Name: oral transmission of listeria monocytogenes in mice via ingestion of contaminated food
Uploaded: 2013-05-06T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Oral Transmission of Listeria monocytogenes in Mice via Ingestion of Contaminated Food at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet med tilskudd fra National Institutes of Health (AI079442 og AI091918) tildelt SEFD

En. Utarbeidelse av selektiv agar Media (BHI / L + G) for å hemme tarmfloraen <ol><li> Vei opp 26 g hjerne hjerte infusjon Agar (Difco), 7,5 g LiCl og 5,0 g glycin og plasser i en 1 liters kolbe. Tilsett 500 ml med avionisert vann. </li><li> Varme på en magnetrører inntil agar koker, kontinuerlig omrøring. Ta flasken av varmen, la boblene bosette kort stund, og deretter bringe tilbake til en byll igjen. </li><li> . Autoklav i 30 minutter ved 121 ° C under 16-19 psi på en væske syklus Merk: La r...

<ol>
	<li>Becker, L. A., Evans, S. N., Hutkins, R. W., Benson, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+sigmaB+in+adaptation+of+Listeria+monocytogenes+to+growth+at+low+temperature.">Role of sigmaB in adaptation of Listeria monocytogenes to growth at low temperature.</a> Journal of Bacteriology. 182, 7083-7087 (2000).</li><li>Neunlist, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+salting+and+cold-smoking+on+the+culturability,+viability,+and+virulence+of+Listeria+monocytogenes+strain+Scott+A.">Effect of salting and cold-smoking on the culturability, viability, and virulence of Listeria monocytogenes strain Scott A.</a> Journal of Food Protection. 68, 85-91 (2005).</li><li>Aureli, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+outbreak+of+febrile+gastroenteritis+associated+with+corn+contaminated+by+Listeria+monocytogenes.">An outbreak of febrile gastroenteritis associated with corn contaminated by Listeria monocytogenes.</a> N. Engl. J. Med. 342, 1236-1241 (2000).</li><li>Dalton, C. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+outbreak+of+gastroenteritis+and+fever+due+to+Listeria+monocytogenes+in+milk.">An outbreak of gastroenteritis and fever due to Listeria monocytogenes in milk.</a> N. Engl. J. Med. 336, 100-105 (1997).</li><li>Frye, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+outbreak+of+febrile+gastroenteritis+associated+with+delicatessen+meat+contaminated+with+Listeria+monocytogenes.">An outbreak of febrile gastroenteritis associated with delicatessen meat contaminated with Listeria monocytogenes.</a> Clin. Infect. Dis. 35, 943-949 (2002).</li><li>Salamina, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+foodborne+outbreak+of+gastroenteritis+involving+Listeria+monocytogenes.">A foodborne outbreak of gastroenteritis involving Listeria monocytogenes.</a> Epidemiol. Infect. 117, 429-436 (1996).</li><li>Mead, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Food-related+illness+and+death+in+the+United+States.">Food-related illness and death in the United States.</a> Emerging Infectious Diseases. 5, 607-625 (1999).</li><li>Wing, E. J., Gregory, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Listeria+monocytogenes:+Clinical+and+experimental+update.">Listeria monocytogenes: Clinical and experimental update.</a> The Journal of Infectious Disease. 185, S18-S24 (2002).</li><li>Condotta, S. A., Richer, M. J., Badovinac, V. P., Harty, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Probing+CD8+T+cell+responses+with+Listeria+monocytogenes+infection.">Probing CD8 T cell responses with Listeria monocytogenes infection.</a> Advances in Immunology. 113, 51-80 (2012).</li><li>Disson, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+human+listeriosis+in+natural+and+genetically+engineered+animals.">Modeling human listeriosis in natural and genetically engineered animals.</a> Nat Protoc. 4, 799-810 (2009).</li><li>Czuprynski, C. J., Faith, N. G., Steinberg, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A/J+mice+are+susceptible+and+C57BL/6+mice+are+resistant+to+Listeria+monocytogenes+infection+by+intragastric+inoculation.">A/J mice are susceptible and C57BL/6 mice are resistant to Listeria monocytogenes infection by intragastric inoculation.</a> Infect. Immun. 71, 682-689 (2003).</li><li>Gajendran, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+IFNgamma+expression+is+insufficient+for+efficacious+control+of+food-borne+bacterial+pathogens+at+the+gut+epithelial+barrier.">Regional IFNgamma expression is insufficient for efficacious control of food-borne bacterial pathogens at the gut epithelial barrier.</a> Int. Immunol. 19, 1075-1081 (2007).</li><li>Lecuit, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+transgenic+model+for+listeriosis:+role+of+internalin+in+crossing+the+intestinal+barrier.">A transgenic model for listeriosis: role of internalin in crossing the intestinal barrier.</a> Science. 292, 1722-1725 (2001).</li><li>Pron, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+study+of+the+intestinal+stage+of+listeriosis+in+a+rat+ligated+ileal+loop+system.">Comprehensive study of the intestinal stage of listeriosis in a rat ligated ileal loop system.</a> Infect. Immun. 66, 747-755 (1998).</li><li>Wollert, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extending+the+host+range+of+Listeria+monocytogenes+by+rational+protein+design.">Extending the host range of Listeria monocytogenes by rational protein design.</a> Cell. 129, 891-902 (2007).</li><li>Ghanem, B. o. u., N, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=InlA+promotes+dissemination+of+Listeria+monocytogenes+to+the+mesenteric+lymph+nodes+during+food+borne+infection+of+mice.">InlA promotes dissemination of Listeria monocytogenes to the mesenteric lymph nodes during food borne infection of mice.</a> PLoS Pathogens. , (2012).</li><li>Kowal, M., Buda-Lewandowska, D., Plytycz, B., Styrna, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Day/night+food+consumption+in+mice+is+strain+and+age-dependent.">Day/night food consumption in mice is strain and age-dependent.</a> Folia Biol. (Krakow). 50, 1-3 (2002).</li><li>Freitag, N. E., Port, G. C., Miner, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Listeria+monocytogenes+-+from+saprophyte+to+intracellular+pathogen.">Listeria monocytogenes - from saprophyte to intracellular pathogen.</a> Nature reviews. Microbiology. 7, 623-628 (2009).</li><li>Camejo, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+arsenal+of+virulence+factors+deployed+by+Listeria+monocytogenes+to+promote+its+cell+infection+cycle.">The arsenal of virulence factors deployed by Listeria monocytogenes to promote its cell infection cycle.</a> Virulence. 2, 379-394 (2011).</li></ol>

Innavlede mus er ikke jevnt mottakelig for fôring til alle tider av døgnet, og deres vilje til å spise forurenset brød vil avhenge både av belastningen type og alder av musene 17. Vår erfaring er 6-9 uker gamle B6 mus er mottakelige for fôring når som helst på dagen, men BALB mus vil ikke konsekvent spise brød stykke med mindre det blir tilbudt i løpet av sin mørke syklus. Den lyssyklus av rommet før huset dyr kan bli endret slik det mørke fase faller sammen med den normale arbeidsdag for labora...

Listeria monocytogenes er fakultative intracellulære bakterier som forårsaker matbårne infeksjoner hos mennesker. Bakteriene er resistente mot mange av de prosessene som brukes til å beskytte vår matforsyning, som tørking, salting, eller kjøling 1,2 og infeksjoner er vanligvis knyttet til bearbeidet, &quot;ready-to-eat&quot; mat som ikke er oppvarmet før konsum . I flere tidligere utbrudd, kilden til L. monocytogenes-forurenset mat ble identifisert, og begrenset gruppe av eksponerte individer ble overvåkes nøye 3-6. I disse eksemplene, klinisk sykdom hos ellers friske individer varierte fra en mild, selvbegrensende gastroenteritt til mer alvorlige tarm og systemiske infeksjoner som krevde sykehusinnleggelse. L. monocytogenes infeksjoner i svekket immunforsvar individer, inkludert både nyfødte og eldre, har vært forbundet med høy dødelighet (25-30%), selv med antibiotikabehandling <sopp&gt; 7,8. Lite er kjent om den smittsomme dose for L. monocytogenes, eller verten faktorer som styrer mottakelighet for infeksjon etter muntlig overføring, hovedsakelig på grunn av mangel på et lite dyr modell som sammenfatter dette brede spekter av infeksjon utfall. Den mest brukte modell av listeriosis er intravenøs (iv) inokulering av mus. Den iv modellen er svært reproduserbare, og har vært svært nyttig for å studere både naive og hukommelse T celle responser under infeksjonen 9,10. Ulempen med iv modellen er at den helt omgår intestinal fase av infeksjonen. Etter matbårne overføring, gir tarmslimhinnene en barriere som formodentlig bremser og begrenser antallet bakterier som kan kontinuerlig formidler til perifert vev. I motsetning, kan hele podestoff bli funnet i milten og leveren innen minutter IV-administrering, og denne store bolus av organismer kan overvelde medfødt immun defenses i disse vev. Oral infeksjon av mus ved gavage er mindre vanlig brukt, fordi store doser (10 9 -10 11 CFU) er vanligvis nødvendig for å oppnå kolonisering intestinal 10.. Også gjør magesekken (ig) inokulering med en fôring nålen ikke generere en reproduserbar periode med gastrointestinal infeksjon før systemisk spredning. Noen laboratorier har rapportert at L. monocytogenes nå milt og lever innen 4-12 timer etter infeksjon (HPI), mens andre viste ingen systemisk spredning inntil 48 HPI 11-15. Denne lab-til-lab variasjon kan være en konsekvens av invasiv art ig inokulasjon, noe som kan føre til mindre traume til slimhinnen i spiserøret, og fremme direkte blodet invasjon av bakterier. Vi har nylig utviklet en ny musemodell av oral L. monocytogenes infeksjon som etterligner alle faser av menneskelig sykdom 16. Infeksjon oppstår når musene får i stykker av contaminerte mat, er en prosess som er ikke-traumatisk, og krever ikke spesielle ferdigheter ved laboratorie undersøkere. For en diskret tid (36-48 timer), L. monocytogenes reproduserbart kolonisere kun mage-tarmkanalen, noe som tillater undersøkelse av de mekanismene som brukes ved patogene Listeria å translocate over tarmslimhinnene og spre til perifere vev. Viktigere, kan modellen brukes til å studere forskjeller i verten medfødt motstand mot infeksjon. I en tidligere studie viste vi at BALB / c / Av / J mus var svært utsatt for matbårne listeriose, med eksponentiell replikering av L. monocytogenes som forekommer i tarmen, milt, lever, galleblære og 16.. I kontrast var C57BL / 6 mus resistente overfor matbårne infeksjon, med bare forbigående kolonisering av L. monocytogenes som forekommer i hvert av disse vev. En ekstra funksjon i matbårne modell som etterligner menneskelig sykdom er at naturlig formidlingtil hjernen skjedde under de senere stadier av infeksjonen (5-7 dpi).

<table border="1">
	<tbody>
 <tr>
 <td>Name of Reagent/Material</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalog Number</td>
 <td>Comments</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Brain Heart Infusion Agar</td>
 <td>Difco</td>
 <td>BD-241830</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Lithium chloride</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>L9650</td>
 <td ></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Glycine</td>
 <td>Omnipur</td>
 <td>4840</td>
 <td ></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>EDTA</td>
 <td>Gibco</td>
 <td>15575-038</td>
 <td ></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>DTT</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>D5545</td>
 <td ></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Collagenase, type IV</td>
 <td>Worthington</td>
 <td>LS004089</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>DNAse I</td>
 <td>Worthington</td>
 <td>LS002007</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Diff-Quik</td>
 <td>Dade-Behring</td>
 <td>B4132-1A</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>PowerGen 1000 homogenizer</td>
 <td>Fisher</td>
 <td>14-261-06</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>stainless steel type 304 mesh #80</td>
 <td>Small Parts, Inc.</td>
 <td>CX-0080-C</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Cytospin</td>
 <td>Statspin</td>
 <td>M801-22</td>
 <td></td>
 </tr>
	 </tbody>
 </table>

oral transmission of listeria monocytogenes in mice via ingestion of contaminated food

L. monocytogenes er fakultative intracellulære bakterier som forårsaker matbårne infeksjoner hos mennesker. Svært lite er kjent om gastrointestinal fase av listeriose på grunn av mangel på et lite dyr modell som etterligner sykdom hos mennesker. Dette notatet beskriver en roman musemodell for muntlig overføring av L. monocytogenes. Ved hjelp av denne modellen, mus matet L. monocytogenes-forurenset brød har en diskret fase av gastrointestinal infeksjon, etterfulgt av varierende grad av systemisk spredning hos følsomme (BALB / c / Av / J) eller resistente (C57BL / 6) musestammer. I løpet av de senere stadier av infeksjonen, er formidling til galleblæren og hjerne observert. Den matbårne modell av listeriosis og reproduserbar, krever ikke spesielle ferdigheter, og kan brukes sammen med et bredt spekter av bakterielle isolater og laboratorie musestammer. Som sådan, er det den ideelle modellen til å studere både virulens strategier som brukes av L. monocytogenes </em&gt; å fremme intestinal kolonisering, samt vertsrespons til invasiv mat bæres bakteriell infeksjon.

L. monocytogenes kolonier vil være synlig på BHI / L + G plater etter 36-48 timers inkubasjon ved 37 ° C. Koloniene har en glatt, kuppelformet kremaktig hvitt utseende (figur 1A). Veksten vil være hemmet for flertallet av tarmfloraen, men det er vanlig å se noen kolonier som ikke L. monocytogenes, særlig ved plating tynntarmen eller kolon direkte uten vesentlig fortynning (figur 1B). Mistenker kolonier kan bekreftes ved platekledning på CHROMagar TM <...

Watch this Scientific Journal Video about Oral Transmission of Listeria monocytogenes in Mice via Ingestion of Contaminated Food at JoVE.com

Oral Transmission of Listeria monocytogenes in Mice via Ingestion of Contaminated Food

Dette dokumentet beskriver en ny fremgangsmåte for oral infeksjon av mus ved anvendelse av<em&gt; Listeria monocytogenes</em&gt;-Forurenset mat. Protokollen kan lett tilpasses for bruk med andre matbårne bakterielle patogener.

Oral Overføring av<em&gt; Listeria monocytogenes</em&gt; I Mus via Inntak av forurenset mat

L. monocytogenes are facultative intracellular bacterial pathogens that cause food borne infections in humans. Very little is known about the ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Oral Transmission of Listeria monocytogenes in Mice via Ingestion of Contaminated Food

Measuring Bacterial Load and Immune Responses in Mice Infected with Listeria monocytogenes

Measuring Bacterial Load and Immune Responses in Mice Infected with Listeria monocytogenes

Listeria monocytogenes (Listeria) is a Gram-positive facultative intracellular pathogen1. Mouse studies typically employ intravenous injection of ...

Imaging InlC Secretion to Investigate Cellular Infection by the Bacterial Pathogen Listeria monocytogenes

Imaging InlC Secretion to Investigate Cellular Infection by the Bacterial Pathogen Listeria monocytogenes

Imaging inlc Secretion å etterforske Cellular Infeksjon av Bakteriell Patogen<em&gt; Listeria monocytogenes</em

Bacterial intracellular  pathogens can be conceived as molecular tools to dissect cellular signaling  cascades due to their capacity to exquisitely ...

Assessing Bacterial Invasion of Cardiac Cells in Culture and Heart Colonization in Infected Mice Using Listeria monocytogenes

Assessing Bacterial Invasion of Cardiac Cells in Culture and Heart Colonization in Infected Mice Using Listeria monocytogenes

Vurdering av bakterieinvasjon av hjerteceller i kultur og hjertekolonisering hos infiserte mus ved hjelp av Listeria monocytogenes

Listeria monocytogenes is a Gram-positive facultative intracellular pathogen that is capable of causing serious invasive infections in immunocompromised ...

Transformation of Probiotic Yeast and Their Recovery from Gastrointestinal Immune Tissues Following Oral Gavage in Mice

Transformasjon av Probiotiske gjær og deres utvinning fra Gastrointestinale immun Vev Etter oralt inntak i Mus

Development of recombinant oral therapy would allow for more direct targeting of the mucosal immune system and improve the ability to combat ...

RNA Purification from Intracellularly Grown Listeria monocytogenes in Macrophage Cells

RNA Purification from Intracellularly Grown Listeria monocytogenes in Macrophage Cells

RNA Purification fra intracellulært Grown<em&gt; Listeria monocytogenes</em&gt; I makrofagceller

Analysis of the transcriptome of bacterial pathogens during mammalian infection is a valuable tool for studying genes and factors that mediate infection. ...

Experimental Infection with Listeria monocytogenes as a Model for Studying Host Interferon-&#947; Responses

Experimental Infection with Listeria monocytogenes as a Model for Studying Host Interferon-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â³ Responses

Eksperimentell infeksjon med<em&gt; Listeria monocytogenes</em&gt; Som en modell for å studere Host interferon-y Responses

L. monocytogenes is a gram-positive bacterium that is a cause of food borne disease in humans. Experimental infection of mice with this pathogen has been ...

An In Vitro Caseum Binding Assay that Predicts Drug Penetration in Tuberculosis Lesions

An In Vitro Caseum Binding Assay that Predicts Drug Penetration in Tuberculosis Lesions

en<em&gt; In Vitro</em&gt; Caseum bindingsassay som forutsier medikamentpenetrering i Tuberkulose Lesjoner

The eradication of tuberculosis disease requires drug regimens that can penetrate the multiple layers of complex pulmonary lesions. Drug distribution in ...

Listeria monocytogenes Infection of the Brain

Listeria monocytogenes Infection of the Brain

Listeria monocytogenes Infeksjon av hjernen

Listeria monocytogenes is an intracellular bacterial pathogen that is frequently associated with food-borne infection. The ability of&#160;L. ...

Purification of a High Molecular Mass Protein in Streptococcus mutans

Purification of a High Molecular Mass Protein in Streptococcus mutans

Rensing av en High Molecular Mass protein i Streptococcus mutans

Elucidation of a gene&#39;s function typically involves comparison of phenotypic traits of wild-type strains and strains in which the gene of interest has ...

Imaging of In Situ Interferon Gamma Production in the Mouse Spleen following Listeria monocytogenes Infection

Imaging of In Situ Interferon Gamma Production in the Mouse Spleen following Listeria monocytogenes Infection

Imaging av in situ interferon gamma Production i Mouse milt etter Listeria monocytogenes infeksjon

Cytokines are small proteins secreted by cells, mediating cell-cell communications that are crucial for effective immune responses. One characteristic of ...