Name: bioluminescent orthotopic model of pancreatic cancer progression
Uploaded: 2013-06-28T13:00:00
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Este trabajo fue apoyado por el Consejo Nacional de Salud y Consejo de Investigación Médica, Australia (1008865), el Consejo de Investigación Australiano (LE110100125), el Instituto Nacional del Cáncer (CA138687-01), Erica Sloan con el apoyo de una beca de Carrera Temprana del Cáncer National Breast Fundación, Australia. Corina Kim-Fuchs es apoyado por una beca de la Liga Suiza contra el Cáncer y una beca de HDR de Monash Instituto de Ciencias Farmacéuticas. Eliane Angst es apoyado por una beca de la Sociedad del Cáncer de Berna.

El protocolo que se está demostrado que se realiza bajo la supervisión y aprobación de cuidado de los animales de la institución del autor y el empleo. Todos los experimentos se realizan en cumplimiento de todas las directrices, reglamentos y las agencias reguladoras. 1. Transducción de páncreas líneas celulares de cáncer <ol><li> Transducir las células de cáncer de páncreas para expresar luciferasa como se ha descrito anteriormente. Capan-1 de páncreas líneas celulares de cá...

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	<li>American Cancer Society. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Facts and Figures. , (2013).</li><li>Hariharan, D., Saied, A., Kocher, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+mortality+rates+for+pancreatic+cancer+across+the+world.">Analysis of mortality rates for pancreatic cancer across the world.</a> HPB (Oxford). 10, 58-62 (2008).</li><li>Li, D., Xie, K., Wolff, R., Abbruzzese, J. 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G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+orthotopic+nude+mouse+model+for+evaluating+pathophysiology+and+therapy+of+pancreatic+cancer.">An orthotopic nude mouse model for evaluating pathophysiology and therapy of pancreatic cancer.</a> Pancreas. 26, 89-98 (2003).</li><li>Partecke, L. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+syngeneic+orthotopic+murine+model+of+pancreatic+adenocarcinoma+in+the+C57/BL6+mouse+using+the+Panc02+and+6606PDA+cell+lines.">A syngeneic orthotopic murine model of pancreatic adenocarcinoma in the C57/BL6 mouse using the Panc02 and 6606PDA cell lines.</a> Eur. Surg. Res. 47, 98-107 (2011).</li><li>Hingorani, S. 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U.S.A. 89, 5645-5649 (1992).</li><li>Reyes, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+xenografts+of+human+pancreatic+carcinomas+acquire+genetic+aberrations+during+dissemination+in+nude+mice.">Orthotopic xenografts of human pancreatic carcinomas acquire genetic aberrations during dissemination in nude mice.</a> Cancer Res. 56, 5713-5719 (1996).</li><li>Kim, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+orthotopic+and+heterotopic+human+pancreatic+cancer+xenografts+in+immunodeficient+mice.">Generation of orthotopic and heterotopic human pancreatic cancer xenografts in immunodeficient mice.</a> Nat Protoc. 4, 1670-1680 (2009).</li><li>Furukawa, T., Kubota, T., Watanabe, M., Kitajima, M., Hoffman, R. 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H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mutant+K-ras+oncogene+causes+pancreatic+periductal+lymphocytic+infiltration+and+gastric+mucous+neck+cell+hyperplasia+in+transgenic+mice.">The mutant K-ras oncogene causes pancreatic periductal lymphocytic infiltration and gastric mucous neck cell hyperplasia in transgenic mice.</a> Cancer Res. 63, 2005-2009 (2003).</li></ol>

Aquí se describe un modelo ortotópico para la evaluación longitudinal de desarrollo y la progresión del tumor de páncreas. La cinética de crecimiento del tumor primario son reproducibles (Figura 3) y pueden ser de forma no invasiva supervisado usando imágenes de bioluminiscencia de la luciferasa de las células marcadas con, por ejemplo, para el análisis de la respuesta del tumor a nuevas terapias contra el cáncer de páncreas. En consonancia con la enfermedad humana, el modelo muestra...

El cáncer de páncreas es la cuarta causa principal de muerte relacionada con el cáncer, con una tasa de supervivencia a 5 años del 4-6% 1,2. Sólo el 15% de los pacientes son diagnosticados a tiempo de la enfermedad para ser elegibles para la cirugía, y los tumores se repiten en&gt; 80% de los pacientes 3,4. gemcitabina se utiliza para el tratamiento de adenocarcinomas de páncreas, sin embargo, quimio-resistencia es común y muchas veces la droga tiene poco impacto en la supervivencia global. 5 Nuevas estrategias farmacológicas para tratar el cáncer de páncreas son críticamente necesarios. Su desarrollo depende de mejorar significativamente la comprensión de los pasos clave de la progresión de la enfermedad que pueden ser sensibles a la intervención terapéutica. Modelos ortotópico de cáncer de páncreas emulan aspectos clave de la enfermedad humana, haciéndolos herramientas ideales para el estudio de la biología del cáncer de páncreas. 6-9 En contraste con los ensayos in vitro basados ​​en células de comportamiento de las células de un cáncer de páncreasd subcutánea en modelos in vivo de cáncer de páncreas, modelos ortotópico permitir la investigación de las interacciones de células tumorales con el microambiente de páncreas. La cinética de la progresión de la enfermedad son altamente reproducibles en los modelos ortotópico y se producen en un corto período de tiempo (semanas), lo que los hace muy adecuados para las pruebas de pre-clínico de nuevos tratamientos. Esto está en contraste con los modelos transgénicos donde inicio de la enfermedad se produce sobre un marco más largo y más variable de tiempo (meses a 1 año). 10 Cuando se utiliza con líneas de células más agresivas, modelos ortotópico de cáncer de páncreas tienen patrones de metástasis espontánea similares a las observadas en los pacientes. 8 Expresión de genes reporteros bioluminiscentes tales como la luciferasa de luciérnaga facilita el seguimiento longitudinal de crecimiento tumoral, diseminación metastásica, la recidiva y la respuesta a la terapéutica. 6,11 A continuación se describe un modelo ortotópico de cáncer de páncreas que utiliza MatrIgel para la entrega localizada de células e in vivo imágenes de bioluminiscencia para la monitorización no invasiva de la progresión del tumor. Este modelo ortotópico de cáncer de páncreas permite análisis no invasivos de progresión de la enfermedad y la respuesta a las intervenciones terapéuticas en modelos singénicos o xenoinjerto.

<table border="1">
 <tbody>
 <tr>
 <td>Equipment</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalog Number</td>
 <td>Comments</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Clean Bench coat</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Heating pad</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Set to 37 &deg;C </td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Ivis Lumina ll Bioluminescent imager</td>
 <td>Caliper </td>
 <td></td>
 <td>Alternative bioluminescent imaging systems include In vivo F PRO (Carestream) and Photon Imager (Biospace Lab)</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Dissecting scissors</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Iris forceps (serrated)</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Needle holder</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>27 G 0.3 ml insulin syringe</td>
 <td>Terumo</td>
 <td>T35525M2913</td>
 <td></td>
 </tr>
 </tbody>
</table>

bioluminescent orthotopic model of pancreatic cancer progression

<p class="jove_content"&gt; El cáncer de páncreas tiene una tasa de supervivencia a cinco años extremadamente pobre del 4-6%. Nuevas opciones terapéuticas son críticamente necesarios y dependen de una mejor comprensión de la biología del cáncer de páncreas. Para entender mejor la interacción de las células cancerosas con el microambiente de páncreas, se demuestra un modelo ortotópico de cáncer de páncreas que permite la monitorización no invasiva de la progresión del cáncer. Células del cáncer pancreático luciferasa-etiquetados se resuspenden en Matrigel y se entregan en la cola del páncreas durante la laparotomía. Matrigel se solidifica a la temperatura corporal para evitar la fuga de las células cancerosas durante la inyección. El crecimiento del tumor primario y la metástasis a órganos distantes se controlan después de la inyección de la luciferina sustrato de luciferasa, utilizando<em&gt; In vivo</em&gt; Formación de imágenes de emisión de bioluminiscencia de las células cancerosas.<em&gt; En vivo</em&gt; De imágenes también puede ser usado para rastrear la recurrencia del tumor primario después de la resección. Este modelo ortotópico es adecuado para ambos modelos singénicos y xenoinjerto y se puede utilizar en ensayos pre-clínicos para investigar el impacto de nuevas terapias contra el cáncer en el crecimiento del tumor pancreático primario y la metástasis.</p&gt;

Este método describe un modelo ortotópico de cáncer de páncreas usando procedimientos quirúrgicos, incluyendo la inducción de la anestesia, la laparotomía, la inyección de las células cancerosas en el cierre de Matrigel y abdominal (Figura 1A). Las células inyectadas forman una burbuja en la superficie del páncreas (Figura 1B). La progresión del cáncer de páncreas puede ser monitorizado de forma no invasiva en el uso de imágenes de bioluminiscencia in vivo</e...

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Bioluminescent Orthotopic Model of Pancreatic Cancer Progression

Una mejor comprensión de la biología del cáncer de páncreas es una necesidad vital para permitir el desarrollo de mejores opciones terapéuticas para el tratamiento de cáncer de páncreas. Para hacer frente a esta necesidad, se demuestra un modelo ortotópico de cáncer de páncreas que permite la monitorización no invasiva de la progresión del cáncer utilizando<em&gt; In vivo</em&gt; Imágenes de bioluminiscencia.

Modelo ortotópico bioluminiscente de la progresión del cáncer de páncreas

Pancreatic cancer has an extremely poor five-year survival rate of 4-6%.  New therapeutic options are critically needed and depend on improved ...

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