Name: permanent cerebral vessel occlusion via double ligature and transection
Uploaded: 2013-07-21T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection at JoVE.com

Dit werk werd ondersteund door de American Heart Association predoctorale Fellowship 788808-41910, de NIH-NINDS NS-066001 en NS-055832, en het Center for Hearing Research NIH Training Grant 1T32DC010775-01.

1. Aan de slag: Vereist Chirurgische Instrumenten Zie figuur 4 <ol><li> Tandboor (Kavo Dental Equipment, Model: UMXL-TM), 2-bit boor, en 3-bit boor </li><li> Twee ~ 30 gauge injectienaalden </li><li> Getande pincet, gebogen punt optioneel (kan nuttig zijn, maar niet noodzakelijk) </li><li> Twee fijne punt pincet </li><li> draadtang </li><li> Hechtdraad </li><li> Microscharen </li></ol> 2. Het creëren van de Chirurgische Window <ol><li> Anesthesie...

<ol>
	<li>Caplan, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Caplan's Stroke, A Clinical Approach. , (2009).</li><li>Blumenfeld, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Neuroanatomy Through Clinical Cases. , (2002).</li><li>Roger, V. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+Disease+and+Stroke+Statistics--2011+Update:+A+Report+From+the+American+Heart+Association.">Heart Disease and Stroke Statistics--2011 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. , (2011).</li><li>Dirnagl, U., Iadecola, C., Moskowitz, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathobiology+of+ischaemic+stroke:+an+integrated+view.">Pathobiology of ischaemic stroke: an integrated view.</a> Trends Neurosci. 22, 391-397 (1999).</li><li>Durukan, A., Tatlisumak, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+ischemic+stroke:+overview+of+major+experimental+rodent+models,+pathophysiology,+and+therapy+of+focal+cerebral+ischemia.">Acute ischemic stroke: overview of major experimental rodent models, pathophysiology, and therapy of focal cerebral ischemia.</a> Pharmacol. Biochem. Behav. 87, 179-197 (2007).</li><li>Dietrich, W. D., Ginsberg, M. D., Busto, R., Watson, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photochemically+induced+cortical+infarction+in+the+rat.+2.+Acute+and+subacute+alterations+in+local+glucose+utilization.">Photochemically induced cortical infarction in the rat. 2. Acute and subacute alterations in local glucose utilization.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 6, 195-202 (1986).</li><li>Watson, B. D., Dietrich, W. D., Busto, R., Wachtel, M. S., Ginsberg, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+reproducible+brain+infarction+by+photochemically+initiated+thrombosis.">Induction of reproducible brain infarction by photochemically initiated thrombosis.</a> Ann. Neurol. 17, 497-504 (1985).</li><li>Koizumi, J., Yoshida, Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+studies+of+ischemic+brain+edema,+I:+a+new+experimental+model+of+cerebral+embolism+in+rats+in+which+recirculation+can+be+introduced+in+the+ischemic+area.">Experimental studies of ischemic brain edema, I: a new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area.</a> Japanese Journal of Stroke. 8, 1-8 (1986).</li><li>Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+focal+stroke:+size,+mechanism,+and+purpose.">Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose.</a> NeuroRx. 2, 396-409 (2005).</li><li>Howells, D. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Different+strokes+for+different+folks:+the+rich+diversity+of+animal+models+of+focal+cerebral+ischemia.">Different strokes for different folks: the rich diversity of animal models of focal cerebral ischemia.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 30, 1412-1431 (2010).</li><li>Trueman, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Critical+Re-Examination+of+the+Intraluminal+Filament+MCAO+Model:+Impact+of+External+Carotid+Artery+Transection.">A Critical Re-Examination of the Intraluminal Filament MCAO Model: Impact of External Carotid Artery Transection.</a> Transl. Stroke Res. 2, (2011).</li><li>Dirnagl, U., Waiz, W. o. l. f. g. a. n. g. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Neuromethods. , (2010).</li><li>Cirstea, M. C., Levin, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compensatory+strategies+for+reaching+in+stroke.">Compensatory strategies for reaching in stroke.</a> Brain. 123 (Pt. 5), 940-953 (2000).</li><li>Nakayama, H., Jorgensen, H. S., Raaschou, H. O., Olsen, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+influence+of+age+on+stroke+outcome.+The+Copenhagen+Stroke+Study.">The influence of age on stroke outcome. The Copenhagen Stroke Study.</a> Stroke. 25, 808-813 (1994).</li><li>Nudo, R. J., Plautz, E. J., Frost, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+adaptive+plasticity+in+recovery+of+function+after+damage+to+motor+cortex.">Role of adaptive plasticity in recovery of function after damage to motor cortex.</a> Muscle Nerve. 24, 1000-1019 (2001).</li><li>Chiganos, T. C., Jensen, W., Rousche, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+response+dynamics+during+focal+cortical+infarction.">Electrophysiological response dynamics during focal cortical infarction.</a> J. Neural Eng. 3, 15-22 (2006).</li><li>Traversa, R., Cicinelli, P., Bassi, A., Rossini, P. M., Bernardi, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mapping+of+motor+cortical+reorganization+after+stroke.+A+brain+stimulation+study+with+focal+magnetic+pulses.">Mapping of motor cortical reorganization after stroke. A brain stimulation study with focal magnetic pulses.</a> Stroke. 28, 110-117 (1997).</li><li>Weber, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+prediction+of+functional+recovery+after+experimental+stroke:+functional+magnetic+resonance+imaging,+electrophysiology,+and+behavioral+testing+in+rats.">Early prediction of functional recovery after experimental stroke: functional magnetic resonance imaging, electrophysiology, and behavioral testing in rats.</a> J. Neurosci. 28, 1022-1029 (2008).</li><li>Dirnagl, U., Kaplan, B., Jacewicz, M., Pulsinelli, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuous+measurement+of+cerebral+cortical+blood+flow+by+laser-Doppler+flowmetry+in+a+rat+stroke+model.">Continuous measurement of cerebral cortical blood flow by laser-Doppler flowmetry in a rat stroke model.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 9, 589-596 (1989).</li><li>Wintermark, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+admission+perfusion+computed+tomography+and+qualitative+diffusion-+and+perfusion-weighted+magnetic+resonance+imaging+in+acute+stroke+patients.">Comparison of admission perfusion computed tomography and qualitative diffusion- and perfusion-weighted magnetic resonance imaging in acute stroke patients.</a> Stroke. 33, 2025-2031 (2002).</li><li>Crafton, K. R., Mark, A. N., Cramer, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+understanding+of+cortical+injury+by+incorporating+measures+of+functional+anatomy.">Improved understanding of cortical injury by incorporating measures of functional anatomy.</a> Brain. 126, 1650-1659 (2003).</li><li>Nudo, R. J., Eisner-Janowicz, I., Lomber, S. t. e. p. h. e. n., Eggermont, J. o. s. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ch.+12.">Ch. 12.</a> Reprogramming the Cerebral Cortex. , (2006).</li><li>Davis, M. F., Lay, C. C., Chen-Bee, C. H., Frostig, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amount+but+not+pattern+of+protective+sensory+stimulation+alters+recovery+after+permanent+middle+cerebral+artery+occlusion.">Amount but not pattern of protective sensory stimulation alters recovery after permanent middle cerebral artery occlusion.</a> Stroke. 42, 792-798 (2011).</li><li>Lay, C. C., Davis, M. F., Chen-Bee, C. H., Frostig, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mild+sensory+stimulation+completely+protects+the+adult+rodent+cortex+from+ischemic+stroke.">Mild sensory stimulation completely protects the adult rodent cortex from ischemic stroke.</a> PLoS One. 5, e11270 (2010).</li><li>Lay, C. C., Davis, M. F., Chen-Bee, C. H., Frostig, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mild+sensory+stimulation+reestablishes+cortical+function+during+the+acute+phase+of+ischemia.">Mild sensory stimulation reestablishes cortical function during the acute phase of ischemia.</a> J. Neurosci. 31, 11495-11504 (2011).</li><li>Coyle, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Middle+cerebral+artery+occlusion+in+the+young+rat.">Middle cerebral artery occlusion in the young rat.</a> Stroke. 13, 855-859 (1982).</li><li>Risedal, A., Zeng, J., Johansson, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+training+may+exacerbate+brain+damage+after+focal+brain+ischemia+in+the+rat.">Early training may exacerbate brain damage after focal brain ischemia in the rat.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 19, 997-1003 (1999).</li><li>Lay, C. C., Davis, M. F., Chen-Bee, C. H., Frostig, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mild+sensory+stimulation+protects+the+aged+rodent+from+cortical+ischemic+stroke+following+permanent+middle+cerebral+artery+occlusion.">Mild sensory stimulation protects the aged rodent from cortical ischemic stroke following permanent middle cerebral artery occlusion.</a> Journal of the American Heart Association Cardiovascular and Cerebrovascular Disease. , (2012).</li><li>Niiro, M., Simon, R. P., Kadota, K., Asakura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proximal+branching+patterns+of+middle+cerebral+artery+(MCA)+in+rats+and+their+influence+on+the+infarct+size+produced+by+MCA+occlusion.">Proximal branching patterns of middle cerebral artery (MCA) in rats and their influence on the infarct size produced by MCA occlusion.</a> J. Neurosci Methods. 64, 19-23 (1996).</li><li>Wang-Fischer, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Manual of Stroke Models in Rats. , 17-30 (2009).</li><li>Quinn, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparing+rat's+to+human's+age:+how+old+is+my+rat+in+people+years?.">Comparing rat's to human's age: how old is my rat in people years?.</a> Nutrition. 21, 775-777 (2005).</li><li>Wei, L., Rovainen, C. M., Woolsey, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ministrokes+in+rat+barrel+cortex.">Ministrokes in rat barrel cortex.</a> Stroke. 26, 1459-1462 (1995).</li><li>Brint, S., Jacewicz, M., Kiessling, M., Tanabe, J., Pulsinelli, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+brain+ischemia+in+the+rat:+methods+for+reproducible+neocortical+infarction+using+tandem+occlusion+of+the+distal+middle+cerebral+and+ipsilateral+common+carotid+arteries.">Focal brain ischemia in the rat: methods for reproducible neocortical infarction using tandem occlusion of the distal middle cerebral and ipsilateral common carotid arteries.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 8, 474-485 (1988).</li><li>Tamura, A., Graham, D. I., McCulloch, J., Teasdale, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+cerebral+ischaemia+in+the+rat:+1.+Description+of+technique+and+early+neuropathological+consequences+following+middle+cerebral+artery+occlusion.">Focal cerebral ischaemia in the rat: 1. Description of technique and early neuropathological consequences following middle cerebral artery occlusion.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 1, 53-60 (1981).</li><li>Dittmar, M., Spruss, T., Schuierer, G., Horn, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=External+carotid+artery+territory+ischemia+impairs+outcome+in+the+endovascular+filament+model+of+middle+cerebral+artery+occlusion+in+rats.">External carotid artery territory ischemia impairs outcome in the endovascular filament model of middle cerebral artery occlusion in rats.</a> Stroke. 34, 2252-2257 (2003).</li><li>Bederson, J. B., Germano, I. M., Guarino, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortical+blood+flow+and+cerebral+perfusion+pressure+in+a+new+noncraniotomy+model+of+subarachnoid+hemorrhage+in+the+rat.">Cortical blood flow and cerebral perfusion pressure in a new noncraniotomy model of subarachnoid hemorrhage in the rat.</a> Stroke. 26, 1086-1091 (1995).</li><li>Kuge, Y., Minematsu, K., Yamaguchi, T., Miyake, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nylon+monofilament+for+intraluminal+middle+cerebral+artery+occlusion+in+rats.">Nylon monofilament for intraluminal middle cerebral artery occlusion in rats.</a> Stroke. 26, 1655-1657 (1995).</li><li>Laing, R. J., Jakubowski, J., Laing, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.+Which+method+works+best?.">Middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats. Which method works best?.</a> Stroke. 24, 294-297 (1993).</li><li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20, 84-91 (1989).</li><li>Schmid-Elsaesser, R., Zausinger, S., Hungerhuber, E., Baethmann, A., Reulen, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+critical+reevaluation+of+the+intraluminal+thread+model+of+focal+cerebral+ischemia:+evidence+of+inadvertent+premature+reperfusion+and+subarachnoid+hemorrhage+in+rats+by+laser-Doppler+flowmetry.">A critical reevaluation of the intraluminal thread model of focal cerebral ischemia: evidence of inadvertent premature reperfusion and subarachnoid hemorrhage in rats by laser-Doppler flowmetry.</a> Stroke. 29, 2162-2170 (1998).</li></ol>

Dit protocol werd ontwikkeld om ischemie te induceren binnen het knaagdier cortex, en wel met een minimale impact op perifere proefpersonen. De dubbele occlusie en doorsnijding methode zorgt voor visuele bevestiging dat het schip is definitief afgesloten, en kan worden uitgevoerd zonder overmatige invasie of weefselschade, en met een hoge overlevingskans. Dit occlusie protocol kan worden toegepast op elke corticale vaartuig dat toegankelijk via craniotomie teneinde ischemie bij een bepaalde corticale domein induceren. B...

Om ischemische condities die effectief na te bootsen menselijke ischemische beroerte veroorzaken, worden diverse dierlijke takt modellen op grote schaal toegepast, met wisselende volumes infarct als gevolg. In de fototrombotisch model, de hersenen bestraald door de intacte schedel met laser belichting na intraveneuze injectie van een lichtgevoelige stof (zoals rose-bengal), resulterend in fotochemische coagulatie, verstopping van de bestraalde schepen en ischemie in het omringende weefsel 6, 7. Photothrombosis kunnen zeer kleine, geïsoleerde gebieden van infarct en wordt typisch als een modelmatig &quot;mini-beroerte&quot; of &quot;micro-slagen&quot;. De meer algemeen aanvaarde methode voor het induceren van ischemische beroerte, in het bijzonder middelste cerebrale slagader (MCA), is de intraluminale monofilament model 8, waarin een filament wordt operatief ingebracht in de uitwendige halsslagader en voortbewogen totdat het uiteinde afsluit basis van MCA. Een primary uitdaging van intraluminale filament occlusie is het hoge sterftecijfer (70% bij MCA wordt afgesloten voor 3 uur, een relevante tijdstip voor slagonderzoek) 9. Andere problemen met de methode opgenomen mogelijke subarachnoïdale bloeding, onvolledige occlusie, en variabele infarctvolume 10,11. Dit model resulteert in een uitgebreide mate van infarct zowel in de cortex en Subcortically 12, en modellen een enorme menselijke beroerte. Hoewel zowel micro-en zware beroerte modellen zijn belangrijk, menselijk slagen zijn meestal ergens tussenin. In grote klinische studies, beroerte infarct varieert in grootte 28-80 cm 3, wat zich vertaalt naar 4,5-14% van de ipsi-ishemic halfrond 9. In vergelijking, onze rat pMCAO infarct grootte varieert van ongeveer 9-35 mm 3, die 3 tot 12% van de ipsi-ishemic halfrond vormt. Onze pMCAO model, dus sterk lijkt op de menselijke ischemische beroerte infarct volumes op percentage van de hersenenvolume. Naast het modelleren van de structurele beschadiging van beroerte, pMCAO resulteert in functionele en afwijkend gedrag vergelijkbaar met de menselijke conditie. Op minimum, een effectief model van een beroerte leidt tot tekorten beweging contralateraal aan slagschade 13-15, verlies of verstoring van motorische en sensorische functie 16,17, verlies of verstoring van opgewekte neuronale activiteit 16,18, vermindering van de cerebrale bloeddoorstroming 19, 20, en infarct 21,22. Dienovereenkomstig, onze pMCAO modellen een ernstige occlusie van de MCA resulteert in lichamelijke handicap, verlies van functie binnen de sensorische cortex (en naburige cortex), verstoring van de neuronale activiteit, een ernstige vermindering van de MCA bloedstroom, en infarct-keurmerk attributen van ischemische beroerte 23 -25 daarom dienen als een effectief model van menselijke beroerte. Procedureel pMCAO gaat om een ​​kleine craniotomie waarin wij verwijder voorzichtig de schedel en dura uiteen 2 x 2 mm &quot;chirurgische venster&quot; via eerste (M1) segment van MCA, net voor de primaire splitsing van MCA in de anterieure en posterieure corticale takken (Figuren 1A en 1B). We passeren een half-bocht achteruit snijden hechtdraad naald en draad (6-0 zijde) door de pial laag van de hersenvliezen, onder MCA en boven de corticale oppervlak (zie Tabel van specifieke reagentia en apparatuur voor de chirurgische leveringen nodig voor het uitvoeren van pMCAO ). We binden dan een dubbele ligatuur, draai de twee knopen rond MCA, en doorsnijden het schip tussen de twee knopen. De dubbele ligatuur en doorsnijding door M1 komt net distaal van de vertakking lenticulostriate, zodanig dat alleen de corticale takken van MCA zijn getroffen-dus alleen corticale infarct (geen subcorticale schade) ontstaat 26,27 (figuur 2). Hoewel de menselijke beroerte gaat vaak gepaard met subcorticale infarct, het modelleren van deze bij knaagdieren vereist meer invasieve (afsluitende cerebrale bloedvaten vóór corticale Branching vereist toegang slagaders via de halsslagader in de nek en vereist extra afsluitingen) in techniek en verhoogde variabiliteit in infarctgrootte. Het hier beschreven model kan niet meer proximaal worden uitgevoerd als de toegang tot eerdere takken van MCA is niet mogelijk via een eenvoudige craniotomie. Terwijl het chirurgisch mogelijk is om een ​​subcorticale infarct via pMCAO induceren, zou occlusie een zeer invasieve procedure omvat en dus niet ideaal. Effectiviteit van occlusie kan worden bevestigd via laser Doppler of laser speckle imaging 12,24,25 (figuur 3), of post-mortem histologisch (Figuur 2). Opgemerkt moet worden dat het vorige onderzoek heeft aangetoond dat sensorische stimulatie een belangrijke rol kan spelen in de evolutie en de uitkomst van infarct; verlening van bescherming tegen beschadiging bij toediening binnen 2 uur van pMCAO en het veroorzaken van een toename van de beroerte schade wanneer toegediend op 3 uur na pMCAO 24,25,28. Wij hebben bevestigd dat ten 5 uur na pMCAO, stimulatie niet langer invloed heeft op resultaat (ongepubliceerde gegevens). Daarom moet sensorische stimulatie van de proefpersonen worden geminimaliseerd voor 5 uur na pMCAO aan infarct volumes te verkrijgen met minimale variabiliteit. Dienovereenkomstig onze groep heeft &quot;onbehandelde&quot; van dit type door hem ratten verdoofd gedurende 5 uur na pMCAO, in het donker, met minimale sensorische stimulatie en uitdrukkelijk geen whisker stimulatie. Voorts zij opgemerkt dat af variatie in MCA structuur, waaronder overmatige vertakking, verschillende primaire segmenten, of de afwezigheid van communicatie slagaders optreden met een frequentie van 10 tot 30% in volwassen mannelijke Sprague Dawley ratten 29,30. Als abnormaliteiten in MCA worden waargenomen, is het raadzaam dat niet specifiek als toevoeging dieren zoals vasculaire abnormaliteiten infarct variabiliteit toenemen. Daarnaast zijn er verschillende praktische aspecten van our procedure die deze occlusie methode voordelig voor beroerte onderzoek te maken. Ten eerste kunnen hechtingen rond de slagader worden geplaatst zonder aangescherpt om een ​​nulmeting, gevolgd door post-ischemische beoordeling na ligatuur en doorsnijding verzamelen. Op deze wijze wordt chirurgisch preparaat zodat het occlusie effectief gecontroleerd binnen onderwerpen. Omdat patiënten stationair kan blijven of in een stereotaxisch frame in occlusie, is het mogelijk experimentele beoordeling van elk onderwerp voor voeren, tijdens en na occlusie zonder bewegende objecten of experimentele apparatuur storen gebruikt 25,28. Bovendien, deze procedure resulteert in een zeer lage sterfte, zelfs in oude knaagdier onderwerpen 21-24 maanden (overeenkomend met een oudere mens) 31, en ​​wordt gebruikt om een beroerte behandelingen bij ratten te evalueren die beter voorspellen van de meest voorkomende leeftijdscategorie van CVA-patiënten 25,28. Schip transection dient ook een aantal praktische doeleinden. De afwezigheid van bloeden na doorsnijding bevestigt dat het vaartuig volledig werd afgesloten aan beide ligatuur sites. Daarnaast doorsnijding staat doorlopend verstoring van de bloedstroom. Tot slot, doorsnijding zorgt ervoor dat elke bloedstroom gedetecteerd in de distale delen van het afgesloten bloedvat moet komen van een alternatieve bron. Tenslotte, hoewel wij specifiek beschrijven occlusie techniek MCA in dit manuscript en video, dezelfde dubbele ligatuur doorsnijding techniek kan worden toegepast op elke cerebrale schip dat toegankelijk via craniotomie. Ons laboratorium, bijvoorbeeld pMCAO gebruikt in combinatie met verscheidene bijkomende permanente occlusie van de MCA distale takken om zowel primaire en collaterale bloedstroom 24 blokkeren op een wijze die vergelijkbaar technieken om selectief ischemie induceren in de primaire somatosensorische cortex 32. Concluderend, tzijn methode voor permanente occlusie zoals toegepast op MCA nauw modellen drie primaire facetten van het menselijk herseninfarct: de meest voorkomende locatie (MCA), type (ischemie), en de mate van beschadiging (infarct) in verband met de menselijke klinische literatuur van een beroerte. Verder kan deze werkwijze occlusie toegepast op een of meerdere occlusie locaties in de hersenen en kan worden uitgevoerd in oude patiënten met een hoge mate van overleving. Gezien de dynamische, permanente en relatief niet-invasieve karakter van deze occlusie, deze techniek vormt een extra instrument voor preklinische onderzoekers evalueren van nieuwe benaderingen voor de bescherming van en de behandeling van een beroerte.

<table border="1">
 <tr>
 <td>Name of the equipment</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalogue number</td>
 <td>Comments (optional)</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Extra Fine Graefe Forceps - 0.5 mm Tips Slight Curve (1)</td>
 <td>Fine Science Tools </td>
 <td>11151-10</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Ceramic Coated Dumont #5 Forceps (2)</td>
 <td>Fine Science Tools </td>
 <td>11252-50</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Extra Fine Bonn Scissors, straight (1)</td>
 <td>Fine Science Tools </td>
 <td>14084-08</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Round 3/8 (16 mm) Suture Needles</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>12050-02</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>6-0 Braided Silk Suture</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>NC9071061 
 Harvard Apparatus 
 No.:510461</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>30 gauge needle, &frac12;" length</td>
 <td>Fine Science Tools</td>
 <td>NC9867376 
 
 No.:ZT-5-030-5-L/COL</td>
 <td></td>
 </tr>
</table>

permanent cerebral vessel occlusion via double ligature and transection

Beroerte is een belangrijke oorzaak van overlijden, invaliditeit, en sociaal-economische schade wereldwijd. De meerderheid van alle beroertes gevolg zijn van een onderbreking van de bloedstroom (ischemie) 1. Middelste cerebrale slagader (MCA) levert een grote meerderheid van het bloed naar het laterale oppervlak van de cortex 2, is de meest voorkomende plaats van de menselijke beroerte 3, en ischemie op zijn grondgebied kan leiden tot uitgebreide disfunctie of dood 1,4,5. Overlevenden van ischemische beroerte lijden vaak verlies of verstoring van motorische capaciteiten, sensorische gebreken, en infarct. In een poging om deze belangrijke kenmerken van een beroerte vast te leggen, en daarbij effectieve behandeling te ontwikkelen, is een veel nadruk gelegd op dierlijke modellen van ischemie bij MCA. Hier presenteren we een werkwijze voor het permanent afsluiten van een corticaal oppervlak bloedvat. We zullen deze methode presenteren met behulp van een voorbeeld van een relevante vatocclusie dat modelleert het meest voorkomende type, de locatie, en de uitkome van de menselijke beroerte, permanente midden cerebrale slagader occlusie (pMCAO). In dit model, we chirurgisch MCA bloot in de volwassen rat en vervolgens af te sluiten via dubbele ligatuur en doorsnijding van het schip. Dit pMCAO blokkeert het proximale corticale tak van MCA, waardoor ischemie in alle MCA corticale gebied, een groot deel van de cortex. Deze methode van occlusie kan ook worden gebruikt om meer distale delen van corticale vaartuigen afsluiten om meer focale ischemie gericht op een kleiner gebied van de cortex bereiken. De belangrijkste nadelen van pMCAO zijn dat de chirurgische procedure enigszins invasief kleine craniotomie is nodig voor MCA, maar dit resulteert in minimale weefselbeschadiging. De belangrijkste voordelen van dit model zijn echter: de occlusieplaats goed gedefinieerd, de mate van verminderde doorbloeding is consistent, functioneel en neurologische stoornis treedt snel, infarctgrootte is consistent, en de hoge overleving maakt lange term chronische evaluatie.

Succesvolle occlusie van een vat kan worden bevestigd met laser speckle imaging (LSI) onder bloedstroom beeldvormingstechnieken. De bloedstroom in de belangrijkste corticale takken van MCA moet dalen tot ~ 25% van de uitgangswaarde of minder na een occlusie afhankelijk van het niveau van ruis in het opnamesysteem en de gevoeligheid van de techniek. Zie Figuur 3 voor een representatieve LSI beeld van een segment van een corticale tak van MCA voor en na MCA occlusie. Wanneer de occlusie b...

Watch this Scientific Journal Video about Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection at JoVE.com

Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection

We beschrijven een zeer reproduceerbare werkwijze voor de permanente occlusie van een knaagdier grote cerebrale bloedvat. Deze techniek kan worden bereikt met zeer weinig perifere schade minimaal bloedverlies, een hoog percentage overleving op lange termijn en consistente infarct volume evenredig met de klinische populatie.

Permanente Cerebrale vatocclusie<em&gt; Via</em&gt; Dubbele Ligatuur en doorsnijding

Stroke is a leading cause of death, disability, and socioeconomic loss worldwide. The majority of all strokes result from an interruption in blood flow ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection

Modeling Stroke in Mice - Middle Cerebral Artery Occlusion with the Filament Model

Modellering Stroke in Muizen - midden cerebrale slagader occlusie met de gloeidraad Model

Stroke is among the most frequent causes of death and adult disability, especially in highly developed countries. However, treatment options to date are ...

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

Muis model van de midden cerebrale slagader Occlusion

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

The Application Of Permanent Middle Cerebral Artery Ligation in the Mouse

De toepassing van permanente midden cerebrale slagader Ligatie in de muis

Focal cerebral ischemia is among the most common type of stroke seen in patients. Due to the clinical significance there has been a prolonged effort to ...

Utilizing a Cranial Window to Visualize the Middle Cerebral Artery During Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion

Met behulp van een Craniale venster om de midden cerebrale slagader Visualiseer Tijdens Endotheline-1 geïnduceerde midden cerebrale slagader occlusie

Creation of a cranial window is a method that allows direct visualization of structures on the cortical surface of the brain1-3. This technique can be ...

2-Vessel Occlusion/Hypotension: A Rat Model of Global Brain Ischemia

2-Vessel Occlusie / Hypotensie: een rat model van Global Brain Ischemie

Cardiac arrest followed by resuscitation often results in dramatic brain damage caused by ischemia and subsequent reperfusion of the brain. Global brain ...

Optimized System for Cerebral Perfusion Monitoring in the Rat Stroke Model of Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion

Geoptimaliseerde Systeem voor cerebrale perfusie Monitoring in het Rat Stroke Model van intraluminale midden cerebrale slagader occlusie

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal ...

Modeling Stroke in Mice: Permanent Coagulation of the Distal Middle Cerebral Artery

Modellering Stroke in Muizen: Permanente Coagulatie van de distale midden cerebrale slagader

Stroke is the third most common cause of death and a main cause of acquired adult disability in developed countries. Only very limited therapeutical ...

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

Embolische midden cerebrale slagader occlusie (MCAO) voor ischemische beroerte met homologe bloedstolsels in Ratten

Clinically, thrombolytic therapy with use of recombinant tissue plasminogen activator (tPA) remains the most effective treatment for acute ischemic ...

Stereological and Flow Cytometry Characterization of Leukocyte Subpopulations in Models of Transient or Permanent Cerebral Ischemia

Stereological en flowcytometrie Karakterisering van leukocytsubpopulaties in Modellen van voorbijgaande of blijvende cerebrale ischemie

Microglia activation, as well as extravasation of haematogenous macrophages and neutrophils, is believed to play a pivotal role in brain injury after ...

Quantification of Neurovascular Protection Following Repetitive Hypoxic Preconditioning and Transient Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Kwantificering van Neurovasculaire Protection Na Repetitive Hypoxische Voorconditionering en Transient midden cerebrale slagader Occlusie in Muizen

Experimental animal models of stroke are invaluable tools for understanding stroke pathology and developing more effective treatment strategies. A 2 week ...