Name: isolation and culture of mouse primary pancreatic acinar cells
Uploaded: 2013-08-13T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation and Culture of Mouse Primary Pancreatic Acinar Cells at JoVE.com

Wij danken het personeel van AniCan (CRCL, Lyon) voor hun technische bijstand met de verzorging van dieren. Dit werk werd ondersteund door het Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale (INSERM Avenir Program), de Ligue Nationale Contre le Cancer, door de Association pour la Recherche sur le Cancer, door het Institut National du Cancer, en door beurzen uit de Ligue Nationale Contre le Cancer (JG), van het Institut National du Cancer (JG), van het Ministère de l&#39;Enseignement Superieur et de la Recherche van Frankrijk (RMP en DFV) en van de Association pour la Recherche sur le Cancer ( DFV).

Alle procedures werden door een ethiek commissie goedgekeurd onder de regelgeving van overheidsgezag (&quot;Comite d&#39;Evaluation Commun au Centre Leon Berard, à l&#39;Animalerie de transit de l&#39;ENS, au PBES et au laboratoire P4&quot; (CECCAPP)). Muizen werden in een specifiek pathogeen-vrije dierlijke faciliteit in het &quot;Plateforme AniCan, Centre Leon Berard&quot; (Lyon, Frankrijk) onderhouden en behandeld in overeenstemming met de institutionele richtlijnen. Een schematische wee...

<ol>
	<li>Lardon, J., Bouwens, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metaplasia+in+the+pancreas.">Metaplasia in the pancreas.</a> Differentiation. 73, 278-286 (2005).</li><li>Sphyris, N., Logsdon, C. D., Harrison, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+retention+of+zymogen+granules+in+cultured+murine+pancreatic+acinar+cells+and+induction+of+acinar-ductal+transdifferentiation+in+vitro.">Improved retention of zymogen granules in cultured murine pancreatic acinar cells and induction of acinar-ductal transdifferentiation in vitro.</a> Pancreas. 30, 148-157 (2005).</li><li>Amsterdam, A., Jamieson, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+and+functional+characterization+of+isolated+pancreatic+exocrine+cells.">Structural and functional characterization of isolated pancreatic exocrine cells.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 69, 3028-3032 (1972).</li><li>Amsterdam, A., Jamieson, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+on+dispersed+pancreatic+exocrine+cells.+I.+Dissociation+technique+and+morphologic+characteristics+of+separated+cells.">Studies on dispersed pancreatic exocrine cells. I. Dissociation technique and morphologic characteristics of separated cells.</a> J. Cell. Biol. 63, 1037-1056 (1974).</li><li>Amsterdam, A., Jamieson, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+on+dispersed+pancreatic+exocrine+cells.+II.+Functional+characteristics+of+separated+cells.">Studies on dispersed pancreatic exocrine cells. II. Functional characteristics of separated cells.</a> J. Cell. Biol. 63, 1057-1073 (1974).</li><li>Schultz, G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guinea+pig+pancreatic+acini+prepared+with+purified+collagenase.">Guinea pig pancreatic acini prepared with purified collagenase.</a> Exp. Cell Res. 130, 49-62 (1980).</li><li>Williams, J. A., Korc, M., Dormer, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Action+of+secretagogues+on+a+new+preparation+of+functionally+intact,+isolated+pancreatic+acini.">Action of secretagogues on a new preparation of functionally intact, isolated pancreatic acini.</a> Am. J. Physiol. 235, 517-524 (1978).</li><li>Logsdon, C. D., Williams, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidermal+growth+factor+binding+and+biologic+effects+on+mouse+pancreatic+acini.">Epidermal growth factor binding and biologic effects on mouse pancreatic acini.</a> Gastroenterology. 85, 339-345 (1983).</li><li>Han, B., Logsdon, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cholecystokinin+induction+of+mob-1+chemokine+expression+in+pancreatic+acinar+cells+requires+NF-kappaB+activation.">Cholecystokinin induction of mob-1 chemokine expression in pancreatic acinar cells requires NF-kappaB activation.</a> Am. J. Physiol. 277, 74-82 (1999).</li><li>Ji, B., Kopin, A. S., Logsdon, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Species+differences+between+rat+and+mouse+CCKA+receptors+determine+the+divergent+acinar+cell+response+to+the+cholecystokinin+analog+JMV-180.">Species differences between rat and mouse CCKA receptors determine the divergent acinar cell response to the cholecystokinin analog JMV-180.</a> J. Biol. Chem. 275, 19115-19120 (2000).</li><li>Ji, K. A., Yang, M. S., Jou, I., Shong, M. H., Joe, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombin+induces+expression+of+cytokine-induced+SH2+protein+(CIS)+in+rat+brain+astrocytes:+involvement+of+phospholipase+A2,+cyclooxygenase,+and+lipoxygenase.">Thrombin induces expression of cytokine-induced SH2 protein (CIS) in rat brain astrocytes: involvement of phospholipase A2, cyclooxygenase, and lipoxygenase.</a> Glia. 48, 102-111 (2004).</li><li>Gaiser, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracellular+activation+of+trypsinogen+in+transgenic+mice+induces+acute+but+not+chronic+pancreatitis.">Intracellular activation of trypsinogen in transgenic mice induces acute but not chronic pancreatitis.</a> Gut. 60, 1379-1388 (2011).</li><li>Logsdon, C. D., Williams, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pancreatic+acinar+cells+in+monolayer+culture:+direct+trophic+effects+of+caerulein+in+vitro.">Pancreatic acinar cells in monolayer culture: direct trophic effects of caerulein in vitro.</a> Am. J. Physiol. 250, 440-447 (1986).</li><li>Stanger, B. Z., Dor, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissecting+the+cellular+origins+of+pancreatic+cancer.">Dissecting the cellular origins of pancreatic cancer.</a> Cell Cycle. 5, 43-46 (2006).</li><li>Vincent, D. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tif1gamma+suppresses+murine+pancreatic+tumoral+transformation+by+a+smad4-independent+pathway.">Tif1gamma suppresses murine pancreatic tumoral transformation by a smad4-independent pathway.</a> Am. J. Pathol. 180, 2214-2221 (2012).</li><li>Vincent, D. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inactivation+of+TIF1gamma+cooperates+with+Kras+to+induce+cystic+tumors+of+the+pancreas.">Inactivation of TIF1gamma cooperates with Kras to induce cystic tumors of the pancreas.</a> PLoS Genet. 5, e1000575 (2009).</li><li>Dorrell, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+mouse+pancreatic+alpha,+beta,+duct+and+acinar+populations+with+cell+surface+markers.">Isolation of mouse pancreatic alpha, beta, duct and acinar populations with cell surface markers.</a> Mol. Cell Endocrinol. 339, 144-150 (2011).</li><li>Case, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis,+intracellular+transport+and+discharge+of+exportable+proteins+in+the+pancreatic+acinar+cell+and+other+cells.">Synthesis, intracellular transport and discharge of exportable proteins in the pancreatic acinar cell and other cells.</a> Biol. Rev. Camb. Philos. Soc. 53, 211-354 (1978).</li><li>Blauer, M., Nordback, I., Sand, J., Laukkarinen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+explant+outgrowth+culture+model+for+mouse+pancreatic+acinar+cells+with+long-term+maintenance+of+secretory+phenotype.">A novel explant outgrowth culture model for mouse pancreatic acinar cells with long-term maintenance of secretory phenotype.</a> Eur. J. Cell. Biol. 90, 1052-1060 (2011).</li></ol>

In dit protocol beschrijven we een werkwijze voor het isoleren acinaire cellen. Deze methode maakt het mogelijk om meer dan 20 x 10 6 acinaire cellen per dier isoleren in minder dan 1 uur. Dankzij de snelle en eenvoudige implementatie (maar liefst 10 pancreases kan onafhankelijk per experiment parallel worden verwerkt), lijkt dit protocol als een goed compromis tussen de bestaande isolatie methoden 3-5,9-12,17. Kritische stappen / Trouble-shooting <p class=...

Een vaak voorkomend probleem voor onderzoekslaboratoria aan exocriene pancreas weefsel is de moeilijkheid kweken acinaire cellen in vitro gedurende een periode die lang genoeg is om een lange-termijn experiment mogelijk. Een factor belemmert de ontwikkeling van dergelijke kweeksystemen is de intrinsieke gevoeligheid van pancreatische weefsel experimentele manipulatie vanwege het hoge gehalte in glycolytische, proteolytische en lipolytische enzymen, die letterlijk verteren de pancreas weefsel wanneer ze vrijkomen bij de isolatie van pancreatische cellen. Een tweede factor is het opmerkelijk vitro plasticiteit van acinaire cellen, die de neiging hebben om hun secretie kenmerken verliezen en transdifferentiate andere rijpe cellen, zoals pancreatische ductale cellen of hepatocyt-achtige cellen 1. In vitro, heeft deze plasticiteit is afhankelijk van de experimentele condities (zoals kweekmedium samenstelling) 2 </sup&gt; en introduceert een mate van complexiteit in het ontwerp van geschikte kweekomstandigheden voor exocriene pancreas cellen 1. Verscheidene werkwijzen zijn ontwikkeld voor de isolatie en kweek van acinaire cellen, eerst van de cavia pancreas 3-5. In eerste instantie, deze protocollen betrokken vertering van pancreas weefsel met collagenase, chymotrypsine, en een protease cocktail, met de uiteindelijke isolatie door krachtige mechanische dissociatie. De pancreatische cellen die op deze wijze getoond abnormale structurele en functionele kenmerken, met name een verlies van apicale structuren en aanzienlijke schade aan de membraanreceptoren. Geïsoleerde cellen in stand bleef voor slechts 1 of 2 dagen. Voorbereiding van verspreide acini onderhoudt hun intra-en intercellulaire architectuur, behoud van celmembranen, beperken van schade aan de oppervlakte receptoren, en daarmee het verbeteren van exocriene secretie als respons op secretagogen 6-8. Als een automalt, deze methode biedt het grote voordeel van acinar levensvatbaarheid van de cellen uit te breiden tot 7-10 dagen in vitro. Bovendien is deze methode nog liever acinaire cellen geïsoleerd 9-12 vanwege onderhoud van intercellulaire contacten, waaronder mobiele koppeling gap junctions, is een essentiële factor van de exocriene acinaire cel-fenotype 13. Aangezien de dedifferentiatie van acinaire cellen en hun transdifferentiatie ductale cellen is een van de voorgestelde mechanismen voor het ontstaan ​​van agressieve exocriene pancreas kanker 14 de gedispergeerde acini model ook een adequaat systeem alvleesklier plasticiteit en de daaropvolgende moleculaire mechanismen te bestuderen. Verder in combinatie met het gebruik van genetisch gemodificeerde dieren 15,16 en de ontwikkeling van technieken voor genoverdracht (2 adenovirale of lentivirale transductie, nanodeeltjes worden gebruikt, enz.), dit in vitro primaire acinaire cellen bij kanzeer nuttig zijn om te bepalen hoe verschillende genetische disfuncties de regelingen inzake acinaire cel differentiatie of dedifferentiatie en dienen beter begrip van de moleculaire gebeurtenissen die verantwoordelijk zijn voor het ontstaan ​​van pancreatitis, precancereuze letsels en veranderingen in cel plasticiteit. Isolatie van verspreide acini is de aanpak die we gebruiken in ons laboratorium om cultuur acinaire cellen. We beschrijven hier en discussiëren over de gebruikte methode. Het gaat enzymatische dissociatie van pancreatische weefsel (met bacterieel collagenase) gekoppeld met mechanische verbreking zonder dissociatie van acinaire cellen. Terwijl de meeste protocollen betrekking hebben op het kweken van de acini, hetzij in suspensie of op speciaal behandelde plastic substraten, we groeien ze in suspensie slechts kort (voor 24 uur), daarna zaaien ze op een matrix steigers wanneer langdurige celcultuur vereist. Dit protocol maakt een snelle isolatie (minder dan 1 uur) van gedispergeerde ac alvleesklierini, duurzaam is voor meer dan een week in de cultuur. Het maakt isolatie van meer dan 20 x 10 6 acinaire cellen per muis alvleesklier. De eenvoud maakt het mogelijk om onafhankelijk verwerken liefst 10 alvleesklier in parallel. Door het handhaven van de intra-en intercellulaire architectuur van acini en daarmee de acinaire fenotype van geïsoleerde primaire cellen, dit model is een systeem waar de studie van transdifferentiatie mechanismen, zoals alle andere exocriene pancreas thans beschikbare modellen zijn afgeleid van de pancreas tumoren weergeven vele genetische veranderingen leidt tot cellulaire transformatie.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="always">
		<tbody>
		 <tr>
			<td>Name of Reagent/Material</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>0.2 &mu;m filter</td>
			<td>Dutscher</td>
			<td>146560</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>10 ml serological pipettes</td>
			<td>Beckton Dickinson</td>
			<td>357551</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>100 &mu;m filter</td>
			<td>Beckton Dickinson</td>
			<td>352360</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>100 mm Petri dish</td>
			<td>Beckton Dickinson</td>
			<td>353003</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>1000 &mu;l filter tips</td>
			<td>Starlab</td>
			<td>S1122-1830</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>20 &mu;l filter tips</td>
			<td>Starlab</td>
			<td>S1120-1810</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>200 &mu;l filter tips</td>
			<td>Starlab</td>
			<td>S1120-8810</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>25 ml serological pipettes</td>
			<td>Beckton Dickinson</td>
			<td>357535</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>5 ml serological pipettes</td>
			<td>Beckton Dickinson</td>
			<td>357543</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>50 ml polypropylene tube</td>
			<td>Beckton Dickinson</td>
			<td>352070</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>6-well plate</td>
			<td>Beckton Dickinson</td>
			<td>353046</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Acetic acid 100%</td>
			<td>VWR BDH Prolabo</td>
			<td>20104.298</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Collagenase IA</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C2676</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Curved forceps, Dumont #7</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>14188</td>
			<td>To sterilize before use</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Dissecting scissors, straight</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>14393</td>
			<td>To sterilize before use</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Epidermal Growth Factor, human</td>
			<td>Promokine</td>
			<td>C-60180</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Ethanol absolute (AnalaR Normapur)</td>
			<td>VWR BDH Prolabo</td>
			<td>20821.310</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>14-801F</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Forceps, Dumont #5</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>14098</td>
			<td>To sterilize before use</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Hank's Balanced Salt Solution 1x </td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14025050</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>HEPES 1 M (pH 6.98-7.30)</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>17-737F</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Incubator O2/CO2</td>
			<td>Sanyo</td>
			<td>MCO-19M</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Inverted microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>Eclipse TS100</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Matrigel</td>
			<td>Beckton Dickinson</td>
			<td>356234</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Microbiological Safety Cabinet, level II</td>
			<td>Faster</td>
			<td>SafeFast Elite 212 S</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Noyes scissors, sharp/sharp tips, German</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>500228-G</td>
			<td>To sterilize before use</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin mixture</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140122</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Phosphate Buffer Saline 10x </td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14200067</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Pipet-Aid</td>
			<td>Drummond Scientific Company</td>
			<td>Pipet-Aid XP</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Pipetman P1000</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>F123602</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Pipetman P20</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>F123600</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Pipetman P200</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>F123601</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Refrigerated centrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5810R</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Paramount Surgimed Ltd.</td>
			<td>Disposable Scalpel Size 23</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>T25 flask, 25 cm2</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Z707481</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Trypsin inhibitor, from Glycine Max</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T6522</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Type I collagen</td>
			<td>Beckton Dickinson</td>
			<td>354236</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Waymouth's medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>31220-023</td>
			<td></td>
		 </tr>
		</tbody>
 </table>

isolation and culture of mouse primary pancreatic acinar cells

Dit protocol maakt snelle isolatie (minder dan 1 uur) van muizen pancreas acini, waardoor ze in kweek te handhaven gedurende meer dan een week. Meer dan 20 x 10 6 acinaire cellen kunnen worden verkregen uit een muis alvleesklier. Dit protocol biedt de mogelijkheid om zelfstandig liefst 10 pancreases verwerken parallel. Omdat behoudt acinaire architectuur, dit model geschikt voor het bestuderen van de fysiologie van de exocriene pancreas in vitro in tegenstelling tot cellijnen van pancreatische tumoren, die vele genetische veranderingen waardoor geheel of gedeeltelijk verlies van hun acinaire differentiatie tonen.

Figuur 1 schematiseert de &quot;verspreide&quot; acini methode voor het primaire acinaire cellen isoleren. De kritische stappen die moeten strikt worden nageleefd tijdens het protocol, beschreven in de discussie deel. Om de verwijdering te vergemakkelijken, de pancreas moet worden vanuit het abdomen samen met de aangehechte milt (figuur 2). Beide organen moeten apart worden gesneden, en de overblijvende vetweefsel die nog kunnen worden gehecht aan de alvlees...

Watch this Scientific Journal Video about Isolation and Culture of Mouse Primary Pancreatic Acinar Cells at JoVE.com

Isolation and Culture of Mouse Primary Pancreatic Acinar Cells

In deze publicatie beschrijven we een snelle en gemakkelijke werkwijze voor het isoleren en kweken van primaire acinaire cellen van de pancreas muizen. Deze methode vormt een waardevolle benadering van de fysiologie van verse primaire normale / getransformeerde exocriene pancreas cellen te bestuderen.

Isolatie en Cultuur van de Muis Primaire Pancreatic Acinaire Cells

This protocol permits rapid isolation (in less than 1 hr) of murine pancreatic acini, making it possible to maintain them in culture for more than one ...

Research

JoVE Journal

Biology

Human Pancreatic Islet Isolation: Part II: Purification and Culture of Human Islets

Human eilandjes van Langerhans Isolatie: Deel II: Zuivering en cultuur van de mens Eilandjes

Management of Type 1 diabetes is burdensome, both to the individual and society, costing over 100 billion dollars annually. Despite the widespread use of ...

Isolation of Primary Mouse Trophoblast Cells and Trophoblast Invasion Assay

Isolatie van primaire Muis trofoblast cellen en Trofoblastinvasie Assay

The placenta is responsible for the transport of nutrients, gasses and growth factors to the fetus, as well as the elimination of wastes.  
Thus, defects ...

Isolation and Primary Culture of Rat Hepatic Cells

Isolatie en Primaire Cultuur van Rat levercellen

Primary hepatocyte culture is a valuable tool that has been extensively used in basic research of liver function, disease, pathophysiology, pharmacology ...

Isolation of Immune Cells from Primary Tumors

Isolatie van immuuncellen van primaire tumoren

Tumors create a unique immunosuppressive microenvironment (tumor microenvironment, TME) whereby leukocytes are recruited into the tumor by various ...

Isolation and Culture of Neonatal Mouse Cardiomyocytes

Isolatie en cultuur van de Neonatale Mouse Cardiomyocytes

Cultured neonatal cardiomyocytes have long been used to study  myofibrillogenesis and myofibrillar functions. Cultured cardiomyocytes allow  for easy ...

Preparation of Pancreatic Acinar Cells for the Purpose of Calcium Imaging, Cell Injury Measurements, and Adenoviral Infection

Bereiding van acinaire cellen ten behoeve van Calcium Imaging, Cell Injury Metingen en adenovirale infectie

The pancreatic acinar  cell is the main parenchymal cell of the exocrine pancreas and plays a primary  role in the secretion of pancreatic enzymes into ...

Assessing the Secretory Capacity of Pancreatic Acinar Cells

Het beoordelen van de Secretory Capaciteit van Pancreatic acinuscellen

Pancreatic acinar cells produce and secrete digestive enzymes. These cells are organized as a cluster which forms and shares a joint lumen. This work ...

Isolation and Primary Culture of Mouse Aortic Endothelial Cells

Isolatie en Primaire Cultuur van de muis endotheelcellen

The vascular endothelium is essential to normal vascular homeostasis. Its dysfunction participates in various cardiovascular disorders. The mouse is an ...

Isolation and Culture of Primary Mouse Keratinocytes from Neonatal and Adult Mouse Skin

Isolatie en Cultuur van Primaire Muis Keratinocyten Uit Neonatale en Volwassen Muis Huid

The keratinocyte (KC) is the predominant cell type in the epidermis, the outermost layer of the skin. Epidermal KCs play a critical role in providing skin ...

Isolation and Culture of Primary Aortic Endothelial Cells from Miniature Pigs

Isolatie en cultuur van primaire aorta-endotheel cellen van miniatuur varkens

Xenotransplantation is a promising way to resolve the shortage of human organs for patients with end-stage organ failure, and the pig is considered as a ...