Name: accelerated type 1 diabetes induction in mice by adoptive transfer of diabetogenic cd4+ t cells
Uploaded: 2013-05-06T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Accelerated Type 1 Diabetes Induction in Mice by Adoptive Transfer of Diabetogenic CD4+ T Cells at JoVE.com

हम डीआरएस धन्यवाद. सहायक टिप्पणियों के लिए रॉबर्ट BONNEAU और नील क्रिस्टेंसेन. इस काम के चिकित्सा धन के पेनसिल्वेनिया स्टेट यूनिवर्सिटी कॉलेज द्वारा समर्थित किया गया था.

1. प्लीहा और BDC2.5 चूहे के लिम्फ नोड्स से टी कोशिकाओं के अलगाव <ol><li> मधुमेहजनक सीडी 4 + टी कोशिकाओं के दाताओं के रूप में 6 सप्ताह पुरानी पूर्व मधुमेह महिला BDC2.5 चूहों का प्रयोग करें. मूत्र ग्लूकोज माप (देखें नीचे) ?...

<ol>
	<li>Makino, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Breeding+of+a+non-obese,+diabetic+strain+of+mice.">Breeding of a non-obese, diabetic strain of mice.</a> Jikken Dobutsu. 29, 1-13 (1980).</li><li>van Belle, T. L., Coppieters, K. T., von Herrath, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Type+1+diabetes:+etiology,+immunology,+and+therapeutic+strategies.">Type 1 diabetes: etiology, immunology, and therapeutic strategies.</a> Physiol. Rev. 91, 79-118 (2011).</li><li>Delovitch, T. L., Singh, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+nonobese+diabetic+mouse+as+a+model+of+autoimmune+diabetes:+immune+dysregulation+gets+the+NOD.">The nonobese diabetic mouse as a model of autoimmune diabetes: immune dysregulation gets the NOD.</a> Immunity. 7, 727-738 (1997).</li><li>Wicker, L. S., Miller, B. J., Mullen, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transfer+of+autoimmune+diabetes+mellitus+with+splenocytes+from+nonobese+diabetic+(NOD)+mice.">Transfer of autoimmune diabetes mellitus with splenocytes from nonobese diabetic (NOD) mice.</a> Diabetes. 35, 855-860 (1986).</li><li>Bendelac, A., Carnaud, C., Boitard, C., Bach, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Syngeneic+transfer+of+autoimmune+diabetes+from+diabetic+NOD+mice+to+healthy+neonates.+Requirement+for+both+L3T4++and+Lyt-2++T+cells.">Syngeneic transfer of autoimmune diabetes from diabetic NOD mice to healthy neonates. Requirement for both L3T4+ and Lyt-2+ T cells.</a> J. Exp. Med. 166, 823-833 (1987).</li><li>Haskins, K., McDuffie, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acceleration+of+diabetes+in+young+NOD+mice+with+a+CD4++islet-specific+T+cell+clone.">Acceleration of diabetes in young NOD mice with a CD4+ islet-specific T cell clone.</a> Science. 249, 1433-1436 (1990).</li><li>Christianson, S. W., Shultz, L. D., Leiter, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adoptive+transfer+of+diabetes+into+immunodeficient+NOD-scid/scid+mice.+Relative+contributions+of+CD4++and+CD8++T-cells+from+diabetic+versus+prediabetic+NOD.NON-Thy-1a+donors.">Adoptive transfer of diabetes into immunodeficient NOD-scid/scid mice. Relative contributions of CD4+ and CD8+ T-cells from diabetic versus prediabetic NOD.NON-Thy-1a donors.</a> Diabetes. 42, 44-55 (1993).</li><li>Wicker, L. S., Todd, J. A., Peterson, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+control+of+autoimmune+diabetes+in+the+NOD+mouse.">Genetic control of autoimmune diabetes in the NOD mouse.</a> Annual Reviews in Immunology. 13, 179-200 (1995).</li><li>Serreze, D. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MHC+class+I-mediated+antigen+presentation+and+induction+of+CD8++cytotoxic+T-cell+responses+in+autoimmune+diabetes-prone+NOD+mice.">MHC class I-mediated antigen presentation and induction of CD8+ cytotoxic T-cell responses in autoimmune diabetes-prone NOD mice.</a> Diabetes. 45, 902-908 (1996).</li><li>Milton, M. J., Poulin, M., Mathews, C., Piganelli, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation,+maintenance,+and+adoptive+transfer+of+diabetogenic+T-cell+lines/clones+from+the+nonobese+diabetic+mouse.">Generation, maintenance, and adoptive transfer of diabetogenic T-cell lines/clones from the nonobese diabetic mouse.</a> Methods Mol. Med. 102, 213-225 (2004).</li><li>Kurrer, M. O., Pakala, S. V., Hanson, H. L., Katz, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beta+cell+apoptosis+in+T+cell-mediated+autoimmune+diabetes.">Beta cell apoptosis in T cell-mediated autoimmune diabetes.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 94, 213-218 (1997).</li><li>Amrani, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perforin-independent+beta-cell+destruction+by+diabetogenic+CD8(+)+T+lymphocytes+in+transgenic+nonobese+diabetic+mice.">Perforin-independent beta-cell destruction by diabetogenic CD8(+) T lymphocytes in transgenic nonobese diabetic mice.</a> J. Clin. Invest. 103, 1201-1209 (1999).</li><li>Dobbs, C., Haskins, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+a+T+cell+clone+and+of+T+cells+from+a+TCR+transgenic+mouse:+TCR+transgenic+T+cells+specific+for+self-antigen+are+atypical.">Comparison of a T cell clone and of T cells from a TCR transgenic mouse: TCR transgenic T cells specific for self-antigen are atypical.</a> J. Immunol. 166, 2495-2504 (2001).</li><li>Haskins, K., Portas, M., Bradley, B., Wegmann, D., Lafferty, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T-lymphocyte+clone+specific+for+pancreatic+islet+antigen.">T-lymphocyte clone specific for pancreatic islet antigen.</a> Diabetes. 37, 1444-1448 (1988).</li><li>Katz, J. D., Wang, B., Haskins, K., Benoist, C., Mathis, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Following+a+diabetogenic+T+cell+from+genesis+through+pathogenesis.">Following a diabetogenic T cell from genesis through pathogenesis.</a> Cell. 74, 1089-1100 (1993).</li><li>Stadinski, B. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chromogranin+A+is+an+autoantigen+in+type+1+diabetes.">Chromogranin A is an autoantigen in type 1 diabetes.</a> Nat. Immunol. 11, 225-231 (2010).</li><li>Luhder, F., Chambers, C., Allison, J. P., Benoist, C., Mathis, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pinpointing+when+T+cell+costimulatory+receptor+CTLA-4+must+be+engaged+to+dampen+diabetogenic+T+cells.">Pinpointing when T cell costimulatory receptor CTLA-4 must be engaged to dampen diabetogenic T cells.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 97, 12204-12209 (2000).</li><li>Tang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro-expanded+antigen-specific+regulatory+T+cells+suppress+autoimmune+diabetes.">In vitro-expanded antigen-specific regulatory T cells suppress autoimmune diabetes.</a> J. Exp. Med. 199, 1455-1465 (2004).</li><li>Calderon, B., Suri, A., Pan, X. O., Mills, J. C., Unanue, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IFN-gamma-dependent+regulatory+circuits+in+immune+inflammation+highlighted+in+diabetes.">IFN-gamma-dependent regulatory circuits in immune inflammation highlighted in diabetes.</a> J. Immunol. 181, 6964-6974 (2008).</li><li>Shultz, L. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+defects+in+innate+and+adaptive+immunologic+function+in+NOD/LtSz-scid+mice.">Multiple defects in innate and adaptive immunologic function in NOD/LtSz-scid mice.</a> J. Immunol. 154, 180-191 (1995).</li><li>Waldner, H., Sobel, R. A., Price, N., Kuchroo, V. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+autoimmune+diabetes+locus+Idd9+regulates+development+of+type+1+diabetes+by+affecting+the+homing+of+islet-specific+T+cells.">The autoimmune diabetes locus Idd9 regulates development of type 1 diabetes by affecting the homing of islet-specific T cells.</a> J. Immunol. 176, 5455-5462 (2006).</li><li>Verdaguer, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+autoimmune+diabetes+in+monoclonal+T+cell+nonobese+diabetic+mice.">Spontaneous autoimmune diabetes in monoclonal T cell nonobese diabetic mice.</a> J. Exp. Med. 186, 1663-1676 (1997).</li><li>Thomas, D. C., Mellanby, R. J., Phillips, J. M., Cooke, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+early+age-related+increase+in+the+frequency+of+CD4++Foxp3++cells+in+BDC2.5NOD+mice.">An early age-related increase in the frequency of CD4+ Foxp3+ cells in BDC2.5NOD mice.</a> Immunology. 121, 565-576 (2007).</li><li>Prochazka, M., Gaskins, H. R., Shultz, L. D., Leiter, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+nonobese+diabetic+scid+mouse:+model+for+spontaneous+thymomagenesis+associated+with+immunodeficiency.">The nonobese diabetic scid mouse: model for spontaneous thymomagenesis associated with immunodeficiency.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 89, 3290-3294 (1992).</li></ol>

T1D मधुमेह इशारा चूहों या मधुमेहजनक टी सेल क्लोन से व्युत्पन्न TCRs के लिए ट्रांसजेनिक चूहों से पूरे तिल्ली कोशिकाओं या टी सेल सबसेट के दत्तक हस्तांतरण द्वारा क्षमता अलग प्राप्तकर्ता चूहों में प्रेरित क?...

इशारा माउस अनायास autoimmune मधुमेह विकसित करता है और व्यापक रूप से मानव T1D 1,2 के लिए एक पशु मॉडल के रूप में इस्तेमाल किया गया है. इशारा चूहों में T1D के रोगजनन टी और बी कोशिकाओं द्वारा पीछा वृक्ष के समान कोशिकाओं और मैक्रोफेज द्वारा Langerhans की अग्नाशय islets, की, उम्र के 3-4 सप्ताह में शुरू, घुसपैठ की विशेषता है. गैर विनाशकारी पेरी insulitis के इस चरण में 3 साल की उम्र के 4-6 महीनों से प्रकट मधुमेह, जिसके परिणामस्वरूप में इंसुलिन के उत्पादन अग्नाशय β कोशिकाओं की एक धीमी, प्रगतिशील विनाश की ओर जाता है. 4,5 splenocytes, सीडी 4 + मधुमेह इशारा चूहों से 6,7 या सीडी 8 + 8,9 टी कोशिकाओं का स्थानांतरण आइलेट प्रतिक्रियाशील टी कोशिकाओं T1D रोगजनन में एक केंद्रीय भूमिका निभाते हैं, यह दर्शाता है immunocompromised इशारा चूहों में मधुमेह मध्यस्थता करने के लिए दिखाया गया है. प्रयोगात्मक शर्तों पर निर्भर करता है, मधुमेह इन अध्ययनों में कई हफ्तों से अधिक, धीरे प्राप्तकर्ता चूहों में विकसित किया है. इसी प्रकार, विभिन्न टी सेल क्लोन, समय लेने वाली और महंगा द्वारा निकाली गईमधुमेहजनक टी कोशिकाओं के संवर्धन, कई हफ्तों प्राप्तकर्ता चूहों 7,10 में स्थानांतरण के बाद मधुमेह मध्यस्थता करने के लिए सूचित किया गया है. सीडी 4 या सीडी 8 प्रतिबंधित मधुमेहजनक टी सेल क्लोन, कई प्रयोगशालाओं से व्युत्पन्न TCRs व्यक्त ट्रांसजेनिक चूहों की उपलब्धता के साथ बाद में इस तरह के चूहों से प्लीहा टी कोशिकाओं 11-13 प्राप्तकर्ताओं को मधुमेह स्थानांतरण करने में सक्षम थे कि पता चला है. विशेष रूप से, BDC2.5 इशारा चूहों Chromogranin ए, अग्नाशय बीटा कोशिकाओं 14-16 में एक प्रोटीन के लिए विशिष्ट है जो BDC2.5 TCR, के लिए ट्रांसजेनिक हैं. इन विट्रो सक्रिय या क्षमता 11,17-19 अलग नवजात या immunodeficient इशारा चूहों को मधुमेह का तबादला खुलकर मधुमेह या prediabetic BDC2.5 चूहों से संयुक्त राष्ट्र के सक्रिय पूरे या fractionated तिल्ली कोशिकाओं का स्थानांतरण. हम शुद्ध ट्रांसजेनिक सीडी 4 का उपयोग एक साधारण विधि + उच्च दक्षता और consiste पर प्राप्तकर्ता चूहों में T1D प्रेरित करने के लिए पूर्व मधुमेह BDC2.5 चूहों से टी कोशिकाओं का वर्णनncy. भोली, आइलेट प्रतिजन विशेष सीडी 4 + टी कोशिकाओं की संख्या में सीडी 4 के लिए प्रतिदीप्ति सक्रिय सेल छँटाई (FACS) ट्रांसजेनिक TCR Vβ4 श्रृंखला व्यक्त + CD62L + टी कोशिकाओं द्वारा इन चूहों से अलग कर रहे हैं. शुद्ध ट्रांसजेनिक टी कोशिकाओं को फिर कार्यात्मक टी और बी कोशिकाओं की कमी है और insulitis और मधुमेह से मुक्त 20 हैं जो NOD.SCID चूहों में सक्रियण के बिना स्थानांतरित कर रहे हैं. प्राप्तकर्ता चूहों टी सेल स्थानांतरण के बाद दो सप्ताह के भीतर तेजी से विकसित होता है, जो T1D, यह दर्शाता है मूत्र ग्लूकोज का ऊंचा सांद्रता के लिए निगरानी कर रहे हैं. Heterogenous specificities के मधुमेहजनक टी कोशिकाओं स्थानांतरण, हमारे प्रोटोकॉल FACS हल सीडी 4 + लगभग विशेष मधुमेहजनक BDC2.5 TCR व्यक्त कि टी कोशिकाओं का उपयोग करता है कि अन्य विधियों के विपरीत. उनकी एकरूपता के कारण, हस्तांतरित टी कोशिकाओं (~ 1x10 6 कोशिकाओं / माउस) की ही छोटी संख्या 100% घटना में 2 सप्ताह के भीतर तेजी से T1D विकास के लिए आवश्यक हैं. हमारे प्रोटोकॉल का एक अन्य लाभ यह है कि irradiatio हैप्राप्तकर्ता चूहों के n यह कुछ अन्य तरीकों के लिए है के रूप में आवश्यक नहीं है. इस पद्धति का एक संभावित सीमा है कि यह दोनों CD4 और CD8 टी सेल सबसेट या विशेष रूप से मधुमेह में CD8 टी कोशिकाओं के योगदान की जांच की अनुमति नहीं देता है. वर्णित प्रोटोकॉल लक्ष्य अंग को आइलेट प्रतिजन विशेष गु कोशिकाओं के घर वापस आना में हस्तक्षेप करने के लिए भोले, monospecific सीडी 4 + टी कोशिकाओं, साथ ही चिकित्सीय रणनीतियों द्वारा मध्यस्थता तेजी T1D विकास, अध्ययन के लिए उपयोगी हो जाएगा.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Name of Reagent/Material</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BDC 2.5 TCR transgenic NOD mice (NOD.Cg-Tg(Tcr&alpha;BDC 2.5, Tcr&beta;BDC 2.5)</td>
			<td>JAX</td>
			<td>004460</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NOD.SCID mice (NOD.CB17-Prkdcscid/J)</td>
			<td>JAX</td>
			<td>001303</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM)</td>
			<td>Themo Scientific</td>
			<td>SH30022.01</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bayer Diastix</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>AM2803</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 ml conical tubes</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352095</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 ml conical tubes</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352070</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile surgical tweezers</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile small pair scissors</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile large pair scissors</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70 &mu;m cell strainers</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22363548</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>35 &mu;m cell strainer cap tubes</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>352235</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonium-Chloride-Potassium (ACK) buffer</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>0.15 M NH4Cl, 1 mM KHCO3, 0.1 mM Na2EDTA, pH 7.2 in dH2O</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACSFlowTM sheath fluid</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>342003</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACS staining buffer</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>PBS, 0.2 mM EDTA, 0.5% BSA/FCS, filter sterilized</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phase contrast microscope</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan blue</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemocytometer</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-CD4 (APC) mAb</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>1005616</td>
			<td>clone RM4-5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-TCR V&beta;4 (FITC) mAb</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>553365</td>
			<td>clone KT4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-CD62L (PE) mAb</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>553151</td>
			<td>clone MEL-14</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell sorter</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>e.g. BD FACSAria III</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat lamp</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse restrainer</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 ml syringes</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>309602</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18-1&frac12; gauge needles (sterile)</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>305196</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27&frac12; gauge needles (sterile)</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>305109</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

accelerated type 1 diabetes induction in mice by adoptive transfer of diabetogenic cd4+ t cells

nonobese मधुमेह (इशारा) माउस अनायास उम्र के 12 सप्ताह के बाद autoimmune मधुमेह विकसित और मानव टाइप 1 मधुमेह (T1D) के सबसे बड़े पैमाने पर अध्ययन पशु मॉडल है. विकिरणित प्राप्तकर्ता चूहों में सेल हस्तांतरण पढ़ाई टी कोशिकाओं के इस मॉडल में T1D रोगजनन में निर्णायक हैं कि स्थापना की है. हम तेजी से शुद्ध के दत्तक हस्तांतरण द्वारा T1D प्रेरित करने के साथ साथ एक सरल विधि का वर्णन है, प्राथमिक सीडी 4 + NOD.SCID प्राप्तकर्ता चूहों में आइलेट विशेष टी सेल रिसेप्टर (TCR) BDC2.5 के लिए ट्रांसजेनिक पूर्व मधुमेह इशारा चूहों से टी कोशिकाओं. इस तकनीक का प्रमुख लाभ एक ही दिन के भीतर, प्राप्तकर्ताओं की विकिरण की आवश्यकता नहीं है, और T1D के एक उच्च घटना के टी सेल स्थानांतरण के बाद 2 सप्ताह के भीतर हासिल है मधुमेहजनक टी कोशिकाओं के अलगाव और दत्तक हस्तांतरण पूरा किया जा सकता है कि कर रहे हैं. इस प्रकार, T1D में रोगजनन और उपचारात्मक उपायों की पढ़ाई heterogenous टी सेल आबादी या क्लोन पर निर्भर है कि तरीकों के साथ तुलना में एक तेज दर से आगे बढ़ सकते हैंमधुमेह इशारा चूहों से ली गई.

हमारे परिणाम बताते हैं ऐसी अग्नाशय के लिम्फ नोड्स के रूप में माध्यमिक lymphoid अंगों को घर के लिए टी कोशिकाओं के लिए महत्वपूर्ण है जो CD62L, व्यक्त ट्रांसजेनिक BDC2.5 कोशिकाओं के अलगाव दिखा. हमारा निष्कर्ष आगे तेज?...

Watch this Scientific Journal Video about Accelerated Type 1 Diabetes Induction in Mice by Adoptive Transfer of Diabetogenic CD4+ T Cells at JoVE.com

Accelerated Type 1 Diabetes Induction in Mice by Adoptive Transfer of Diabetogenic CD4+ T Cells

हम आइलेट विशिष्ट प्रतिजन, प्राथमिक सीडी 4 + टी कोशिकाओं के दत्तक हस्तांतरण से दो सप्ताह के भीतर चूहों में टाइप 1 मधुमेह (T1D) उत्पन्न करने के लिए एक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य विधि प्रदान करते हैं.

मधुमेहजनक सीडी 4 की दत्तक स्थानांतरण से चूहे में त्वरित टाइप 1 मधुमेह प्रेरण + टी कोशिकाओं

The nonobese diabetic (NOD) mouse spontaneously develops autoimmune diabetes after 12 weeks of age and is the most extensively studied animal model of ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Experimental Metastasis and CTL Adoptive Transfer Immunotherapy Mouse Model

प्रायोगिक मेटास्टेसिस और सीटीएल दत्तक स्थानांतरण Immunotherapy माउस मॉडल

Experimental metastasis mouse model is a simple and yet physiologically relevant metastasis model. The tumor cells are injected intravenously (i.v) into ...

Preparation and Use of HIV-1 Infected Primary CD4+ T-Cells as Target Cells in Natural Killer Cell Cytotoxic Assays

तैयारी और प्रयोग करें एचआईवी 1 संक्रमित प्राथमिक + प्राकृतिक खूनी सेल साइटोटोक्सिक Assays में लक्ष्य कोशिकाओं के रूप में सीडी 4 टी कोशिकाओं

 Natural killer (NK) cells are a vital component of the innate immune response to virus-infected cells. It is important to understand the ability of NK ...

Assessing the Innate Sensing of HIV-1 Infected CD4+ T Cells by Plasmacytoid Dendritic Cells Using an Ex vivo Co-culture System.

Assessing the Innate Sensing of HIV-1 Infected CD4+ T Cells by Plasmacytoid Dendritic Cells Using an Ex vivo Co-culture System.

एचआईवी -1 संक्रमित सीडी 4 की सहज सेंसिंग का आकलन<sup&gt; +</sup&gt; एक का उपयोग Plasmacytoid वृक्ष के समान कोशिकाओं द्वारा टी कोशिकाओं<em&gt; पूर्व vivo</em&gt; प्रणाली सह संस्कृति।

HIV-1 innate sensing requires direct contact of infected CD4+ T cells with plasmacytoid dendritic cells (pDCs). In order to study this process, the ...

Transplantation of Tail Skin to Study Allogeneic CD4 T Cell Responses in Mice

चूहे में allogeneic सीडी 4 टी सेल प्रतिक्रिया का अध्ययन करने के लिए तेल त्वचा का प्रत्यारोपण

The study of T cell responses and their consequences during allo-antigen recognition requires a model that enables one to distinguish between donor and ...

Induction of Murine Intestinal Inflammation by Adoptive Transfer of Effector CD4+CD45RBhigh T Cells into Immunodeficient Mice

Induction of Murine Intestinal Inflammation by Adoptive Transfer of Effector CD4+CD45RBhigh T Cells into Immunodeficient Mice

Effector के सीडी 4 की दत्तक हस्तांतरण द्वारा Murine आंतों में सूजन की प्रेरण<sup&gt; +</sup&gt; CD45RB<sup&gt; उच्च</sup&gt; Immunodeficient चूहों में टी कोशिकाओं

There are many different animal models available for studying the pathogenesis of human inflammatory bowel diseases (IBD), each with its own advantages ...

Preparation of CD4+ T Cells for Analysis of GD3 and GD2 Ganglioside Membrane Expression by Microscopy

Preparation of CD4+ T Cells for Analysis of GD3 and GD2 Ganglioside Membrane Expression by Microscopy

सीडी 4 की तैयारी<sup&gt; +</sup&gt; माइक्रोस्कोपी द्वारा GD3 और GD2 ganglioside झिल्ली अभिव्यक्ति का विश्लेषण के लिए टी कोशिकाओं

The methods described herein for activation of na&#239;ve CD4+ T cells in suspension and their adherence in coverslips for confocal microscopy analysis ...

In Vitro Differentiation of Human CD4+FOXP3+ Induced Regulatory T Cells (iTregs) from Na&#239;ve CD4+ T Cells Using a TGF-&#946;-containing Protocol

In Vitro Differentiation of Human CD4+FOXP3+ Induced Regulatory T Cells iTregs from NaÃƒÆ’Ã†'Ãƒâ€šÃ‚Â¯ve CD4+ T Cells Using a TGF-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â²-containing Protocol

भोले सीडी 4 + टी कोशिकाओं से मानव सीडी 4 + Foxp3 + प्रेरित विनियामक टी कोशिकाओं (iTregs) एक TGF-β युक्त प्रोटोकॉल का उपयोग की इन विट्रो भेदभाव में

Regulatory T cells (Tregs) are an integral part of peripheral tolerance, suppressing immune reactions against self-structures and thus preventing ...

Induction of Paralysis and Visual System Injury in Mice by T Cells Specific for Neuromyelitis Optica Autoantigen Aquaporin-4

Neuromyelitis Optica के लिए विशिष्ट टी कोशिकाओं द्वारा चूहों में पक्षाघात और दृश्य प्रणाली चोट की प्रेरण Aquaporin-4

While it is recognized that aquaporin-4 (AQP4)-specific T cells and antibodies participate in the pathogenesis of neuromyelitis optica (NMO), a human ...

Stereotactic Adoptive Transfer of Cytotoxic Immune Cells in Murine Models of Orthotopic Human Glioblastoma Multiforme Xenografts

Orthotopic मानव ग्लियोब्लास्टोमा मल्टीफार्मी Xenografts के Murine मॉडलों में साइटोटोक्सिक प्रतिरक्षा कोशिकाओं का स्टीरियोटैक्टिक दत्तक अंतरण

Glioblastoma multiforme (GBM), the most frequent and aggressive primary brain cancer in adults, is generally associated with a poor prognosis, and scarce ...