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Basic Principles of Subculturing Cells

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Common Equipment/Reagents for Passaging Cells

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How to Passage Cells

8:03

Applications

9:36

Summary

Passaggio delle cellule

Le linee cellulari sono spesso utilizzate in esperimenti biomedici, in quanto consentono una rapida coltura ed espansione dei tipi di cellule per l'analisi sperimentale. Le linee cellulari vengono coltivate in condizioni simili rispetto alle cellule appena isolate o primarie, ma con alcune importanti differenze di base: (i) le linee cellulari richiedono i propri cocktail specifici di fattori di crescita e (ii) la loro crescita deve essere monitorata più da vicino rispetto alle cellule primarie, poiché le mutazioni che consentono loro di essere coltivate indefinitamente possono anche portare rapidamente alla loro crescita eccessiva. Pertanto, quando una linea cellulare raggiunge il punto di crescita in coltura in cui copre la maggior parte del fondo del contenitore di coltura, o circa un 90% di confluenza,le cellule devono essere risuscise, lavate, utilizzate sperimentalmente, congelate per un uso successivo o nuovamente seminate per un'ulteriore espansione in nuovi contenitori di coltura.

Questo video dimostrerà come utilizzare gli indicatori dei supporti per determinare la salute della coltura cellulare, quali reagenti e attrezzature sono utili per rimuovere in modo sicuro le linee cellulari aderenti dalla coltura e verranno discussi vari metodi per trasferire queste cellule in forte espansione in nuove colture. Sono stati inoltre dimostrati i metodi su come colturare le cellule di alimentazione (importanti per fornire fattori di crescita essenziali alle linee cellulari) e come espandere un gran numero di colture di linee cellulari contemporaneamente.

Il passaggio, o subculturazione, delle cellule è una procedura comune in cui le cellule di una determinata coltura vengono divise, o "divise", in nuove colture e alimentate con mezzi freschi per facilitare un'ulteriore espansione. Mentre il concetto stesso è relativamente semplice, in questo video discuteremo alcuni dei passaggi più importanti per il successo della manutenzione e dell'espansione delle linee cellulari.

I metaboliti tossici si accumulano nei mezzi di coltura cellulare ne...

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