Name: 5/6th nephrectomy in combination with high salt diet and nitric oxide synthase inhibition to induce chronic kidney disease in the lewis rat
Uploaded: 2013-07-03T14:00:00
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우리는 그녀의 우수한 기술 지원을 크리스타 서재 Ouden 감사합니다. 이 기술은 재정적 네덜란드의 신장 재단 보조금 C06.2174에 의해 지원되었다. MCV는 과학 연구에 대한 네덜란드기구 (NWO) 비디 - 부여 016.096.359에 의해 지원됩니다.

모든 실험은 위트레흐트 실험 동물위원회의 동물 실험 윤리 가이드 라인에 따라 실행됩니다. 프로토콜은 저자의 기관의 동물 관리 및 사용위원회의지도 및 승인하에 수행됩니다. CKD ~ 8 주 세의 나이에 남성 근친 루이스 쥐 (찰스 리버, Sulzfeld, 독일)에서 유도된다. 쥐 빛, 온도 및 습도 제어 환경의 표준 조건 하에서 보관되어 있습니다. 1. 수술 준비 <ol><...

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	<li>AS, G. o., Chertow, G. M., Fan, D., McCulloch, C. E., Hsu, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+kidney+disease+and+the+risks+of+death,+cardiovascular+events,+and+hospitalization.">Chronic kidney disease and the risks of death, cardiovascular events, and hospitalization.</a> N. Engl. J. Med. 351 (13), 1296-1305 (2004).</li><li>Fleck, C., Appenroth, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suitability+of+5/6+nephrectomy+(5/6NX)+for+the+induction+of+interstitial+renal+fibrosis+in+rats--influence+of+sex,+strain,+and+surgical+procedure.">Suitability of 5/6 nephrectomy (5/6NX) for the induction of interstitial renal fibrosis in rats--influence of sex, strain, and surgical procedure.</a> Exp. Toxicol. Pathol. 57 (3), 195-205 (2006).</li><li>Griffin, K. A., Picken, M. M., Churchill, M., Churchill, P., Bidani, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+and+structural+correlates+of+glomerulosclerosis+after+renal+mass+reduction+in+the+rat.">Functional and structural correlates of glomerulosclerosis after renal mass reduction in the rat.</a> J. Am. Soc. Nephrol. 11 (3), 497-506 (2000).</li><li>Kang, D. H., Kanellis, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+the+microvascular+endothelium+in+progressive+renal+disease.">Role of the microvascular endothelium in progressive renal disease.</a> J. Am. Soc. Nephrol. 13 (3), 806-816 (2002).</li><li>Baylis, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitric+oxide+synthase+derangements+and+hypertension+in+kidney+disease.">Nitric oxide synthase derangements and hypertension in kidney disease.</a> Curr. Opin. Nephrol. Hypertens. 21 (1), 1-6 (2012).</li><li>Bongartz, L. G., Braam, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transient+nitric+oxide+reduction+induces+permanent+cardiac+systolic+dysfunction+and+worsens+kidney+damage+in+rats+with+chronic+kidney+disease.">Transient nitric oxide reduction induces permanent cardiac systolic dysfunction and worsens kidney damage in rats with chronic kidney disease.</a> Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 298 (3), 815-823 (2010).</li><li>Fujihara, C. K., De N, G., Zatz, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+nitric+oxide+synthase+inhibition+aggravates+glomerular+injury+in+rats+with+subtotal+nephrectomy.">Chronic nitric oxide synthase inhibition aggravates glomerular injury in rats with subtotal nephrectomy.</a> J. Am. Soc. Nephrol. 5 (7), 1498-1507 (1995).</li><li>Fujihara, C. K., Sena, C. R., Malheiros, D. M., Mattar, A. L., Zatz, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Short-term+nitric+oxide+inhibition+induces+progressive+nephropathy+after+regression+of+initial+renal+injury.">Short-term nitric oxide inhibition induces progressive nephropathy after regression of initial renal injury.</a> Am. J. Physiol. Renal Physiol. 290 (3), F632-F640 (2006).</li><li>Dikow, R., Kihm, L. 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A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Healthy+bone+marrow+cells+reduce+progression+of+kidney+failure+better+than+CKD+bone+marrow+cells+in+rats+with+established+chronic+kidney+disease.">Healthy bone marrow cells reduce progression of kidney failure better than CKD bone marrow cells in rats with established chronic kidney disease.</a> Cell Transplant. , (2012).</li><li>Baylis, C., Corman, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+aging+kidney:+insights+from+experimental+studies.">The aging kidney: insights from experimental studies.</a> J. Am. Soc. Nephrol. 9 (4), 699-709 (1998).</li><li>Szabo, A. J., Muller, V., Chen, G. F., Samsell, L. J., Erdely, A., Baylis, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nephron+number+determines+susceptibility+to+renal+mass+reduction-induced+CKD+in+Lewis+and+Fisher+344+rats:+implications+for+development+of+experimentally+induced+chronic+allograft+nephropathy.">Nephron number determines susceptibility to renal mass reduction-induced CKD in Lewis and Fisher 344 rats: implications for development of experimentally induced chronic allograft nephropathy.</a> Nephrol. Dial Transplant. 23 (8), 2492-2495 (2008).</li><li>Darling, I. M., Morris, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+"true"+creatinine+clearance+in+rats+reveals+extensive+renal+secretion.">Evaluation of "true" creatinine clearance in rats reveals extensive renal secretion.</a> Pharm. 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M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lentivirally+generated+eGFP-transgenic+rats+allow+efficient+cell+tracking+in+vivo.">Lentivirally generated eGFP-transgenic rats allow efficient cell tracking in vivo.</a> Genesis. 39 (2), 94-99 (2004).</li><li>Kreutz, R., Kovacevic, L., Schulz, A., Rothermund, L., Ketteler, M., Paul, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+high+NaCl+diet+on+spontaneous+hypertension+in+a+genetic+rat+model+with+reduced+nephron+number.">Effect of high NaCl diet on spontaneous hypertension in a genetic rat model with reduced nephron number.</a> J. Hypertens. 18 (6), 777-782 (2000).</li><li>Liu, Z. C., Chow, K. M., Chang, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+two+protocols+of+uremic+rat+model:+partial+nephrectomy+and.">Evaluation of two protocols of uremic rat model: partial nephrectomy and.</a> 25 (6), 935-943 (2003).</li><li>Griffin, K. A., Picken, M., Bidani, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Method+of+renal+mass+reduction+is+a+critical+modulator+of+subsequent+hypertension+and+glomerular+injury.">Method of renal mass reduction is a critical modulator of subsequent hypertension and glomerular injury.</a> J. Am. Soc. Nephrol. 4 (12), 2023-2031 (1994).</li><li>Meyer, F., Ioshii, S. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laparoscopic+partial+nephrectomy+in+rats.">Laparoscopic partial nephrectomy in rats.</a> Acta. Cir. Bras. 22 (2), 152-156 (2007).</li></ol>

높은 소금 다이어트 및 임시 NOS 억제와 결합 루이스 쥐에서 신장 질량의 5/6th의 외과 제거는 인간의 CKD 유사한 CKD의 모델에 이르게 및 CKD의 치료 개입의 인과 관계 메커니즘과 효능을 연구 할 수 있습니다. 5/6th의 절제 모델은 CKD에 대한 잘 알려진 광범위하게 설명하는 모델입니다. 그러나 단순히 신장 질량의 5/6th을 제거하면 모든 쥐의 변종 즉시 신부전으로 이어질하지 않습?...

그 진보적 성격, 계속되는 말기 신장 질환과 관련된 심혈 관계 이환율과 사망률로 인해 CKD는 성장 공중 보건 문제 1. CKD의 진행을 둔화 따라서 중요한 건강 우선 순위입니다. CKD는 항상성의 복잡한 derangements 특징 때문에, 통합 동물 모델은 CKD의 개발 및 진행을 연구 할 필요가있다. 신장은 서로 상호 작용하는 다른 세포 유형의 다양한으로 구성되어 있습니다. 이러한 복잡성은 체외에서 모방 할 수 없습니다. CKD에 새로운 치료 개입을 연구하기 위해, 우리는 인간의 CKD 2,3의 여러 측면을 닮은 5/6th 절제 절제 모델, 진보적 인 신장 질환의 잘 알려진 실험 모델을 사용합니다. 신장 질량 총 감소는 진보적 인 사구체와 tubulo-간질 부상, 남은 네프론의 손실과 조직 및 사구체 고혈압의 개발을 발생합니다. 이 progr을과 연관되어essive intrarenal 모세관 손실 4, 염증과 사구체. 위험 요인은 결국 내피 세포 기능 5에 미치는 영향을 CKD. 우리는 CKD의 개발에 상대적으로 저항하는 쥐의 변형 (루이스)를 사용하기 때문에 우리는 산화 질소 (NO) 고갈 6, 7, 8, 높은 소금 다이어트 9에서 신장 질량의 5/6th의 제거를 결합했다. 도착 적응 한 후, 동물 이틀 후 L-NNA의 지속과 오른쪽면 uninephrectomy (UNX) 다음에 사주의 기간 동안 물 (20 ㎎ / L)을 첨가 NO 합성 효소 억제제 (L-NNA), 수신하지 . 일주일 후, 신장 질량의 2/3rds의 소계 절제 (SNX) 즉, 제거는 왼쪽에 수행됩니다. SNX 후, 동물을 4 주 동안 마시는 물에 20 ㎎ / L LNNA에 이어 다시 이틀 복구 할 수 있습니다. 지상 차우 (시간 선 그림 1 참조) 보충 높은 소금 다이어트 (6 %)을, 실험을하는 동안 계속됩니다. 티그는 오른쪽에 UNX을 수행 할 수있는 이성과 왼쪽에 SNX은 신장 혈관이 쉽게 신장이 신체 외부에 노출되었을 때 너무 많은 혈관을 스트레칭하지 않고 신장에 액세스 할 수 있습니다 왼쪽에 더 이상 것입니다 . 문학, 모델은 일주일 후 10,11,12 오른쪽 신장 UNX 다음, 왼쪽 신장의 극을 먼저 제거되는 설명되어 있습니다. 우리의 손이 모델은 신장 장애의 더 빠른 발전을 보였다, 또한 신장 기능의 손실에 훨씬 더 큰 변화. 신부전의 진행은 혈중 요소, 수축기 혈압과 단백뇨를 측정하여 시간이 지남에 따라한다. SNX 후 6 주까지, 신부전, 개발 사구체 여과 속도의 현저한 감소 (69 %)하고 효과적인 신장 플라즈마 흐름 (62 %) 13 고혈압 (수축기 혈압&gt; 150 mmHg로), 단백뇨 (특징&gt; 50 mg/24 HR) 및 가벼운 요독증 (&gt; 10 MM). 조직 학적 특징은 tubul 포함오 - 간질 손상, 염증, 관 위축 및 섬유화와 나머지 인구 (&lt;10 %)에서 건강 사구체의 대규모 감소로 이어지는 초점 사구체 경화증으로 반영됩니다. 후속 최대 12 주 후까지 SNX는 치료 개입의 평가를위한 기회의 창을 제공 CKD의 추가 진행을 보여줍니다.

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-NNA</td>
			<td>Sigma-aldrich</td>
			<td>N5501</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spongostan dental: gel foam pads 1x1x1 cm</td>
			<td>Johnson&amp;Johnson</td>
			<td>Ms0005</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethicon Vicryl FS-2S naald 4/0 V392H p/36</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>V303H</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethicon Vicryl RB-1+ naald 5/0 V303H p/36</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>V392H</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine (0.3 mg/ml)</td>
			<td>Via local pharmacist ordered by Reckitt Benckiser pharmaceuticals</td>
			<td>unknown</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Student Tissue Forceps - 1x2 Teeth 12 cm</td>
			<td>Fine Science Tools (FST)</td>
			<td>91121-12</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Student Standard Pattern Forceps</td>
			<td>FST</td>
			<td>91100-12</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mayo Scissors</td>
			<td>FST</td>
			<td>14010-15</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2X Semken Forceps</td>
			<td>FST</td>
			<td>11008-13</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Student Iris Scissors</td>
			<td>FST</td>
			<td>91460-11</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olsen-Hegar Needle Holder</td>
			<td>FST</td>
			<td>12002-14</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

5/6th nephrectomy in combination with high salt diet and nitric oxide synthase inhibition to induce chronic kidney disease in the lewis rat

만성 신장 질환 (CKD)는 세계적인 문제입니다. CKD의 진행을 느리게하는 주요 건강 우선 순위입니다. CKD는 항상성의 복잡한 derangements 특징 때문에, 통합 동물 모델은 CKD의 개발 및 진행을 연구 할 필요가있다. CKD의 CKD 및 새로운 치료 개입의 개발을 연구하기 위해, 우리는 인간의 CKD의 여러 측면을 닮은 5/6th 절제 절제 모델, 진보적 인 신장 질환의 잘 알려진 실험 모델을 사용합니다. 신장 질량 총 감소는 진보적 인 사구체와 tubulo-간질 부상, 남은 네프론의 손실과 조직 및 사구체 고혈압의 개발을 발생합니다. 또한 진보적 인 intrarenal 모세 혈관 감소, 염증과 사구체 경화증과 연관되어 있습니다. 위험 요인은 결국 내피 세포 기능에 미치는 영향을 CKD. 이 모방하기 위해, 우리는 산화 질소 (NO) 고갈과 높은 소금 다이어트와 신장 질량의 5/6th의 제거를 결합합니다. 도착 적응 한 동물은 다시오른쪽면 uninephrectomy 다음에 사주의 기간 동안 물 (20 ㎎ / L)을 첨가 NO 합성 효소 억제제 (NG-니트로-L-아르기닌) (L-NNA)를 가압하지 않습니다. 일주일 후, 소계 절제 (SNX)이 왼쪽에서 수행됩니다. SNX 후, 동물을 4 주 더 동안 물 (20 ㎎ / L)에 LNNA 다음 이틀 동안 복구 할 수 있습니다. 지상 차우 (시간 선 그림 1 참조) 보충 높은 소금 다이어트 (6 %)을, 실험을하는 동안 계속됩니다. 신부전의 진행은 혈중 요소, 수축기 혈압과 단백뇨를 측정하여 시간이 지남에 따라한다. SNX 후 6 주까지, 신부전을 개발하고있다. 신장 기능이 &#39;황금 표준&#39;이눌린 및 파라 - 아미노 히 푸르 산 (PAH) 정리 기술을 사용하여 측정됩니다. CKD의이 모델은 사구체 여과율 (GFR)의 감소와 효과적인 신장 플라즈마 흐름 (ERPF), 고혈압 (수축기 혈압&gt; 150 mmHg로), 단백뇨 (&gt; 50 mg/24 시간이 특징입니다)와 가벼운 요독증 (&gt; 10 MM). 조직 학적 특징은 염증, 관 위축 및 섬유화와 나머지 인구 (&lt;10 %)에서 건강 사구체의 대규모 감소로 이어지는 초점 사구체에 반영 tubulo-간질 손상이 있습니다. 후속 SNX는 CKD의 추가 진행을 보여줍니다 12주 후까지.

부분합을 절제 한 후, 총 신장 질량의 약 1/6th이 남아 있습니다. 그림 4는 이전의 두 실험에서 평균과 ​​표준 편차의 오른쪽 신장 제거 된 부품의 무게를 보여줍니다. 하나는 UNX 후 주에, 왼쪽 신장의 비대가 발생하는 것을 염두에 두어야한다 나타내는 것을 5/6th 제거 미만 오른쪽 신장 항상 결과의 무게에 근거하여 산출 제거해야합니다 무게. 이 수술 중 좌측 신장의 무게를 결정하는...

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5/6th Nephrectomy in Combination with High Salt Diet and Nitric Oxide Synthase Inhibition to Induce Chronic Kidney Disease in the Lewis Rat

수술 신장 질량의 5/6th를 제거하여 루이스 쥐에서 만성 신장 질환 (CKD)을 설정하는 두 단계 방법을 설명합니다. 수술의 조합, NOS-억제와 높은 소금 다이어트 인과 관계 메커니즘과 새로운 치료 개입의 개발 연구를 허용, 인간의 CKD를 닮은 모델에 연결됩니다.

높은 소금 다이어트와 루이스 쥐에서 만성 신장 질환을 유발하는 산화 질소 합성 효소 억제와 함께 5/6th의 절제

Chronic kidney disease (CKD) is a global problem. Slowing CKD progression is a major health priority. Since CKD is characterized by complex derangements ...

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