Name: preparation of the mgm101 recombination protein by mbp-based tagging strategy
Uploaded: 2013-06-25T14:00:00
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हम ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी में मदद के लिए स्टीफन Wilkens धन्यवाद. इस काम के स्वास्थ्य अनुदान R01AG023731 के राष्ट्रीय संस्थान द्वारा समर्थित किया गया था.

पिछले अध्ययनों Mgm101 के पहले एमिनो टर्मिनल 22 अवशेषों माइटोकांड्रिया 19 में आयात के बाद cleaved रहे हैं कि पता चला है. Escherichia कोलाई में अभिव्यक्ति के लिए, पहले 22 कोडोन कमी MGM101 खुला पढ़ने फ्रेम पीसीआर से परि...

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	<li>San Filippo, J., Sung, P., Klein, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+eukaryotic+homologous+recombination.">Mechanism of eukaryotic homologous recombination.</a> Annu. Rev. Biochem. 77, 229-257 (2008).</li><li>Bishop, D. K., Park, D., Xu, L., Kleckner, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DMC1:+a+meiosis-specific+yeast+homolog+of+E.+coli+recA+required+for+recombination,+synaptonemal+complex+formation,+and+cell+cycle+progression.">DMC1: a meiosis-specific yeast homolog of E. coli recA required for recombination, synaptonemal complex formation, and cell cycle progression.</a> Cell. 69, 439-456 (1992).</li><li>Shinohara, A., Ogawa, H., Ogawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rad51+protein+involved+in+repair+and+recombination+in+S.+cerevisiae+is+a+RecA-like+protein.">Rad51 protein involved in repair and recombination in S. cerevisiae is a RecA-like protein.</a> Cell. 69, 457-470 (1992).</li><li>Passy, S. 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H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Domain+structure+and+dynamics+in+the+helical+filaments+formed+by+RecA+and+Rad51+on+DNA.">Domain structure and dynamics in the helical filaments formed by RecA and Rad51 on DNA.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 98, 8419-8424 (2001).</li><li>Conway, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Crystal+structure+of+a+Rad51+filament.">Crystal structure of a Rad51 filament.</a> Nat. Struct. Mol. Biol. 11, 791-796 (2004).</li><li>Bai, Y., Davis, A. P., Symington, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+allele+of+RAD52+that+causes+severe+DNA+repair+and+recombination+deficiencies+only+in+the+absence+of+RAD51+or+RAD59.">A novel allele of RAD52 that causes severe DNA repair and recombination deficiencies only in the absence of RAD51 or RAD59.</a> Genetics. 153, 1117-1130 (1999).</li><li>Bai, Y., Symington, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Rad52+homolog+is+required+for+RAD51-independent+mitotic+recombination+in+Saccharomyces+cerevisiae.">A Rad52 homolog is required for RAD51-independent mitotic recombination in Saccharomyces cerevisiae.</a> Genes Dev. 10, 2025-2037 (1996).</li><li>Paques, F., Haber, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+pathways+of+recombination+induced+by+double-strand+breaks+in+Saccharomyces+cerevisiae.">Multiple pathways of recombination induced by double-strand breaks in Saccharomyces cerevisiae.</a> Microbiol. Mol. Biol. Rev. 63, 349-404 (1999).</li><li>Lopes, A., Amarir-Bouhram, J., Faure, G., Petit, M. A., Guerois, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+novel+recombinases+in+bacteriophage+genomes+unveils+Rad52,+Rad51+and+Gp2.5+remote+homologs.">Detection of novel recombinases in bacteriophage genomes unveils Rad52, Rad51 and Gp2.5 remote homologs.</a> Nucleic Acids Res. 38, 3952-3962 (2010).</li><li>Poteete, A. R., Sauer, R. T., Hendrix, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Domain+structure+and+quaternary+organization+of+the+bacteriophage+P22+Erf+protein.">Domain structure and quaternary organization of the bacteriophage P22 Erf protein.</a> J. Mol. Biol. 171, 401-418 (1983).</li><li>Passy, S. I., Yu, X., Li, Z., Radding, C. M., Egelman, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rings+and+filaments+of+beta+protein+from+bacteriophage+lambda+suggest+a+superfamily+of+recombination+proteins.">Rings and filaments of beta protein from bacteriophage lambda suggest a superfamily of recombination proteins.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 96, 4279-4284 (1999).</li><li>Ploquin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+and+structural+basis+for+a+bacteriophage+homolog+of+human+RAD52.">Functional and structural basis for a bacteriophage homolog of human RAD52.</a> Curr. Biol. 18, 1142-1146 (2008).</li><li>Chen, X. J., Guan, M. X., Clark-Walker, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MGM101,+a+nuclear+gene+involved+in+maintenance+of+the+mitochondrial+genome+in+Saccharomyces+cerevisiae.">MGM101, a nuclear gene involved in maintenance of the mitochondrial genome in Saccharomyces cerevisiae.</a> Nucl. Acids Res. 21, 3473-3477 (1993).</li><li>Meeusen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mgm101p+is+a+novel+component+of+the+mitochondrial+nucleoid+that+binds+DNA+and+is+required+for+the+repair+of+oxidatively+damaged+mitochondrial+DNA.">Mgm101p is a novel component of the mitochondrial nucleoid that binds DNA and is required for the repair of oxidatively damaged mitochondrial DNA.</a> J. Cell Biol. 145, 291-304 (1999).</li><li>Mbantenkhu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mgm101+is+a+Rad52-related+protein+required+for+mitochondrial+DNA+recombination.">Mgm101 is a Rad52-related protein required for mitochondrial DNA recombination.</a> J. Biol. Chem. 286, 42360-42370 (2011).</li><li>Nardozzi, J. D., Wang, X., Mbantenkhu, M., Wilkens, S., Chen, X. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+properly+configured+ring+structure+is+critical+for+the+function+of+the+mitochondrial+DNA+recombination+protein.">A properly configured ring structure is critical for the function of the mitochondrial DNA recombination protein.</a> Mgm101. J. Biol. Chem. 287, 37259-37268 (2012).</li><li>Zuo, X., Xue, D., Li, N., Clark-Walker, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+functional+core+of+the+mitochondrial+genome+maintenance+protein+Mgm101p+in+Saccharomyces+cerevisiae+determined+with+a+temperature-conditional+allele.">A functional core of the mitochondrial genome maintenance protein Mgm101p in Saccharomyces cerevisiae determined with a temperature-conditional allele.</a> FEMS Yeast Res. 7, 131-140 (2007).</li><li>Itoh, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA+packaging+proteins+Glom+and+Glom2+coordinately+organize+the+mitochondrial+nucleoid+of+Physarum+polycephalum.">DNA packaging proteins Glom and Glom2 coordinately organize the mitochondrial nucleoid of Physarum polycephalum.</a> Mitochondrion. 11, 575-586 (2011).</li><li>Janicka, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+RAD52-like+single-stranded+DNA+binding+protein+affects+mitochondrial+DNA+repair+by+recombination.">A RAD52-like single-stranded DNA binding protein affects mitochondrial DNA repair by recombination.</a> Plant J. 72, 423-435 (2012).</li></ol>

यह ई. से एक स्थिर, देशी पुनः संयोजक Mgm101 प्रोटीन का उत्पादन करने के लिए एक चुनौती रहा है बैक्टीरियल कोशिकाओं में इसकी जटिलता को संभवतः कारण कोलाई. इस रिपोर्ट में, हम इस MBP-संलयन रणनीति प्रोटीन एक काफी...

मुताबिक़ पुनर्संयोजन डबल भूग्रस्त टूटता है की मरम्मत (DSBs) और interstrand crosslinks, के लिए और ढह प्रतिकृति कांटे 1 से डीएनए प्रतिकृति के reinitiation के लिए महत्वपूर्ण है. पारंपरिक मुताबिक़ पुनर्संयोजन में, केंद्रीय प्रतिक्रिया प्रोकीर्योट्स में RECA, और RAD51 और 1-3 eukaryotes में Dmc1 सहित एटीपी निर्भर recombinases द्वारा उत्प्रेरित है. ये recombinases द्वैध डीएनए टेम्पलेट (चित्रा 1, बाएं पैनल) 4-7 भीतर अनुरूपता खोज और किनारा आक्रमण की शुरुआत करने के लिए आवश्यक हैं जो ssDNA, पर nucleoprotein तंतु के रूप में. पारंपरिक योजना के अलावा, मुताबिक़ पुनर्संयोजन भी एक RecA/Rad51-independent तरीके से (चित्रा 1, सही पैनल) में जगह नहीं ले सकता. उदाहरण के लिए, खमीर Rad52 और Rad59 प्रोटीन सीधे dsDNA टूट की resectioning से सामने आ रहे हैं जो पूरक ssDNA किस्में annealing उत्प्रेरित कर सकते हैं. गाने के रूप में जाना जाता है यह पुनर्संयोजन प्रक्रिया,ले किनारा annealing, आम तौर पर मुताबिक़ dsDNA टेम्पलेट्स के साथ जोड़ी को शामिल नहीं करता. Annealing के बाद, heterologous पूंछ exonucleases से हटा रहे हैं और nicks जीनोम निरंतरता 8-10 बहाल करने के लिए ligated हैं. भी कतरा annealing तंत्र द्वारा मरम्मत अक्सर सीधे दोहराया क्षेत्रों के बीच जीनोमिक दृश्यों के विलोपन के साथ है. Rad52 bacteriophages 11 के बीच व्यापक हैं कि पुनर्संयोजन प्रोटीन की एक विविध समूह के अंतर्गत आता है. ये प्रोटीन भी मुताबिक़ एकल असहाय डीएनए अणु की annealing को बढ़ावा देने में उनकी गतिविधियों के आधार पर भी कतरा एनीलिंग प्रोटीन (SSAPs) के रूप में जाना जाता है. सर्वश्रेष्ठ विशेषता जीवाणुभोजी SSAPs Redβ और lactococcal फेज ul36 से prophage आरएसी और Sak प्रोटीन से bacteriophages λ और P22, रंगरूट से ERF हैं. समानता लगभग undetect है हालांकि SSAPs संरचनात्मक रूप से, एक ठेठ β-β-β-α गुना की विशेषता हैउनकी प्राथमिक दृश्यों में सक्षम. 10 की वे सभी फार्म बड़े होमोसेक्सुअल oligomeric छल्ले - विट्रो 12-14 में 14 गुना समरूपता. इस विशेषता उच्च आदेश संरचनात्मक संगठन के कार्यात्मक प्रभाव अच्छी तरह से नहीं समझा गया है. हम mitochondrial जीनोम में मुताबिक़ पुनर्संयोजन के तंत्र को समझने में रुचि रखते हैं. हम पहले से Saccharomyces cerevisiae 15 में mtDNA के रखरखाव के लिए आवश्यक है कि MGM101 जीन की पहचान की है. MGM101 बाद मितोचोन्द्रिअल nucleoids साथ जुड़ा होना पाया गया था और डीएनए हानिकारक एजेंटों के लिए mtDNA की सहिष्णुता 16 के लिए आवश्यक है. हालांकि, Mgm101 का अध्ययन पुनः संयोजक Mgm101 निर्माण करने के लिए कठिनाई से पिछले एक दशक में वापस आयोजित किया गया है. हमने हाल ही में ई. से बड़ी मात्रा में घुलनशील Mgm101 का निर्माण करने में सफल रहा है इस MBP-संलयन रणनीति का प्रयोग कोलाई. यह हमें उस Mgm101 शेयरों का प्रदर्शन करने के लिए सक्षम हैप्रोटीन 17,18 के Rad52 परिवार के साथ जैव रासायनिक और संरचनात्मक समानता. इस रिपोर्ट में, एक तीन कदम शोधन प्रक्रिया सजातीय Mgm101for जैव रासायनिक और संरचनात्मक विश्लेषण (चित्रा 2) पैदा करता है, जो वर्णन किया गया है.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Name of Reagent/Material</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Expression vector pMAL-c2E</td>
			<td>New England Biolabs</td>
			<td>#N8066S</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PreScission Protease</td>
			<td>GE Healthcare Life Sciences</td>
			<td>#27-0843-01</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BL21-CodonPlus(DE3)-RIL cells</td>
			<td>Strategene</td>
			<td>#230245</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leupeptin</td>
			<td>Roche Applied Science</td>
			<td>#11034626001</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pepstatin</td>
			<td>Roche Applied Science</td>
			<td>#11359053001</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF)</td>
			<td>Roche Applied Science</td>
			<td>#10837091001</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNAse I</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>#DN25-1G</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopropyl &beta;-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG)</td>
			<td>Roche Applied Science</td>
			<td>#11411446001</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amylose resin</td>
			<td>New England Biolabs</td>
			<td>#E8021L</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Econo-Column chromatography column</td>
			<td>BIO-RAD</td>
			<td>#7372512</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bio-Scale Mini Macro-Prep High S cartridge (1 ml)</td>
			<td>BIO-RAD</td>
			<td>#732-4130</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VIVASPIN 15R Ultrafiltration spin column (10,000 MWCO)</td>
			<td>Sartorius Stedium</td>
			<td>#VS15RH02</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Superose 6 prep grade column</td>
			<td>Amersham Bioscirnces</td>
			<td>#17-0489-01</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VIVASPIN 6 Ultrafiltration spin column (5,000 MWCO)</td>
			<td>Sartorius Stedium</td>
			<td>#VS0611</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparation of the mgm101 recombination protein by mbp-based tagging strategy

MGM101 जीन mitochondrial डीएनए के रखरखाव में अपनी भूमिका के लिए 20 साल पहले की पहचान की थी. कई समूहों से अध्ययन Mgm101 प्रोटीन mitochondrial डीएनए के recombinational मरम्मत में शामिल है कि सुझाव दिया है. हाल ही में जांच Mgm101 Rad52 प्रकार पुनर्संयोजन प्रोटीन परिवार से संबंधित है कि संकेत दिया है. ये प्रोटीन बड़े oligomeric के छल्ले के रूप में और मुताबिक़ एकल असहाय डीएनए अणु की annealing बढ़ावा. हालांकि, Mgm101 के लक्षण वर्णन पुनः संयोजक प्रोटीन का निर्माण करने में कठिनाई द्वारा बाधा कर दिया गया है. इधर, पुनः संयोजक Mgm101 की तैयारी के लिए एक विश्वसनीय प्रक्रिया में वर्णित है. Maltose बाइंडिंग प्रोटीन (MBP) टैग Mgm101 पहले Escherichia कोलाई में व्यक्त किया है. संलयन प्रोटीन शुरू में एमाइलोज आत्मीयता क्रोमैटोग्राफी द्वारा शुद्ध होता है. Proteolytic दरार से रिहा होने के बाद, Mgm101 धनायनित विनिमय क्रोमैटोग्राफी द्वारा MBP से अलग किया जाता है. Monodispersed Mgm101 तो प्राप्त की हैआकार अपवर्जन क्रोमैटोग्राफी द्वारा. जीवाणु संस्कृति के प्रति लीटर Mgm101 की ~ 0.87 मिलीग्राम की एक उपज नियमित रूप से प्राप्त किया जा सकता है. पुनः संयोजक Mgm101 डीएनए की न्यूनतम संदूषण है. तैयार नमूने सफलतापूर्वक Mgm101 की, जैव रासायनिक संरचनात्मक और एक कण छवि विश्लेषण के लिए उपयोग किया जाता है. इस प्रोटोकॉल भी misfolded और बैक्टीरियल कोशिकाओं को विषाक्त हो सकता है कि अन्य बड़े oligomeric डीएनए बाध्यकारी प्रोटीन की तैयारी के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.

Mgm101 माइटोकांड्रिया में एक Rad52 संबंधी पुनर्संयोजन प्रोटीन है. Rad52 बड़े पैमाने पर mitochondrial डीएनए पुनर्संयोजन (चित्रा 1) में अपनी भूमिका के लिए अध्ययन किया गया है. संयोजक Mgm101 एक तीन कदम प्रक्रिया (चित्रा 2)...

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Preparation of the Mgm101 Recombination Protein by MBP-based Tagging Strategy

खमीर मितोचोन्द्रिअल nucleoid प्रोटीन, Mgm101, बड़े oligomeric छल्ले कि रूपों एक Rad52 प्रकार पुनर्संयोजन प्रोटीन है. एक प्रोटोकॉल माल्टोस बाइंडिंग प्रोटीन (MBP) टैगिंग कटियन विनिमय और आकार अपवर्जन क्रोमैटोग्राफी के साथ मिलकर रणनीति का प्रयोग घुलनशील पुनः संयोजक Mgm101 तैयार करने के लिए वर्णित है.

MBP आधारित टैगिंग रणनीति से Mgm101 पुनर्संयोजन प्रोटीन की तैयारी

The MGM101 gene was identified 20 years ago for its role in the maintenance of mitochondrial DNA. Studies from several groups have suggested that the ...

Research

JoVE Journal

Biology

Predicting the Effectiveness of Population Replacement Strategy Using Mathematical Modeling

जनसंख्या रिप्लेसमेंट रणनीति की प्रभावशीलता की भविष्यवाणी गणितीय मॉडलिंग का प्रयोग

Charles Taylor and John Marshall explain the utility of mathematical modeling for evaluating the effectiveness of population replacement strategy.  ...

Staining of Proteins in Gels with Coomassie G-250 without Organic Solvent and Acetic Acid

कार्बनिक सॉल्वेंट और एसिटिक एसिड के बिना जी 250 Coomassie के साथ जैल में प्रोटीन की धुंधला

In classical protein staining protocols using Coomassie Brilliant Blue (CBB), solutions with high contents of toxic and flammable organic solvents ...

Using the GELFREE 8100 Fractionation System for Molecular Weight-Based Fractionation with Liquid Phase Recovery

आण्विक Fractionation वजन के आधार के लिए तरल चरण रिकवरी के साथ GELFREE 8100 Fractionation प्रणाली का उपयोग

The GELFREE 8100 Fractionation System is a novel protein fractionation system designed to maximize protein recovery during molecular weight based ...

Identifying the Effects of BRCA1 Mutations on Homologous Recombination using Cells that Express Endogenous Wild-type BRCA1

कोशिकाओं है कि एक्सप्रेस अंतर्जात बीआरसीए 1 जंगली प्रकार का उपयोग मुताबिक़ पुनर्संयोजन पर बीआरसीए 1 उत्परिवर्तन के प्रभाव की पहचान

The functional analysis of missense mutations can be complicated by the presence in the cell of the endogenous protein. Structure-function analyses of the ...

Genetic Modification and Recombination of Salivary Gland Organ Cultures

जेनेटिक और लार ग्रंथि अंग संस्कृति का संशोधन पुनर्संयोजन

Branching  morphogenesis occurs during the development of many organs, and the embryonic  mouse submandibular gland (SMG) is a classical model for the ...

Improving the Success Rate of Protein Crystallization by Random Microseed Matrix Screening

रैंडम Microseed मैट्रिक्स स्क्रीनिंग द्वारा प्रोटीन crystallization की सफलता की दर में सुधार

Random microseed matrix screening  (rMMS) is a protein crystallization technique in which seed crystals are added  to random screens. By increasing the ...

Preparation of Segmented Microtubules to Study Motions Driven by the Disassembling Microtubule Ends

Disassembling Microtubule रुप से प्रेरित प्रस्ताव का अध्ययन करने के खंडों सूक्ष्मनलिकाएं तैयारी

Microtubule depolymerization can provide force to transport different protein complexes and protein-coated beads in vitro. The underlying mechanisms are ...

Green Fluorescent Protein-based Expression Screening of Membrane Proteins in Escherichia coli

Green Fluorescent Protein-based Expression Screening of Membrane Proteins in Escherichia coli

झिल्ली प्रोटीन की हरी फ्लोरोसेंट प्रोटीन आधारित अभिव्यक्ति स्क्रीनिंग में<em&gt; Escherichia कोलाई</em

The production of recombinant membrane proteins for structural and functional studies remains technically challenging due to low levels of expression and ...

Fecal Glucocorticoid Analysis: Non-invasive Adrenal Monitoring in Equids

मलीय Glucocorticoid विश्लेषण: Equids में गैर-आक्रामक अधिवृक्क निगरानी

Adrenal activity can be assessed in the equine species by analysis of feces for corticosterone metabolites. During a potentially aversive situation, ...

Detecting Protein Subcellular Localization by Green Fluorescence Protein Tagging and 4',6-Diamidino-2-phenylindole Staining in Caenorhabditis elegans

Detecting Protein Subcellular Localization by Green Fluorescence Protein Tagging and 4',6-Diamidino-2-phenylindole Staining in Caenorhabditis elegans

ग्रीन प्रतिदीप्ति प्रोटीन टैगिंग और 4 ', 6-Diamidino-2-phenylindole धुंधला Caenorhabditis एलिगेंस में द्वारा प्रोटीन उपसेलुलर स्थानीयकरण का पता लगाने