Name: coculture analysis of extracellular protein interactions affecting insulin secretion by pancreatic beta cells
Uploaded: 2013-06-15T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Coculture Analysis of Extracellular Protein Interactions Affecting Insulin Secretion by Pancreatic Beta Cells at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av National Institutes of Health tilskudd R01DK080971 og Juvenile Diabetes Research Foundation stipend 37-2009-44. Vi setter også pris støtte mottatt fra UCSD Pediatric Diabetes Research Center (PDRC).

En. Transfeksjon av HEK293 Layer <ol><li> Forbered HEK293 celler medium ved å tilsette til 500 ml flasker med DMEM (med 4,5 g / ml glukose og fenolrødt og uten glutamin): 50 ml FBS, 5 ml 100X penicillin / streptomycin-løsning, 5 ml 100 x L-glutamin-løsning og 500 mL amphotericin B. </li><li> Plate ut HEK293 celler i et 24-brønners plate med 0,5 ml HEK293 media per brønn. Sikre at cellene er jevnt fordelt over bunnen av platen. </li><li> Når HEK293 celler når 100% konfluens, transfektere med 0,8 ug av plasmid k...

<ol>
	<li>Kelly, C., McClenaghan, N. H., Flatt, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+islet+structure+and+cellular+interactions+in+the+control+of+insulin+secretion.">Role of islet structure and cellular interactions in the control of insulin secretion.</a> Islets. 3, 41-47 (2011).</li><li>Konstantinova, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EphA-Ephrin-A-mediated+beta+cell+communication+regulates+insulin+secretion+from+pancreatic+islets.">EphA-Ephrin-A-mediated beta cell communication regulates insulin secretion from pancreatic islets.</a> Cell. 129, 359-370 (2007).</li><li>Jain, R., Lammert, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-cell+interactions+in+the+endocrine+pancreas.">Cell-cell interactions in the endocrine pancreas.</a> Diabetes Obes. Metab. 11, 159-167 (2009).</li><li>Poitout, V., Olson, L. K., Robertson, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin-secreting+cell+lines:+classification,+characteristics+and+potential+applications.">Insulin-secreting cell lines: classification, characteristics and potential applications.</a> Diabetes Metab. 22, 7-14 (1996).</li><li>Craig, A. M., Graf, E. R., Linhoff, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+to+build+a+central+synapse:+clues+from+cell+culture.">How to build a central synapse: clues from cell culture.</a> Trends in Neurosciences. 29, 8-20 (2006).</li><li>Scheiffele, P., Fan, J., Choih, J., Fetter, R., Serafini, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroligin+expressed+in+nonneuronal+cells+triggers+presynaptic+development+in+contacting+axons.">Neuroligin expressed in nonneuronal cells triggers presynaptic development in contacting axons.</a> Cell. 101, 657-669 (2000).</li><li>Abderrahmani, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+traits+are+required+for+glucose-induced+insulin+secretion.">Neuronal traits are required for glucose-induced insulin secretion.</a> FEBS Lett. 565, 133-138 (2004).</li><li>Lowe, A. W., Madeddu, L., Kelly, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endocrine+secretory+granules+and+neuronal+synaptic+vesicles+have+three+integral+membrane+proteins+in+common.">Endocrine secretory granules and neuronal synaptic vesicles have three integral membrane proteins in common.</a> The Journal of Cell Biology. 106, 51-59 (1988).</li><li>Suckow, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+neurexin,+neuroligin,+and+their+cytoplasmic+binding+partners+in+the+pancreatic+beta-cells+and+the+involvement+of+neuroligin+in+insulin+secretion.">Expression of neurexin, neuroligin, and their cytoplasmic binding partners in the pancreatic beta-cells and the involvement of neuroligin in insulin secretion.</a> Endocrinology. 149, 6006-6017 (2008).</li><li>Suckow, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcellular+neuroligin-2+interactions+enhance+insulin+secretion+and+are+integral+to+pancreatic+beta+cell+function.">Transcellular neuroligin-2 interactions enhance insulin secretion and are integral to pancreatic beta cell function.</a> The Journal of Biological Chemistry. 287, 19816-19826 (2012).</li><li>Kohnert, K. D., Hehmke, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+suspensions+of+pancreatic+islet+cells:+a+comparison+of+methods.">Preparation of suspensions of pancreatic islet cells: a comparison of methods.</a> J. Biochem. Biophys. Methods. 12, 81-88 (1986).</li><li>Qi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+pancreatic+islet+isolation:+Part+I:+digestion+and+collection+of+pancreatic+tissue.">Human pancreatic islet isolation: Part I: digestion and collection of pancreatic tissue.</a> J. Vis. Exp. (27), e1125 (2009).</li><li>Qi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+pancreatic+islet+isolation:+Part+II:+purification+and+culture+of+human+islets.">Human pancreatic islet isolation: Part II: purification and culture of human islets.</a> J. Vis. Exp. (27), e1343 (2009).</li><li>Szot, G. L., Koudria, P., Bluestone, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+pancreatic+islet+isolation.">Murine pancreatic islet isolation.</a> J. Vis. Exp. (7), e255 (2007).</li><li>Zmuda, E. J., Powell, C. A., Hai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+murine+islet+isolation+and+subcapsular+kidney+transplantation.">A method for murine islet isolation and subcapsular kidney transplantation.</a> J. Vis. Exp. (50), e2096 (2011).</li><li>Hauge-Evans, A. C., Squires, P. E., Persaud, S. J., Jones, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pancreatic+beta-cell-to-beta-cell+interactions+are+required+for+integrated+responses+to+nutrient+stimuli:+enhanced+Ca2++and+insulin+secretory+responses+of+MIN6+pseudoislets.">Pancreatic beta-cell-to-beta-cell interactions are required for integrated responses to nutrient stimuli: enhanced Ca2+ and insulin secretory responses of MIN6 pseudoislets.</a> Diabetes. 48, 1402-1408 (1999).</li><li>Spiess, Y., Smith, M. A., Vale, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Superfusion+of+dissociated+pancreatic+islet+cells+attached+to+Cytodex+beads.">Superfusion of dissociated pancreatic islet cells attached to Cytodex beads.</a> Diabetes. 31, 189-193 (1982).</li><li>Pham, P. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transient+gene+expression+in+HEK293+cells:+peptone+addition+posttransfection+improves+recombinant+protein+synthesis.">Transient gene expression in HEK293 cells: peptone addition posttransfection improves recombinant protein synthesis.</a> Biotechnol. Bioeng. 90, 332-344 (2005).</li><li>Thomas, P., Smart, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HEK293+cell+line:+a+vehicle+for+the+expression+of+recombinant+proteins.">HEK293 cell line: a vehicle for the expression of recombinant proteins.</a> J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 51, 187-200 (2005).</li><li>Maurisse, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+transfection+of+DNA+into+primary+and+transformed+mammalian+cells+from+different+lineages.">Comparative transfection of DNA into primary and transformed mammalian cells from different lineages.</a> BMC Biotechnol. 10, 9 (2010).</li></ol>

Den coculture metoden beskrevet her gir en effektiv måte for å bestemme den fysiologiske betydningen av bestemte beta-celle-overflate, transmembrane proteiner, og spesielt av deres ekstracellulære domener. Ved dyrking av betaceller eller insulinoma celler (slik som de Ins-1 celler anvendt her) som er i kontakt med HEK293-celler som viser et protein av interesse på celleoverflaten, kan eksperimenter være utformet for å fastslå effekten av ekstracellulære protein-protein interaksjoner direkte uten å forstyrre den...

Vi beskriver her en metode for å legge til rette for undersøkelser av hvordan de ekstracellulære domener av spesifikke transmembrane proteiner påvirker insulin sekresjon. Fremgangsmåten omfatter påføring på prober virkningene av interaksjoner av proteinet av interesse med proteiner (eller eventuelle andre molekyler) på pankreatisk p-celle-overflate. Fremgangsmåten tillater undersøkelser av hvordan celle-overflateproteiner uttrykt av betaceller eller av andre nabocellene (f.eks endoteliale celler, nerveceller, pankreatiske alfa-celler) påvirker betacellefunksjonen gjennom transcellular interaksjoner (dvs. gjennom interaksjoner med interaksjonspartnere på overflaten av tilstøtende betacellene). Den cellulære plasma membran inneholder en kompleks rekke strukturelle og funksjonelle proteiner som fungerer som broer til den ekstracellulære miljøet. Ved dannelsen av transcellular forbindelser eller ved oppstart av plast signalering hendelser, kan interaksjoner mellom celle-overflate proteiner hjelpe koordinerefunksjon av nabocellene. Betaceller i bukspyttkjertelen er gruppert sammen innenfor bukspyttkjertelen holmer og handle på en koordinert måte for å opprettholde glukose homeostase en. Som avslørt, for eksempel ved viktigheten av ekstracellulære EPHA-ephrinA og neuroligin-2 interaksjoner i reguleringen av glukose-stimulert insulin sekresjon, er det blitt stadig mer klart at økt kunnskap om de ekstracellulære interaksjoner oppstår mellom proteiner på overflaten av tilstøtende beta-celler vil være av stor betydning for å få en full forståelse av insulinsekresjon, beta-celle funksjonell modning og opprettholdelse av glukosehomeostase 1-3. Målet med metoden beskrevet her er at undersøkelser av effekter på beta celle funksjon av transcellular interaksjoner som involverer spesifikke transmembran eller på annen måte-celle-overflate-assosierte proteiner. Ved co-dyrking betacellene med HEK293 celler transfektert med forskjellige uttrykk konstruksjoner, effekter på beta celle funksjon av forskjellige celle-overflateproteiner eller muterte varianter derav, kan effektivt bli probet. Dette oppnås uten å transfektere betacellene selv. Klarlegging av rollene til bestemte transcellular interaksjon ved knockdown, knockout eller overexpression studier i dyrkede betacellene eller in vivo nødvendiggjør direkte forstyrrelse av beta-celle mRNA og protein uttrykk, potensielt påvirker beta celle helse og / eller funksjon på måter som kan forvirrer analyser av virkningene av spesifikke ekstracellulære interaksjoner. Disse tilnærmingene også endre nivåene av de intracellulære domenene til de målrettede proteiner og, videre, tillater ikke effekter på grunn av interaksjonen mellom proteiner på eller i den samme celle som skal skilles fra virkningene av transcellular interaksjoner. Her er en fremgangsmåte for å bestemme virkningen av bestemte transcellular interaksjoner på insulin-utskillende kapasitet og responsen til betaceller beskrIBED. Metoden kan anvendes for insulin-sekresjon beta-cellelinjer, slik som INS-1 celler 4, og til dissosiert primære gnager eller humant beta-celler. Den er basert på coculture modeller utviklet av neurobiologists, som fant at eksponering av dyrkede nerveceller til spesifikke nevrale proteiner uttrykt på HEK293 (eller COS) cellelagene kunne identifisere proteiner som driver synapse formasjon 5,6. Gitt parallellene mellom sekretoriske maskiner av nevrale synapser og av beta-cellene, resonnerte vi at beta-celle funksjon og funksjonelle modning kan være drevet av lignende transcellular interaksjoner 7-9. For å undersøke disse interaksjoner, har vi utviklet system som er beskrevet heri i hvilke beta-celler er cocultured på et lag av HEK293-celler som uttrykker et protein av interesse 10.. Dette systemet gjør at beta-cellen cytoplasma å forbli urørt mens ekstracellulære protein-protein interaksjoner er manipulert.

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Name of the reagent</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalogue number</td>
			<td>Comments (optional)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pcDNA 3.3 vector/backbone</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>K830001</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipofectamine 2000</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>18324012</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-312</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen/strep solution</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-652-1</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amphotericin B</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-808-1/30</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI-1640</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-404</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-PBS</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-434</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Pyruvate</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-710-1</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-Mercaptoethanol</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>21985023</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell stripper</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45000-668</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T75 Flask</td>
			<td>BD</td>
			<td>1368065</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>16% Paraformaldehyde</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>50980487</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10X PBS</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-130</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>MT35010CV</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IBMX</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I5879-100MG</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RIPA lysis buffer</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>R0278</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

coculture analysis of extracellular protein interactions affecting insulin secretion by pancreatic beta cells

Interaksjoner mellom celle-overflateproteiner å koordinere funksjon av nabocellene. Betaceller i bukspyttkjertelen er gruppert sammen i bukspyttkjertelen holmer og handle på en koordinert måte for å opprettholde glukose homeostase. Det blir stadig mer klart at samspillet mellom transmembrane proteiner på overflaten av tilstøtende betacellene er viktige faktorer som bestemmer beta-celle funksjon. Klarlegging av rollene til bestemte transcellular interaksjon ved knockdown, knockout eller overexpression studier i dyrkede betacellene eller in vivo nødvendiggjør direkte forstyrrelse av mRNA og protein uttrykk, potensielt påvirker beta-celle helse og / eller funksjon på måter som kan forvirrer analyser av effektene av spesifikke interaksjoner. Disse tilnærminger også endre nivåene av de intracellulære domenene til de målrettede proteiner og kan hindre effekter på grunn av interaksjonen mellom proteinene i samme celle membran for å bli fortrengtskredtatte fra virkningene av transcellular interaksjoner. Her er en fremgangsmåte for å bestemme virkningen av bestemte transcellular interaksjoner på insulin-utskillende kapasitet og responsen til beta-celler er presentert. Metoden kan anvendes til beta-cellelinjer, slik som INS-1 celler, og til dissosiert primære betaceller. Den er basert på coculture modeller utviklet av neurobiologists, som fant at eksponering av dyrkede nerveceller til spesifikke nevrale proteiner uttrykt på HEK293 (eller COS) cellelagene identifiserte proteiner viktige for kjøring synapse formasjon. Gitt parallellene mellom sekretoriske maskiner av nevrale synapser og av beta-cellene, resonnerte vi at beta-celle funksjonelle modning kan være drevet av lignende transcellular interaksjoner. Vi har utviklet et system hvor beta-celler dyrket på et sjikt av HEK293-celler som uttrykker et protein av interesse. I denne modellen er den beta-cellen cytoplasma urørt mens ekstracellulært protein-protein interactions er manipulert. Selv om vi her primært fokuserer på studier av glukose-stimulerte insulin sekresjon, kan andre prosesser som skal analyseres, for eksempel endringer i genekspresjon som bestemt ved immunoblotting eller qPCR.

Ved å anvende fremgangsmåten beskrevet her, har vi testet effekten av forskjellige varianter av proteinet neuroligin på insulinsekresjon. Dette utfyller vår publiserte arbeider undersøker effekten av neuroligin-2 på beta-celle funksjon 10. Figur 2, for eksempel, viser resultatene fra coculturing INS-1 beta celler med HEK293 celler transfektert å uttrykke en neuroligin isoform referert til her som NL- X. Dette eksperimentet er designet for å teste hypotesen om at NL-X engasjerer seg i ...

Watch this Scientific Journal Video about Coculture Analysis of Extracellular Protein Interactions Affecting Insulin Secretion by Pancreatic Beta Cells at JoVE.com

Coculture Analysis of Extracellular Protein Interactions Affecting Insulin Secretion by Pancreatic Beta Cells

Transcellular protein interaksjoner er viktige determinanter av pankreatisk p-celle-funksjon. Detaljert her er en metode tilpasset fra en coculture modell av synaptogenesis-for å undersøke hvordan spesifikke transmembrane proteiner påvirker insulin sekresjon. Transfekterte HEK293-celler uttrykker proteiner av interesse; beta celler trenger ikke å bli transfektert eller på annen måte direkte perturbert.

Coculture Analyse av Ekstracellulære protein interaksjoner som påvirker insulinsekresjon ved betaceller i bukspyttkjertelen

Interactions between cell-surface proteins help coordinate the function of neighboring cells. Pancreatic beta cells are clustered together within ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Improving IV Insulin Administration in a Community Hospital

Forbedre IV Insulin Administration i en Community Hospital

Diabetes mellitus is a major independent risk factor for increased morbidity and mortality in the hospitalized patient, and elevated blood glucose ...

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

Isolasjon, karakterisering og Comparative Differensiering av Human tannpulpa stamceller hentet fra permanente tenner ved hjelp av to ulike metoder

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Coculture System with an Organotypic Brain Slice and 3D Spheroid of Carcinoma Cells

Coculture System med en Organotypic Brain Slice og 3D Spheroid av karcinomceller

Patients with cerebral metastasis of carcinomas have a poor prognosis. However, the process at the metastatic site has barely been investigated, in ...

Human Dupuytren's Ex Vivo Culture for the Study of Myofibroblasts and Extracellular Matrix Interactions

Human Dupuytren's Ex Vivo Culture for the Study of Myofibroblasts and Extracellular Matrix Interactions

Menneskelig Dupuytrens<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Kultur for studier av myofibroblasts og ekstracellulære matriks Interactions

Organ fibrosis or &#8220;scarring&#8221; is known to account for a high death toll due to the extensive amount of disorders and organs affected (from ...

Studying Pancreatic Cancer Stem Cell Characteristics for Developing New Treatment Strategies

Studerer Bukspyttkjertelkreft Stem Cell Kjennetegn for å utvikle nye behandlingsstrategier

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) contains a subset of exclusively tumorigenic cancer stem cells (CSCs) which have been shown to drive tumor ...

Neurodegeneration in an Animal Model of Chronic Amyloid-beta Oligomer Infusion Is Counteracted by Antibody Treatment Infused with Osmotic Pumps

Nevrodegenerasjon i en dyremodell av kronisk amyloid-beta oliqomer Infusion motvirkes av antistoffbehandlingen Infused med osmotiske pumper

Decline in hippocampal-dependent explicit memory (memory for facts and events) is one of the earliest clinical symptom of Alzheimer&#39;s disease (AD). It ...

Application of End-to-end Anastomosis in Robotic Central Pancreatectomy

Anvendelse av ende-til-ende anastomose i robot sentrale Pancreatectomy

Central pancreatectomy is carried out for the treatment of benign or low-malignant potential tumors located in the pancreatic neck or proximal part of ...

Homogeneous Time-resolved F&#246;rster Resonance Energy Transfer-based Assay for Detection of Insulin Secretion

Homogeneous Time-resolved FÃƒÆ’Ã†'Ãƒâ€šÃ‚Â¶rster Resonance Energy Transfer-based Assay for Detection of Insulin Secretion

Homogen tid-løst han selvmord resonans energi overføring-basert analysen for påvisning av Insulin Secretion

The detection of insulin secretion is critical for elucidating mechanisms of regulated secretion as well as in studies of metabolism. Though numerous ...

Isolation of Primary Mouse Hepatocytes for Nascent Protein Synthesis Analysis by Non-radioactive L-azidohomoalanine Labeling Method

Isolasjon hepatocytes hovedknappen på musen for begynnende Protein syntese analyse av ikke-radioaktivt L-azidohomoalanine merking metoden

Hepatocytes are parenchymal cells of the liver and engage multiple metabolic functions, including synthesis and secretion of proteins essential for ...

Bio-energetics Investigation of Candida albicans Using Real-time Extracellular Flux Analysis

Bio-energetics Investigation of Candida albicans Using Real-time Extracellular Flux Analysis

Bio-energetikk undersøkelse av Candida albicans bruker Real-time ekstracellulære Flux analyse

Mitochondria are essential organelles for the cellular metabolism and survival. A variety of key events take place in mitochondria, such as cellular ...