Name: permanent cerebral vessel occlusion via double ligature and transection
Uploaded: 2013-07-21T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af American Heart Association Predoctoral Fellowship 788.808-41.910, NIH-NINDS NS-066001 og NS-055.832, og Center for Hearing Research NIH Training Grant 1T32DC010775-01.

1.. Kom godt i gang: Nødvendige kirurgiske instrumenter Se figur 4. <ol><li> Tandlægebor (Kavo Dental Equipment, Model: UMXL-TM), 2-bit bore, og 3-bit bore </li><li> To ~ 30 gauge kanyler </li><li> Savtakket pincet, buet spids valgfri (kan være nyttigt, men ikke afgørende) </li><li> To fine spids pincet </li><li> bidetang </li><li> Suturtråd </li><li> Micro saks </li></ol> 2.. Oprettelse af Kirurgisk Window <ol><li> Anæstesi: Procedurer er i...

<ol>
	<li>Caplan, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Caplan's Stroke, A Clinical Approach. , (2009).</li><li>Blumenfeld, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Neuroanatomy Through Clinical Cases. , (2002).</li><li>Roger, V. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+Disease+and+Stroke+Statistics--2011+Update:+A+Report+From+the+American+Heart+Association.">Heart Disease and Stroke Statistics--2011 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. , (2011).</li><li>Dirnagl, U., Iadecola, C., Moskowitz, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathobiology+of+ischaemic+stroke:+an+integrated+view.">Pathobiology of ischaemic stroke: an integrated view.</a> Trends Neurosci. 22, 391-397 (1999).</li><li>Durukan, A., Tatlisumak, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+ischemic+stroke:+overview+of+major+experimental+rodent+models,+pathophysiology,+and+therapy+of+focal+cerebral+ischemia.">Acute ischemic stroke: overview of major experimental rodent models, pathophysiology, and therapy of focal cerebral ischemia.</a> Pharmacol. Biochem. Behav. 87, 179-197 (2007).</li><li>Dietrich, W. D., Ginsberg, M. D., Busto, R., Watson, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photochemically+induced+cortical+infarction+in+the+rat.+2.+Acute+and+subacute+alterations+in+local+glucose+utilization.">Photochemically induced cortical infarction in the rat. 2. Acute and subacute alterations in local glucose utilization.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 6, 195-202 (1986).</li><li>Watson, B. D., Dietrich, W. D., Busto, R., Wachtel, M. S., Ginsberg, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+reproducible+brain+infarction+by+photochemically+initiated+thrombosis.">Induction of reproducible brain infarction by photochemically initiated thrombosis.</a> Ann. Neurol. 17, 497-504 (1985).</li><li>Koizumi, J., Yoshida, Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+studies+of+ischemic+brain+edema,+I:+a+new+experimental+model+of+cerebral+embolism+in+rats+in+which+recirculation+can+be+introduced+in+the+ischemic+area.">Experimental studies of ischemic brain edema, I: a new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area.</a> Japanese Journal of Stroke. 8, 1-8 (1986).</li><li>Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+focal+stroke:+size,+mechanism,+and+purpose.">Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose.</a> NeuroRx. 2, 396-409 (2005).</li><li>Howells, D. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Different+strokes+for+different+folks:+the+rich+diversity+of+animal+models+of+focal+cerebral+ischemia.">Different strokes for different folks: the rich diversity of animal models of focal cerebral ischemia.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 30, 1412-1431 (2010).</li><li>Trueman, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Critical+Re-Examination+of+the+Intraluminal+Filament+MCAO+Model:+Impact+of+External+Carotid+Artery+Transection.">A Critical Re-Examination of the Intraluminal Filament MCAO Model: Impact of External Carotid Artery Transection.</a> Transl. Stroke Res. 2, (2011).</li><li>Dirnagl, U., Waiz, W. o. l. f. g. a. n. g. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Neuromethods. , (2010).</li><li>Cirstea, M. C., Levin, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compensatory+strategies+for+reaching+in+stroke.">Compensatory strategies for reaching in stroke.</a> Brain. 123 (Pt. 5), 940-953 (2000).</li><li>Nakayama, H., Jorgensen, H. S., Raaschou, H. O., Olsen, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+influence+of+age+on+stroke+outcome.+The+Copenhagen+Stroke+Study.">The influence of age on stroke outcome. The Copenhagen Stroke Study.</a> Stroke. 25, 808-813 (1994).</li><li>Nudo, R. J., Plautz, E. J., Frost, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+adaptive+plasticity+in+recovery+of+function+after+damage+to+motor+cortex.">Role of adaptive plasticity in recovery of function after damage to motor cortex.</a> Muscle Nerve. 24, 1000-1019 (2001).</li><li>Chiganos, T. C., Jensen, W., Rousche, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+response+dynamics+during+focal+cortical+infarction.">Electrophysiological response dynamics during focal cortical infarction.</a> J. Neural Eng. 3, 15-22 (2006).</li><li>Traversa, R., Cicinelli, P., Bassi, A., Rossini, P. M., Bernardi, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mapping+of+motor+cortical+reorganization+after+stroke.+A+brain+stimulation+study+with+focal+magnetic+pulses.">Mapping of motor cortical reorganization after stroke. A brain stimulation study with focal magnetic pulses.</a> Stroke. 28, 110-117 (1997).</li><li>Weber, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+prediction+of+functional+recovery+after+experimental+stroke:+functional+magnetic+resonance+imaging,+electrophysiology,+and+behavioral+testing+in+rats.">Early prediction of functional recovery after experimental stroke: functional magnetic resonance imaging, electrophysiology, and behavioral testing in rats.</a> J. Neurosci. 28, 1022-1029 (2008).</li><li>Dirnagl, U., Kaplan, B., Jacewicz, M., Pulsinelli, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuous+measurement+of+cerebral+cortical+blood+flow+by+laser-Doppler+flowmetry+in+a+rat+stroke+model.">Continuous measurement of cerebral cortical blood flow by laser-Doppler flowmetry in a rat stroke model.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 9, 589-596 (1989).</li><li>Wintermark, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+admission+perfusion+computed+tomography+and+qualitative+diffusion-+and+perfusion-weighted+magnetic+resonance+imaging+in+acute+stroke+patients.">Comparison of admission perfusion computed tomography and qualitative diffusion- and perfusion-weighted magnetic resonance imaging in acute stroke patients.</a> Stroke. 33, 2025-2031 (2002).</li><li>Crafton, K. R., Mark, A. N., Cramer, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+understanding+of+cortical+injury+by+incorporating+measures+of+functional+anatomy.">Improved understanding of cortical injury by incorporating measures of functional anatomy.</a> Brain. 126, 1650-1659 (2003).</li><li>Nudo, R. J., Eisner-Janowicz, I., Lomber, S. t. e. p. h. e. n., Eggermont, J. o. s. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ch.+12.">Ch. 12.</a> Reprogramming the Cerebral Cortex. , (2006).</li><li>Davis, M. F., Lay, C. C., Chen-Bee, C. H., Frostig, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amount+but+not+pattern+of+protective+sensory+stimulation+alters+recovery+after+permanent+middle+cerebral+artery+occlusion.">Amount but not pattern of protective sensory stimulation alters recovery after permanent middle cerebral artery occlusion.</a> Stroke. 42, 792-798 (2011).</li><li>Lay, C. C., Davis, M. F., Chen-Bee, C. H., Frostig, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mild+sensory+stimulation+completely+protects+the+adult+rodent+cortex+from+ischemic+stroke.">Mild sensory stimulation completely protects the adult rodent cortex from ischemic stroke.</a> PLoS One. 5, e11270 (2010).</li><li>Lay, C. C., Davis, M. F., Chen-Bee, C. H., Frostig, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mild+sensory+stimulation+reestablishes+cortical+function+during+the+acute+phase+of+ischemia.">Mild sensory stimulation reestablishes cortical function during the acute phase of ischemia.</a> J. Neurosci. 31, 11495-11504 (2011).</li><li>Coyle, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Middle+cerebral+artery+occlusion+in+the+young+rat.">Middle cerebral artery occlusion in the young rat.</a> Stroke. 13, 855-859 (1982).</li><li>Risedal, A., Zeng, J., Johansson, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+training+may+exacerbate+brain+damage+after+focal+brain+ischemia+in+the+rat.">Early training may exacerbate brain damage after focal brain ischemia in the rat.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 19, 997-1003 (1999).</li><li>Lay, C. C., Davis, M. F., Chen-Bee, C. H., Frostig, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mild+sensory+stimulation+protects+the+aged+rodent+from+cortical+ischemic+stroke+following+permanent+middle+cerebral+artery+occlusion.">Mild sensory stimulation protects the aged rodent from cortical ischemic stroke following permanent middle cerebral artery occlusion.</a> Journal of the American Heart Association Cardiovascular and Cerebrovascular Disease. , (2012).</li><li>Niiro, M., Simon, R. P., Kadota, K., Asakura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proximal+branching+patterns+of+middle+cerebral+artery+(MCA)+in+rats+and+their+influence+on+the+infarct+size+produced+by+MCA+occlusion.">Proximal branching patterns of middle cerebral artery (MCA) in rats and their influence on the infarct size produced by MCA occlusion.</a> J. Neurosci Methods. 64, 19-23 (1996).</li><li>Wang-Fischer, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Manual of Stroke Models in Rats. , 17-30 (2009).</li><li>Quinn, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparing+rat's+to+human's+age:+how+old+is+my+rat+in+people+years?.">Comparing rat's to human's age: how old is my rat in people years?.</a> Nutrition. 21, 775-777 (2005).</li><li>Wei, L., Rovainen, C. M., Woolsey, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ministrokes+in+rat+barrel+cortex.">Ministrokes in rat barrel cortex.</a> Stroke. 26, 1459-1462 (1995).</li><li>Brint, S., Jacewicz, M., Kiessling, M., Tanabe, J., Pulsinelli, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+brain+ischemia+in+the+rat:+methods+for+reproducible+neocortical+infarction+using+tandem+occlusion+of+the+distal+middle+cerebral+and+ipsilateral+common+carotid+arteries.">Focal brain ischemia in the rat: methods for reproducible neocortical infarction using tandem occlusion of the distal middle cerebral and ipsilateral common carotid arteries.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 8, 474-485 (1988).</li><li>Tamura, A., Graham, D. I., McCulloch, J., Teasdale, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+cerebral+ischaemia+in+the+rat:+1.+Description+of+technique+and+early+neuropathological+consequences+following+middle+cerebral+artery+occlusion.">Focal cerebral ischaemia in the rat: 1. Description of technique and early neuropathological consequences following middle cerebral artery occlusion.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 1, 53-60 (1981).</li><li>Dittmar, M., Spruss, T., Schuierer, G., Horn, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=External+carotid+artery+territory+ischemia+impairs+outcome+in+the+endovascular+filament+model+of+middle+cerebral+artery+occlusion+in+rats.">External carotid artery territory ischemia impairs outcome in the endovascular filament model of middle cerebral artery occlusion in rats.</a> Stroke. 34, 2252-2257 (2003).</li><li>Bederson, J. B., Germano, I. M., Guarino, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortical+blood+flow+and+cerebral+perfusion+pressure+in+a+new+noncraniotomy+model+of+subarachnoid+hemorrhage+in+the+rat.">Cortical blood flow and cerebral perfusion pressure in a new noncraniotomy model of subarachnoid hemorrhage in the rat.</a> Stroke. 26, 1086-1091 (1995).</li><li>Kuge, Y., Minematsu, K., Yamaguchi, T., Miyake, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nylon+monofilament+for+intraluminal+middle+cerebral+artery+occlusion+in+rats.">Nylon monofilament for intraluminal middle cerebral artery occlusion in rats.</a> Stroke. 26, 1655-1657 (1995).</li><li>Laing, R. J., Jakubowski, J., Laing, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.+Which+method+works+best?.">Middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats. Which method works best?.</a> Stroke. 24, 294-297 (1993).</li><li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20, 84-91 (1989).</li><li>Schmid-Elsaesser, R., Zausinger, S., Hungerhuber, E., Baethmann, A., Reulen, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+critical+reevaluation+of+the+intraluminal+thread+model+of+focal+cerebral+ischemia:+evidence+of+inadvertent+premature+reperfusion+and+subarachnoid+hemorrhage+in+rats+by+laser-Doppler+flowmetry.">A critical reevaluation of the intraluminal thread model of focal cerebral ischemia: evidence of inadvertent premature reperfusion and subarachnoid hemorrhage in rats by laser-Doppler flowmetry.</a> Stroke. 29, 2162-2170 (1998).</li></ol>

Denne protokol blev udviklet med henblik på at fremkalde iskæmi i gnaver cortex, og at gøre det med minimal perifer betydning for eksperimentelle fag. Den dobbelte okklusion og transection metode giver mulighed for visuel bekræftelse af, at fartøjet er blevet permanent tillukket og kan udføres uden overdreven invasion eller vævsskade, og med en høj overlevelsesrate. Denne okklusion protokol kan anvendes på enhver kortikale fartøj, der kan tilgås via kraniotomi for at fremkalde iskæmi inden for et specifikt c...

For at fremkalde iskæmiske tilstande som effektivt efterligner human iskæmisk slagtilfælde, er flere dyr takts modeller almindeligt anvendt, med varierende mængder af infarkt resulterende. I photothrombotic modellen hjernen bestråles gennem den intakte kraniet ved laserbelysning efter intravenøs injektion af et lysfølsomt stof (såsom rose-bengal), hvilket resulterer i fotokemisk koagulation, blokering af de bestrålede fartøjer og iskæmi i det omgivende væv 6, 7.. Photothrombosis kan resultere i meget små, isolerede områder af infarkt og anvendes typisk som et middel til modellering &quot;mini-slagtilfælde&quot;, eller &quot;mikro-slagtilfælde&quot;. Jo mere udbredt teknik til at inducere iskæmisk slagtilfælde, især i midterste cerebrale arterie (MCA), er det intraluminale monofilament model 8, hvor et filament er kirurgisk indført i den ydre carotidarterie og fremføres indtil spidsen aflukker bunden af MCA. A primary udfordring intraluminale glødetråd okklusion er den høje dødelighed (70%, når MCA okkluderes i 3 timer, et relevant tidspunkt for slagtilfælde forskning) 9.. Andre problemer med den metode, omfattede mulige subaraknoidalblødning, ufuldstændige okklusion, og variable infarktvolumen 10,11. Denne model resulterer i en udstrakt grad af infarkt i både cortex og subcortically 12 og modeller en massiv menneskelig slagtilfælde. Selv om både mikro-og massive takts modeller er vigtige, menneskelige slagtilfælde er typisk et sted i mellem. I store kliniske studier, slagtilfælde infarkt spænder i størrelse fra 28 til 80 cm 3, hvilket svarer til 4,5 til 14% af den ipsi-ishemic halvkugle 9.. Til sammenligning. Vores rotte pMCAO infarktstørrelse spænder fra ca 9-35 mm 3, der udgør 3 til 12% af den ipsi-ishemic halvkugle Vores pMCAO model derfor ligner menneskelige iskæmisk slagtilfælde infarktvolumener i procent af hjernensvolumen. Ud over at modellere strukturelle skader af slagtilfælde, pMCAO resultater i funktionelle og adfærdsmæssige underskud svarende til den menneskelige tilstand. Som minimum en effektiv model for slagtilfælde resultater i bevægelse underskud kontralaterale til slagtilfælde skader 13-15, tab eller forstyrrelser af motorisk og sensorisk funktion 16,17, tab eller afbrydelse af fremkaldte neuronal aktivitet 16,18, reduktioner i cerebral blodgennemstrømning 19 20, og infarkt 21,22. Derfor vores pMCAO modeller en alvorlig okklusion af MCA resulterer i fysisk handicap, tab af funktion i den sensoriske cortex (og tilstødende cortex), forstyrrelse af neuronal aktivitet, en alvorlig reduktion i MCA blodgennemstrømning, og infarkt-kendetegnende attributter iskæmisk slagtilfælde 23 -25, derfor tjener som en effektiv model for menneskelig slagtilfælde. Proceduremæssigt, pMCAO indebærer en lille kraniotomi, hvor vi forsigtigt fjerne kraniet og dura fraen 2 x 2 mm &quot;kirurgisk vindue&quot; over det første (M1) segment af MCA, lige før den primære tvedeling af MCA ind i de forreste og bageste kortikale grene (figur 1A og 1B). Vi passerer en halv kurve reverse skære sutur nål og tråd (6-0 silke) gennem pial lag i hjernehinden, under MCA og over kortikale overflade (se tabel af specifikke reagenser og udstyr til de kirurgiske forsyninger, der er nødvendige for at udføre pMCAO ). Vi derefter binde en dobbelt ligatur, spænd de to knob omkring MCA, og transektere skibet mellem de to knob. Den dobbelte ligatur og overskæring gennem M1 sker lige distalt for lenticulostriate forgrening, således at kun de cortikale grene af MCA er påvirket-således kun kortikale infarkt (ingen subkortikale skade) forekommer 26,27 (fig. 2). Selvom menneskelig slagtilfælde involverer ofte subkortikale infarkt, modellering dette i gnavere kræver øget invasivitet (okklusion cerebrale fartøjer inden kortikale Branching kræver adgang arterier via halspulsåren i nakken og nødvendiggør yderligere tillukning) i teknik og øget variabilitet i infarktstørrelse. Modellen er beskrevet her kan ikke udføres mere proksimalt som adgang til tidligere grene af MCA ikke er mulig via en simpel kraniotomi. Mens det kan være kirurgisk muligt at fremkalde en subkortikale infarkt via pMCAO ville okklusion medføre en særdeles invasiv procedure og er derfor ikke ideel. Effektiviteten af okklusion kan bekræftes via laser Doppler, eller laser speckle billedbehandling 12,24,25 (fig. 3), eller histologisk post mortem (figur 2). Det skal bemærkes, at tidligere forskning har vist, at sensorisk stimulation kan spille en vigtig rolle i udviklingen og resultatet af infarkt, giver beskyttelse mod skader, når det administreres inden 2 timer i pMCAO og forårsager en stigning i slagtilfælde skader, når det administreres ved 3 timer efter pMCAO 24,25,28. Vi har bekræftet, at ved 5 timer efter pMCAO, stimulation ikke længere har en effekt på resultat (upublicerede data). Derfor bør sensorisk stimulation af emner minimeres i 5 timer efter pMCAO at opnå infarktvolumener med minimal variation. Tilsvarende har vores gruppe kører &quot;ubehandlede kontroller&quot; af denne type ved at holde rotter bedøvet i 5 timer efter pMCAO, i mørke, med minimal sensorisk stimulation, og udtrykkeligt ingen whisker stimulation. Det skal endvidere bemærkes, at lejlighedsvis variation i MCA struktur, herunder overdreven forgrening, flere primære segmenter, eller fravær af kommunikerende arterier kan forekomme ved en frekvens på 10 til 30% i mandlige voksne Sprague Dawley rotter 29,30. Hvis abnormiteter i MCA overholdes, er det tilrådeligt ikke at bruge det pågældende emne som at tilføje dyr med sådanne vaskulære abnormiteter vil øge infarkt variabilitet. Derudover er der flere praktiske aspekter af our procedure, der gør dette okklusion metode fordelagtigt for slagtilfælde undersøgelse. Først kan suturer placeres rundt om arterien, men ikke strammet for at indsamle en baseline vurdering, efterfulgt af post-iskæmisk vurdering efter ligatur og transection. På denne måde, er kirurgisk forberedelse nødvendig for okklusionen kontrolleres effektivt til, inden emner. Fordi fag kan forblive stationære eller inden for en stereotaktisk ramme hele okklusion, er det muligt at foretage eksperimentel vurdering af hvert emne før, under og efter okklusion uden at flytte motivet eller forstyrre nogen eksperimentelle udstyr i brug 25,28. Desuden er denne procedure resulterer i en meget lav dødelighed, selv inden alderen gnaver fag 21-24 måneder (svarende til en ældre menneske) 31, og kan derfor anvendes til at vurdere slagtilfælde behandlinger i rotter, nærmere modellere mest almindelige aldersgruppe af slagtilfælde syge 25,28. Vessel transection også tjener flere praktiske formål. Fraværet af blødning efter transection bekræfter, at skibet var helt tilstoppet ved begge ligaturer sites. Derudover overskæring sikrer en permanent afbrydelse af blodgennemstrømningen. Endelig overskæring sikrer, at enhver blodgennemstrømningen påvist i de distale dele af den okkluderede fartøj skal komme fra en alternativ kilde. Endelig, selv om vi specifikt beskrive denne okklusion teknik til MCA i dette manuskript og video, kan den samme dobbelte ligatur transection teknik anvendes på enhver cerebral fartøj, der kan tilgås via craniotomy. Vores laboratorium, for eksempel, udnyttes pMCAO i samarbejde med flere andre permanente tillukning af distale MCA afdelinger for at blokere både primær og sikkerhedsstillelse blodgennemstrømningen 24 på en måde, der svarer til metoder, der skal selektivt fremkalde iskæmi inden for den primære somatosensoriske cortex 32.. Sammenfattende thans metode til permanent okklusion, som anvendes til MCA tæt modeller tre primære facetter af menneskelig iskæmisk slagtilfælde: den mest almindelige placering (MCA), type (iskæmi), og graden af ​​skader (infarkt) i forbindelse med den humane kliniske litteratur for slagtilfælde. Desuden kan denne metode til okklusion anvendes på en enkelt eller flere okklusion steder i hele hjernen, og kan udføres i alderen individer med en høj overlevelsesprocent. I betragtning af den dynamiske, permanent og relativt invasiv karakter af denne okklusion, udgør denne teknik et supplerende værktøj for prækliniske forskere evaluere nye metoder til beskyttelse mod og behandling af slagtilfælde.

<table border="1">
 <tr>
 <td>Name of the equipment</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalogue number</td>
 <td>Comments (optional)</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Extra Fine Graefe Forceps - 0.5 mm Tips Slight Curve (1)</td>
 <td>Fine Science Tools </td>
 <td>11151-10</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Ceramic Coated Dumont #5 Forceps (2)</td>
 <td>Fine Science Tools </td>
 <td>11252-50</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Extra Fine Bonn Scissors, straight (1)</td>
 <td>Fine Science Tools </td>
 <td>14084-08</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Round 3/8 (16 mm) Suture Needles</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>12050-02</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>6-0 Braided Silk Suture</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>NC9071061 
 Harvard Apparatus 
 No.:510461</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>30 gauge needle, &frac12;" length</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>NC9867376 
 
 No.:ZT-5-030-5-L/COL</td>
 <td></td>
 </tr>
</table>

permanent cerebral vessel occlusion via double ligature and transection

Slagtilfælde er en førende årsag til død, invaliditet og samfundsøkonomisk tab på verdensplan. Hovedparten af alle slagtilfælde skyldes en afbrydelse i blodgennemstrømning (iskæmi) 1.. Midterste cerebral arterie (MCA) giver et stort flertal af blod til den laterale overflade af cortex 2, er den mest almindelige sted for humant slagtilfælde 3, og iskæmi inden for dens område kan resultere i omfattende dysfunktion eller død 1,4,5. Overlevende fra iskæmisk slagtilfælde ofte lider tab eller afbrydelse af motordrevne evner, sensoriske underskud, og infarkt. I et forsøg på at fange disse vigtige egenskaber for slagtilfælde, og derved udvikle en effektiv behandling, er en stor vægt lagt på dyremodeller af iskæmi i MCA. Her præsenterer vi en metode til permanent okklusion en cortical overflade blodkar. Vi vil præsentere denne metode ved hjælp af et eksempel på en relevant tillukning af blodkar, der modellerer den mest almindelige type, placering og OutCome af menneskets slagtilfælde, permanent midterste cerebral arterieokklusion (pMCAO). I denne model, kirurgisk udsætter vi MCA i den voksne rotte og efterfølgende okkludere via dobbelt ligatur og overskæring af karret. Dette pMCAO blokerer proximale kortikale gren af ​​MCA, forårsager iskæmi i alle MCA kortikale område, en stor del af cortex. Denne metode til okklusion kan også anvendes til at okkludere mere distale dele af corticale fartøjer for at opnå mere fokal iskæmi rettet mod et mindre område af cortex. De primære ulemper ved pMCAO er at den kirurgiske procedure er lidt invasiv som en lille kraniotomi for at få adgang MCA, selvom dette resulterer i minimal vævsskade. De primære fordele ved denne model er imidlertid: stedet for okklusion er veldefineret, graden af ​​reduktion af blodgennemstrømningen er konsistent, funktionel og neurologisk svækkelse sker hurtigt, infarktstørrelse er konsistent, og den høje overlevelse muliggør lang Udtrykket kronisk vurdering.

Vellykket okklusion af et fartøj kan bekræftes ved hjælp af laser speckle imaging (LSI) blandt andet blodstrømningshastigheder billeddannende teknikker. Blodgennemstrømningen i de store kortikale grene af MCA skulle falde til ~ 25% af baseline eller mindre efter okklusion afhængigt af støjniveauet i registreringssystemet og følsomhed af teknikken. Se figur 3 for en repræsentativ LSI billede af et segment af en cortical gren af MCA før og efter MCA tilstopning. Når den beskrev...

Watch this Scientific Journal Video about Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection at JoVE.com

Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection

Vi beskriver en meget reproducerbar metode til permanent okklusion af en gnaver større cerebral blodkar. Denne teknik kan udføres med meget lille perifer skade minimal blodtab, en høj grad af langsigtede overlevelse, og konsekvent infarktvolumen svarer til den humane kliniske befolkning.

Permanent Cerebral karokklusion<em&gt; Via</em&gt; Dobbelt Ligature og transection

Stroke is a leading cause of death, disability, and socioeconomic loss worldwide. The majority of all strokes result from an interruption in blood flow ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection

Modeling Stroke in Mice - Middle Cerebral Artery Occlusion with the Filament Model

Stroke is among the most frequent causes of death and adult disability, especially in highly developed countries. However, treatment options to date are ...

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

The Application Of Permanent Middle Cerebral Artery Ligation in the Mouse

Focal cerebral ischemia is among the most common type of stroke seen in patients. Due to the clinical significance there has been a prolonged effort to ...

Utilizing a Cranial Window to Visualize the Middle Cerebral Artery During Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion

Anvendelse af en Cranial vindue for at visualisere den midterste cerebrale arterie Under endothelin-1-induceret mellem-cerebral arterieokklusion

Creation of a cranial window is a method that allows direct visualization of structures on the cortical surface of the brain1-3. This technique can be ...

2-Vessel Occlusion/Hypotension: A Rat Model of Global Brain Ischemia

2-tillukning af blodkar / Hypotension: A Rat Model of Global hjerneiskæmi

Cardiac arrest followed by resuscitation often results in dramatic brain damage caused by ischemia and subsequent reperfusion of the brain. Global brain ...

Optimized System for Cerebral Perfusion Monitoring in the Rat Stroke Model of Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion

Optimeret System for Cerebral Perfusion Overvågning i Rat Stroke Model af intraluminal mellem-cerebral arterieokklusion

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal ...

Modeling Stroke in Mice: Permanent Coagulation of the Distal Middle Cerebral Artery

Modellering Stroke i mus: Permanent Koagulering af den distale Middle Cerebral Artery

Stroke is the third most common cause of death and a main cause of acquired adult disability in developed countries. Only very limited therapeutical ...

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

Embolisk cerbri arterieokklusion (MCAO) for iskæmisk slagtilfælde med Homologe Blodpropper i rotter

Clinically, thrombolytic therapy with use of recombinant tissue plasminogen activator (tPA) remains the most effective treatment for acute ischemic ...

Stereological and Flow Cytometry Characterization of Leukocyte Subpopulations in Models of Transient or Permanent Cerebral Ischemia

Stereologisk og flowcytometri karakterisering af leukocytsubpopulationer i modeller af Forbigående eller permanent cerebral iskæmi

Microglia activation, as well as extravasation of haematogenous macrophages and neutrophils, is believed to play a pivotal role in brain injury after ...

Quantification of Neurovascular Protection Following Repetitive Hypoxic Preconditioning and Transient Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Kvantificering af neurovaskulær Protection Efter Gentagne Hypoksisk Forkonditionering og Forbigående mellem-cerebral arterieokklusion i mus

Experimental animal models of stroke are invaluable tools for understanding stroke pathology and developing more effective treatment strategies. A 2 week ...