Name: implementing dynamic clamp with synaptic and artificial conductances in mouse retinal ganglion cells
Uploaded: 2013-05-16T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Implementing Dynamic Clamp with Synaptic and Artificial Conductances in Mouse Retinal Ganglion Cells at JoVE.com

Detta arbete stöds av Australian Research Council (ARC DP0988227) och Biomedicinsk vetenskap Research Initiative Grant från Discipline of Biomedical Science, University of Sydney. Utrustningen Patch Clamp Förstärkare EPC 8 finansierades av Startup fonden från Discipline of Biomedical Science, University of Sydney. Utrustningen InstruTECH LIH 8 +8 Data Acquisition System köptes med medel från Rebecca L. Cooper Foundation och Startup fonden från Discipline of Biomedical Science, University of Sydney. Vi vill tacka de anonyma granskarna för deras insiktsfulla förslag och kommentarer.

Ett. General Set Up och Vävnadsberedning <ol><li> Håll musen i mörker under 30 minuter (syftar till att minska sin stress nivå). Medan du väntar, bereda 1 liter extracellulära lösning. Först upplösa 1,9 g natriumbikarbonat i en halv liter av Milli-Q-vatten. Dess pH-värdet hålles vid 7,4 genom att bubbla med 95% O2 och 5% CO2. Fem minuter senare, Lös 8,8 g Ames Medium i 100 ml Milli-Q-vatten, lägg till natriumbikarbonatlösning, fyll till 1 L med Milli-Q-vatten och blanda väl. Förva...

<ol>
	<li>Robinson, H. P. C., Kawai, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Injection+of+digitally+synthesized+synaptic+conductance+transients+to+measure+the+integrative+properties+of+neurons.">Injection of digitally synthesized synaptic conductance transients to measure the integrative properties of neurons.</a> Journal of Neuroscience Methods. 49, 157-165 (1993).</li><li>Sharp, A. A., O'Neil, M. B., Abbott, L. F., Marder, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+dynamic+clamp:+artificial+conductances+in+biological+neurons.">The dynamic clamp: artificial conductances in biological neurons.</a> Trends in Neuroscience. 16, 389-394 (1993).</li><li>Sharp, A. A., O'Neil, M. B., Abbott, L. F., Marder, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+clamp:+computer-generated+conductances+in+real+neurons.">Dynamic clamp: computer-generated conductances in real neurons.</a> Journal of Neurophysiology. 69, 992-995 (1993).</li><li>Johnson, D., Wu, S. M. -. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Foundations of cellular neurophysiology. , (1995).</li><li>Taylor, W. R., Vaney, D. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diverse+synaptic+mechanisms+generate+direction+selectivity+in+the+rabbit+retina.">Diverse synaptic mechanisms generate direction selectivity in the rabbit retina.</a> Journal of Neuroscience. 22 (17), 7712-7720 (2002).</li><li>Jurkat-Rott, K., Lehmann-Horn, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+patch+clamp+technique+in+ion+channel+research.">The patch clamp technique in ion channel research.</a> Current Pharmaceutical Biotechnology. 4, 221-238 (2003).</li><li>Prinz, A. A., Abbott, L. F., Marder, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+dynamic+clamp+comes+of+age.">The dynamic clamp comes of age.</a> Trends in Neuroscience. 27, 218-224 (2004).</li><li>Williams, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+compartmentalization+and+functional+impact+of+conductance+in+pyramidal+neurons.">Spatial compartmentalization and functional impact of conductance in pyramidal neurons.</a> Nature Neuroscience. 7 (9), 961-967 (2004).</li><li>Perkins, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-attached+voltage-clamp+and+current-clamp+recording+and+stimulation+techniques+in+brain+slices.">Cell-attached voltage-clamp and current-clamp recording and stimulation techniques in brain slices.</a> Journal of Neuroscience Methods. 154 (1-2), 1-18 (2006).</li><li>Feng, S. S., Jaeger, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+SK+calcium-dependent+potassium+currents+in+regulating+the+activity+of+deep+cerebellar+nucleus+neurons:+a+dynamic+clamp+study.">The role of SK calcium-dependent potassium currents in regulating the activity of deep cerebellar nucleus neurons: a dynamic clamp study.</a> Cerebellum. 7 (4), 542-546 (2008).</li><li>Butera, R., Lin, R., Destexhe, A., Bal, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Key+factors+for+improving+dynamic+clamp+performance.+In:+Dynamic-Clamp+From+Principles+to+Applications+Series.">Key factors for improving dynamic clamp performance. In: Dynamic-Clamp From Principles to Applications Series.</a> Dynamic-Clamp From Principles to Applications Series: Springer Series in Computational Neuroscience. 1, (2009).</li><li>Marco, S. D. i., Nguyen, V. A., Bisti, S., Protti, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Permanent+functional+reorganization+of+retinal+circuits+induced+by+early+long-term+visual+deprivation.">Permanent functional reorganization of retinal circuits induced by early long-term visual deprivation.</a> The Journal of Neuroscience. 29 (43), 13691-13701 (2009).</li><li>Zhao, Y., Inayat, S., Dikin, D. A., Singer, J. H., Ruoff, R. S., Troy, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patch+clamp+technique:+review+of+the+current+state+of+the+art+and+potential+contributions+from+nanoengineering.">Patch clamp technique: review of the current state of the art and potential contributions from nanoengineering.</a> Proceedings of the Institution of Mechanical Engineers, Part N: Journal of Nanoengineering and Nanosystems. 222 (1), 1-11 (2009).</li><li>Lobb, C. J., Paladini, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+a+NMDA+receptor+conductance+in+rat+midbrain+dopaminergic+neurons+using+the+dynamic+clamp+technique.">Application of a NMDA receptor conductance in rat midbrain dopaminergic neurons using the dynamic clamp technique.</a> J. Vis. Exp. (46), e2275 (2010).</li><li>Briggman, K. L., Euler, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bulk+electroporation+and+population+calcium+imaging+in+the+adult+mammalian+retina.">Bulk electroporation and population calcium imaging in the adult mammalian retina.</a> Journal of Neurophysiology. 105 (5), 2601-2609 (2011).</li><li>Middleton, T. P., Protti, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cannabinoids+modulate+spontaneous+synaptic+activity+in+retinal+ganglion+cells.">Cannabinoids modulate spontaneous synaptic activity in retinal ganglion cells.</a> Visual Neuroscience. 28 (5), 393-402 (2011).</li><li>Pottek, M., Knop, G. C., Weiler, R., Dedek, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+characterization+of+GFP-expressing+cell+populations+in+the+intact+retina.">Electrophysiological characterization of GFP-expressing cell populations in the intact retina.</a> J. Vis. Exp. (57), e3457 (2011).</li></ol>

Här visar vi användningen av dynamiska klämma för att bedöma inverkan av förhållandet och relativa timingen för excitation och hämning på näthinnegangliecell utgång. Dynamisk klämma använder datorsimuleringar för att införa fysiologiskt inspelade eller konstgjorda synaptiska konduktanser i levande nervceller. Denna metod ger ett interaktivt verktyg med vilket konduktanser kan modifieras och injiceras i nervceller för att beräkna deras påverkan på neurala reaktioner. Conductance vågformer kan erhåll...

Näthinnan är en nästan transparent nervvävnad foder baksidan av ögat. Många studier använder näthinnan som modell för att undersöka de första stegen i visuell bearbetning och mekanismer synaptiska signaleringen. Eftersom den retinal nätverket i hela montera beredning förblir intakt efter dissektion, innebär det ett idealiskt system för att studera synaptiska interaktioner som dess fysiologiska reaktioner är mycket lik den in vivo-betingelser. Således, med hjälp av en isolerad näthinnan egenskaper dess nervceller kan studeras med hjälp av tekniker patch clamp (för omdömen på tekniken, se 6,9,13). Identifiering av det exakta bidraget av specifika kretsar och signalsubstanser gangliecell svar, dock brukar hindras som farmakologiska medel verkar på olika platser. Fysiologiska reaktioner av näthinnans nervceller för ljus, den naturliga stimulans, kan spelas in med glaspipetter fyllda med intracellulär vätska. Använda patch clamp tekniker, neuronala svar på ljus stimulering kan registreras som membran potentiella fluktuationer (strömtång) eller som strömmar (spänningsklämma). Genom att hålla membranet potentialen vid olika spänningar och genomföra en posteriori konduktans analys, är det möjligt att isolera hämmande och excitatoriska synaptiska ingångar 5,12. Denna typ av försök kan utföras i normalt badmedium och i närvaro av olika farmakologiska medel för att isolera bidraget från de olika neurotransmittorer och receptorer till neuronala responser. En uppsjö av studier från många laboratorier kännetecknas beroendet av tillsatta produktion och retande och hämmande ingångarna på stimulans egenskaper såsom storlek, kontrast, rumsliga och tidsmässiga frekvenser, riktning, orientering och andra variabler stimulanser. Även om dessa experimentella metoder ger information om förhållandet mellan spik produktion och synaptiska ingångar som en funktion av stimulans fastigheter,tolkning av bidraget av specifika celltyper och deras synaptiska ingångar till cellen retbarhet är inte okomplicerat. Detta beror på det faktum att vanligtvis både retande och hämmande insatsvaror varierar med stimulansåtgärder egenskaper och därmed är det inte möjligt att bedöma den exakta påverkan som förändringar i någon av dessa ingångar har på neuronal spiking. Ett alternativt tillvägagångssätt för att kringgå dessa begränsningar är att utföra dynamiska clamp inspelningar, som möjliggör en kritisk utvärdering av bidragen till enskilda synaptiska ingångar till spiking utgång. Den dynamiska clamp teknik möjliggör direkt injektion av strömmen i cellen och mängden ström som matas vid en given tidpunkt beror på den inspelade membran potential på den tiden 1,2,3 (för översikt se 7,14). Det är en modifierad strömtång set-up där en realtid, snabba återkopplingskanalen växelverkan mellan cellen under inspelning och den utrustning som omfattar specialiserad hårdvara, mjukvaraoch en dator uppnås. Mängden ström som matas in i cellen beräknas i enlighet därmed. Följaktligen är fördelen med denna metod att cellen kan stimuleras med olika kombinationer av konduktans vågformer, och dess svar kommer att efterlikna aktivering av receptorer som medierar synaptiska inmatningar. Till exempel ger jämförelse av svaret på injektion av retande och hämmande konduktanser för en liten fläck med svaret till injektion av excitatoriska konduktans för en liten fläck bara information om hur hämning av cellens respons. Likaså kan andra kombinationer av fysiologiskt inspelade konduktanser vara co-injiceras för att avslöja hur stimulus-beroende förändringar av excitatoriska och / eller hämmande konduktanser påverkar spik utgång. I vår studie, är den dynamiska klämman teknik som används för att visa på effekten av den relativa amplituden och timingen av synaptiska ingångar på skottlossningen egenskaper näthinneganglieceller. Olika konduktansererhållits från fysiologiska experiment i kontrollbetingelser eller i närvaro av farmakologiska medel användes som indata. Dessutom har artificiella konduktanser baserade på alfa-funktioner även användas för att undersöka hur synaptiska ingångar integreras av nervceller. Således är detta en mångsidig teknik som tillåter olika typer av konduktans antingen genereras fysiologiskt, farmakologiskt eller beräkningsmässigt att injiceras i samma ganglion cell, så kan jämförelse av svar på dessa insignaler göras.

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane Inhalation Anaesthetic</td>
			<td>Pharmachem</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ames Medium with L-Glutamate (Powder)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Gluconate, Anhydrous</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES Sodium salt</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium chloride solution (4.9 mol/l)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adenosine 5'-triphosphate (ATP) disodium salt hydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Guanosine 5'-triphosphate sodium salt hydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethylene glycol-bis(2-aminoethylether)-N,N,N',N'-tetraacetic acid</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde Powder, 95%</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Lucifer Yellow, Rabbit IgG Fraction (3 mg/ml)</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 594 Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) 2 mg/ml</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescent Preserving Media</td>
			<td>BioFX Laboratories Inc.</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Capillary Glass Tubing with flame polished ends (OD = 1.50 mm, ID = 0.86 mm, Length = 15 cm)</td>
			<td>Warner Instruments</td>
			<td>64-0794</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Single Stage Glass Microelectrode Puller</td>
			<td>Narishinge Japan</td>
			<td>Model PP-830</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Minipuls 2</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millex-GV 0.22 &mu;m Filter Unit</td>
			<td>Millipore Corporation</td>
			<td>SLGV004SL</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luer Lock Reusable Hypodermic Needle: 30 G</td>
			<td>Smith &amp; Nephew (Australia)</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Single Inline Solution Heater</td>
			<td>Warner Instruments</td>
			<td>Model SH-27B</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dual Automatic Temperature Controller</td>
			<td>Warner Instruments</td>
			<td>TC-344B</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olympus Stereomicroscope SZ61</td>
			<td>Olympus Corporation</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olympus Microscope BX50WI: with 40X objective</td>
			<td>Olympus Corporation</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0-30 V 2.5 A DC Power Supply</td>
			<td>Dick Smith Electronics</td>
			<td>Q1770</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Microscopic Camera ProgResMF cool</td>
			<td>Jenoptik</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulator MP-225</td>
			<td>Sutter Instrument Company</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Patch Clamp Amplifier EPC 8</td>
			<td>HEKA Elektronik</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>InstruTECH LIH 8+8 Data Acquisition System</td>
			<td>HEKA Elektronik</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Computer: DELL</td>
			<td>Dell Corporation</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

implementing dynamic clamp with synaptic and artificial conductances in mouse retinal ganglion cells

Ganglionceller är de utgående nervceller i näthinnan och deras aktivitet återspeglar integrering av flera synaptiska inmatningar som rör specifika neurala kretsar. Patch clamp teknik, i spänningsklämma och aktuella konfigurationer klämma, används ofta för att studera de fysiologiska egenskaperna hos nervceller och att karaktärisera sina synaptiska ingångar. Även om tillämpning av dessa tekniker är mycket informativ, utgör de olika begränsningar. Till exempel är det svårt att kvantifiera hur de exakta samspelet mellan retande och hämmande insatsvaror bestämmer svar utgång. För att lösa detta har vi använt en modifierad strömtång teknik, dynamisk klämma, även kallad konduktans klämma 1, 2, 3 och undersökt effekterna av excitatoriska och inhibitoriska synaptiska ingångar på neuronala retbarhet. Denna teknik kräver injektion av ström in i cellen och är beroende av den feedback i realtid av sin membranpotential vid den tidpunkten. Den injected ström beräknas från förutbestämda retande och hämmande synaptiska konduktanser, deras potentialer återföring och cellens momentana membran potential. Detaljer om de experimentella procedurer, patch fastspänning celler för att uppnå en hel-cell konfiguration och sysselsättning av den dynamiska klämman tekniken illustreras i denna video artikeln. Här visar vi svaren från mus näthinneganglieceller till olika konduktans vågformer erhållna från fysiologiska experiment kontrollbetingelser eller i närvaro av droger. Dessutom visar vi användning av artificiella retande och hämmande konduktanser genererats med alfa-funktioner för att undersöka svaren i cellerna.

Bidraget från olika källor för hämmande insignaler till svar gangliecell demonstreras genom tillämpning av olika konduktans vågformer. Dessa vågformer erhölls med stimuli av olika luminans under normala förhållanden och i närvaro av TTX, en spänning-gated Na +-blockerare som blockerar aktionspotential generation endast i en delmängd av hämmande retinal interneurons. Figur 2A visar ett representativt svar på injektion av retande och hämmande konduktans vågformer in som svar p?...

Watch this Scientific Journal Video about Implementing Dynamic Clamp with Synaptic and Artificial Conductances in Mouse Retinal Ganglion Cells at JoVE.com

Implementing Dynamic Clamp with Synaptic and Artificial Conductances in Mouse Retinal Ganglion Cells

Denna video artikeln illustrerar set-up, förfaranden för att lappa cell organ och hur att genomföra dynamiska clamp inspelningar från ganglion celler i hela montera mus retinae. Denna teknik gör det möjligt att utreda den exakta bidrag retande och hämmande synaptiska ingångar, och deras relativa storlek och timing till neuronal spiking.

Implementera Dynamic Clamp med Synaptic och artificiella konduktanser i Mus Retinal ganglion celler

Ganglion cells are the output neurons of the  retina and their activity reflects the integration of multiple synaptic inputs  arising from specific neural ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Patch Clamp Recordings from Mouse Retinal Neurons in a Dark-adapted Slice Preparation

Patch Clamp Inspelningar från mus näthinnan nervceller i en anpassad Dark-Slice Förberedelser

Our visual experience is initiated when the visual pigment in our retinal photoreceptors absorbs photons of light energy and initiates a cascade of ...

An Isolated Retinal Preparation to Record Light Response from Genetically Labeled Retinal Ganglion Cells

En isolerad näthinnan förberedelse till Record Ljus Svar från Genetiskt Märkta Retinal ganglion celler

The first steps in vertebrate vision take place when light stimulates the rod and cone photoreceptors of the retina 1.  This information is then ...

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Transfektion av Mouse retinal ganglion celler genom att In vivo Elektroporation

The targeting and refinement of RGC projections to the midbrain is a popular and powerful model system for studying how precise patterns of neural ...

Retrograde Labeling of Retinal Ganglion Cells in Adult Zebrafish with Fluorescent Dyes

Retrograd Märkning av retinal ganglion celler i vuxna zebrafisk med fluorescerande färger

As retrograde labeling retinal ganglion cells (RGCs) can isolate RGCs somata from dying sites, it has become the gold standard for counting RGCs in RGCs ...

Recording Light-evoked Postsynaptic Responses in Neurons in Dark-adapted, Mouse Retinal Slice Preparations Using Patch Clamp Techniques

Inspelning Ljus framkallade Postsynaptiska svar i nervceller i Dark-anpassade, mus näthinnan Slice Förberedelser Använda Patch Clamp Tekniker

The retina is the gateway to the visual system. To understand visual signal processing mechanisms, we investigate retinal neural network functions. ...

Single-cell RNA-Seq of Defined Subsets of Retinal Ganglion Cells

En-cell-RNA-Seq av definierade deluppsättningar av retinala Ganglion-celler

The discovery of cell type-specific markers can provide insight into cellular function and the origins of cellular heterogeneity. With a recent push for ...

Optical Coherence Tomography: Imaging Mouse Retinal Ganglion Cells In Vivo

Optical Coherence Tomography: Imaging Mouse Retinal Ganglion Cells In Vivo

Optisk koherenstomografi: Imaging mus Retinal Ganglion celler In Vivo

Structural changes in the retina are common manifestations of ophthalmic diseases. Optical coherence tomography (OCT) enables their identification in ...

Partial Optic Nerve Transection in Rats: A Model Established with a New Operative Approach to Assess Secondary Degeneration of Retinal Ganglion Cells

Partiell synnerven Transection råttor: en förebild som upprättats med en ny operativ metod att bedöma sekundära Degeneration av retinala ganglionceller

Previous studies have shown that the secondary degeneration of retinal ganglion cells (RGCs) occurs commonly in glaucoma. Partial optic nerve transection ...

Combining Optogenetics with Artificial microRNAs to Characterize the Effects of Gene Knockdown on Presynaptic Function within Intact Neuronal Circuits

Att kombinera optogenetik med konstgjorda mikroRNA att karakterisera de effekter av genen Knockdown på presynaptiska funktion inom intakt neuronala kretsar

The purpose of this protocol is to characterize the effect of gene knockdown on presynaptic function within intact neuronal circuits. We describe a ...

Evaluation of Synaptic Multiplicity Using Whole-cell Patch-clamp Electrophysiology

Utvärdering av Synaptic Multiplicity använder hela-cell Patch-clamp elektrofysiologi

In the central nervous system, a pair of neurons often form&#160;multiple synaptic contacts and/or functional neurotransmitter release sites (synaptic ...