Name: coculture analysis of extracellular protein interactions affecting insulin secretion by pancreatic beta cells
Uploaded: 2013-06-15T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Coculture Analysis of Extracellular Protein Interactions Affecting Insulin Secretion by Pancreatic Beta Cells at JoVE.com

Detta arbete stöddes av National Institutes of Health bidrag R01DK080971 och Juvenile Diabetes Research Foundation 37-2009-44. Vi uppskattar även stödet från UCSD Pediatric Diabetes Research Center (PDRC).

Ett. Transfektion av HEK293 Layer <ol><li> Förbered HEK293 cellmedium genom att lägga till 500 ml flaskor av DMEM (med 4,5 g / ml glukos och fenol rött och utan glutamin): 50 ml FBS, 5 ml 100X penicillin / streptomycin lösning, 5 ml 100x L-glutamin lösning och 500 ^ amfotericin B. </li><li> Platta ut HEK293 celler i en 24-brunnars platta med användning av 0,5 ml av HEK293 medium per brunn. Kontrollera att cellerna är spridda jämnt över botten av plattan. </li><li> När HEK293-celler når 100% konfluens, trans...

<ol>
	<li>Kelly, C., McClenaghan, N. H., Flatt, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+islet+structure+and+cellular+interactions+in+the+control+of+insulin+secretion.">Role of islet structure and cellular interactions in the control of insulin secretion.</a> Islets. 3, 41-47 (2011).</li><li>Konstantinova, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EphA-Ephrin-A-mediated+beta+cell+communication+regulates+insulin+secretion+from+pancreatic+islets.">EphA-Ephrin-A-mediated beta cell communication regulates insulin secretion from pancreatic islets.</a> Cell. 129, 359-370 (2007).</li><li>Jain, R., Lammert, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-cell+interactions+in+the+endocrine+pancreas.">Cell-cell interactions in the endocrine pancreas.</a> Diabetes Obes. Metab. 11, 159-167 (2009).</li><li>Poitout, V., Olson, L. K., Robertson, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin-secreting+cell+lines:+classification,+characteristics+and+potential+applications.">Insulin-secreting cell lines: classification, characteristics and potential applications.</a> Diabetes Metab. 22, 7-14 (1996).</li><li>Craig, A. M., Graf, E. R., Linhoff, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+to+build+a+central+synapse:+clues+from+cell+culture.">How to build a central synapse: clues from cell culture.</a> Trends in Neurosciences. 29, 8-20 (2006).</li><li>Scheiffele, P., Fan, J., Choih, J., Fetter, R., Serafini, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroligin+expressed+in+nonneuronal+cells+triggers+presynaptic+development+in+contacting+axons.">Neuroligin expressed in nonneuronal cells triggers presynaptic development in contacting axons.</a> Cell. 101, 657-669 (2000).</li><li>Abderrahmani, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+traits+are+required+for+glucose-induced+insulin+secretion.">Neuronal traits are required for glucose-induced insulin secretion.</a> FEBS Lett. 565, 133-138 (2004).</li><li>Lowe, A. W., Madeddu, L., Kelly, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endocrine+secretory+granules+and+neuronal+synaptic+vesicles+have+three+integral+membrane+proteins+in+common.">Endocrine secretory granules and neuronal synaptic vesicles have three integral membrane proteins in common.</a> The Journal of Cell Biology. 106, 51-59 (1988).</li><li>Suckow, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+neurexin,+neuroligin,+and+their+cytoplasmic+binding+partners+in+the+pancreatic+beta-cells+and+the+involvement+of+neuroligin+in+insulin+secretion.">Expression of neurexin, neuroligin, and their cytoplasmic binding partners in the pancreatic beta-cells and the involvement of neuroligin in insulin secretion.</a> Endocrinology. 149, 6006-6017 (2008).</li><li>Suckow, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcellular+neuroligin-2+interactions+enhance+insulin+secretion+and+are+integral+to+pancreatic+beta+cell+function.">Transcellular neuroligin-2 interactions enhance insulin secretion and are integral to pancreatic beta cell function.</a> The Journal of Biological Chemistry. 287, 19816-19826 (2012).</li><li>Kohnert, K. D., Hehmke, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+suspensions+of+pancreatic+islet+cells:+a+comparison+of+methods.">Preparation of suspensions of pancreatic islet cells: a comparison of methods.</a> J. Biochem. Biophys. Methods. 12, 81-88 (1986).</li><li>Qi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+pancreatic+islet+isolation:+Part+I:+digestion+and+collection+of+pancreatic+tissue.">Human pancreatic islet isolation: Part I: digestion and collection of pancreatic tissue.</a> J. Vis. Exp. (27), e1125 (2009).</li><li>Qi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+pancreatic+islet+isolation:+Part+II:+purification+and+culture+of+human+islets.">Human pancreatic islet isolation: Part II: purification and culture of human islets.</a> J. Vis. Exp. (27), e1343 (2009).</li><li>Szot, G. L., Koudria, P., Bluestone, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+pancreatic+islet+isolation.">Murine pancreatic islet isolation.</a> J. Vis. Exp. (7), e255 (2007).</li><li>Zmuda, E. J., Powell, C. A., Hai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+murine+islet+isolation+and+subcapsular+kidney+transplantation.">A method for murine islet isolation and subcapsular kidney transplantation.</a> J. Vis. Exp. (50), e2096 (2011).</li><li>Hauge-Evans, A. C., Squires, P. E., Persaud, S. J., Jones, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pancreatic+beta-cell-to-beta-cell+interactions+are+required+for+integrated+responses+to+nutrient+stimuli:+enhanced+Ca2++and+insulin+secretory+responses+of+MIN6+pseudoislets.">Pancreatic beta-cell-to-beta-cell interactions are required for integrated responses to nutrient stimuli: enhanced Ca2+ and insulin secretory responses of MIN6 pseudoislets.</a> Diabetes. 48, 1402-1408 (1999).</li><li>Spiess, Y., Smith, M. A., Vale, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Superfusion+of+dissociated+pancreatic+islet+cells+attached+to+Cytodex+beads.">Superfusion of dissociated pancreatic islet cells attached to Cytodex beads.</a> Diabetes. 31, 189-193 (1982).</li><li>Pham, P. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transient+gene+expression+in+HEK293+cells:+peptone+addition+posttransfection+improves+recombinant+protein+synthesis.">Transient gene expression in HEK293 cells: peptone addition posttransfection improves recombinant protein synthesis.</a> Biotechnol. Bioeng. 90, 332-344 (2005).</li><li>Thomas, P., Smart, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HEK293+cell+line:+a+vehicle+for+the+expression+of+recombinant+proteins.">HEK293 cell line: a vehicle for the expression of recombinant proteins.</a> J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 51, 187-200 (2005).</li><li>Maurisse, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+transfection+of+DNA+into+primary+and+transformed+mammalian+cells+from+different+lineages.">Comparative transfection of DNA into primary and transformed mammalian cells from different lineages.</a> BMC Biotechnol. 10, 9 (2010).</li></ol>

Den coculture här beskrivna metoden ger ett effektivt sätt att bestämma den fysiologiska betydelsen av specifika beta-cell-ytan, transmembranproteiner, och specifikt om deras extracellulära domäner. Genom odling av beta eller celler insulinomceller (såsom INS-1 celler som används här) i kontakt med HEK293 celler som uppvisar ett intressant protein på cellytan, kan experiment utformas för att bestämma effekterna av extracellulära protein-protein-interaktioner utan att direkt störa den intracellulära miljön...

Vi beskriver här en metod för att underlätta undersökningar av hur de extracellulära domänerna av specifika transmembranproteiner påverkar insulinsekretionen. Metoden sonder effekterna av interaktion mellan proteinet av intresse med proteiner (eller eventuellt andra molekyler) på pankreatisk beta-cellytan. Metoden möjliggör undersökningar av hur cellytproteiner uttrycks av betaceller eller av andra närliggande celler (t.ex. endotelceller, neuroner, pankreas alfaceller) påverkar betacellfunktionen genom transcellulär interaktioner (dvs. genom interaktioner med interaktionspartner på ytan av intilliggande betaceller). Den cellulära plasmamembran innehåller en komplex samling av strukturella och funktionella proteiner som fungerar som broar till den extracellulära miljön. Genom bildandet av transcellulär anslutningar eller genom initiering av plast signalering händelser, kan interaktioner mellan cellytproteiner hjälpa till att samordnafunktion av angränsande celler. Betaceller är grupperade tillsammans inom pankreasöarna och agera på ett samordnat sätt för att upprätthålla glukoshomeostas 1. Som visat, exempelvis genom vikten av extracellulära EPHA-ephrinA och neuroligin-2 interaktioner i regleringen av glukos-stimulerad insulinsekretion, blir det allt mer tydligt att ökad kunskap om de extracellulära interaktioner som förekommer mellan proteiner på ytan av intilliggande betaceller kommer att vara av stor betydelse för att få en full förståelse av insulinutsöndring, beta cell funktionell mognad och underhåll av glukoshomeostasen 1-3. Målet med den här beskrivna metoden är att möjliggöra undersökningar av effekterna på betacellsfunktionen av transcellulär interaktioner med specifika trans eller annat-cell-ytan-associerade proteiner. Genom samodling betaceller med HEK293 celler transfekterade med olika uttryckskonstruktioner, effekterna på beta cellernas funktion av olika proteiner på cellernas ytor eller muterade varianter därav kan vara effektivt sonderade. Detta åstadkommes utan att behöva transfektera betacellerna själva. Klarläggande av rollerna av särskilda transcellulär interaktioner från knockdown, knockout eller överuttryck studier i odlade betaceller eller in vivo kräver direkt störning av beta-cellens mRNA och protein expression, potentiellt påverka beta cell hälsa och / eller funktion på ett sätt som kunde förbrylla analyser av effekterna av specifika extracellulära interaktioner. Dessa angreppssätt också förändra nivåerna av de intracellulära domänerna av de riktade proteiner och vidare inte tillåter effekter på grund av interaktioner mellan proteiner på eller i samma cell som ska särskiljas från effekterna av transcellulär interaktioner. Här är en metod för att bestämma effekten av specifika transcellulär interaktioner på insulinproducerande kapacitet och lyhördhet av betaceller described. Denna metod är tillämplig på insulinproducerande beta-cellinjer, såsom INS-1-celler 4, och dissocierade primära gnagare eller humana beta. Den är baserad på samodling modeller som utvecklats av neurobiologists, som fann att exponering av odlade nervceller till specifika neuronala proteiner som uttrycks på HEK293 (eller COS) cellager kunde identifiera proteiner som kör synapsebildande 5,6. Med tanke på parallellerna mellan den sekretoriska maskineriet av neuronala synapser och betaceller, motiverade vi att betacellfunktionen och funktionell mognad kan drivas av liknande transcellulär interaktioner 7-9. För att undersöka dessa interaktioner, utvecklade vi det här beskrivna systemet i vilket betaceller samodlades på ett lager av HEK293-celler som uttrycker ett protein av intresse 10. Detta system gör det beta-cellens cytoplasma att förbli orörda medan extracellulära protein-protein-interaktioner är manipulerade.

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Name of the reagent</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalogue number</td>
			<td>Comments (optional)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pcDNA 3.3 vector/backbone</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>K830001</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipofectamine 2000</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>18324012</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-312</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen/strep solution</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-652-1</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amphotericin B</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-808-1/30</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI-1640</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-404</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-PBS</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-434</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Pyruvate</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-710-1</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-Mercaptoethanol</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>21985023</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell stripper</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45000-668</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T75 Flask</td>
			<td>BD</td>
			<td>1368065</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>16% Paraformaldehyde</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>50980487</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10X PBS</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>45001-130</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>MT35010CV</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IBMX</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I5879-100MG</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RIPA lysis buffer</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>R0278</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

coculture analysis of extracellular protein interactions affecting insulin secretion by pancreatic beta cells

Interaktioner mellan cellytproteiner hjälpa till att samordna funktionen av angränsande celler. Betaceller är grupperade tillsammans inom pankreascellöar och agera på ett samordnat sätt för att upprätthålla glukoshomeostas. Det blir alltmer tydligt att samspelet mellan transmembranproteiner på ytorna av intilliggande betaceller är viktiga faktorer för beta-cellernas funktion. Klarläggande av rollerna av särskilda transcellulär interaktioner från knockdown, knockout eller överuttryck studier i odlade betaceller eller in vivo kräver direkt störning av mRNA och protein expression, potentiellt påverka beta-cell hälsa och / eller funktion på ett sätt som kunde förbrylla analyser av effekterna av specifika interaktioner. Dessa tillvägagångssätt också förändra nivåerna av de intracellulära domänerna av de riktade proteinerna och kan förhindra effekter på grund av interaktionen mellan proteiner inom samma cell membran skall kopplas bortpräglats från effekterna av transcellulär interaktioner. Här är en metod för att bestämma effekten av specifika transcellulär interaktioner på insulinproducerande kapacitet och lyhördhet betaceller presenteras. Denna metod är tillämplig på beta-cellinjer, såsom INS-1-celler, och dissocierade primära betaceller. Den är baserad på samodling modeller som utvecklats av neurobiologists, som fann att exponering av odlade nervceller till specifika neuronala proteiner som uttrycks på HEK293 (eller COS) cellager identifierade proteiner som är viktiga för att driva synapsebildande. Med tanke på parallellerna mellan den sekretoriska maskineriet av neuronala synapser och betaceller, motiverade vi att beta-cell funktionell mognad kan drivas av liknande transcellulär interaktioner. Vi utvecklade ett system där betaceller odlas på ett skikt av HEK293-celler som uttrycker ett protein av intresse. I denna modell är den beta-cellens cytoplasma orörd medan extracellulärt protein-protein interactions manipuleras. Även om vi fokuserar här främst på studier av glukos-stimulerad insulinsekretion, kan andra processer analyseras, till exempel, som förändringar i genuttryck bestäms genom immunoblottning eller qPCR.

Med användning av metoden som beskrivs här, har vi testat effekten av olika varianter av proteinet neuroligin på insulinutsöndring. Detta kompletterar vårt publicerade arbete undersöker effekten av neuroligin-2 på betacellsfunktionen 10. Figur 2, till exempel, visar resultat som erhållits från samodling INS-1 beta celler med HEK293 celler transfekterade för att uttrycka en neuroligin isoform som här kallas NL- X. Detta experiment utformades för att testa hypotesen att NL-X bedrive...

Watch this Scientific Journal Video about Coculture Analysis of Extracellular Protein Interactions Affecting Insulin Secretion by Pancreatic Beta Cells at JoVE.com

Coculture Analysis of Extracellular Protein Interactions Affecting Insulin Secretion by Pancreatic Beta Cells

Transcellulär proteinväxelverkningar är viktiga faktorer för bukspottkörtel betacellfunktion. Detaljerad här är en metod anpassad från en samodling modell synaptogenesis-för att undersöka hur specifika transmembranproteiner påverkar insulinutsöndring. Transfekterade HEK293-celler uttrycka proteiner av intresse, beta celler behöver inte skall transfekteras eller på annat sätt direkt perturbed.

Coculture Analys av extracellulärt protein interaktioner som kan påverka insulinutsöndringen från betacellerna i bukspottkörteln

Interactions between cell-surface proteins help coordinate the function of neighboring cells. Pancreatic beta cells are clustered together within ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Improving IV Insulin Administration in a Community Hospital

Förbättra IV Insulin Administration i ett Community Hospital

Diabetes mellitus is a major independent risk factor for increased morbidity and mortality in the hospitalized patient, and elevated blood glucose ...

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

Isolering, karakterisering och jämförande differentiering av mänskliga Dental celler Pulp Stem Härstammar från permanenta tänder med hjälp av två olika metoder

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Coculture System with an Organotypic Brain Slice and 3D Spheroid of Carcinoma Cells

Coculture System med en Organotypiska Brain Slice och 3D Sfär av cancerceller

Patients with cerebral metastasis of carcinomas have a poor prognosis. However, the process at the metastatic site has barely been investigated, in ...

Human Dupuytren's Ex Vivo Culture for the Study of Myofibroblasts and Extracellular Matrix Interactions

Human Dupuytren's Ex Vivo Culture for the Study of Myofibroblasts and Extracellular Matrix Interactions

Humant Dupuytrens<em&gt; Ex vivo</em&gt; Kultur för studien av Myofibroblaster och extracellulära matrixinteraktioner

Organ fibrosis or &#8220;scarring&#8221; is known to account for a high death toll due to the extensive amount of disorders and organs affected (from ...

Studying Pancreatic Cancer Stem Cell Characteristics for Developing New Treatment Strategies

Studera bukspottkörtelcancer Stem Cell egenskaper för att utveckla nya behandlingsstrategier

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) contains a subset of exclusively tumorigenic cancer stem cells (CSCs) which have been shown to drive tumor ...

Neurodegeneration in an Animal Model of Chronic Amyloid-beta Oligomer Infusion Is Counteracted by Antibody Treatment Infused with Osmotic Pumps

Neurodegeneration i en djurmodell av kronisk amyloid-beta Oligomer Infusion motverkas av antikroppsbehandling Infused med osmotiska pumpar

Decline in hippocampal-dependent explicit memory (memory for facts and events) is one of the earliest clinical symptom of Alzheimer&#39;s disease (AD). It ...

Application of End-to-end Anastomosis in Robotic Central Pancreatectomy

Tillämpningen av End-to-end anastomos i Robotic centrala Pancreatectomy

Central pancreatectomy is carried out for the treatment of benign or low-malignant potential tumors located in the pancreatic neck or proximal part of ...

Homogeneous Time-resolved F&#246;rster Resonance Energy Transfer-based Assay for Detection of Insulin Secretion

Homogeneous Time-resolved FÃƒÆ’Ã†'Ãƒâ€šÃ‚Â¶rster Resonance Energy Transfer-based Assay for Detection of Insulin Secretion

Homogen tid-löst Förster resonans energi överföring-baserad analys för detektion av insulinsekretionen

The detection of insulin secretion is critical for elucidating mechanisms of regulated secretion as well as in studies of metabolism. Though numerous ...

Isolation of Primary Mouse Hepatocytes for Nascent Protein Synthesis Analysis by Non-radioactive L-azidohomoalanine Labeling Method

Isolering av primära mus hepatocyter för begynnande proteinsyntes analys av icke-radioaktiva L-azidohomoalanine märkning metoden

Hepatocytes are parenchymal cells of the liver and engage multiple metabolic functions, including synthesis and secretion of proteins essential for ...

Bio-energetics Investigation of Candida albicans Using Real-time Extracellular Flux Analysis

Bio-energetics Investigation of Candida albicans Using Real-time Extracellular Flux Analysis

Bio-Energetik utredning av Candida albicans använder Real-time extracellulära Flux analys

Mitochondria are essential organelles for the cellular metabolism and survival. A variety of key events take place in mitochondria, such as cellular ...