Name: efficient and rapid isolation of early-stage embryos from arabidopsis thaliana seeds
Uploaded: 2013-06-07T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Efficient and Rapid Isolation of Early-stage Embryos from Arabidopsis thaliana Seeds at JoVE.com

Vi vil gerne takke Tal Nawy og Martin Bayer for deres råd om embryo isolation. MTR, VG, UG og CB udtænkt embryo isolation udstyr. MTR, VG og CB udviklet embryo isolation protokollen. MTR, VG og CB etablerede protokollen, isolerede embryoner og genererede embryo cDNA, VG udført PCR, MTR GUS-farvning, JJ fisken eksperimenter. MTR, VG, CG og UG skrev manuskriptet. Dette arbejde blev finansieret af University of Zürich, et stipendium af Roche Research Foundation (til MTR) og tilskud fra den schweiziske National Foundation (til UG og CB).

Proceduren er sammenfattet i rutediagrammet i figur 1 viste. Den microcapillaries og instrumentopstilling er vist i figur 2 og figur 3, og de ​​typiske trin i embryo isolation er vist i fig. 4. 1.. Materiale og buffer Forberedelse 1,1 Silikonebeklædning af glas microcapillaries <ol><li> Placer microcapillaries i et 15 ml Falcon-rør med ~ 5 ml Sigmacote (Sigma) og vend adskillige gange. </li>...

<ol>
	<li>Gehring, M., Bubb, K. L., Henikoff, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extensive+demethylation+of+repetitive+elements+during+seed+development+underlies+gene+imprinting.">Extensive demethylation of repetitive elements during seed development underlies gene imprinting.</a> Science. 324, 1447-1451 (2009).</li><li>Muller, B., Sheen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytokinin+and+auxin+interaction+in+root+stem-cell+specification+during+early+embryogenesis.">Cytokinin and auxin interaction in root stem-cell specification during early embryogenesis.</a> Nature. 453, 1094-1097 (2008).</li><li>Gehring, M., Missirian, V., Henikoff, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genomic+analysis+of+parent-of-origin+allelic+expression+in+Arabidopsis+thaliana+seeds.">Genomic analysis of parent-of-origin allelic expression in Arabidopsis thaliana seeds.</a> PLoS One. 6, 23687-23 (2011).</li><li>Xiang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genome-wide+analysis+reveals+gene+expression+and+metabolic+network+dynamics+during+embryo+development+in+Arabidopsis.">Genome-wide analysis reveals gene expression and metabolic network dynamics during embryo development in Arabidopsis.</a> Plant Physiol. 156, 346-356 (2011).</li><li>Nawy, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+GATA+factor+HANABA+TARANU+is+required+to+position+the+proembryo+boundary+in+the+early+Arabidopsis+embryo.">The GATA factor HANABA TARANU is required to position the proembryo boundary in the early Arabidopsis embryo.</a> Dev Cell. 19, 103-113 (2010).</li><li>Baroux, C., Pecinka, A., Fuchs, J., Schubert, I., Grossniklaus, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+triploid+endosperm+genome+of+Arabidopsis+adopts+a+peculiar,+parental-dosage-dependent+chromatin+organization.">The triploid endosperm genome of Arabidopsis adopts a peculiar, parental-dosage-dependent chromatin organization.</a> Plant Cell. 19, 1782-1794 (2007).</li><li>Autran, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maternal+epigenetic+pathways+control+parental+contributions+to+Arabidopsis+early+embryogenesis.">Maternal epigenetic pathways control parental contributions to Arabidopsis early embryogenesis.</a> Cell. 145, 707-719 (2011).</li><li>Wohrmann, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+a+DNA+methylation-independent+imprinting+control+region+at+the+Arabidopsis+MEDEA+locus.">Identification of a DNA methylation-independent imprinting control region at the Arabidopsis MEDEA locus.</a> Genes Dev. 26, 1837-1850 (2012).</li><li>Raissig, M. T., Baroux, C., Grossniklaus, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+and+Flexibility+of+Genomic+Imprinting+during+Seed+Development.">Regulation and Flexibility of Genomic Imprinting during Seed Development.</a> Plant Cell. 23, 16-26 (2011).</li><li>Rea, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+DNA+methylation+of+imprinted+genes+in+Arabidopsis+endosperm.">Determination of DNA methylation of imprinted genes in Arabidopsis endosperm.</a> J. Vis Exp. 47 (47), e2327 (2011).</li><li>Breuninger, H., Rikirsch, E., Hermann, M., Ueda, M., Laux, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+expression+of+WOX+genes+mediates+apical-basal+axis+formation+in+the+Arabidopsis+embryo.">Differential expression of WOX genes mediates apical-basal axis formation in the Arabidopsis embryo.</a> Dev Cell. 14, 867-876 (2008).</li><li>Kohler, C., Page, D. R., Gagliardini, V., Grossniklaus, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Arabidopsis+thaliana+MEDEA+Polycomb+group+protein+controls+expression+of+PHERES1+by+parental+imprinting.">The Arabidopsis thaliana MEDEA Polycomb group protein controls expression of PHERES1 by parental imprinting.</a> Nature. 37, 28-30 (2005).</li><li>Fransz, P., De Jong, J. H., Lysak, M., Castiglione, M. R., Schubert, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interphase+chromosomes+in+Arabidopsis+are+organized+as+well+defined+chromocenters+from+which+euchromatin+loops+emanate.">Interphase chromosomes in Arabidopsis are organized as well defined chromocenters from which euchromatin loops emanate.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 99, 14584-14589 (2002).</li><li>Morris, J., Singh, J. M., Eberwine, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcriptome+analysis+of+single+cells.">Transcriptome analysis of single cells.</a> J. Vis. Exp. (50), e2634 (2011).</li><li>Nodine, M. D., Bartel, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maternal+and+paternal+genomes+contribute+equally+to+the+transcriptome+of+early+plant+embryos.">Maternal and paternal genomes contribute equally to the transcriptome of early plant embryos.</a> Nature. 482 (7383), (2012).</li><li>Jefferson, R. A., Kavanagh, T. A., Bevan, M. W. G. U. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=fusions:+beta-glucuronidase+as+a+sensitive+and+versatile+gene+fusion+marker+in+higher+plants.">fusions: beta-glucuronidase as a sensitive and versatile gene fusion marker in higher plants.</a> EMBO J. 6, 3901-3907 (1987).</li><li>Schmidt, A., W&#246;hrmann, H., Raissig, M. T., Arand, J., Gheyselinck, J., Gagliardini, V., Heichinger, C., Walter, J., Grossniklaus, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Polycomb+group+protein+MEDEA+and+the+DNA+methyltransferase+MET1+interact+in+Arabidopsis+to+repress+autonomous+endosperm+development.">The Polycomb group protein MEDEA and the DNA methyltransferase MET1 interact in Arabidopsis to repress autonomous endosperm development.</a> Plant J. 73 (5), (1111).</li></ol>

Vi udviklede et foster isolation protokol, der er hurtig, effektiv og kan nemt overføres til andre laboratorier. Den beskrevne udstyr består her af et omvendt mikroskop, en mikromanipulator, glas microcapillaries, en lodret filament aftrækker og en microinjector (figur 3A). Opsætningen ligner den, der er beskrevet for enkelt dyr celleisolering for transcriptomics analyser 17. Vi har også med succes arbejdet med en mere grundlæggende setup, hvor glas microcap...

Embryo af blomstrende planter er omgivet af endosperm, en nærende væv afledt fra et andet befrugtning begivenhed. Både foster og endosperm er omgivet af flere cellelag i frøkappe. Kollektivt disse væv danner et frø, der udvikler inde i frugten. Således er vævs-og celle-specifikke analyser af Arabidopsis embryoner stærkt forringet grundet deres utilgængelighed. Ikke desto mindre, embryoer på det sene-kugleformede eller senere faser er forholdsvis godt modtagelig for manuel dissektion ved hjælp af fine wolfram nåle under stereomikroskop eller ved et let tryk på frøet ved hjælp af pincet til at udtrække dem. Sådanne teknikker succes blev anvendt til transcriptome eller epigenome profilering analyser, f.eks microarray hybridisering, bisulfit sekventering eller RNA-sekventering (fx 1-3). I modsætning hertil er fortsat undersøgelser af embryoner på zygote til tidlig kugleformede stadie teknisk udfordrende. Til dato har kun få undersøgelser reported transkriptom analyser på unge embryoer ved hjælp af enten laser-capture mikrodissektion (LCM) af embryonale væv fra faste frø afsnit 4 eller manuel udvinding af individuelle embryoer fra inden frø ved hjælp af fine værktøjer 5.. Men LCM udstyr ikke almindeligt tilgængelige og manuel embryo udsugning på tidlige stadier er tidskrævende og kræver gode dissektion færdigheder, som er ikke er let omsættelige. Ud over at genom-dækkende analyser findes på stedet genekspressionsanalyse også svært at udføre på unge, hel-mount embryoner fra Arabidopsis. Til en vis grad kan unge embryoer frigives mikroskopobjektglas ved let tryk på frøene og anvendes til reportergenassays eller protein detektion ved immunfarvning (se for eksempel 6,7). Denne teknik er imidlertid ikke tillader high-throughput embryo isolation, hvilket hindrer kvantitative analyser. Derfor har vi udviklet en effektiv og hurtig protokolfor tidlig embryo isoleret fra Arabidopsis frø, der er enkel at sætte op, let at overføre, og egnet til en bred vifte af downstream-applikationer. Det grundlæggende princip er at forsigtigt knuse frø - dissekeret fra unge siliques i et Eppendorf-rør ved hjælp af en plastik pistil i en egnet isolation buffer. Frøet ekstrakt anbringes i dråber på en multi-brønd sliden og screenet for tilstedeværelsen af ​​frigivne embryoner på det ønskede tidspunkt ved hjælp af en inverteret mikroskop. Embryonerne opsamles ved hjælp af et glas microcapillary knyttet til en microinjector eller en standard laboratorium pipette. For molekylære applikationer anvendes embryoner vaskes to gange ved gentagne udsætning i dråber af nye isolation buffer, før du overfører dem til destinationen buffer i et minimalt volumen. Til cytologiske applikationer (reporter assays, immunfarvning, FISH), kan vasketrin udelades. Fremgangsmåden giver flere fordele: (i) det giver 25-40 embryoner i ~ 45 min til cytologisk apppublikationer eller i 3-4 hr til molekylær ansøgninger (inklusive vasketrinene), (ii) den giver mulighed isolering af specifikke fosterstadiet, (iii), er det nemt overføres til andre personer og laboratorier på grund af sin simple setup, (iv) kræver overkommelig udstyr til den grundlæggende opsætning, der er modtagelig for opgraderinger, og (v) det blev med held brugt til forskellige downstream-applikationer såsom RNA-sekventering 8, gen-specifikke DNA-metyleringsanalyse 9 reporter assays (10 og Raissig et al., i prep.) og FISH (J. Jaenisch, U. Grossniklaus, C. Baroux upubliceret se figur 5).

<table border="1">
	<tbody>
 <tr>
 <td>Name of the Reagent</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalogue Number</td>
 <td>Comments (optional)</td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>REAGENTS</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Sigmacote</td>
 <td>SIGMA </td>
 <td>SL2-100 ml</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>RNAse OUT</td>
 <td>Invitrogen (life technologies)</td>
 <td>10777-019</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>First- strand buffer</td>
 <td>Invitrogen (life technologies)</td>
 <td>18064-022</td>
 <td>contained in Superscript II package</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>DTT</td>
 <td>Invitrogen (life technologies)</td>
 <td>18064-022</td>
 <td>contained in Superscript II package</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Bovine serum albumin (BSA) 100x =10 mg/ml </td>
 <td>New England Biolabs Inc.</td>
 <td></td>
 <td>Different suppliers will also work </td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Thin wall Capillaries 1.0 mm</td>
 <td>World Precision Instruments</td>
 <td>TW100F-4</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>DNA LoBind tube 0.5 ml</td>
 <td>Vaudaux-Eppendorf</td>
 <td>0030108.035</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>CellTrics&Delta; 30 &mu;m</td>
 <td>PARTEC</td>
 <td>04-0042-2316</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>5wells 10 mm diameter slides</td>
 <td>Electron Microscopy Sciences</td>
 <td>63421-10</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Formaldehyde Solution</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>F1635</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Superfrost Plus slide</td>
 <td>Thermo Fisher</td>
 <td>J1800AMNZ</td>
 <td>Menzel-Gl&auml;ser</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Tris</td>
 <td>Amaresco</td>
 <td>0497</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>EDTA</td>
 <td>Applichem</td>
 <td>A2937</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Glycin</td>
 <td>Fluka</td>
 <td>50050</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>SDS pellets</td>
 <td>Roth</td>
 <td>CN30.3</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Micro Pestle</td>
 <td>VWR</td>
 <td>431-0094</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Microfine insulin syringes</td>
 <td>BD</td>
 <td>U-100</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>DEPC</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>D5758</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Ethanol</td>
 <td>Schaurlau</td>
 <td>ET00102500</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Forceps N5</td>
 <td>Dumont</td>
 <td>0108-5</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Bioanalyzer Pico Chip</td>
 <td>Agilent Technologies</td>
 <td>5067-1513</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>EQUIPMENT</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Inverted microscope</td>
 <td>Nikon TMS (Japan),</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Micromanipulator</td>
 <td>Leitz</td>
 <td></td>
 <td>Leica</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Micomanipulator Post mount LH1 probe</td>
 <td>Leica microsystems</td>
 <td>39430101</td>
 <td>Different brand will also do the work</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Vertical filament puller</td>
 <td>Sutter instrument</td>
 <td>P-20 model</td>
 <td>Other model are also suitable </td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Cell Tram vario</td>
 <td>Vaudaux-Eppendorf</td>
 <td>5176.000.033</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Bioanalyzer</td>
 <td>Agilent Technologies</td>
 <td>2100</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Qubit Fluorometer</td>
 <td>Invitrogen (life technologies</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
	 </tbody>
 </table>

efficient and rapid isolation of early-stage embryos from arabidopsis thaliana seeds

I blomstrende planter, udvikler fosteret inden for en nærende væv - endosperm - omgivet af de maternelle frø hinderne (eller frøskal). Som en konsekvens heraf er isolation af plante embryoner i de tidlige faser (1 celle til kugleformede etape) teknisk udfordrende på grund af deres relative utilgængelighed. Effektiv manuel dissektion på tidlige stadier er stærkt svækket af den lille størrelse af unge Arabidopsis frø og klæbeevne af foster til det omgivende væv. Her beskriver vi en metode, der giver en effektiv isolering af unge Arabidopsis embryoner, hvilket gav op til 40 embryoner i 1 time til 4 timer, afhængigt af den efterfølgende anvendelse. Fostre, der frigives i isolation buffer med lidt knusning 250-750 frø med en plastik pistil i en Eppendorf rør. Et glas microcapillary tilknytning til enten en standard laboratoriepipette (via en gummislange) eller en hydraulisk styret microinjector bruges til at indsamle embryoner fra dråber stedd på en multi-godt slide på en inverteret lysmikroskop. De nødvendige tekniske færdigheder er enkel og let omsættelige, og den grundlæggende opsætning ikke kræver dyrt udstyr. Embryoner indsamlet er egnet til en lang række efterfølgende anvendelser, såsom RT-PCR, RNA-sekventering, methylering af DNA analyser, fluorescens in situ hybridisering (FISH), immunfarvning, og reportergenassays.

Vores embryo isolation procedure (fig. 1) muliggør isolering af op til 40 embryoner i 4 timer, hvis Vaskene udføres, fx til molekylære anvendelser, eller i mindre end en time, hvis vaskninger udelades, fx til cytologiske applikationer. Figur 2 viser høj og lav kvalitet microcapillary tips og Figur 3 viser opsætningen af embryo isolation maskinen. Figur 4 viser processen med embryo isolation på inverteret mikroskop. <p class="...

Watch this Scientific Journal Video about Efficient and Rapid Isolation of Early-stage Embryos from Arabidopsis thaliana Seeds at JoVE.com

Efficient and Rapid Isolation of Early-stage Embryos from Arabidopsis thaliana Seeds

Vi rapporterer en effektiv og enkel metode til at isolere embryoner i de tidlige stadier af udvikling fra<em&gt; Arabidopsis thaliana</em&gt; Frø. Op til 40 embryoner kan isoleres i 1 time til 4 timer, afhængigt af den efterfølgende anvendelse. Proceduren er egnet til transkriptom, DNA-methylering, reporter-genekspression, immunfarvning og fluorescens<em&gt; In situ</em&gt; Hybridiserings analyser.

Effektiv og hurtig Isolering af Debuterende embryoner fra<em&gt; Arabidopsis thaliana</em&gt; Frø

In flowering plants, the embryo develops within a nourishing tissue - the endosperm - surrounded by the maternal seed integuments (or seed coat). As a ...

Research

JoVE Journal

Biology

Efficient and Rapid Isolation of Early-stage Embryos from Arabidopsis thaliana Seeds

Placing Growth Factor-Coated Beads on Early Stage Chicken Embryos

The neural tube expresses many proteins in specific spatiotemporal patterns during development.   These proteins have been shown to be critical for cell ...

Isolation of Protoplasts from Tissues of 14-day-old Seedlings of Arabidopsis thaliana

Isolation of Protoplasts from Tissues of 14-day-old Seedlings of Arabidopsis thaliana

Protoplasts are plant cells that have had their cell walls enzymatically removed. Isolation of protoplasts  from different plant tissues was first ...

Chromatin Immunoprecipitation Assay for Tissue-specific Genes using Early-stage Mouse Embryos

Chromatin immunoprecipitation (ChIP) is a powerful tool to identify protein:chromatin interactions that occur in the context of living cells 1-3. This ...

Isolation and Purification of Kinesin from Drosophila Embryos

Isolation and Purification of Kinesin from Drosophila Embryos

Isolering og oprensning af kinesin fra Drosophila Embryoner

Motor proteins move cargos along microtubules, and transport them to specific sub-cellular locations. Because altered transport is suggested to underlie a ...

Histochemical Staining of Arabidopsis thaliana Secondary Cell Wall Elements

Histochemical Staining of Arabidopsis thaliana Secondary Cell Wall Elements

Histokemisk farvning af<em&gt; Arabidopsis thaliana</em&gt; Sekundært Cell vægelementer

Arabidopsis thaliana is a model organism commonly used to understand and manipulate various cellular processes in plants, and it has been used extensively ...

Standardized Method for High-throughput Sterilization of Arabidopsis Seeds

Standardiseret metode til høj overførselshastighed Sterilisation af Arabidopsis frø

Arabidopsis thaliana (Arabidopsis) seedlings often need to be grown on sterile media. This requires prior seed sterilization to prevent the growth of ...

Spatiotemporal Investigation of ERL1 Dynamics via Confocal Imaging

Image-Based Methods to Study Membrane Trafficking Events in Stomatal Lineage Cells

Image-Based Methods to Study Membrane Trafficking Events in Stomatal Lineage Cells (Video) | JoVE 

In eukaryotic cells, membrane components, including proteins and lipids, are spatiotemporally transported to their destination within the endomembrane ...

An Improved Method to Measure Pollen Hydration Profiles in Arabidopsis thaliana

A High-Resolution, Single-Grain, In Vivo Pollen Hydration Bioassay for Arabidopsis thaliana

A High-Resolution, Single-Grain, In Vivo Pollen Hydration Bioassay for Arabidopsis thaliana (Video) | JoVE 

En højopløsning, enkeltkornet, in vivo pollenhydrering bioassay for Arabidopsis thaliana

Sexual reproduction in flowering plants requires initial interaction between the pollen grain and the stigmatic surface, where a molecular dialog is ...