Name: transplantation into the anterior chamber of the eye for longitudinal, non-invasive in vivo imaging with single-cell resolution in real-time
Uploaded: 2013-03-10T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Transplantation into the Anterior Chamber of the Eye for Longitudinal, Non-invasive In vivo Imaging with Single-cell Resolution in Real-time at JoVE.com

Vi erkjenner Drs. Camillo Ricordi, Antonello Pileggi, R. Damaris Molano, Stephan Speier og Daniel Nyqvist for fruktbare diskusjoner. Vi vil også takke Eleut Hernandez og Diego Espinosa-Heidmann for teknisk assistanse, og Mike Valdes og Margaret Formoso for hjelp med videoopptak. Byron Maldonado registrert, redigert og produsert den endelige videoen. Forskningsstøtte ble gitt av Diabetes Research Institute Foundation ( <a href="http://www.DiabetesResearch.org" target="_blank">www.DiabetesResearch.org</a> ), NIH / NIDDK / NIAID (F32DK083226 til MHA, NIH RO3DK075487 til AC; U01DK089538 til PO.B.). Ytterligere forskning støtte til PO.B ble gitt gjennom midler fra Karolinska Institutet, det svenske Vetenskapsrådet, den svenske Diabetes Foundation, Family Erling-Persson Foundation, familien Knut og Alice Wallenberg Foundation, Skandia Insurance Company Ltd, VIBRANT ( FP7-228933-2), strategisk forskningsprogram i Diabetes ved Karolinska Institutet, Novo Nordisk Fonden, og Berth von Kantzow stiftelse.

Følgende prosedyre utføres under stereoskop i 2 trinn, innebærer det første trinnet lasting holmene inn kanylen og det andre trinnet er den faktiske transplantasjon i ACE. Alle prosedyrer utført på dyr ble godkjent av den institusjonelle dyr omsorg og bruk komité (IACUC) ved Universitetet i Miami. 1. Lasting Islets i Kanyle for transplantasjon <ol><li> Senter holmer i kultur tallerken ved å spinne rett i innsnevring sirkler. </li><li> Koble kanylen fra &quot;reservoar&quot; og plas...

<ol>
	<li>Weigert, R., Sramkova, M., Parente, L., Amornphimoltham, P., Masedunskas, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravital+microscopy:+a+novel+tool+to+study+cell+biology+in+living+animals.">Intravital microscopy: a novel tool to study cell biology in living animals.</a> Histochem. Cell Biol. 133 (5), 481-491 (2010).</li><li>Leibiger, I. B., Caicedo, A., Berggren, P. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-invasive+in+vivo+imaging+of+pancreatic+?-cell+function+and+survival+-+a+perspective.">Non-invasive in vivo imaging of pancreatic ?-cell function and survival - a perspective.</a> Acta Physiol. (Oxf). , (2011).</li><li>Wang, Y., Maslov, K., Kim, C., Hu, S., Wang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrated+photoacoustic+and+fluorescence+confocal+microscopy.">Integrated photoacoustic and fluorescence confocal microscopy.</a> IEEE Trans Biomed. Eng. 57 (10), 2576-2578 (2010).</li><li>Ntziachristos, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Going+deeper+than+microscopy:+the+optical+imaging+frontier+in+biology.">Going deeper than microscopy: the optical imaging frontier in biology.</a> Nat. Methods. 7, 603-614 (2010).</li><li>Aswathy, R. G., Yoshida, Y., Maekawa, T., Kumar, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Near-infrared+quantum+dots+for+deep+tissue+imaging.">Near-infrared quantum dots for deep tissue imaging.</a> Anal. Bioanal Chem. 397 (4), 1417-1435 (2010).</li><li>Ghoroghchian, P. P., Therien, M. J., Hammer, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+fluorescence+imaging:+a+personal+perspective.">In vivo fluorescence imaging: a personal perspective.</a> Wiley Interdiscip Rev. Nanomed Nanobiotechnol. 1 (2), 156-167 (2009).</li><li>Prescher, A., Mory, C., Martin, M., Fiedler, M., Uhlmann, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+FTY720+treatment+on+postischemic+pancreatic+microhemodynamics.">Effect of FTY720 treatment on postischemic pancreatic microhemodynamics.</a> Transplant Proc. 42 (10), 3984-3985 (2010).</li><li>Leblond, F., Davis, S., Vald&#233;s, P., Pogue, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pre-clinical+whole-body+fluorescence+imaging:+Review+of+instruments,+methods+and+applications.">Pre-clinical whole-body fluorescence imaging: Review of instruments, methods and applications.</a> J. Photochem. Photobiol. B. 98 (1), 77-94 (2010).</li><li>Toso, C., Vallee, J. P., Morel, P., Ris, F., Demuylder-Mischler, S., Lepetit-Coiffe, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+magnetic+resonance+imaging+of+pancreatic+islet+grafts+after+iron+nanoparticle+labeling.">Clinical magnetic resonance imaging of pancreatic islet grafts after iron nanoparticle labeling.</a> Am. J. Transplant. 8 (3), 701-706 (2008).</li><li>Denk, W., Strickler, J. H., Webb, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two-photon+laser+scanning+fluorescence+microscopy.">Two-photon laser scanning fluorescence microscopy.</a> Science. 248 (4951), 73-76 (1990).</li><li>Wang, B. G., Konig, K., Halbhuber, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two-photon+microscopy+of+deep+intravital+tissues+and+its+merits+in+clinical+research.">Two-photon microscopy of deep intravital tissues and its merits in clinical research.</a> J. Microsc. 238 (1), 1-20 (2010).</li><li>Denk, W., Delaney, K. R., Gelperin, A., Kleinfeld, D., Strowbridge, B. W., Tank, D. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomical+and+functional+imaging+of+neurons+using+2-photon+laser+scanning+microscopy.">Anatomical and functional imaging of neurons using 2-photon laser scanning microscopy.</a> J. Neurosci. Methods. 54 (2), 151-162 (1994).</li><li>Cahalan, M. D., Parker, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Choreography+of+cell+motility+and+interaction+dynamics+imaged+by+two-photon+microscopy+in+lymphoid+organs.">Choreography of cell motility and interaction dynamics imaged by two-photon microscopy in lymphoid organs.</a> Annu. Rev. Immunol. 26, 585-626 (2008).</li><li>Khorshidi, M. A., Vanherberghen, B., Kowalewski, J. M., Garrod, K. R., Lindstrom, S., Andersson-Svahn, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+transient+migration+behavior+of+natural+killer+cells+imaged+in+situ+and+in+vitro.">Analysis of transient migration behavior of natural killer cells imaged in situ and in vitro.</a> Integr. Biol. (Camb). 3 (7), 770-778 (2011).</li><li>Matheu, M. P., Cahalan, M. D., Parker, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunoimaging:+studying+immune+system+dynamics+using+two-photon+microscopy.">Immunoimaging: studying immune system dynamics using two-photon microscopy.</a> Cold Spring Harb. Protoc. 2011, pdb.top99 (2011).</li><li>Celli, S., Albert, M. L., Bousso, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualizing+the+innate+and+adaptive+immune+responses+underlying+allograft+rejection+by+two-photon+microscopy.">Visualizing the innate and adaptive immune responses underlying allograft rejection by two-photon microscopy.</a> Nat. Med. , (2011).</li><li>Fan, Z., Spencer, J., Lu, Y., Pitsillides, C., Singh, G., Kim, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+tracking+of+'color-coded'+effector,+natural+and+induced+regulatory+T+cells+in+the+allograft+response.">In vivo tracking of 'color-coded' effector, natural and induced regulatory T cells in the allograft response.</a> Nat. Med. 16 (6), 718-722 (2010).</li><li>Sabek, O., Gaber, M. W., Wilson, C. M., Zawaski, J. A., Fraga, D. W., Gaber, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+human+islet+vascularization+using+a+dorsal+window+model.">Imaging of human islet vascularization using a dorsal window model.</a> Transplant Proc. 42 (6), 2112-2114 (2010).</li><li>Coppieters, K., Martinic, M. M., Kiosses, W. B., Amirian, N., von Herrath, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+technique+for+the+in+vivo+imaging+of+autoimmune+diabetes+development+in+the+pancreas+by+two-photon+microscopy.">A novel technique for the in vivo imaging of autoimmune diabetes development in the pancreas by two-photon microscopy.</a> PLoS One. 5 (12), e15732 (2010).</li><li>Martinic, M. M., von Herrath, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+imaging+of+the+pancreas+during+development+of+diabetes.">Real-time imaging of the pancreas during development of diabetes.</a> Immunol Rev. 221, 200-213 (2008).</li><li>Mostany, R., Portera-Cailliau, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Method+for+2-Photon+Imaging+of+Blood+Flow+in+the+Neocortex+through+a+Cranial+Window.">A Method for 2-Photon Imaging of Blood Flow in the Neocortex through a Cranial Window.</a> J. Vis. Exp. (12), e678 (2008).</li><li>Palmer, G. M., Fontanella, A. N., Shan, S., Hanna, G., Zhang, G., Fraser, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+optical+molecular+imaging+and+analysis+in+mice+using+dorsal+window+chamber+models+applied+to+hypoxia,+vasculature+and+fluorescent.">In vivo optical molecular imaging and analysis in mice using dorsal window chamber models applied to hypoxia, vasculature and fluorescent.</a> 6 (9), 1355-1366 (2011).</li><li>Jain, R. K., Munn, L. L., Fukumura, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissecting+tumour+pathophysiology+using+intravital+microscopy.">Dissecting tumour pathophysiology using intravital microscopy.</a> Nat. Rev. Cancer. 2 (4), 266-276 (2002).</li><li>Taylor, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+response+of+capillary+endothelium+to+changes+in+intravascular+pressure,+as+seen+in+the+rabbit's+ear+chamber.">The response of capillary endothelium to changes in intravascular pressure, as seen in the rabbit's ear chamber.</a> Aust. J. Exp. Biol. Med. Sci. 31 (5), 533-543 (1953).</li><li>Shan, S., Sorg, B., Dewhirst, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+rodent+mammary+window+of+orthotopic+breast+cancer+for+intravital+microscopy.">A novel rodent mammary window of orthotopic breast cancer for intravital microscopy.</a> Microvasc. Res. 65 (2), 109-117 (2003).</li><li>Speier, S., Nyqvist, D., Cabrera, O., Yu, J., Molano, R. D., Pileggi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+in+vivo+imaging+of+pancreatic+islet+cell+biology.">Noninvasive in vivo imaging of pancreatic islet cell biology.</a> Nat. Med. 14 (5), 574-578 (2008).</li><li>Speier, S., Nyqvist, D., Kohler, M., Caicedo, A., Leibiger, I. B., Berggren, P. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+high-resolution+in+vivo+imaging+of+cell+biology+in+the+anterior+chamber+of+the+mouse+eye.">Noninvasive high-resolution in vivo imaging of cell biology in the anterior chamber of the mouse eye.</a> Nat. Protoc. 3 (8), 1278-1286 (2008).</li><li>Falck, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Site+of+production+of+oestrogen+in+the+ovary+of+the+rat.">Site of production of oestrogen in the ovary of the rat.</a> Nature. 184, 1082 (1959).</li><li>Bickford-Wimer, P., Granholm, A. C., Bygdeman, M., Hoffer, B., Olson, L., Seiger, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+fetal+cerebellar+and+cortical+tissue+transplanted+to+the+anterior+eye+chamber+of+athymic+rats:+electrophysiological+and+structural+studies.">Human fetal cerebellar and cortical tissue transplanted to the anterior eye chamber of athymic rats: electrophysiological and structural studies.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 84 (16), 5957-5961 (1987).</li><li>Adeghate, E., Donath, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+findings+in+long-term+pancreatic+tissue+transplants+in+the+anterior+eye+chamber+of+rats.">Morphological findings in long-term pancreatic tissue transplants in the anterior eye chamber of rats.</a> Pancreas. 5 (3), 298-305 (1990).</li><li>Abdulreda, M. H., Faleo, G., Molano, R. D., Lopez-Cabezas, M., Molina, J., Tan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution,+noninvasive+longitudinal+live+imaging+of+immune+responses.">High-resolution, noninvasive longitudinal live imaging of immune responses.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. , (2011).</li><li>Unutmaz, D., Xiang, W., Sunshine, M. J., Campbell, J., Butcher, E., Littman, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+primate+lentiviral+receptor+Bonzo/STRL33+is+coordinately+regulated+with+CCR5+and+its+expression+pattern+is+conserved+between+human+and+mouse.">The primate lentiviral receptor Bonzo/STRL33 is coordinately regulated with CCR5 and its expression pattern is conserved between human and mouse.</a> J. Immunol. 165 (6), 3284-3292 (2000).</li><li>Pileggi, A., Molano, R. D., Berney, T., Cattan, P., Vizzardelli, C., Oliver, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heme+oxygenase-1+induction+in+islet+cells+results+in+protection+from+apoptosis+and+improved+in+vivo+function+after+transplantation.">Heme oxygenase-1 induction in islet cells results in protection from apoptosis and improved in vivo function after transplantation.</a> Diabetes. 50 (9), 1983-1991 (2001).</li></ol>

Murine pankreatiske øyer ble isolert ved hjelp av kollagenase fordøyelsen etterfulgt av rensing på tetthetsgradienter, som beskrevet tidligere 33. Isolerte småøyer ble dyrket over natten før transplantasjon. Mens dette ikke kan være nødvendig, er det anbefalt å la holmene å gjenopprette fra isolasjon prosedyren. Dette er avgjørende når transplantasjon utføres i diabetiker mottakere som det vil sikre transplantasjon for å overleve / robuste holmer. Transplantasjon utf...

Fremskritt i intravital mikroskopi har avdekket fysiologiske fenomener ikke spådd av in vitro studier en. Dette understreker utfordringen med å oversette funn oppnådd ved konvensjonelle in vitro metoder i levende dyr. I det siste tiåret, ble visualisering av vev i levende dyr betydelig forbedret ved teknologiske fremskritt i bildediagnostikk 2, 3, 4, 5, 6. Dette har påvirket en behov for in vivo imaging tilnærminger med gjennomførbart program i eksperimentelle dyremodeller for å muliggjøre langsgående visualisering av målvev ikke-invasiv. Imaging-teknikker slik som magnetisk resonans imaging og positronemisjonstomografi eller Bioluminescens har aktivert ikke-invasiv avbildning av organer / vev dypt inne i kroppen 7-8, 9. Men disse teknikkene ikke kan oppnå enkelt celle-oppløsning på grunn av høy bakgrunnssignaler og lav romlig oppløsning, til tross for bruk of høy kontrast materialer eller vev-spesifikk luminescence 4. Dette ble adressert med bruk av to-foton fluorescens konfokalmikroskopi 10. To-foton mikroskopi aktivert intravital imaging studier for å visualisere og kvantifisere mobilnettet hendelser med enestående detaljer 11, 12. Dette har ført til karakterisering av sentrale biologiske prosesser i helse og sykdom 13, 14, 15, 16.. Mens banebrytende intravital imaging studier har primært &quot;etterlignet&quot; in vivo betingelser i excised vev (f.eks lymfeknuter), har andre studier benyttet invasive tilnærminger til bilde eksponerte målvev in situ 17, 18, ​​19, 20, 21. Andre studier har også brukt &quot;vindu kammer modeller&quot; for å omgå begrensninger knyttet invasive metoder og begrenset bildebehandling oppløsning i 22 vivo, 23, 24, 25. I vinduet kammeret modellen er et kammer med et gjennomsiktig vindu implantert inn i huden på diffeleie steder (dorsal eller øret hud, mammary fettpute, lever, osv.) på dyret (f.eks mus, rotte, kanin). Mens denne tilnærmingen klart gir høy oppløsning in vivo imaging, krever det en invasiv kirurgi for å implantere kammeret og kan ikke være i stand til å imøtekomme longitudinelle imaging studier over flere uker eller måneder 22. Det ble nylig vist at å kombinere høy oppløsning konfokalmikroskopi med en minimal invasiv prosedyre, nemlig transplantasjon i fremre kammer av øyet (ACE) gir en &quot;naturlig kropp vindu&quot; som et kraftig og allsidig in vivo imaging plattform 26, 27. Transplantasjon i ACE har vært brukt i de siste årtier å studere biologiske aspekter av en rekke 28 vev, 29, 30, og dens siste kombinasjon med høy oppløsning aktivert studere fysiologi pankreatiske øyer med enkeltcelle-oppløsning ikke- invasiv og lengderetningen &lt;sup&gt; 26, 27. Denne tilnærmingen ble brukt til å studere autoimmune reaksjoner under utvikling av type 1 diabetes i dyremodeller (upubliserte data). Det ble også brukt til å studere bukspyttkjertelen utvikling, samt, i studier av nyrefunksjon ved transplantere inn ACE pancreatic knopper eller individuelle renale glomeruli, henholdsvis (upubliserte data). En fersk rapport ved hjelp av denne tilnærmingen ytterligere demonstrert sin søknad for å studere immunresponser etter bukspyttkjertelen holme transplantasjon 31. Viktigere, viste denne studie at transplantasjon i fremre kammer av øyet gir en naturlig kropp vindu å utføre: (1) langsgående, ikke-invasiv avbildning av transplanterte vev in vivo, (2) in vivo cytolabeling å vurdere cellulær fenotype og levedyktighet i situ, (3) sanntids sporing av infiltrerende immunceller i målvevet, og (4) lokal intervensjon ved lokal applikasjon eller intraokulær injeksjon. Her D Viemonstrate hvordan å utføre transplantasjon i fremre kammer av øyet ved hjelp av pankreatiske øyer.

<table border="1"><tbody><tr><td> Navn på reagens </td><td> Selskapet </td><td> Katalognummer </td><td> Beskrivelse / Kommentarer </td></tr><tr><td> IsoTHESIA (isofluran) </td><td> Buttler Animal Health forsyning </td><td> 11695-6775-2 </td><td> 99,9% isofluran / ml </td></tr><tr><td> Ketaset (Ketamin HCL) </td><td> Fort Dodge Animal Health </td><td> 0856-2013-01 </td><td> Alternative injiserbare anestesi </td></tr><tr><td> Beprenex (Buprenorfin HCL) </td><td> Reckitt Benckiser Health Care (UK) Ltd </td><td> 12496-075-7-1 </td><td> 0,3 mg / ml </td></tr><tr><td> Erytromycin Ophthalmic salve USP, 0,5% </td><td> Akron </td><td> 17478-070-35 </td><td> Anvendt profylaktisk til transplanterte øyet </td></tr><tr><td> 0,9% natriumklorid (saltoppløsning) </td><td> Hospira Inc. </td><td> 0409-7983-03 </td><td> For iv injeksjon. Sterile </td></tr><tr><td> PBS </td><td> Gibco </td><td> 10010-023 </td><td> 1X. Sterile </td></tr><tr><td> CMRL medium 1066 </td><td> Cellgro </td><td> 98-304-CV </td><td> Supplert, CIT modifisering. Foretrukne medier for holmer </td></tr></tbody></table>

transplantation into the anterior chamber of the eye for longitudinal, non-invasive in vivo imaging with single-cell resolution in real-time

Intravital bildebehandling har dukket opp som et uunnværlig verktøy i biologisk forskning. I prosessen, har mange bildedannende teknikker blitt utviklet for å studere forskjellige biologiske prosesser i dyr ikke-invasiv. Imidlertid er en stor teknisk begrensning i eksisterende intravital bildediagnostikk manglende evne til å kombinere ikke-invasiv, langsgående avbildning med encellede løsningsmuligheter. Vi viser her hvordan transplantasjon i fremre kammer av øyet omgår slik betydelig begrensning tilbyr en allsidig eksperimentell plattform som muliggjør ikke-invasiv, langsgående avbildning med cellulær oppløsning in vivo. Vi viser til transplantasjon prosedyre i musen og gi representative resultater ved hjelp av en modell med klinisk relevans, nemlig bukspyttkjertelen holme transplantasjon. I tillegg til å aktivere direkte visualisering i en rekke vev transplantert inn i fremre kammer av øyet, gir denne tilnærmingen en plattform for å rasmarkn legemidler ved å utføre langsiktig oppfølging og overvåking i målet vev. På grunn av sin fleksibilitet, vev / celle transplantasjon i fremre kammer av øyet ikke bare fordeler transplantasjon terapier, strekker det i andre in vivo applikasjoner å studere fysiologiske og patofysiologiske prosesser som signaltransduksjon og kreft eller autoimmun sykdom utvikling.

Det er et par parametere som definerer en &quot;god&quot; transplantasjon. En god transplantasjon er en som går uten blødning når gjøre innsnitt som kan sees i videoen. Blødning forhindres / minimert ved å trenge bare spissen av skalpellen (nålen) i ACE (Figur 3a). Dette vil også bidra til å forhindre kontakt og punktering av iris. Det vil også sikre et lite snitt som vil gro godt uten forårsaker uklarhet i hornhinnen over tid (figur 3c, d). Et annet viktig aspekt i et vellyk...

Watch this Scientific Journal Video about Transplantation into the Anterior Chamber of the Eye for Longitudinal, Non-invasive In vivo Imaging with Single-cell Resolution in Real-time at JoVE.com

Transplantation into the Anterior Chamber of the Eye for Longitudinal, Non-invasive In vivo Imaging with Single-cell Resolution in Real-time

En ny tilnærming kombinere intraokulær transplantasjon og konfokalmikroskopi muliggjør langsgående, ikke-invasiv sanntids avbildning med encellede oppløsning innenfor podet vev<em&gt; In vivo</em&gt;. Vi viser hvordan å transplantere bukspyttkjertelen holmer i fremre kammer av musen øyet.

Transplantasjon i fremre kammer av øyet for Longitudinal, Ikke-invasive<em&gt; In vivo</em&gt; Imaging med encellede oppløsning i sanntid

Intravital imaging has emerged as an indispensable tool in biological research.  In the process, many imaging techniques have been developed to study ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Transplantation into the Anterior Chamber of the Eye for Longitudinal, Non-invasive In vivo Imaging with Single-cell Resolution in Real-time

High-frequency High-resolution Echocardiography: First Evidence on Non-invasive Repeated Measure of Myocardial Strain, Contractility, and Mitral Regurgitation in the Ischemia-reperfused Murine Heart

Ischemia-reperfusion (IR) was surgically performed in murine hearts which were then subjected to repeated imaging to monitor temporal changes in ...

Multispectral Real-time Fluorescence Imaging for Intraoperative Detection of the Sentinel Lymph Node in Gynecologic Oncology

The prognosis in virtually all solid tumors depends on the presence or absence of lymph node metastases.1-3 Surgical treatment most often combines radical ...

Non-invasive Imaging of Acute Allograft Rejection after Rat Renal Transplantation Using 18F-FDG PET

Non-invasive Imaging of Acute Allograft Rejection after Rat Renal Transplantation Using 18F-FDG PET

Non-invasiv Imaging av akutt rejeksjon etter Rat nyretransplantasjon hjelp<sup&gt; 18</sup&gt; F-FDG PET

The number of patients with end-stage renal  disease, and the number of kidney allograft recipients continuously increases.  Episodes of acute cellular ...

Development of an Audio-based Virtual Gaming Environment to Assist with Navigation Skills in the Blind

Utvikling av en Audio-baserte Virtual Gaming Environment for å bistå med Navigasjon Skills i Blind

Audio-based Environment Simulator (AbES) is virtual environment software designed to improve real world navigation skills in the blind. Using only audio ...

Chemotherapy-induced Vascular Toxicity - Real-time In vivo Imaging of Vessel Impairment

Chemotherapy-induced Vascular Toxicity - Real-time In vivo Imaging of Vessel Impairment

Cytostatikaindusert Vaskulær Toxicity - Real-time<em&gt; In vivo</em&gt; Imaging av Vessel Nedskrivning

Certain classes of chemotherapies may exert acute vascular changes that may progress into long-term conditions that may predispose the patient to an ...

Non-invasive Assessment of the Efficacy of New Therapeutics for Intestinal Pathologies Using Serial Endoscopic Imaging of Live Mice

Non-invasiv Vurdering av effekt av New Therapeutics for Intestinal Patologier Bruke Serial Endoskopisk Imaging av levende mus

Animal models of inflammatory bowel disease (IBD) and colorectal cancer (CRC) have provided significant insight into the cell intrinsic and extrinsic ...

Encapsulation Thermogenic Preadipocytes for Transplantation into Adipose Tissue Depots

Innkapsling Thermogenic preadipocytes for Transplantasjon inn fettvev depoter

Cell encapsulation was developed to entrap viable cells within semi-permeable membranes. The engrafted encapsulated cells can exchange low molecular ...

Extended Time-lapse Intravital Imaging of Real-time Multicellular Dynamics in the Tumor Microenvironment

Utvidet Time-lapse intra Imaging av Real-time Flercellede Dynamics i svulstens mikromiljø

In the tumor microenvironment, host stromal cells interact with tumor cells to promote tumor progression, angiogenesis, tumor cell dissemination and ...

Longitudinal In Vivo Imaging of the Cerebrovasculature: Relevance to CNS Diseases

Longitudinal In Vivo Imaging of the Cerebrovasculature: Relevance to CNS Diseases

longitudinal<em&gt; I Vivo</em&gt; Imaging av Cerebrovasculature: Relevans til CNS sykdommer

Remodeling of the brain vasculature is a common trait of brain pathologies. In vivo imaging techniques are fundamental to detect cerebrovascular ...

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Nytt Arterialized Rat delvis leveren transplantasjon med en i vivo fartøyet orienterte 70% Hepatectomy

Split liver transplantation and living liver donor liver transplantation were developed in the clinic to utilize liver organs in a more efficient manner. ...