Passagem de células

As linhas celulares são frequentemente utilizadas em experimentos biomédicos, pois permitem a rápida cultura e expansão de tipos celulares para análise experimental. As linhas celulares são cultivadas em condições semelhantes quando comparadas a células recém-isoladas, ou primárias, mas com algumas diferenças importantes básicas: (i) as linhas celulares requerem seus próprios coquetéis específicos de fator de crescimento e (ii) seu crescimento deve ser mais monitorado do que as células primárias, já que as mutações que permitem que elas sejam cultivadas indefinidamente também podem levar rapidamente ao seu crescimento excessivo. Portanto, quando uma linha celular atinge o ponto de crescimento da cultura, onde cobre a maior parte do fundo do recipiente de cultura, ou cerca de 90% de confluência,as células devem ser resuspended, lavadas, usadas experimentalmente, congeladas para uso posterior ou re-semeadas para expansão em novos recipientes culturais.

Este vídeo demonstrará como usar indicadores de mídia para determinar a saúde da cultura celular, quais reagentes e equipamentos são úteis para remover com segurança linhas celulares aderentes da cultura, e vários métodos para transferir essas células em expansão robusta para novas culturas serão discutidos. Também são demonstrados métodos de como cultivar células alimentadores (importantes para fornecer fatores essenciais de crescimento às linhas celulares) e como expandir um grande número de culturas de linhas celulares ao mesmo tempo.