Name: oral transmission of listeria monocytogenes in mice via ingestion of contaminated food
Uploaded: 2013-05-06T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Oral Transmission of Listeria monocytogenes in Mice via Ingestion of Contaminated Food at JoVE.com

עבודה זו נתמכה על ידי מענקים מהמכון הלאומי לבריאות (AI079442 וAI091918) הוענקו לSEFD

1. הכנת אגר תקשורת סלקטיבית (BHI / L + G) כדי לעכב חיידקי מעיים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשקול את 26 גרם מוח לב עירוי אגר (Difco), 7.5 גר &#39;LiCl ו5.0 גרם גליצין ומקום בבקבוק 1 ליטר. הוספת 500 מ&quot;ל של מים מזוקקים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חום על stirrer מגנטי עד שח?...

<ol>
	<li>Becker, L. A., Evans, S. N., Hutkins, R. W., Benson, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+sigmaB+in+adaptation+of+Listeria+monocytogenes+to+growth+at+low+temperature.">Role of sigmaB in adaptation of Listeria monocytogenes to growth at low temperature.</a> Journal of Bacteriology. 182, 7083-7087 (2000).</li><li>Neunlist, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+salting+and+cold-smoking+on+the+culturability,+viability,+and+virulence+of+Listeria+monocytogenes+strain+Scott+A.">Effect of salting and cold-smoking on the culturability, viability, and virulence of Listeria monocytogenes strain Scott A.</a> Journal of Food Protection. 68, 85-91 (2005).</li><li>Aureli, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+outbreak+of+febrile+gastroenteritis+associated+with+corn+contaminated+by+Listeria+monocytogenes.">An outbreak of febrile gastroenteritis associated with corn contaminated by Listeria monocytogenes.</a> N. Engl. J. Med. 342, 1236-1241 (2000).</li><li>Dalton, C. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+outbreak+of+gastroenteritis+and+fever+due+to+Listeria+monocytogenes+in+milk.">An outbreak of gastroenteritis and fever due to Listeria monocytogenes in milk.</a> N. Engl. J. Med. 336, 100-105 (1997).</li><li>Frye, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+outbreak+of+febrile+gastroenteritis+associated+with+delicatessen+meat+contaminated+with+Listeria+monocytogenes.">An outbreak of febrile gastroenteritis associated with delicatessen meat contaminated with Listeria monocytogenes.</a> Clin. Infect. Dis. 35, 943-949 (2002).</li><li>Salamina, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+foodborne+outbreak+of+gastroenteritis+involving+Listeria+monocytogenes.">A foodborne outbreak of gastroenteritis involving Listeria monocytogenes.</a> Epidemiol. Infect. 117, 429-436 (1996).</li><li>Mead, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Food-related+illness+and+death+in+the+United+States.">Food-related illness and death in the United States.</a> Emerging Infectious Diseases. 5, 607-625 (1999).</li><li>Wing, E. J., Gregory, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Listeria+monocytogenes:+Clinical+and+experimental+update.">Listeria monocytogenes: Clinical and experimental update.</a> The Journal of Infectious Disease. 185, S18-S24 (2002).</li><li>Condotta, S. A., Richer, M. J., Badovinac, V. P., Harty, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Probing+CD8+T+cell+responses+with+Listeria+monocytogenes+infection.">Probing CD8 T cell responses with Listeria monocytogenes infection.</a> Advances in Immunology. 113, 51-80 (2012).</li><li>Disson, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+human+listeriosis+in+natural+and+genetically+engineered+animals.">Modeling human listeriosis in natural and genetically engineered animals.</a> Nat Protoc. 4, 799-810 (2009).</li><li>Czuprynski, C. J., Faith, N. G., Steinberg, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A/J+mice+are+susceptible+and+C57BL/6+mice+are+resistant+to+Listeria+monocytogenes+infection+by+intragastric+inoculation.">A/J mice are susceptible and C57BL/6 mice are resistant to Listeria monocytogenes infection by intragastric inoculation.</a> Infect. Immun. 71, 682-689 (2003).</li><li>Gajendran, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+IFNgamma+expression+is+insufficient+for+efficacious+control+of+food-borne+bacterial+pathogens+at+the+gut+epithelial+barrier.">Regional IFNgamma expression is insufficient for efficacious control of food-borne bacterial pathogens at the gut epithelial barrier.</a> Int. Immunol. 19, 1075-1081 (2007).</li><li>Lecuit, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+transgenic+model+for+listeriosis:+role+of+internalin+in+crossing+the+intestinal+barrier.">A transgenic model for listeriosis: role of internalin in crossing the intestinal barrier.</a> Science. 292, 1722-1725 (2001).</li><li>Pron, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+study+of+the+intestinal+stage+of+listeriosis+in+a+rat+ligated+ileal+loop+system.">Comprehensive study of the intestinal stage of listeriosis in a rat ligated ileal loop system.</a> Infect. Immun. 66, 747-755 (1998).</li><li>Wollert, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extending+the+host+range+of+Listeria+monocytogenes+by+rational+protein+design.">Extending the host range of Listeria monocytogenes by rational protein design.</a> Cell. 129, 891-902 (2007).</li><li>Ghanem, B. o. u., N, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=InlA+promotes+dissemination+of+Listeria+monocytogenes+to+the+mesenteric+lymph+nodes+during+food+borne+infection+of+mice.">InlA promotes dissemination of Listeria monocytogenes to the mesenteric lymph nodes during food borne infection of mice.</a> PLoS Pathogens. , (2012).</li><li>Kowal, M., Buda-Lewandowska, D., Plytycz, B., Styrna, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Day/night+food+consumption+in+mice+is+strain+and+age-dependent.">Day/night food consumption in mice is strain and age-dependent.</a> Folia Biol. (Krakow). 50, 1-3 (2002).</li><li>Freitag, N. E., Port, G. C., Miner, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Listeria+monocytogenes+-+from+saprophyte+to+intracellular+pathogen.">Listeria monocytogenes - from saprophyte to intracellular pathogen.</a> Nature reviews. Microbiology. 7, 623-628 (2009).</li><li>Camejo, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+arsenal+of+virulence+factors+deployed+by+Listeria+monocytogenes+to+promote+its+cell+infection+cycle.">The arsenal of virulence factors deployed by Listeria monocytogenes to promote its cell infection cycle.</a> Virulence. 2, 379-394 (2011).</li></ol>

עכברים טהורים אינם אחיד פתוחים להאכלה בכל שעות היום, והנכונות שלהם לאכול את הלחם המזוהם יהיו תלויים גם בסוג והזן של עכברי גיל 17. מניסיוננו, 6-9 B6 עכברים ישנים בשבוע הם פתוחים להאכלה בכל שעה ביום, אבל עכברי BALB לא לאכול חתיכת הלחם באופן עקבי אלא אם כן הוא הציע במהלך ה...

חיידקי ליסטריה הם חיידקים פתוגנים תאיים פקולטטיביים הגורמים לזיהומים בבני אדם שמקורן במזון. החיידקים עמידים בפני רבים של תהליכים המשמשים להגנת אספקת המזון שלנו, כגון ייבוש, המלחה, או 1,2 קירור וזיהומים מקושרים בדרך כלל ל, מזונות &quot;מוכן לאכילה&quot; מעובדים שאינם מחוממים לפני הצריכה . בכמה התפרצויות קודמות, מקור ל &#39; מזון מזוהם חיידקי-זוהה, והקבוצה המצומצמת של אנשים שנחשפו הייתה פיקוח הדוק 3-6. בדוגמאות אלה, מחלה קלינית באנשים בריאים נעה בין קיבה ומעיים קלים, הגבלה עצמית לדלקות מעיים ומערכתיות חמורות יותר שנזקק לאשפוז. L. זיהומי חיידקי באנשים שנפרצו חיסוניים, כולל שני תינוקות והקשישים, היו קשורים עם שיעור תמותה גבוה (25-30%), אפילו עם טיפול אנטיביוטי <sעד&gt; 7,8. מעט מאוד ידוע על המינון המדבק לL. חיידקי, או את גורמי המארח ששולטים ברגישות לזיהומים לאחר שידור אוראלי, בעיקר בשל חוסר מודל חיה קטן שמשחזר מגוון רחב זה של תוצאות זיהום. המודל הנפוץ ביותר של דלקת ליסטריה הוא חיסון (IV) תוך ורידי של עכברים. המודל הרביעי הוא לשעתקו מאוד, והיה מאוד שימושית לחקר תגובות תא T הן נאיביות וזיכרון במהלך זיהום 9,10. החסרון של המודל הרביעי הוא שהיא עוקפת את שלב העיכול של זיהום לחלוטין. אחרי שידור שמקורן במזון, רירית המעיים מספקת מחסום שמאט כנראה ומגביל את מספר החיידקים כי הרף יכול להפיץ לרקמות היקפיות. לעומת זאת, ניתן למצוא את כל הבידוד בטחול ובכבד בתוך דקות של IV ממשל, ובולוס הגדול הזה של אורגניזמים עשוי להציף ד חיסון מולדיםefenses ברקמות אלה. משמש זיהום אוראלי של עכברים על ידי gavage פחות נפוץ, כי מנות גדולות (10 -10 11 CFU 9) נדרשות בדרך כלל כדי להשיג קולוניזציה מעיים 10. כמו כן, חיסון (IG) intragastric עם מחט האכלה אינו יוצר תקופת שחזור של זיהום במערכת העיכול לפני ההתפשטות מערכתית. מעבדות אחדות דיווחו כי ל &#39; חיידקי מגיעים לטחול וכבד בתוך 4-12 שעות לאחר זיהום (HPI), בעוד שאחרים לא הראו התפשטות מערכתית עד 48 HPI 11-15. וריאציה מעבדה למעבדה זו עשויה להיות תוצאה של האופי הפולשני של IG חיסון, אשר יכול לגרום לטראומה קלה לרירית של הוושט, ולקדם את פלישת דם ישירה של החיידקים. לאחרונה פיתחנו מודל עכבר רומן של אוראלי L. חיידקי לזיהום שמחק באופן הדוק כל שלבי מחלה אנושית 16. הדבקה מתרחשת כאשר העכברים לבלוע חתיכות של המשךaminated מזון, תהליך שהוא לא טראומטי, ואינו דורש כישורים מיוחדים על ידי חוקרי מעבדה. לתקופה של זמן בדיד (36-48 שעות), ל &#39; חיידקי reproducibly ליישב רק במערכת העיכול, ובכך מאפשרים חקירה של המנגנונים המשמשים ליסטריה פתוגניים translocate פני רירית המעיים ולהפיץ לרקמות היקפיות. חשוב מכך, ניתן להשתמש במודל כדי ללמוד הבדלים בהתנגדות מולדת מארחת לזיהום. במחקר קודם, הראינו שBALB / ג / מאת / עכברי J היו רגישים מאוד ליסטריה שמקורן במזון, עם שכפול מעריכי של ל &#39; חיידקי המתרחשים במעיים, הטחול, הכבד וכיס מרה 16. לעומת זאת, עכברי C57BL / 6 היו עמידים לזיהום שמקורן במזון, עם התישבות זמנית בלבד של ל &#39; חיידקי המתרחשים בכל אחת מרקמות אלה. תכונה נוספת של המודל שמקורן במזון המחקה מחלה אנושית הדוק היא הפצה טבעיתלמוח התרחש בשלבים מאוחר יותר של הזיהום (dpi 5-7).

<table border="1">
	<tbody>
 <tr>
 <td>Name of Reagent/Material</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalog Number</td>
 <td>Comments</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Brain Heart Infusion Agar</td>
 <td>Difco</td>
 <td>BD-241830</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Lithium chloride</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>L9650</td>
 <td ></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Glycine</td>
 <td>Omnipur</td>
 <td>4840</td>
 <td ></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>EDTA</td>
 <td>Gibco</td>
 <td>15575-038</td>
 <td ></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>DTT</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>D5545</td>
 <td ></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Collagenase, type IV</td>
 <td>Worthington</td>
 <td>LS004089</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>DNAse I</td>
 <td>Worthington</td>
 <td>LS002007</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Diff-Quik</td>
 <td>Dade-Behring</td>
 <td>B4132-1A</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>PowerGen 1000 homogenizer</td>
 <td>Fisher</td>
 <td>14-261-06</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>stainless steel type 304 mesh #80</td>
 <td>Small Parts, Inc.</td>
 <td>CX-0080-C</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Cytospin</td>
 <td>Statspin</td>
 <td>M801-22</td>
 <td></td>
 </tr>
	 </tbody>
 </table>

oral transmission of listeria monocytogenes in mice via ingestion of contaminated food

חיידקי L. הם חיידקים פתוגנים תאיים פקולטטיביים הגורמים לזיהומים בבני אדם שמקורן במזון. מעט מאוד ידוע על שלב העיכול של ליסטריה בשל חוסר מודל חיה קטן המחקה מחלה אנושית באופן הדוק. מאמר זה מתאר מודל עכבר חדשני להעברה אוראלית של ל &#39; חיידקי. שימוש במודל זה, עכברים שהוזנו ל חיידקי מזוהמים יש לחם שלב דיסקרטי של זיהום במערכת העיכול, ואחריו בדרגות שונות של התפשטות מערכתית בזנים רגישים (BALB / ג / מאת / י) או עמידים (C57BL / 6) עכבר. בשלבים מאוחר יותר של הזיהום, הפצתו לכיס המרה והמוח הוא ציין. מודל שמקורן במזון של ליסטריה הוא לשעתקו מאוד, אינו דורש כישורים מיוחדים, וניתן להשתמש בו במגוון רחב של חיידקים ובודד זני עכבר מעבדה. ככזה, הוא המודל האידיאלי ללמוד שתי האסטרטגיות ארסיות בשימוש על ידי ל &#39; חיידקי </em&gt; כדי לקדם את התישבות במעיים, כמו גם את תגובת המארח למזון זיהום חיידקי פולשני נישא.

מושבות חיידקי L. תהיה גלויות על BHI / L + G צלחות לאחר הדגירה 36-48 שעות ב 37 ° C. יש מושבות מראה חלק, בצורת כיפה שמנת לבנה (איור 1 א). צמיחה תהיה עכבות עבור רוב חיידקי המעיים, אבל זה נפוץ לראות כמה מושבות שאינן L. חיידקי, במיוחד כאשר ציפוי מעי דק או מעי גס ישירות ל?...

Watch this Scientific Journal Video about Oral Transmission of Listeria monocytogenes in Mice via Ingestion of Contaminated Food at JoVE.com

Oral Transmission of Listeria monocytogenes in Mice via Ingestion of Contaminated Food

מאמר זה מתאר שיטה חדשה לזיהום אוראלי של עכברים באמצעות<em&gt; חיידקי ליסטריה</em&gt;-מזון מזוהם. הפרוטוקול יכול בקלות להיות מותאם לשימוש עם חיידקים פתוגנים שמקורן במזון אחר.

הילוכים אוראלי של<em&gt; חיידקי ליסטריה</em&gt; בעכברים באמצעות בליעה של מזון מזוהם

L. monocytogenes are facultative intracellular bacterial pathogens that cause food borne infections in humans. Very little is known about the ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Oral Transmission of Listeria monocytogenes in Mice via Ingestion of Contaminated Food

Measuring Bacterial Load and Immune Responses in Mice Infected with Listeria monocytogenes

Measuring Bacterial Load and Immune Responses in Mice Infected with Listeria monocytogenes

מדידת עומס בקטריאלי ותגובות החיסון של עכברים נגועים עם חיידקי ליסטריה</em

Listeria monocytogenes (Listeria) is a Gram-positive facultative intracellular pathogen1. Mouse studies typically employ intravenous injection of ...

Imaging InlC Secretion to Investigate Cellular Infection by the Bacterial Pathogen Listeria monocytogenes

Imaging InlC Secretion to Investigate Cellular Infection by the Bacterial Pathogen Listeria monocytogenes

ההדמיה InlC הפרשה לחקר זיהום נייד על ידי פתוגן החיידקים<em&gt; חיידקי ליסטריה</em

Bacterial intracellular  pathogens can be conceived as molecular tools to dissect cellular signaling  cascades due to their capacity to exquisitely ...

Assessing Bacterial Invasion of Cardiac Cells in Culture and Heart Colonization in Infected Mice Using Listeria monocytogenes

Assessing Bacterial Invasion of Cardiac Cells in Culture and Heart Colonization in Infected Mice Using Listeria monocytogenes

הערכת פלישת חיידקים לתאי לב בתרבות וקולוניזציה של הלב בעכברים נגועים באמצעות מונוציטוגנים ליסטריה

Listeria monocytogenes is a Gram-positive facultative intracellular pathogen that is capable of causing serious invasive infections in immunocompromised ...

Transformation of Probiotic Yeast and Their Recovery from Gastrointestinal Immune Tissues Following Oral Gavage in Mice

טרנספורמציה של שמרים פרוביוטיים ושחזור שלהם מרקמות העיכול החיסון בעקבות Gavage אוראלי עכברים

Development of recombinant oral therapy would allow for more direct targeting of the mucosal immune system and improve the ability to combat ...

RNA Purification from Intracellularly Grown Listeria monocytogenes in Macrophage Cells

RNA Purification from Intracellularly Grown Listeria monocytogenes in Macrophage Cells

RNA טיהור מן intracellularly Grown<em&gt; חיידקי ליסטריה</em&gt; בתאי Macrophage

Analysis of the transcriptome of bacterial pathogens during mammalian infection is a valuable tool for studying genes and factors that mediate infection. ...

Experimental Infection with Listeria monocytogenes as a Model for Studying Host Interferon-&#947; Responses

Experimental Infection with Listeria monocytogenes as a Model for Studying Host Interferon-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â³ Responses

זיהום הניסיון עם<em&gt; חיידקי ליסטריה</em&gt; כמודל תגובות לימוד מארח אינטרפרון-γ

L. monocytogenes is a gram-positive bacterium that is a cause of food borne disease in humans. Experimental infection of mice with this pathogen has been ...

An In Vitro Caseum Binding Assay that Predicts Drug Penetration in Tuberculosis Lesions

An In Vitro Caseum Binding Assay that Predicts Drug Penetration in Tuberculosis Lesions

An<em&gt; במבחנה</em&gt; Assay מחייב Assay כי חוזה חדירה לסמים בשחפת נגעים

The eradication of tuberculosis disease requires drug regimens that can penetrate the multiple layers of complex pulmonary lesions. Drug distribution in ...

Listeria monocytogenes Infection of the Brain

Listeria monocytogenes Infection of the Brain

ליסטריה דלקת של המוח

Listeria monocytogenes is an intracellular bacterial pathogen that is frequently associated with food-borne infection. The ability of&#160;L. ...

Purification of a High Molecular Mass Protein in Streptococcus mutans

Purification of a High Molecular Mass Protein in Streptococcus mutans

טיהור חלבון המסה המולקולרי הגבוה בסטרפטוקוקוס

Elucidation of a gene&#39;s function typically involves comparison of phenotypic traits of wild-type strains and strains in which the gene of interest has ...

Imaging of In Situ Interferon Gamma Production in the Mouse Spleen following Listeria monocytogenes Infection

Imaging of In Situ Interferon Gamma Production in the Mouse Spleen following Listeria monocytogenes Infection

הדמיה של אינטרפרון באתרו הפקת גמא בטחול העכבר בעקבות זיהום יסטריה חיידקי

Cytokines are small proteins secreted by cells, mediating cell-cell communications that are crucial for effective immune responses. One characteristic of ...