Name: oral transmission of listeria monocytogenes in mice via ingestion of contaminated food
Uploaded: 2013-05-06T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Oral Transmission of Listeria monocytogenes in Mice via Ingestion of Contaminated Food at JoVE.com

Bu çalışma SEFD verilen Ulusal Sağlık Enstitüleri (AI079442 ve AI091918) hibe tarafından desteklenmiştir

1. Selective Agar Medya hazırlanması (BHI / L + G) Bağırsak Microbiota Engelleme için <ol><li> 26 g Brain Heart Infusion agar (Difco), 7.5 g LiCI ve 5,0 g glisin ve 1 litrelik bir şişe içinde yer tartılır. Iyonu giderilmiş suyun 500 ml ilave edilir. </li><li> Bir manyetik karıştırıcı üzerinde ısı agar kaynayıncaya kadar, sürekli bir şekilde karıştırarak. Isı şişesi alın, baloncuklar yerleşmek izin, ve sonra tekrar bir raddeye geri getirmek. </li><li> . Bir sıvı döngüsünde 16-19 psi a...

<ol>
	<li>Becker, L. A., Evans, S. N., Hutkins, R. W., Benson, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+sigmaB+in+adaptation+of+Listeria+monocytogenes+to+growth+at+low+temperature.">Role of sigmaB in adaptation of Listeria monocytogenes to growth at low temperature.</a> Journal of Bacteriology. 182, 7083-7087 (2000).</li><li>Neunlist, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+salting+and+cold-smoking+on+the+culturability,+viability,+and+virulence+of+Listeria+monocytogenes+strain+Scott+A.">Effect of salting and cold-smoking on the culturability, viability, and virulence of Listeria monocytogenes strain Scott A.</a> Journal of Food Protection. 68, 85-91 (2005).</li><li>Aureli, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+outbreak+of+febrile+gastroenteritis+associated+with+corn+contaminated+by+Listeria+monocytogenes.">An outbreak of febrile gastroenteritis associated with corn contaminated by Listeria monocytogenes.</a> N. Engl. J. Med. 342, 1236-1241 (2000).</li><li>Dalton, C. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+outbreak+of+gastroenteritis+and+fever+due+to+Listeria+monocytogenes+in+milk.">An outbreak of gastroenteritis and fever due to Listeria monocytogenes in milk.</a> N. Engl. J. Med. 336, 100-105 (1997).</li><li>Frye, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+outbreak+of+febrile+gastroenteritis+associated+with+delicatessen+meat+contaminated+with+Listeria+monocytogenes.">An outbreak of febrile gastroenteritis associated with delicatessen meat contaminated with Listeria monocytogenes.</a> Clin. Infect. Dis. 35, 943-949 (2002).</li><li>Salamina, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+foodborne+outbreak+of+gastroenteritis+involving+Listeria+monocytogenes.">A foodborne outbreak of gastroenteritis involving Listeria monocytogenes.</a> Epidemiol. Infect. 117, 429-436 (1996).</li><li>Mead, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Food-related+illness+and+death+in+the+United+States.">Food-related illness and death in the United States.</a> Emerging Infectious Diseases. 5, 607-625 (1999).</li><li>Wing, E. J., Gregory, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Listeria+monocytogenes:+Clinical+and+experimental+update.">Listeria monocytogenes: Clinical and experimental update.</a> The Journal of Infectious Disease. 185, S18-S24 (2002).</li><li>Condotta, S. A., Richer, M. J., Badovinac, V. P., Harty, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Probing+CD8+T+cell+responses+with+Listeria+monocytogenes+infection.">Probing CD8 T cell responses with Listeria monocytogenes infection.</a> Advances in Immunology. 113, 51-80 (2012).</li><li>Disson, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+human+listeriosis+in+natural+and+genetically+engineered+animals.">Modeling human listeriosis in natural and genetically engineered animals.</a> Nat Protoc. 4, 799-810 (2009).</li><li>Czuprynski, C. J., Faith, N. G., Steinberg, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A/J+mice+are+susceptible+and+C57BL/6+mice+are+resistant+to+Listeria+monocytogenes+infection+by+intragastric+inoculation.">A/J mice are susceptible and C57BL/6 mice are resistant to Listeria monocytogenes infection by intragastric inoculation.</a> Infect. Immun. 71, 682-689 (2003).</li><li>Gajendran, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+IFNgamma+expression+is+insufficient+for+efficacious+control+of+food-borne+bacterial+pathogens+at+the+gut+epithelial+barrier.">Regional IFNgamma expression is insufficient for efficacious control of food-borne bacterial pathogens at the gut epithelial barrier.</a> Int. Immunol. 19, 1075-1081 (2007).</li><li>Lecuit, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+transgenic+model+for+listeriosis:+role+of+internalin+in+crossing+the+intestinal+barrier.">A transgenic model for listeriosis: role of internalin in crossing the intestinal barrier.</a> Science. 292, 1722-1725 (2001).</li><li>Pron, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+study+of+the+intestinal+stage+of+listeriosis+in+a+rat+ligated+ileal+loop+system.">Comprehensive study of the intestinal stage of listeriosis in a rat ligated ileal loop system.</a> Infect. Immun. 66, 747-755 (1998).</li><li>Wollert, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extending+the+host+range+of+Listeria+monocytogenes+by+rational+protein+design.">Extending the host range of Listeria monocytogenes by rational protein design.</a> Cell. 129, 891-902 (2007).</li><li>Ghanem, B. o. u., N, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=InlA+promotes+dissemination+of+Listeria+monocytogenes+to+the+mesenteric+lymph+nodes+during+food+borne+infection+of+mice.">InlA promotes dissemination of Listeria monocytogenes to the mesenteric lymph nodes during food borne infection of mice.</a> PLoS Pathogens. , (2012).</li><li>Kowal, M., Buda-Lewandowska, D., Plytycz, B., Styrna, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Day/night+food+consumption+in+mice+is+strain+and+age-dependent.">Day/night food consumption in mice is strain and age-dependent.</a> Folia Biol. (Krakow). 50, 1-3 (2002).</li><li>Freitag, N. E., Port, G. C., Miner, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Listeria+monocytogenes+-+from+saprophyte+to+intracellular+pathogen.">Listeria monocytogenes - from saprophyte to intracellular pathogen.</a> Nature reviews. Microbiology. 7, 623-628 (2009).</li><li>Camejo, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+arsenal+of+virulence+factors+deployed+by+Listeria+monocytogenes+to+promote+its+cell+infection+cycle.">The arsenal of virulence factors deployed by Listeria monocytogenes to promote its cell infection cycle.</a> Virulence. 2, 379-394 (2011).</li></ol>

Doğuştan fareler günün her zaman beslenme için düzgün açık değildir ve kontamine ekmek yemek için istekli olduklarını hem gerginlik tipi ve farelerin 17 yaşına bağlıdır. Bizim tecrübelerimize göre, 6-9 haftalık B6 fareler günün herhangi bir zamanda besleme için açık olan, ama onların karanlık döngüsü sırasında sunulan sürece BALB fareler sürekli ekmek parçası yemek olmaz. Karanlık evre laboratuvar personeli için normal iş günü denk böylece hayvanların ev için kulla...

Listeria monocytogenes, insanlarda gıda kaynaklı enfeksiyonlara neden fakültatif hücre içi bakteriyel patojenler bulunmaktadır. Bakteri tuzlama, kurutma gibi olarak gıda tedarik, korumak için kullanılan süreçlerin çok dayanıklı, ya da soğutma 1,2 ve enfeksiyonlar genellikle tüketim önce ısıtılır değildir işlenmiş, &quot;hazır yemek&quot; gıdalar ile bağlantılıdır . L. birkaç önceki salgınları, kaynak monocytogenes-kontamine yiyecek tespit edilmiştir, ve maruz kalan bireylerin kısıtlı grup yakından 3-6 izlenmiştir. Bu örneklerde, aksi takdirde sağlıklı kişilerde klinik hastalık hafif, kendini sınırlayan gastroenterit daha ağır bağırsak ve sistemik enfeksiyonlar gerektiren hastanede. L. çeşitli yenidoğan ve yaşlılar dahil olmak üzere bağışıklık sistemi zayıflamış kişiler, içinde monocytogenes enfeksiyonları bile antibiyotik tedavisi ile, bir yüksek ölüm oranı (% 25-30) ile ilişkilendirilmiştir <s7,8&gt; kadar. Küçük L. için bulaşıcı dozu hakkında bilinen monocytogenes, ya da küçük bir hayvan modeli eksikliği nedeniyle öncelikle sözlü iletim sonra enfeksiyona duyarlılık yöneten ana faktörler, bu enfeksiyon sonuçları özetlediği bu geniş. Listeryoz En yaygın olarak kullanılan model farenin intravenöz (iv) bir aşı. Iv modeli son derece tekrarlanabilir, ve enfeksiyon 9,10 sırasında naif ve bellek hem de T hücre yanıtları eğitim için son derece yararlı olmuştur. Iv modelinin dezavantajı tamamen enfeksiyon bağırsak faz atlar olmasıdır. Gıda kaynaklı iletim sonra, bağırsak mukoza muhtemelen yavaşlatır ve sürekli çevre dokulara yaymak olabilir bakteri sayısını sınırlayan bir engel oluşturur. Buna karşılık, tüm inokulum iv uygulamadan sonra birkaç dakika içinde dalak, karaciğer ve bulunabilir ve organizmaların bu büyük bolus olarak doğuştan gelen bağışıklık d bastıran olabilirbu dokularda efenses. Yüksek dozlarda (10 9 -10 11 CFU) genellikle bağırsak kolonizasyonu 10 elde etmek için gerekli, çünkü sonda ile farelerin ağız enfeksiyonu daha az yaygın olarak kullanılır. Ayrıca, bir besleme iğnesi ile birlikte intragastrik (Ig) aşılama sistemik yayılmasını önce sindirim sistemi enfeksiyonu tekrarlanabilir bir süre üretmez. Bazı laboratuvarlar bu L. bildirdin diğerleri 48 hpi 11-15 kadar sistemik yayılma gösterdi monocytogenes, 4-12 saat sonrası enfeksiyon (hpi) içinde dalak ve karaciğer ulaşır. Bu laboratuvar-to-laboratuar varyasyon yemek borusu astar minör travmaya neden olabilir hangi, ig inokülasyon invaziv bir sonucu olması ve bakteri doğrudan kan işgali teşvik edebilir. Biz son zamanlarda sözlü L. yeni bir fare modeli geliştirdi yakın insan hastalığı 16 her aşamasında taklit monocytogenes enfeksiyonu. Fareler devam parçaları yemek zaman enfeksiyon ortaya çıkarGıda, travmatik olmayan bir süreç, aminated ve laboratuvar araştırmacılar tarafından özel beceri gerektirmez. Zaman ayrı bir süre (36-48 saat) için, L. monositogenlerinin tekrarlanabilir böylece bağırsak mukozasındaki transloke ve çevre dokulara yayılması için Listeria patojen tarafından kullanılan mekanizmalarının incelenmesi sağlayan, sadece mide-bağırsak sisteminde koloni. Önemli olarak, model enfeksiyona ana doğal dirençte farklılıklarını incelemek için kullanılabilir. Bir önceki çalışmada, BALB / c / J fareler By / L. üstel çoğaltma ile, gıda kaynaklı listeriozis son derece duyarlı olduğunu gösterdi bağırsak, dalak, karaciğer ve safra kesesi 16 meydana monocytogenes. Bunun aksine, C57BL / 6 fareler L. yalnızca geçici kolonizasyonunu, gıda kaynaklı enfeksiyona karşı dirençli monocytogenes, bu dokuların her meydana gelen. Yakın insan hastalığı taklit gıda kaynaklı modelinin bir diğer özelliği doğal yayılması olduğunubeyin enfeksiyonu sonraki aşamalarında (5-7 dpi) sırasında meydana için.

<table border="1">
	<tbody>
 <tr>
 <td>Name of Reagent/Material</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalog Number</td>
 <td>Comments</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Brain Heart Infusion Agar</td>
 <td>Difco</td>
 <td>BD-241830</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Lithium chloride</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>L9650</td>
 <td ></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Glycine</td>
 <td>Omnipur</td>
 <td>4840</td>
 <td ></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>EDTA</td>
 <td>Gibco</td>
 <td>15575-038</td>
 <td ></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>DTT</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>D5545</td>
 <td ></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Collagenase, type IV</td>
 <td>Worthington</td>
 <td>LS004089</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>DNAse I</td>
 <td>Worthington</td>
 <td>LS002007</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Diff-Quik</td>
 <td>Dade-Behring</td>
 <td>B4132-1A</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>PowerGen 1000 homogenizer</td>
 <td>Fisher</td>
 <td>14-261-06</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>stainless steel type 304 mesh #80</td>
 <td>Small Parts, Inc.</td>
 <td>CX-0080-C</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Cytospin</td>
 <td>Statspin</td>
 <td>M801-22</td>
 <td></td>
 </tr>
	 </tbody>
 </table>

oral transmission of listeria monocytogenes in mice via ingestion of contaminated food

L. monocytogenes insanlarda gıda kaynaklı enfeksiyonlara neden fakültatif hücre içi bakteriyel patojenler bulunmaktadır. Çok az yakın insan hastalığı taklit eden küçük bir hayvan modelinin eksikliği nedeniyle listeriosis gastrointestinal faz hakkında bilinmektedir. Bu çalışma, L. sözlü iletim için yeni bir fare modeli açıklar monocytogenes. Fareler beslenen L., bu modeli kullanarak monositogenlerinin kirlenmiş ekmek duyarlı (BALB / c / j /) veya dirençli (C57BL / 6) fare suşlarının sistemik yayılmasını değişen derecelerde takip gastrointestinal enfeksiyon gibi ayrı bir faz vardır. Enfeksiyon daha sonraki aşamalarında, safra kesesi ve beyne yayılması görülmektedir. Listeriosis gıda kaynaklı modeli, son derece tekrarlanabilir özel beceri gerektirmez, ve bakteriyel izolatlar ve laboratuvar fare suşlarının geniş bir yelpazede kullanılabilir. Bu nedenle, L. tarafından kullanılan iki virülans stratejileri incelemek için ideal bir model monocytogenes </em&gt; bağırsak kolonizasyonu, hem de invaziv gıda kaynaklı bakteriyel enfeksiyon için ana tepki teşvik etmek.

L. monocytogenes kolonileri 37 ° C&#39;de 36-48 saat inkübasyondan sonra BHI / L + G plakaları görünür olacak Koloniler düzgün, kubbe şeklinde kremsi beyaz bir görünüm (Şekil 1A) var. Büyüme intestinal mikrobiyota çoğunluğu için inhibe ama L. olmayan bazı koloniler görmek için ortak olan edilecektir monocytogenes, direkt olarak seyreltme (Şekil 1B) olmadan ince bağırsak ya da kolon kaplama özellikle. Şüpheli koloniler CHROMagar <sup...

Watch this Scientific Journal Video about Oral Transmission of Listeria monocytogenes in Mice via Ingestion of Contaminated Food at JoVE.com

Oral Transmission of Listeria monocytogenes in Mice via Ingestion of Contaminated Food

Bu kağıt kullanılarak farenin oral enfeksiyonu için yeni bir yöntemi anlatmaktadır<em&gt; Listeria monocytogenes</emGıda&gt;-kontamine. Protokol kolayca diğer gıda kaynaklı bakteriyel patojenler ile kullanım için adapte edilebilir.

Sözlü İletim<em&gt; Listeria monocytogenes</em&gt; Kirlenmiş Gıda Yutma ile Farelerde

L. monocytogenes are facultative intracellular bacterial pathogens that cause food borne infections in humans. Very little is known about the ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Oral Transmission of Listeria monocytogenes in Mice via Ingestion of Contaminated Food

Measuring Bacterial Load and Immune Responses in Mice Infected with Listeria monocytogenes

Measuring Bacterial Load and Immune Responses in Mice Infected with Listeria monocytogenes

Ile Enfekte Fare Bakteriyel Yük ve Bağışıklık Yanıtları Ölçüm Listeria monocytogenes</em

Listeria monocytogenes (Listeria) is a Gram-positive facultative intracellular pathogen1. Mouse studies typically employ intravenous injection of ...

Imaging InlC Secretion to Investigate Cellular Infection by the Bacterial Pathogen Listeria monocytogenes

Imaging InlC Secretion to Investigate Cellular Infection by the Bacterial Pathogen Listeria monocytogenes

Bakteriyel Patojen Hücresel Enfeksiyon Soruşturma inlc salgılanmasına Görüntüleme<em&gt; Listeria monocytogenes</em

Bacterial intracellular  pathogens can be conceived as molecular tools to dissect cellular signaling  cascades due to their capacity to exquisitely ...

Assessing Bacterial Invasion of Cardiac Cells in Culture and Heart Colonization in Infected Mice Using Listeria monocytogenes

Assessing Bacterial Invasion of Cardiac Cells in Culture and Heart Colonization in Infected Mice Using Listeria monocytogenes

Listeria monocytogenes Kullanarak Enfekte Farelerde Kültür ve Kalp Kolonizasyonunda Kardiyak Hücrelerin Bakteriyel İstilasının Değerlendirilmesi

Listeria monocytogenes is a Gram-positive facultative intracellular pathogen that is capable of causing serious invasive infections in immunocompromised ...

Transformation of Probiotic Yeast and Their Recovery from Gastrointestinal Immune Tissues Following Oral Gavage in Mice

Farelerde oral sonda ardından Probiyotik Maya Dönüşümü ve Gastrointestinal Bağışıklık Dokular Onların Kurtarma

Development of recombinant oral therapy would allow for more direct targeting of the mucosal immune system and improve the ability to combat ...

RNA Purification from Intracellularly Grown Listeria monocytogenes in Macrophage Cells

RNA Purification from Intracellularly Grown Listeria monocytogenes in Macrophage Cells

RNA Arıtma Hücre içindeki dan Yetiştirilen<em&gt; Listeria monocytogenes</em&gt; Makrofaj

Analysis of the transcriptome of bacterial pathogens during mammalian infection is a valuable tool for studying genes and factors that mediate infection. ...

Experimental Infection with Listeria monocytogenes as a Model for Studying Host Interferon-&#947; Responses

Experimental Infection with Listeria monocytogenes as a Model for Studying Host Interferon-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â³ Responses

Deneysel Enfeksiyon<em&gt; Listeria monocytogenes</em&gt; Ana İnterferon-γ Yanıtları incelenmesi için Bir Model Olarak

L. monocytogenes is a gram-positive bacterium that is a cause of food borne disease in humans. Experimental infection of mice with this pathogen has been ...

An In Vitro Caseum Binding Assay that Predicts Drug Penetration in Tuberculosis Lesions

An In Vitro Caseum Binding Assay that Predicts Drug Penetration in Tuberculosis Lesions

bir<em&gt; In vitro</emTüberküloz Lezyonlarında İlaç Penetrasyonunu Öngören Caseum Bağlanma Testi

The eradication of tuberculosis disease requires drug regimens that can penetrate the multiple layers of complex pulmonary lesions. Drug distribution in ...

Listeria monocytogenes Infection of the Brain

Listeria monocytogenes Infection of the Brain

Listeria Monositogenez Enfeksiyon beyin

Listeria monocytogenes is an intracellular bacterial pathogen that is frequently associated with food-borne infection. The ability of&#160;L. ...

Purification of a High Molecular Mass Protein in Streptococcus mutans

Purification of a High Molecular Mass Protein in Streptococcus mutans

Streptococcus mutans'larda Yüksek Moleküler Kütle Proteininin Saflaştırılması

Elucidation of a gene&#39;s function typically involves comparison of phenotypic traits of wild-type strains and strains in which the gene of interest has ...

Imaging of In Situ Interferon Gamma Production in the Mouse Spleen following Listeria monocytogenes Infection

Imaging of In Situ Interferon Gamma Production in the Mouse Spleen following Listeria monocytogenes Infection

Listeria monocytogenes enfeksiyonu sonrasında Mouse dalağında In situ Interferon gama üretiminin görüntülenmesi

Cytokines are small proteins secreted by cells, mediating cell-cell communications that are crucial for effective immune responses. One characteristic of ...