Name: coculture analysis of extracellular protein interactions affecting insulin secretion by pancreatic beta cells
Uploaded: 2013-06-15T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Coculture Analysis of Extracellular Protein Interactions Affecting Insulin Secretion by Pancreatic Beta Cells at JoVE.com

Dit werk werd ondersteund door de National Institutes of Health subsidie ​​R01DK080971 en Juvenile Diabetes Research Foundation subsidie ​​37-2009-44. We waarderen ook ontvangen van de UCSD Pediatric Diabetes Research Center (PdRC) ondersteuning.

1. Transfectie van HEK293 Layer <ol><li> Bereid HEK293 celmedium door aan 500 ml flessen DMEM (met 4,5 g / ml glucose en fenolrood en zonder glutamine): 50 ml FBS, 5 ml 100X penicilline / streptomycine-oplossing, 5 ml 100x L-glutamine-oplossing en 500 pi amfotericine B. </li><li> Plaat uit HEK293 cellen in een 24-wells plaat met 0,5 ml HEK293 media per putje. Zorg ervoor dat de cellen gelijkmatig worden verdeeld over de bodem van de plaat. </li><li> Wanneer HEK293 cellen 100% samenvloeiing bereiken, transfecteren met ...

<ol>
	<li>Kelly, C., McClenaghan, N. H., Flatt, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+islet+structure+and+cellular+interactions+in+the+control+of+insulin+secretion.">Role of islet structure and cellular interactions in the control of insulin secretion.</a> Islets. 3, 41-47 (2011).</li><li>Konstantinova, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EphA-Ephrin-A-mediated+beta+cell+communication+regulates+insulin+secretion+from+pancreatic+islets.">EphA-Ephrin-A-mediated beta cell communication regulates insulin secretion from pancreatic islets.</a> Cell. 129, 359-370 (2007).</li><li>Jain, R., Lammert, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-cell+interactions+in+the+endocrine+pancreas.">Cell-cell interactions in the endocrine pancreas.</a> Diabetes Obes. Metab. 11, 159-167 (2009).</li><li>Poitout, V., Olson, L. K., Robertson, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin-secreting+cell+lines:+classification,+characteristics+and+potential+applications.">Insulin-secreting cell lines: classification, characteristics and potential applications.</a> Diabetes Metab. 22, 7-14 (1996).</li><li>Craig, A. M., Graf, E. R., Linhoff, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+to+build+a+central+synapse:+clues+from+cell+culture.">How to build a central synapse: clues from cell culture.</a> Trends in Neurosciences. 29, 8-20 (2006).</li><li>Scheiffele, P., Fan, J., Choih, J., Fetter, R., Serafini, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroligin+expressed+in+nonneuronal+cells+triggers+presynaptic+development+in+contacting+axons.">Neuroligin expressed in nonneuronal cells triggers presynaptic development in contacting axons.</a> Cell. 101, 657-669 (2000).</li><li>Abderrahmani, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+traits+are+required+for+glucose-induced+insulin+secretion.">Neuronal traits are required for glucose-induced insulin secretion.</a> FEBS Lett. 565, 133-138 (2004).</li><li>Lowe, A. W., Madeddu, L., Kelly, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endocrine+secretory+granules+and+neuronal+synaptic+vesicles+have+three+integral+membrane+proteins+in+common.">Endocrine secretory granules and neuronal synaptic vesicles have three integral membrane proteins in common.</a> The Journal of Cell Biology. 106, 51-59 (1988).</li><li>Suckow, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+neurexin,+neuroligin,+and+their+cytoplasmic+binding+partners+in+the+pancreatic+beta-cells+and+the+involvement+of+neuroligin+in+insulin+secretion.">Expression of neurexin, neuroligin, and their cytoplasmic binding partners in the pancreatic beta-cells and the involvement of neuroligin in insulin secretion.</a> Endocrinology. 149, 6006-6017 (2008).</li><li>Suckow, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcellular+neuroligin-2+interactions+enhance+insulin+secretion+and+are+integral+to+pancreatic+beta+cell+function.">Transcellular neuroligin-2 interactions enhance insulin secretion and are integral to pancreatic beta cell function.</a> The Journal of Biological Chemistry. 287, 19816-19826 (2012).</li><li>Kohnert, K. D., Hehmke, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+suspensions+of+pancreatic+islet+cells:+a+comparison+of+methods.">Preparation of suspensions of pancreatic islet cells: a comparison of methods.</a> J. Biochem. Biophys. Methods. 12, 81-88 (1986).</li><li>Qi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+pancreatic+islet+isolation:+Part+I:+digestion+and+collection+of+pancreatic+tissue.">Human pancreatic islet isolation: Part I: digestion and collection of pancreatic tissue.</a> J. Vis. Exp. (27), e1125 (2009).</li><li>Qi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+pancreatic+islet+isolation:+Part+II:+purification+and+culture+of+human+islets.">Human pancreatic islet isolation: Part II: purification and culture of human islets.</a> J. Vis. Exp. (27), e1343 (2009).</li><li>Szot, G. L., Koudria, P., Bluestone, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+pancreatic+islet+isolation.">Murine pancreatic islet isolation.</a> J. Vis. Exp. (7), e255 (2007).</li><li>Zmuda, E. J., Powell, C. A., Hai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+murine+islet+isolation+and+subcapsular+kidney+transplantation.">A method for murine islet isolation and subcapsular kidney transplantation.</a> J. Vis. Exp. (50), e2096 (2011).</li><li>Hauge-Evans, A. C., Squires, P. E., Persaud, S. J., Jones, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pancreatic+beta-cell-to-beta-cell+interactions+are+required+for+integrated+responses+to+nutrient+stimuli:+enhanced+Ca2++and+insulin+secretory+responses+of+MIN6+pseudoislets.">Pancreatic beta-cell-to-beta-cell interactions are required for integrated responses to nutrient stimuli: enhanced Ca2+ and insulin secretory responses of MIN6 pseudoislets.</a> Diabetes. 48, 1402-1408 (1999).</li><li>Spiess, Y., Smith, M. A., Vale, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Superfusion+of+dissociated+pancreatic+islet+cells+attached+to+Cytodex+beads.">Superfusion of dissociated pancreatic islet cells attached to Cytodex beads.</a> Diabetes. 31, 189-193 (1982).</li><li>Pham, P. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transient+gene+expression+in+HEK293+cells:+peptone+addition+posttransfection+improves+recombinant+protein+synthesis.">Transient gene expression in HEK293 cells: peptone addition posttransfection improves recombinant protein synthesis.</a> Biotechnol. Bioeng. 90, 332-344 (2005).</li><li>Thomas, P., Smart, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HEK293+cell+line:+a+vehicle+for+the+expression+of+recombinant+proteins.">HEK293 cell line: a vehicle for the expression of recombinant proteins.</a> J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 51, 187-200 (2005).</li><li>Maurisse, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+transfection+of+DNA+into+primary+and+transformed+mammalian+cells+from+different+lineages.">Comparative transfection of DNA into primary and transformed mammalian cells from different lineages.</a> BMC Biotechnol. 10, 9 (2010).</li></ol>

De co-cultuur hier beschreven methode een effectieve manier om de fysiologische betekenis van specifieke beta-celoppervlak transmembraan eiwitten bepalen en specifiek hun extracellulaire domeinen. Door kweken beta cellen of insulinoma cellen (zoals de INS-1 cellen zijn hier toegepast) in contact met HEK293 cellen die een eiwit van belang op het celoppervlak, kan experimenten om de effecten van extracellulair eiwit-eiwit interacties bepalen zonder direct verstoren het intracellulaire milieu van de cellen. Omdat de eiwitt...

We beschrijven hier een methode om onderzoeken hoe de extracellulaire domeinen van transmembraan proteïnen specifieke invloed insulinesecretie vergemakkelijken. De werkwijze probes de effecten van interacties van het eiwit van belang met eiwitten (of mogelijk andere moleculen) op de beta-cel oppervlak. De werkwijze maakt onderzoeken hoe celoppervlak eiwitten door beta-cellen of andere naburige cellen (bijv. endotheelcellen, neuronen, pancreas alfa-cellen) tot expressie beïnvloeden beta-celfunctie door transcellulaire interacties (dat wil zeggen door interactie met interactiepartners op het oppervlak van aangrenzende beta-cellen). De cellulaire plasmamembraan bevat een complexe reeks van structurele en functionele eiwitten dienen als brug de extracellulaire omgeving. Door de vorming van transcellulaire aansluitingen of door initiatie van plastic signalering evenementen, kunnen interacties tussen cel-oppervlakte-eiwitten helpen bij het coördineren van defunctie van naburige cellen. Bètacellen in de pancreas worden geclusterd binnen de alvleesklier eilandjes en op een gecoördineerde wijze als glucose homeostase 1 te behouden. Zoals geopenbaard, bijvoorbeeld door het belang van extracellulaire EphA-ephrinA en neuroligin 2-interacties in de regulatie van glucose-gestimuleerde insuline secretie, wordt steeds duidelijker dat betere kennis van de extracellulaire interactie optreedt tussen eiwitten op de oppervlakken van aangrenzende bètacellen zal van groot belang zijn voor het verkrijgen van een volledig begrip van de insuline secretie, beta-cel functionele rijping en het onderhoud van de glucose homeostase 1-3. Het doel van de hier beschreven methode voor onderzoek naar de effecten mogelijk over beta-celfunctie van transcellulaire interacties van specifieke of anderszins transmembraan-celoppervlak-geassocieerde eiwitten. Door co-kweken van beta-cellen met HEK293 cellen getransfecteerd met verschillende expressie constructen, de effecten op de beta celfunctie verschillende celoppervlak eiwitten of gemuteerde varianten daarvan kan efficiënt worden onderzocht. Dit wordt bereikt zonder dat de bètacellen zelf transfecteren. Opheldering van de rol van specifieke transcellulaire interacties door knockdown, knockout of overexpressie studies in gekweekte beta-cellen of in vivo noodzakelijk directe verstoring van beta-cel mRNA en eiwit expressie, met mogelijke gevolgen voor beta cel gezondheid en / of functie op een manier die analyses van zou kunnen verwarren de effecten van specifieke extracellulaire interacties. Deze zal ook veranderen niveaus van de intracellulaire domeinen van de beoogde eiwitten en verder geen effecten door interacties tussen eiwitten in of in dezelfde cel worden onderscheiden van de effecten van transcellulaire interacties mogelijk. Hier wordt een werkwijze voor het bepalen van het effect van specifieke transcellulaire interacties op het insuline-capaciteit en responsiviteit van bètacellen described. Deze methode is toepasbaar voor insuline-afscheidende bèta-cellijnen, zoals INS-1 cellen 4, en gedissocieerde primaire knaagdieren of humane B-cellen. Het is gebaseerd op co-cultuur modellen ontwikkeld door neurobiologists die dat blootstelling van gekweekte neuronen specifieke neuronale eiwitten die op HEK293 (of COS) cellagen gevonden kunnen eiwitten die drive synapsvorming 5,6 identificeren. Gezien de parallellen tussen de secretie machinerie van neuronale synapsen en van beta-cellen, redeneerden we dat bèta-celfunctie en functionele rijping zou kunnen worden gedragen door soortgelijke transcellulaire interacties 7-9. Om deze interacties probe, we de hierin beschreven waarin betacellen tezamen gekweekt op een laag van HEK293 cellen die een eiwit van interesse 10 ontwikkeld. Dit systeem maakt het beta-cel cytoplasma onaangetast blijven terwijl extracellulair eiwit-eiwit interacties worden gemanipuleerd.

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Name of the reagent</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalogue number</td>
			<td>Comments (optional)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pcDNA 3.3 vector/backbone</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>K830001</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipofectamine 2000</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>18324012</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-312</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen/strep solution</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-652-1</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amphotericin B</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-808-1/30</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI-1640</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-404</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-PBS</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-434</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Pyruvate</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-710-1</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-Mercaptoethanol</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>21985023</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell stripper</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45000-668</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T75 Flask</td>
			<td>BD</td>
			<td>1368065</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>16% Paraformaldehyde</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>50980487</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10X PBS</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-130</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>MT35010CV</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IBMX</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I5879-100MG</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RIPA lysis buffer</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>R0278</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

coculture analysis of extracellular protein interactions affecting insulin secretion by pancreatic beta cells

Interacties tussen cel-oppervlakte-eiwitten helpen bij het coördineren van de functie van naburige cellen. Bètacellen in de pancreas worden geclusterd binnen pancreaseilandjes en handelen op een gecoördineerde wijze aan glucose-homeostase te behouden. Het wordt steeds duidelijker dat interacties tussen transmembraan eiwitten op het oppervlak van de aangrenzende bètacellen zijn belangrijke determinanten van bèta-celfunctie. Opheldering van de rol van specifieke transcellulaire interacties door knockdown, knockout of overexpressie studies in gekweekte beta-cellen of in vivo noodzakelijk directe verstoring van mRNA en eiwit expressie, met mogelijke gevolgen voor beta-cel gezondheid en / of functie op een manier die analyses van de effecten zou kunnen verwarren specifieke interacties. Deze benaderingen verandert ook het niveau van de intracellulaire domeinen van de beoogde eiwitten en kunnen effecten als gevolg van interacties tussen eiwitten voorkomen binnen dezelfde celmembraan te distinguished tegen de gevolgen van transcellulaire interacties. Hier een werkwijze voor het bepalen van het effect van specifieke transcellulaire interacties op het insuline-capaciteit en responsiviteit van bètacellen gepresenteerd. Deze methode is toepasbaar voor beta-cellijnen, zoals INS-1-cellen, en gedissocieerde primaire bètacellen. Het is gebaseerd op co-cultuur modellen ontwikkeld door neurobiologists die dat blootstelling van gekweekte neuronen specifieke neuronale eiwitten die op HEK293 (of COS) cellagen geïdentificeerde eiwitten belangrijk voor een synapsvorming gevonden. Gezien de parallellen tussen de secretie machinerie van neuronale synapsen en van beta-cellen, redeneerden we dat beta-cel functionele rijping zou kunnen worden gedragen door soortgelijke transcellulaire interacties. We hebben een systeem ontwikkeld waarbij beta-cellen worden gekweekt op een laag van HEK293 cellen die een eiwit van interesse. In dit model wordt de beta-cel cytoplasma onaangeroerd terwijl extracellulair eiwit-eiwit Interactiens worden gemanipuleerd. Hoewel wij hierbij voornamelijk richten op studies van glucose-gestimuleerde insuline secretie, kunnen andere processen worden geanalyseerd, bijvoorbeeld veranderingen in genexpressie bepaald door immunoblotting of qPCR.

Als hier beschreven, hebben we het effect van verschillende varianten van de proteïne neuroligin op insulinesecretie getest. Dit vult onze gepubliceerde werk wordt de invloed van neuroligin 2-on beta-celfunctie 10. Figuur 2, bijvoorbeeld, toont resultaten van coculturing INS-1 beta-cellen HEK293 cellen getransfecteerd met een expressie neuroligin isovorm hier aangeduid als NL- X. Dit experiment werd ontworpen om de hypothese dat NL-X transcellulaire bezighoudt met interacties verhogen insuli...

Watch this Scientific Journal Video about Coculture Analysis of Extracellular Protein Interactions Affecting Insulin Secretion by Pancreatic Beta Cells at JoVE.com

Coculture Analysis of Extracellular Protein Interactions Affecting Insulin Secretion by Pancreatic Beta Cells

Transcellulaire eiwit interacties zijn belangrijke determinanten van beta-cel functie. Hier beschreven is een methode-aangepast van een co-cultuur model van synaptogenesis-voor het onderzoeken hoe specifieke transmembraaneiwitten beïnvloeden insuline secretie. Getransfecteerde HEK293 cellen brengen eiwitten van belang; beta-cellen hoeven niet te worden getransfecteerd of anderszins direct verstoord.

Coculture Analyse van extracellulaire eiwit interacties met invloed op de insulinesecretie door bètacellen in de pancreas

Interactions between cell-surface proteins help coordinate the function of neighboring cells. Pancreatic beta cells are clustered together within ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Improving IV Insulin Administration in a Community Hospital

Verbetering van de IV toediening van insuline aan een communautair Ziekenhuis

Diabetes mellitus is a major independent risk factor for increased morbidity and mortality in the hospitalized patient, and elevated blood glucose ...

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

Isolatie, karakterisering en vergelijkende differentiatie van humane Dental Pulp stamcellen uit permanente tanden met behulp van twee verschillende methoden

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Coculture System with an Organotypic Brain Slice and 3D Spheroid of Carcinoma Cells

Coculture systeem met een Organotypische Brain Slice en 3D Sferoïde van carcinomacellen

Patients with cerebral metastasis of carcinomas have a poor prognosis. However, the process at the metastatic site has barely been investigated, in ...

Human Dupuytren's Ex Vivo Culture for the Study of Myofibroblasts and Extracellular Matrix Interactions

Human Dupuytren's Ex Vivo Culture for the Study of Myofibroblasts and Extracellular Matrix Interactions

Menselijke Dupuytren<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Cultuur voor de Studie van Myofibroblasten en extracellulaire matrix interacties

Organ fibrosis or &#8220;scarring&#8221; is known to account for a high death toll due to the extensive amount of disorders and organs affected (from ...

Studying Pancreatic Cancer Stem Cell Characteristics for Developing New Treatment Strategies

Studeren alvleesklier- Stamcel Kenmerken voor het ontwikkelen van nieuwe behandelingsstrategieën

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) contains a subset of exclusively tumorigenic cancer stem cells (CSCs) which have been shown to drive tumor ...

Neurodegeneration in an Animal Model of Chronic Amyloid-beta Oligomer Infusion Is Counteracted by Antibody Treatment Infused with Osmotic Pumps

Neurodegeneratie in een diermodel van chronische Amyloid-beta oligomeer infusie wordt tegengewerkt door antilichaambehandeling doordrongen osmotische pompen

Decline in hippocampal-dependent explicit memory (memory for facts and events) is one of the earliest clinical symptom of Alzheimer&#39;s disease (AD). It ...

Application of End-to-end Anastomosis in Robotic Central Pancreatectomy

Toepassing van End-to-end Anastomosis in Robotic centrale Pancreatectomy

Central pancreatectomy is carried out for the treatment of benign or low-malignant potential tumors located in the pancreatic neck or proximal part of ...

Homogeneous Time-resolved F&#246;rster Resonance Energy Transfer-based Assay for Detection of Insulin Secretion

Homogeneous Time-resolved FÃƒÆ’Ã†'Ãƒâ€šÃ‚Â¶rster Resonance Energy Transfer-based Assay for Detection of Insulin Secretion

Homogene Time-resolved Förster Resonance energie overdracht gebaseerde Assay voor detectie van insuline secretie

The detection of insulin secretion is critical for elucidating mechanisms of regulated secretion as well as in studies of metabolism. Though numerous ...

Isolation of Primary Mouse Hepatocytes for Nascent Protein Synthesis Analysis by Non-radioactive L-azidohomoalanine Labeling Method

Isolatie van primaire muisknop hepatocyten door niet-radioactieve L-azidohomoalanine Labeling methode p.a. ontluikende eiwit synthese

Hepatocytes are parenchymal cells of the liver and engage multiple metabolic functions, including synthesis and secretion of proteins essential for ...

Bio-energetics Investigation of Candida albicans Using Real-time Extracellular Flux Analysis

Bio-energetics Investigation of Candida albicans Using Real-time Extracellular Flux Analysis

Bio-energetica onderzoek naar Candida albicans met behulp van Real-time extracellulaire Flux Analysis

Mitochondria are essential organelles for the cellular metabolism and survival. A variety of key events take place in mitochondria, such as cellular ...