Name: coculture analysis of extracellular protein interactions affecting insulin secretion by pancreatic beta cells
Uploaded: 2013-06-15T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Coculture Analysis of Extracellular Protein Interactions Affecting Insulin Secretion by Pancreatic Beta Cells at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af National Institutes of Health tilskud R01DK080971 og Juvenile Diabetes Research Foundation tilskud 37-2009-44. Vi værdsætter også modtaget støtte fra UCSD Pediatric Diabetes Research Center (PDRC).

1.. Transfektion af HEK293 Layer <ol><li> Forbered HEK293 cell medium ved tilsætning til 500 ml flasker af DMEM (med 4,5 g / ml glucose og phenolrødt og uden glutamin): 50 ml FBS, 5 ml 100X penicillin / streptomycin opløsning, 5 ml 100x L-glutamin løsning og 500 pi amphotericin B. </li><li> Plade ud HEK293 celler i en 24-brønds plade ved anvendelse af 0,5 ml HEK293 medier per brønd. Sikre, at cellerne er spredt jævnt over bunden af ​​pladen. </li><li> Når HEK293 celler nå op på 100% konfluens transficere...

<ol>
	<li>Kelly, C., McClenaghan, N. H., Flatt, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+islet+structure+and+cellular+interactions+in+the+control+of+insulin+secretion.">Role of islet structure and cellular interactions in the control of insulin secretion.</a> Islets. 3, 41-47 (2011).</li><li>Konstantinova, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EphA-Ephrin-A-mediated+beta+cell+communication+regulates+insulin+secretion+from+pancreatic+islets.">EphA-Ephrin-A-mediated beta cell communication regulates insulin secretion from pancreatic islets.</a> Cell. 129, 359-370 (2007).</li><li>Jain, R., Lammert, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-cell+interactions+in+the+endocrine+pancreas.">Cell-cell interactions in the endocrine pancreas.</a> Diabetes Obes. Metab. 11, 159-167 (2009).</li><li>Poitout, V., Olson, L. K., Robertson, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin-secreting+cell+lines:+classification,+characteristics+and+potential+applications.">Insulin-secreting cell lines: classification, characteristics and potential applications.</a> Diabetes Metab. 22, 7-14 (1996).</li><li>Craig, A. M., Graf, E. R., Linhoff, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+to+build+a+central+synapse:+clues+from+cell+culture.">How to build a central synapse: clues from cell culture.</a> Trends in Neurosciences. 29, 8-20 (2006).</li><li>Scheiffele, P., Fan, J., Choih, J., Fetter, R., Serafini, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroligin+expressed+in+nonneuronal+cells+triggers+presynaptic+development+in+contacting+axons.">Neuroligin expressed in nonneuronal cells triggers presynaptic development in contacting axons.</a> Cell. 101, 657-669 (2000).</li><li>Abderrahmani, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+traits+are+required+for+glucose-induced+insulin+secretion.">Neuronal traits are required for glucose-induced insulin secretion.</a> FEBS Lett. 565, 133-138 (2004).</li><li>Lowe, A. W., Madeddu, L., Kelly, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endocrine+secretory+granules+and+neuronal+synaptic+vesicles+have+three+integral+membrane+proteins+in+common.">Endocrine secretory granules and neuronal synaptic vesicles have three integral membrane proteins in common.</a> The Journal of Cell Biology. 106, 51-59 (1988).</li><li>Suckow, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+neurexin,+neuroligin,+and+their+cytoplasmic+binding+partners+in+the+pancreatic+beta-cells+and+the+involvement+of+neuroligin+in+insulin+secretion.">Expression of neurexin, neuroligin, and their cytoplasmic binding partners in the pancreatic beta-cells and the involvement of neuroligin in insulin secretion.</a> Endocrinology. 149, 6006-6017 (2008).</li><li>Suckow, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcellular+neuroligin-2+interactions+enhance+insulin+secretion+and+are+integral+to+pancreatic+beta+cell+function.">Transcellular neuroligin-2 interactions enhance insulin secretion and are integral to pancreatic beta cell function.</a> The Journal of Biological Chemistry. 287, 19816-19826 (2012).</li><li>Kohnert, K. D., Hehmke, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+suspensions+of+pancreatic+islet+cells:+a+comparison+of+methods.">Preparation of suspensions of pancreatic islet cells: a comparison of methods.</a> J. Biochem. Biophys. Methods. 12, 81-88 (1986).</li><li>Qi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+pancreatic+islet+isolation:+Part+I:+digestion+and+collection+of+pancreatic+tissue.">Human pancreatic islet isolation: Part I: digestion and collection of pancreatic tissue.</a> J. Vis. Exp. (27), e1125 (2009).</li><li>Qi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+pancreatic+islet+isolation:+Part+II:+purification+and+culture+of+human+islets.">Human pancreatic islet isolation: Part II: purification and culture of human islets.</a> J. Vis. Exp. (27), e1343 (2009).</li><li>Szot, G. L., Koudria, P., Bluestone, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+pancreatic+islet+isolation.">Murine pancreatic islet isolation.</a> J. Vis. Exp. (7), e255 (2007).</li><li>Zmuda, E. J., Powell, C. A., Hai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+murine+islet+isolation+and+subcapsular+kidney+transplantation.">A method for murine islet isolation and subcapsular kidney transplantation.</a> J. Vis. Exp. (50), e2096 (2011).</li><li>Hauge-Evans, A. C., Squires, P. E., Persaud, S. J., Jones, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pancreatic+beta-cell-to-beta-cell+interactions+are+required+for+integrated+responses+to+nutrient+stimuli:+enhanced+Ca2++and+insulin+secretory+responses+of+MIN6+pseudoislets.">Pancreatic beta-cell-to-beta-cell interactions are required for integrated responses to nutrient stimuli: enhanced Ca2+ and insulin secretory responses of MIN6 pseudoislets.</a> Diabetes. 48, 1402-1408 (1999).</li><li>Spiess, Y., Smith, M. A., Vale, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Superfusion+of+dissociated+pancreatic+islet+cells+attached+to+Cytodex+beads.">Superfusion of dissociated pancreatic islet cells attached to Cytodex beads.</a> Diabetes. 31, 189-193 (1982).</li><li>Pham, P. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transient+gene+expression+in+HEK293+cells:+peptone+addition+posttransfection+improves+recombinant+protein+synthesis.">Transient gene expression in HEK293 cells: peptone addition posttransfection improves recombinant protein synthesis.</a> Biotechnol. Bioeng. 90, 332-344 (2005).</li><li>Thomas, P., Smart, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HEK293+cell+line:+a+vehicle+for+the+expression+of+recombinant+proteins.">HEK293 cell line: a vehicle for the expression of recombinant proteins.</a> J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 51, 187-200 (2005).</li><li>Maurisse, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+transfection+of+DNA+into+primary+and+transformed+mammalian+cells+from+different+lineages.">Comparative transfection of DNA into primary and transformed mammalian cells from different lineages.</a> BMC Biotechnol. 10, 9 (2010).</li></ol>

Den cokultur her beskrevne metode giver en effektiv måde at bestemme den fysiologiske betydning af specifikke beta-celle-overflade, transmembrane proteiner, og specifikt af deres ekstracellulære domæner. Ved dyrkning af betaceller eller insulinom celler (såsom INS-1-cellerne ansat her) i kontakt med HEK293 celler, som viser et protein af interesse på celleoverfladen, kan man udvikle bestemme virkningerne af ekstracellulære protein-protein interaktioner uden direkte at forstyrre den intracellulære miljø af celler...

Vi beskriver her en metode til at lette undersøgelser af, hvordan de ekstracellulære domæner af specifikke transmembrane proteiner påvirker insulinsekretion. Metoden sonder effekten af ​​interaktioner af proteinet af interesse med proteiner (eller eventuelt andre molekyler) på pancreas-beta-celle-overflade. Metoden giver mulighed for undersøgelser af, hvordan celle-overflade proteiner udtrykt ved beta-celler eller andre omkringliggende celler (f.eks endotelceller, neuroner, pancreas alpha celler) påvirker beta-celle funktion gennem transcellulær interaktioner (dvs. gennem interaktion med interaktion partnere på overfladen af tilstødende beta-celler). Den cellulære plasmamembran indeholder en kompleks række af strukturelle og funktionelle proteiner, der tjener som bro til det ekstracellulære miljø. Ved dannelse af transcellulær forbindelser eller efter initiering af plast signaleringsbegivenheder, kan vekselvirkninger mellem celleoverfladeproteiner hjælpe med at koordinere denfunktion af naboceller. Bugspytkirtlens beta-celler er grupperet sammen inden pancreas holme og handle på en koordineret måde for at bevare glucosehomøostase 1.. Som afsløret, for eksempel ved betydningen af ​​ekstracellulære EPHA-ephrinA og neuroligin-2 interaktioner i reguleringen af ​​glucose-stimuleret insulinsekretion, bliver det stadig mere klart, at øget viden om de ekstracellulære interaktioner forekommer mellem proteiner på overfladen af ​​tilstødende betaceller vil være af stor betydning for at opnå en fuld forståelse af insulinsekretion, beta-celle funktionelle modning og vedligeholdelse af glukose homøostase 1-3. Målet den her beskrevne fremgangsmåde er at muliggøre undersøgelser af virkningen på beta-celle funktion transcellulær interaktioner, der involverer specifik transmembrane eller på anden måde-celle-overflade-associerede proteiner. Ved co-dyrkning betaceller med HEK293 celler transficeret med forskellige ekspressionskonstrukter, vurdere virkningerne på beta cellefunktion af forskellige celleoverflade-proteiner eller muterede varianter deraf kan være effektivt probes. Dette opnås uden at transficere betacellerne selv. Belysning af roller bestemte transcellulær interaktioner af knockdown, knockout eller overekspression studier i dyrkede betaceller eller in vivo nødvendiggør direkte forstyrrelse af beta-celle-mRNA og proteinekspression, potentielt kan påvirke beta-celle sundhed og / eller funktion på måder, der kan forvirre analyser af virkningerne af specifikke ekstracellulære interaktioner. Disse tilgange også ændre niveauet af de intracellulære domæner af målrettede proteiner og endvidere tillader ikke effekter på grund af interaktioner mellem proteiner på eller i den samme celle skal adskilles fra virkningerne af transcellulær interaktioner. Her en metode til bestemmelse af virkningen af ​​specifikke transcellulær interaktioner på insulinudskillende kapacitet og reaktionsevne beta-celler er descrIBED. Denne metode kan anvendes til insulinproducerende beta-cellelinier, såsom INS-1-celler 4, og dissocierede primær gnaver eller humane betaceller. Den er baseret på cokultur modeller udviklet af neurobiologer, der fandt, at udsættelse af dyrkede neuroner til specifikke neuronale proteiner udtrykt på HEK293 (eller COS) cellelag kunne identificere proteiner, der drev synapse dannelse 5,6. I betragtning af de paralleller mellem sekretoriske maskineri af neuronale synapser og af beta-celler, begrundet vi, at beta-celle funktion og funktionel modning kan være drevet af lignende transcellulær interaktioner 7-9. For at undersøge disse interaktioner, udviklede vi det heri beskrevne system, hvor beta-celler er dyrket sammen på et lag af HEK293 celler, der udtrykker et protein af interesse 10.. Dette system tillader beta-cellecytoplasmaen at forblive uberørt mens ekstracellulære protein-protein interaktioner er manipuleret.

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Name of the reagent</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalogue number</td>
			<td>Comments (optional)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pcDNA 3.3 vector/backbone</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>K830001</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipofectamine 2000</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>18324012</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-312</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen/strep solution</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-652-1</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amphotericin B</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-808-1/30</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI-1640</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-404</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-PBS</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-434</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Pyruvate</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-710-1</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-Mercaptoethanol</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>21985023</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell stripper</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45000-668</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T75 Flask</td>
			<td>BD</td>
			<td>1368065</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>16% Paraformaldehyde</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>50980487</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10X PBS</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-130</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>MT35010CV</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IBMX</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I5879-100MG</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RIPA lysis buffer</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>R0278</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

coculture analysis of extracellular protein interactions affecting insulin secretion by pancreatic beta cells

Interaktioner mellem celleoverfladeproteiner hjælpe med at koordinere funktionen af ​​naboceller. Bugspytkirtlens beta-celler er grupperet sammen inden pancreasøer og handle på en koordineret måde for at opretholde glukose homøostase. Det bliver mere og mere klart, at samvirket mellem transmembrane proteiner på overfladerne af hosliggende betaceller er vigtige determinanter for beta-celle funktion. Belysning af roller bestemte transcellulær interaktioner af knockdown, knockout eller overekspression studier i dyrkede betaceller eller in vivo nødvendiggør direkte forstyrrelse af mRNA og proteinekspression, potentielt kan påvirke beta-celle sundhed og / eller funktion på måder, der kan forvirre analyser af følgerne af specifikke interaktioner. Disse tilgange også ændre niveauet af de intracellulære domæner af målrettede proteiner og kan forhindre effekter på grund af interaktioner mellem proteiner i den samme celle membranen at blive visttinguished fra virkningerne af transcellulær interaktioner. Her en metode til bestemmelse af virkningen af ​​specifikke transcellulær interaktioner på insulinudskillende kapacitet og reaktionsevne af beta-celler er præsenteret. Denne metode anvendes til beta-cellelinier, såsom INS-1-celler, og dissocierede primære betaceller. Den er baseret på cokultur modeller udviklet af neurobiologer, der fandt, at udsættelse af dyrkede neuroner til specifikke neuronale proteiner udtrykt på HEK293 (eller COS) cellelag identificerede proteiner er vigtige for kørsel synapse dannelse. I betragtning af de paralleller mellem sekretoriske maskineri af neuronale synapser og af beta-celler, begrundet vi, at beta-celle funktionelle modning kan være drevet af lignende transcellulær interaktioner. Vi udviklede et system, hvor beta-celler dyrkes på et lag af HEK293 celler, der udtrykker et protein af interesse. I denne model er den beta-cellecytoplasmaen uberørt mens ekstracellulært protein-protein-interactions er manipuleret. Selvom vi fokuserer her primært på studier af glucose-stimuleret insulinsekretion, kan andre processer analyseres, for eksempel, som ændringer i genekspression bestemmes ved immunoblotting eller qPCR.

Ved anvendelse af fremgangsmåden beskrevet her, har vi testet effekten af ​​forskellige varianter af proteinet neuroligin på insulinsekretion. Dette supplerer vores publicerede arbejder undersøge effekten af neuroligin-2 på beta-celle funktion 10. Figur 2, for eksempel, viser resultater opnået fra coculturing INS-1 betaceller med HEK293 celler transficeret til at udtrykke en neuroligin isoform her benævnt NL- X. Dette forsøg blev designet til at teste den hypotese, at NL-X engagere...

Watch this Scientific Journal Video about Coculture Analysis of Extracellular Protein Interactions Affecting Insulin Secretion by Pancreatic Beta Cells at JoVE.com

Coculture Analysis of Extracellular Protein Interactions Affecting Insulin Secretion by Pancreatic Beta Cells

Transcellulær protein interaktioner er vigtige determinanter for pancreas beta-celle funktion. Detaljeret her er en metode, tilpasset fra en cokultur model synaptogenesis-for at undersøge, hvordan specifikke transmembrane proteiner påvirker insulinsekretion. Transficerede HEK293 celler udtrykker proteiner af interesse; betaceller behøver ikke at transficeres eller på anden måde direkte foruroliget.

Cokultur Analyse af Ekstracellulære proteininteraktioner påvirker insulin fra bugspytkirtlens beta-celler

Interactions between cell-surface proteins help coordinate the function of neighboring cells. Pancreatic beta cells are clustered together within ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Improving IV Insulin Administration in a Community Hospital

Forbedring IV Insulin Administration i en Community Hospital

Diabetes mellitus is a major independent risk factor for increased morbidity and mortality in the hospitalized patient, and elevated blood glucose ...

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

Isolation, karakterisering og sammenlignende differentiering af humane Dental Pulp stamceller fra blivende tænder ved hjælp af to forskellige metoder

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Coculture System with an Organotypic Brain Slice and 3D Spheroid of Carcinoma Cells

Cokultur System med en organotypisk Brain Slice og 3D Sfæroide af carcinomaceller

Patients with cerebral metastasis of carcinomas have a poor prognosis. However, the process at the metastatic site has barely been investigated, in ...

Human Dupuytren's Ex Vivo Culture for the Study of Myofibroblasts and Extracellular Matrix Interactions

Human Dupuytren's Ex Vivo Culture for the Study of Myofibroblasts and Extracellular Matrix Interactions

Humant Dupuytrens<em&gt; Ex vivo</em&gt; Kultur for Studiet af myofibroblaster og ekstracellulære matrix-interaktioner

Organ fibrosis or &#8220;scarring&#8221; is known to account for a high death toll due to the extensive amount of disorders and organs affected (from ...

Studying Pancreatic Cancer Stem Cell Characteristics for Developing New Treatment Strategies

Studere i bugspytkirtlen Kræft stamceller Karakteristik for udvikling af nye behandlingsstrategier

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) contains a subset of exclusively tumorigenic cancer stem cells (CSCs) which have been shown to drive tumor ...

Neurodegeneration in an Animal Model of Chronic Amyloid-beta Oligomer Infusion Is Counteracted by Antibody Treatment Infused with Osmotic Pumps

Neurodegeneration i en dyremodel for kronisk Amyloid-beta Oligomer Infusion modvirkes af antistof Behandling Infused med osmotiske pumper

Decline in hippocampal-dependent explicit memory (memory for facts and events) is one of the earliest clinical symptom of Alzheimer&#39;s disease (AD). It ...

Application of End-to-end Anastomosis in Robotic Central Pancreatectomy

Anvendelse af ende-til-ende anastomose i robot centrale Pancreatectomy

Central pancreatectomy is carried out for the treatment of benign or low-malignant potential tumors located in the pancreatic neck or proximal part of ...

Homogeneous Time-resolved F&#246;rster Resonance Energy Transfer-based Assay for Detection of Insulin Secretion

Homogeneous Time-resolved FÃƒÆ’Ã†'Ãƒâ€šÃ‚Â¶rster Resonance Energy Transfer-based Assay for Detection of Insulin Secretion

Homogen tidsopløst Förster resonans energi Transfer-baseret analyse til påvisning af insulinsekretion

The detection of insulin secretion is critical for elucidating mechanisms of regulated secretion as well as in studies of metabolism. Though numerous ...

Isolation of Primary Mouse Hepatocytes for Nascent Protein Synthesis Analysis by Non-radioactive L-azidohomoalanine Labeling Method

Isolering af primære mus hepatocytter for spirende Protein syntese analyse af ikke-radioaktive L-azidohomoalanine mærkning metode

Hepatocytes are parenchymal cells of the liver and engage multiple metabolic functions, including synthesis and secretion of proteins essential for ...

Bio-energetics Investigation of Candida albicans Using Real-time Extracellular Flux Analysis

Bio-energetics Investigation of Candida albicans Using Real-time Extracellular Flux Analysis

Bio-energetik undersøgelse af Candida albicans ved hjælp af Real-time ekstracellulære Flux analyse

Mitochondria are essential organelles for the cellular metabolism and survival. A variety of key events take place in mitochondria, such as cellular ...