Name: methods for performing crosses in setaria viridis, a new model system for the grasses
Uploaded: 2013-10-01T09:00:00
Duration: 8 min 35 s
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हम पांडुलिपि के महत्वपूर्ण पढ़ने और संपादन के लिए Sankalpi Warnasooriya और एमी हम्बोल्ट धन्यवाद. इस काम के ऊर्जा विभाग (डी SC0008769) और राष्ट्रीय विज्ञान फाउंडेशन (IOS-1127017) से अनुदान द्वारा समर्थित किया गया.

<ol>
	<li>Bennetzen, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reference+genome+sequence+of+the+model+plant+Setaria.">Reference genome sequence of the model plant Setaria.</a> Nat Biotechnol. 30, 555-561 (2012).</li><li>Zhang, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genome+sequence+of+foxtail+millet+(Setaria+italica)+provides+insights+into+grass+evolution+and+biofuel+potential.">Genome sequence of foxtail millet (Setaria italica) provides insights into grass evolution and biofuel potential.</a> Nat Biotechnol. 30, 549-554 (2012).</li><li>Li, P., Brutnell, T. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Setaria+viridis+and+Setaria+italica,+model+genetic+systems+for+the+Panicoid+grasses.">Setaria viridis and Setaria italica, model genetic systems for the Panicoid grasses.</a> J Exp Bot. 62, 3031-3037 (2011).</li><li>Brutnell, T. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Setaria+viridis:+a+model+for+C4+photosynthesis.">Setaria viridis: a model for C4 photosynthesis.</a> Plant Cell. 22, 2537-2544 (2010).</li><li>Doust, A. N., Kellogg, E. A., Devos, K. M., Bennetzen, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Foxtail+millet:+a+sequence-driven+grass+model+system.">Foxtail millet: a sequence-driven grass model system.</a> Plant Physiol. 149, 137-141 (2009).</li><li>Siles, M. M., Baltensperger, D. D., Nelson, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technique+for+artificial+hybridization+of+foxtail+millet+[Setaria+italica+(L.)+Beauv.].">Technique for artificial hybridization of foxtail millet [Setaria italica (L.) Beauv.].</a> Crop Sci. 41, 1408-1412 (2001).</li><li>Li, H. W., Meng, C. J., Liu, T. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Problems+in+the+Breeding+of+Millet+(Setaria+Italica+(L.)+Beauv.).">Problems in the Breeding of Millet (Setaria Italica (L.) Beauv.).</a> Agron. J. 27, 963-970 (1935).</li><li>Willweber-Kishimoto, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interspecific+relationships+in+the+genus+setaria.">Interspecific relationships in the genus setaria.</a> Contributions from the Biological Laboratory, Kyoto University. 14, 1-41 (1962).</li><li>Chang, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+on+flowering+and+hybridization+technique+in+Setaria.">Studies on flowering and hybridization technique in Setaria.</a> Nungyeh-hsueh Pao (Jour. Agric.) Act. Agric. Sin. 9, 68-76 (1958).</li><li>Darmency, H., Pernes, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+wild+Setaria+viridis+(L.)+Beauv.+to+improve+triazine+resistance+in+cultivated+S.+italica+(L.)+by+hybridization.">Use of wild Setaria viridis (L.) Beauv. to improve triazine resistance in cultivated S. italica (L.) by hybridization.</a> Weed Research. 25, 175-179 (1985).</li><li>Sakai, S., Shin, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Artificial+hybridization+of+Setaria+italica+by+hot+water+treatment.">Artificial hybridization of Setaria italica by hot water treatment.</a> Bull. Fac. Agric. Kagoshima Univ. , 28-37 (1955).</li><li>Malm, N. R., Rachie, K. 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Theoret. Appl. Genetics. 96, 31-36 (1998).</li><li>RangaswamiAyyangar, G. N., Narayanan, T. R., Seshadri Sarma, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+in+Setaria+italica+(Beauv.),+the+Italian+millet.+Part+I.">Studies in Setaria italica (Beauv.), the Italian millet. Part I.</a> Indian J. Agr. Sci. , 561-571 (1933).</li><li>Heh, C. M., Mei, T. F., Yang, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anthesis+of+Millet,+Setaria+Italica+(L.)+Beauv.">Anthesis of Millet, Setaria Italica (L.) Beauv.</a> Agron. J. 29, 845-853 (1937).</li><li>Doust, A. N., Devos, K. M., Gadberry, M. D., Gale, M. D., Kellogg, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+genetic+basis+for+inflorescence+variation+between+foxtail+and+green+millet+(poaceae).">The genetic basis for inflorescence variation between foxtail and green millet (poaceae).</a> Genetics. 169, 1659-1672 (2005).</li></ol>

लेखकों वे कोई प्रतिस्पर्धा वित्तीय हितों की है कि घोषित.

एस viridis बारीकी bioenergy फीड स्टॉक switchgrass (NAD-ME उप प्रकार), अनाज फसल लोमड़ी की पूंछ बाजरा, और कृषि घास गिनी घास 5 से संबंधित एक NADP-ME उप प्रकार सी 4 घास है. Setaria, एस की खेती के फार्म का 510 एमबी जीनोम Italica, हाल ही में 1,2 अनुक्रम और पतला रिश्तेदार, एस के एक 25x कवरेज जीनोम अनुक्रम की गई है viridis, कार्य प्रगति पर है (अप्रकाशित). एस viridis यह एक तेजी पीढ़ी समय, छोटे कद, साधारण विकास की आवश्यकताओं, और विपुल बीज उत्पादन 3 सहित एक संभावित उत्कृष्ट मॉडल आनुवंशिक प्रणाली बनाने कि विशेषताओं का एक नंबर है. महत्वपूर्ण बात है, तरीकों हाल ही में एस के दोनों क्षणिक और स्थिर परिवर्तन के लिए विकसित किया गया है ट्रांसजेनिक पौधों 4 बनाने के लिए अवसर प्रदान करते हैं जो viridis. हालांकि, एस के लिए आनुवंशिक उपकरणों के विकास में एक बड़ी अड़चन viridis अपने recalc हैoutcrossing को itrance. तिथि करने के लिए, कोई मानक प्रोटोकॉल नियंत्रित पार से बीज का तेजी से उत्पादन की अनुमति होगी कि प्रकाशित किया गया है. एस में जेनेटिक पार Italica आमतौर पर फूलों 6,7,8 से anthers को हटाने के माध्यम से या महिला के माता पिता 9-11 के फूलों की गर्मी उपचार के माध्यम से निर्बलता से प्रदर्शन कर रहे हैं. इन उपचार, anthers या गैर इलाज फूलों से panicles के बाद / पुरुष माता पिता धीरे पराग रिहा कलंक के खिलाफ abraded रहे हैं. निर्बलता में, anthers पुष्पक खोलता है और परागपिटक exsert शुरुआत है तुरंत बाद ठीक संदंश का उपयोग कर हटा रहे हैं, लेकिन अभी तक पराग 6-8 शेड नहीं किया गया है. इस बाद विधि की चुनौतियों के अलावा फूल के उद्घाटन और पराग शेड के बीच एक संकीर्ण समय के अंतराल में निर्बलता प्रदर्शन में कठिनाई है. एक फूल के उद्घाटन और समापन की अवधि के परिग्रहण और पर्यावरणीय स्थिति के आधार पर अलग अलग होंगे, और 7 मिनट से लेकर कर सकते हैं &lt;समर्थन&gt; 6 एस में घंटा 12 2.5 Italica. Anthers पुष्पक से exsert के रूप में पराग का छप्पर होता है, anthers ध्यान से और जल्दी से हटा दिया जाना चाहिए, और इसलिए, यह कारण आत्म - परागण के लिए संक्रमण से बचने के लिए मुश्किल है. Pollinations निर्बलता के तुरंत बाद प्रदर्शन कर रहे हैं इसके अलावा, प्रति दिन प्रति व्यक्ति / किया जा सकता है कि पार की संख्या सीमित है. एक वैकल्पिक पद्धति के रूप में, परिपक्व panicles गर्मी मार panicles की एक बड़ी संख्या पर पार प्रदर्शन के लाभ के साथ पराग अनाज 9,10,13,14 विकसित करने के लिए गर्म पानी में डूबा जा सकता है. हालांकि, गर्मी उपचार के तापमान और अवधि विभिन्न प्रयोगों (20 मिनट 10 के लिए 10 मिनट 14 और 42 डिग्री सेल्सियस के लिए जैसे 47 डिग्री सेल्सियस) से व्यापक रूप से भिन्न होता है. इसके अलावा, गर्मी की मध्यस्थता emasculations की प्रभावकारिता पर कोई व्यवस्थित विश्लेषण प्रकाशित किया गया है. एस में आनुवंशिक पार प्रदर्शन के लिए इस प्रकार, एक मानक और सरल विधि वीiridis बहुत एस के आनुवंशिक संसाधन विकास और स्थापना को तेज करेगा अनुसंधान समुदाय के भीतर एक मॉडल प्रणाली के रूप viridis. हम एस में आनुवंशिक पार प्रदर्शन के लिए एक मानक प्रोटोकॉल के विकास और अनुकूलन रिपोर्ट viridis. पौधे फूल विकास सिंक्रनाइज़ और प्रक्रिया के reproducibility बढ़ाने के लिए नियंत्रित वातावरण में उगाया जाता है. क्रॉस एक ट्रांसजेनिक एस का उपयोग कर प्रदर्शन कर रहे हैं सफल नियंत्रित आनुवंशिक पार की पहचान की सुविधा के लिए गस रिपोर्टर जीन 4 युक्त पुरुष अभिभावक के रूप में viridis लाइन. गस transgene तुरंत कटाई के बाद F1 बीज की स्कोरिंग में सक्षम बनाता है और इस प्रकार निर्बलता और परागण की क्षमता का निर्धारण करने के लिए एक आसान गुणात्मक परख प्रदान करता है जो एक चावल Ubiquitin प्रमोटर द्वारा संचालित है. हम emascula किया गया है कि फूलों की लेबलिंग के साथ निर्बलता के लिए गर्म पानी के साथ एक सरल गर्मी उपचार कार्यरत हैटेड निर्बलता के बाद नव विकसित फूलों से उत्पन्न बीज खत्म करने के लिए. अनुमोदक तापमान पर गर्मी उपचार की एक श्रृंखला के परीक्षण और गर्म पानी में सूई से अलग अवधि के बाद, हम 3-6 मिनट से 48 डिग्री सेल्सियस के एक अधिकतम तापमान और समय durations की स्थापना की है. एक पूर्व सुबह ठंड उपचार पार परागण की सुविधा के क्रम में दोनों के माता पिता में तुल्यकालिक anthesis को बढ़ावा देने के लिए मिला था. हम भी अन्य Setaria accessions के लिए प्रोटोकॉल और इस विधि का भविष्य आवेदन में महत्वपूर्ण कदम पर चर्चा की है.

<table border="1">
		<tbody>
		 <tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Cat. Number</td>
 <td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Scissors, spring</td>
			<td>World Precision Instruments, Inc</td>
			<td>14126</td>
		<td></td>	
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Forceps, Dumostar Biology Polished</td>
			<td>SPI Supplies</td>
			<td>TD5BP-XD</td>
		<td></td>	
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Surgical Scissors</td>
			<td>F.S.T (Fine Science Tools)</td>
			<td>14005-12</td>
		<td></td>	
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Europack Clear Polypropylene Micro-Perforated Crusty Bread Bags 6"x28"</td>
			<td><a href="http://www.pjpmarketplace.com" target="_blank">http://www.pjpmarketplace.com</a></td>
			<td>361001</td>
 <td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Flats</td>
			<td>T.O. Plastics</td>
			<td>715401C </td>
			<td></td>	
		 </tr>
		 <tr>
			<td>metro mix 360</td>
			<td>Hommert International</td>
			<td>10-0356-1</td>
			<td></td>	
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Jack's 15-16-17</td>
			<td>Hommert International</td>
			<td>07-5925-1</td>
			<td></td>	
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Kimwipes</td>
			<td>VWR International</td>
			<td>34120</td>
			<td></td>	
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Sharpie Ultra Fine Point Permanent Markers, Red</td>
			<td>Staples</td>
			<td>37002</td>
 <td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Donegan DA-10 OptiVisor Headband Magnifier, 3.5x Magnification, 4" Focal Length</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>DA-10, B0015IP380</td>
 <td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>12"24/7 Packaging Hand Impulse Sealer Heat Seal Machine Poly Sealing Free Element Grip </td>
			<td>Amazon</td>
			<td>N/A</td>
 <td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>water bath</td>
			<td>VWR scientific</td>
			<td>Model: 1166</td>
			<td></td>	
		 </tr>
		 <tr>
			<td>BDW walk in plant growth chamber</td>
			<td>Conviron</td>
			<td>BDW 40</td>
 <td></td>
		 </tr>
		</tbody>
 </table>

methods for performing crosses in setaria viridis, a new model system for the grasses

Setaria viridis सी 4 घास के लिए एक उभरती हुई मॉडल प्रणाली है. यह निकटता bioenergy फीड स्टॉक switchgrass और अनाज फसल लोमड़ी की पूंछ बाजरा से संबंधित है. हाल ही में, लोमड़ी की पूंछ बाजरा, एस के 510 एमबी जीनोम Italica, 1,2 अनुक्रम और पतला रिश्तेदार एस के एक 25x कवरेज जीनोम अनुक्रम की गई है viridis कार्य प्रगति पर है. एस viridis यह एक तेजी पीढ़ी समय, छोटे कद, साधारण विकास आवश्यकताओं, विपुल बीज उत्पादन 3 और क्षणिक और स्थिर दोनों परिवर्तन 4 के लिए विकसित प्रणालियों सहित एक संभावित उत्कृष्ट मॉडल आनुवंशिक प्रणाली बनाने कि विशेषताओं का एक नंबर है. हालांकि, एस के आनुवंशिकी viridis वजह पार प्रदर्शन के लिए विस्तृत तरीकों की कमी के कारण, भाग में, बड़े पैमाने पर बेरोज़गार है. तिथि करने के लिए, कोई मानक प्रोटोकॉल नियंत्रित पार से बीज का तेजी से उत्पादन की अनुमति होगी कि अपनाया गया है. प्रोटोकॉल दबावented यहाँ एस में आनुवंशिक पार प्रदर्शन के लिए अनुकूलित है viridis, परिग्रहण A10.1. हम निर्बलता के बाद नव विकसित फूलों से उत्पन्न बीज खत्म करने के लिए 20-30 फ्लोरेट्स और फूलों की लेबलिंग बनाए रखने के लिए पुष्पगुच्छ छंटाई के बाद निर्बलता के लिए गर्म पानी के साथ एक सरल गर्मी उपचार कार्यरत है. अनुमोदक तापमान पर गर्मी उपचार की एक श्रृंखला के परीक्षण और सूई से अलग अवधि के बाद, हम 3-6 मिनट के लिए एक अधिकतम तापमान और 48 डिग्री सेल्सियस के समय सीमा की स्थापना की है. इस पद्धति का उपयोग करके, 15 पार की एक न्यूनतम प्रति दिन एक भी कार्यकर्ता द्वारा प्रदर्शन किया जा सकता है और पुष्पगुच्छ प्रति 3-5 outcross संतान के एक औसत बरामद किया जा सकता है. इसलिए, 45-75 outcross संतान के एक औसत एक ही दिन में एक व्यक्ति द्वारा उत्पादित किया जा सकता है. इस तकनीक का व्यापक कार्यान्वयन एस के पुनः संयोजक जन्मजात लाइन आबादी के विकास की सुविधा होगी viridis एक्स एस viridis या एस viridis एक्स एस Italica, एसई थोक के माध्यम से म्यूटेशन मानचित्रणgregant विश्लेषण और आनुवांशिक विश्लेषण के लिए उच्च आदेश म्यूटेंट बनाने.

इस अध्ययन में, हम अनुक्रम एस इस्तेमाल किया महिला माता पिता, और एक ट्रांसजेनिक एस के रूप में viridis परिग्रहण A10.1 सभी pollinations के लिए पुरुष अभिभावक के रूप में गस रिपोर्टर जीन 4 युक्त viridis लाइन (भी A10.1). एक अनुकूलित विकास शासन चित्र 1 में दिखाया के रूप में फूल सिंक्रनाइज़ करने के लिए इस्तेमाल किया गया था. हम निर्बलता के लिए गर्मी उपचार के तापमान और समय के कई संयोजनों का परीक्षण किया और शेष 3 दिन (चित्रा 2) पर खिल जबकि नपुंसक बना दी जाती पुष्पगुच्छ पर बनाए रखा फूलों के बारे में 40-80% 2 एन डी दिन पर खिल कि मनाया है. गर्मी उपचार भी गंभीर था हालांकि, अगर एक उदाहरण के लिए, 4 बहुत कुछ मिनट, या कोई फूलों के लिए 49 डिग्री सेल्सियस 2 दिन पर खिल. परागण 2 एन डी या पुरुष माता पिता के anthesis की पीक समय पर निर्भर था जो निर्बलता के बाद 3 दिन, पर प्रदर्शन किया गया था. यह observ था, युवा फूलों निर्बलता के बाद विकसित करना जारी रखा है कि एड परिपक्व और 3-6 दिनों के बाद नियंत्रित pollinations आत्म - परागण. 7-10 दिनों के बाद परागण के बाद, सफेद रंग में हैं कि फूल पुष्पगुच्छ पर दिखाई दे रहे हैं. ये सफेद फूल गर्मी के कारण नुकसान या गरीब परागण या तो unfertilized रहे हैं. इसी समय, सफलतापूर्वक परागण किया गया है कि फूल अंधेरे बीज सहन और 14 दिनों के बाद बिखर शुरू शुरू करते हैं. परागण के बाद 14 वें दिन पर काटा लाल निशान के साथ अंधेरे बीज स्पष्ट रूप से अभी भी हरे थे और चकनाचूर नहीं था कि लाल निशान के बिना बीज से प्रतिष्ठित किया जा सकता है. कटाई में देरी कर रहा है, दोनों के साथ और लाल निशान के बिना बीज के anthecium यह मुश्किल जल्दी से काटा पूल में लाल निशान के साथ बीज भेद करने के लिए बनाता है, जो अंधेरे बारी है. तालिका 1 में संक्षेप के रूप में क्रॉसिंग प्रोटोकॉल कई गर्मी उपचार प्रयोगों का प्रदर्शन किया गया अनुकूलन. के एक औसत0-10 बीज / पुष्पगुच्छ विभिन्न गर्मी उपचार प्रयोगों से बरामद किए गए. कटाई के बाद बीज एक anthecium पदच्युत का उपयोग anthecium को हटाने के बाद एक बीज ड्रायर में 2 दिनों के लिए 30 डिग्री सेल्सियस पर सूख रहे थे. Anthecium हटा दिया गया था, ख्यात F1 बीज गस धुंधला समाधान के साथ दाग, और outcross संतान 1-2 घंटा (चित्रा 2 एफ) में नीले रंग दाग रहे थे. इन परिणामों के आधार पर, हम 3-6 मिनट के लिए 48 डिग्री सेल्सियस के गर्मी उपचार की सलाह देते हैं. इसके अलावा, हम पार निर्बलता अगले दिन 2 और 3 दिन दोनों पर किया जा सलाह देते हैं. अन्य Setaria accessions या प्रजातियों के साथ पार प्रदर्शन में इस तकनीक के प्रभाव की जांच करने के लिए, एस के बीच पार viridis A10.1 और आठ विविध एस viridis accessions और एक एस Pumila परिग्रहण प्रदर्शन किया गया. दिनों accessions के बीच विभिन्न फूल को हालांकि हमने पाया कि सभी आठ एस के फूल viridis accessions और एक एसPumila परिग्रहण भोर के पहले ठंड उपचार के बाद 10:20-11:00 पर एक शिखर खोलने समय के साथ 10:00-11:00 के बीच उद्घाटन शुरू करते हैं. यह भोर के पहले ठंड उपचार विविध Setaria accessions के लिए लागू किया जा सकता है कि इंगित करता है. 5-6 मिनट के लिए 48 डिग्री सेल्सियस के गर्मी उपचार एस प्रभावहीन करने के लिए इस्तेमाल किया गया था प्रदर्शन कर सभी को पार करने के लिए महिला अभिभावक के रूप में इस्तेमाल किया गया था जो viridis A10.1. हम A10.1 और विविध एस तीनों के बीच पार से 12 बीज के लिए एक से बरामद viridis accessions और एस के बीच एक भी पार से छह बीज viridis A10.1 और एक भी एस Pumila परिग्रहण. इन बीजों को एक सफल testcross से हुई या स्वयं संदूषण के परिणाम थे हालांकि, अगर इस समय हम निर्धारित नहीं किया है. भले ही, इन प्रारंभिक परिणाम बताते हैं कि एस के लिए इस्तेमाल विकास की स्थिति viridis A10.1 विविध एस के साथ पार उत्पन्न करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है viridis accessions और संभवतः Setaria की अन्य प्रजातियों. <tablई सीमा = &quot;1&quot;&gt; <tbody><tr><td> अस्थायी गर्मी का इलाज (डिग्री सेल्सियस) </td><td> समय गर्मी का इलाज (मिनट) </td><td> # पार </td><td> औसत. ट्रिम के बाद फूलों की # </td><td> परागण के दिन (emasc के बाद दिन) </td><td> औसत. # बीज (लाल) / पुष्पगुच्छ (मतलब) </td><td> औसत. % गस (+) / बीज (लाल) </td><td> औसत. # HYB बीज (गस) </td><td> मिन # बीज HYB </td><td> मैक्स # HYB बीज </td></tr><tr><td> 47 </td><td> 10 </td><td> 2 </td><td> 27 </td><td> 2 दिन </td><td> 0 </td><td> 0 </td><td> 0 </td><td> 0 </td><td> 0 </td></tr><tr><td> 48 </td><td> 3 </td><td> 3 </td><td> 36 </td><td> 2 दिन </td><td> 5 </td><td> 60 </td><td> 3 </td><td> 1 </td><td> 5 </td></tr><tr><td></td><td> 4</td><td> 3 </td><td> 25 </td><td> 3 दिन </td><td> 10 </td><td> 50 </td><td> 5 </td><td> 3 </td><td> 7 </td></tr><tr><td></td><td> 5 </td><td> 8 </td><td> 25 </td><td> 2 दिन </td><td> 5 </td><td> 60 </td><td> 3 </td><td> 1 </td><td> 6 </td></tr><tr><td></td><td> 6 </td><td> 3 </td><td> 25 </td><td> 2 दिन </td><td> 4 </td><td> 75 </td><td> 3 </td><td> 0 </td><td> 4 </td></tr><tr><td></td><td> 7 </td><td> 4 </td><td> 24 </td><td> 2 दिन </td><td> 3 </td><td> 33 </td><td> 1 </td><td> 0 </td><td> 4 </td></tr><tr><td></td><td> 7 </td><td> 1 </td><td> 25 </td><td> 3 दिन </td><td> 4 </td><td> 75 </td><td> 3 </td><td> N / A </td><td> एन /एक </td></tr><tr><td> 49 </td><td> 1 </td><td> 3 </td><td> 23 </td><td> 2 दिन </td><td> 5 </td><td> 25 </td><td> 1 </td><td> 0 </td><td> 2 </td></tr><tr><td></td><td> 2 </td><td> 7 </td><td> 26 </td><td> 2 दिन </td><td> 8 </td><td> 25 </td><td> 2 </td><td> 0 </td><td> 4 </td></tr><tr><td></td><td> 3 </td><td> 5 </td><td> 22 </td><td> 2 दिन </td><td> 0 </td><td> 0 </td><td> 0 </td><td> 0 </td><td> 1 </td></tr><tr><td></td><td> 4 </td><td> 4 </td><td> 25 </td><td> 2 दिन </td><td> 0 </td><td> 0 </td><td> 0 </td><td> 0 </td><td> 0 </td></tr></tbody></table> तालिका 1. निर्बलता के लिए गर्मी उपचार के अनुकूलन. गर्मी उपचार के तापमान और समय दोनों में फेरबदल के परिणाम. Pollinations निर्बलता और सफल outcrosses के बाद एक (2 दिन) या दो दिन (3 दिन) प्रदर्शन किया गयागस धुंधला के साथ cored <img alt="चित्रा 1" fo:content-src="/files/ftp_upload/50527/50527fig1highres.jpg" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/50527/50527fig1.jpg" /> चित्रा 1. एक पूर्व भोर ठंड उपचार. तापमान और फूल उत्पादन का इष्टतम विकास और synchrony के लिए समय अवधि के साथ अनुकूलित विकास कक्ष की स्थिति दिखाई जाती हैं. हरे और लाल तीर क्रमशः, पार और निर्बलता के प्रदर्शन के लिए इष्टतम खिड़की दिखा. <img alt="चित्रा 2" src="/files/ftp_upload/50527/50527fig2.jpg" /> चित्रा 2. क्रॉसिंग और outcross संतान की गस धुंधला के लिए पुष्पगुच्छ तैयारी. लगभग 1/10 खोला फूलों के दिखा, trimming से पहले Setaria viridis A10.1 की (ए) एक पुष्पगुच्छ. पुष्पगुच्छ साथ anthesis की प्रगति में चार वर्गों और दिशात्मकता दिखाया गया है. <strongतस्वीर में 10:30 लिया (खिल रहे हैं कि फूल दिखा दिन 2 के बाद निर्बलता, पर बाल हटाने के बाद बनाए रखा bristles के साथ निर्बलता को पूर्व&gt; (बी) एक छंटनी पुष्पगुच्छ. (ग) एक नपुंसक बना दी जाती पुष्पगुच्छ. (डी) एक नपुंसक बना दी जाती पुष्पगुच्छ AM). (ई) पुरुष माता पिता एक β-glucuronidase (गस ले जाने (ट्रांसजेनिक Setaria viridis A10.1 लाइन का एक पुष्पगुच्छ) तड़के उपचार (तस्वीर को 10:30 बजे लिया) के बाद खिल जाता है कि पत्रकार जीन). एक ई के माध्यम से, स्केल सलाखों = 70% (v / v) इथेनॉल में distaining द्वारा पीछा 2 घंटे के लिए गस धुंधला के बाद 1 मिमी. (एफ) ख्यात outcross संतान. सही से दो बीज नकारात्मक और सकारात्मक नियंत्रण कर रहे हैं, क्रमशः. <img alt="चित्रा 3" src="/files/ftp_upload/50527/50527fig3.jpg" /> चित्रा 3. प्रोटोकॉल का फ्लो चार्ट मीटर का एक योजनाबद्ध प्रतिनिधित्वएस प्रदर्शन में शामिल ajor कदम viridis पार.

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Methods for Performing Crosses in Setaria viridis, a New Model System for the Grasses

हम Setaria viridis (एस viridis) में पार के प्रदर्शन के लिए एक पद्धति को विकसित किया है. विधि व्यवहार्य पराग को मारने के लिए पहले एक गर्म पानी के उपचार के लिए पुष्पगुच्छ छंटाई शामिल है. क्रॉस एक अच्छी तरह से नियंत्रित विकास के शासन के बाद किया जाता है और आम तौर पर 1 बीज / एस पुष्पगुच्छ प्रति पार परागण से 7 की वसूली में परिणाम हैं.

पार प्रदर्शन के लिए तरीके<em&gt; Setaria viridis</emघास के लिए&gt;, एक नया मॉडल प्रणाली

Setaria viridis is an emerging model system for C4 grasses. It is closely related to the bioenergy feed stock switchgrass and the grain crop foxtail ...

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Methods for Performing Crosses in Setaria viridis, a New Model System for the Grasses

Multimodal Optical Microscopy Methods Reveal Polyp Tissue Morphology and Structure in Caribbean Reef Building Corals

मल्टीमॉडल ऑप्टिकल माइक्रोस्कोपी तरीके कैरेबियन रीफ भवन मूंगों में नाकड़ा ऊतक आकृति विज्ञान और संरचना प्रकट

An integrated suite of imaging techniques has been applied to determine the three-dimensional (3D) morphology and cellular structure of polyp tissues ...

A New Application of the Electrical Penetration Graph (EPG) for Acquiring and Measuring Electrical Signals in Phloem Sieve Elements

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फ्लोएम चलनी तत्वों में विद्युत संकेतों को प्राप्त करने और मापने के लिए बिजली पहुंच ग्राफ (EPG) का एक नया आवेदन

Electrophysiological properties of cells are often studied in vitro, after dissociating them from their native environments. However, the study of ...

Methods of Soil Resampling to Monitor Changes in the Chemical Concentrations of Forest Soils

मृदा Resampling के तरीके वन मिट्टी के रासायनिक सांद्रता में परिवर्तन की निगरानी

Recent soils research has shown that important chemical soil characteristics can change in less than a decade, often the result of broad environmental ...

Measuring and Mapping Patterns of Soil Erosion and Deposition Related to Soil Carbonate Concentrations Under Agricultural Management

मापने और मिट्टी के कटाव और कृषि प्रबंधन के तहत मिट्टी कार्बोनेट सांद्रता से संबंधित जमाव के पैटर्न मानचित्रण

Spatial patterns of soil erosion and deposition can be inferred from differences in ground elevation mapped at appropriate time increments. Such changes ...

Methodology for Developing Life Tables for Sessile Insects in the Field Using the Whitefly, Bemisia tabaci, in Cotton As a Model System

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एक मॉडल प्रणाली के रूप में कपास में ह्वाइटफ्लाई, बेमिसिया टेबासी, का उपयोग कर क्षेत्र में डंठल कीड़ों के लिए जीवन तालिकाओं के विकास के लिए क्रियाविधि

Life tables provide a means of measuring the schedules of birth and death from populations over time. They also can be used to quantify the sources and ...

Techniques for Investigating the Anatomy of the Ant Visual System

चींटी दृश्य प्रणाली के एनाटॉमी की जांच के लिए तकनीक

This article outlines a suite of techniques in light microscopy (LM) and electron microscopy (EM) which can be used to study the internal and external eye ...

Development of New Methods for Quantifying Fish Density Using Underwater Stereo-video Tools

पानी के नीचे स्टीरियो का उपयोग कर मछली घनत्व को बढ़ाता के लिए नए तरीकों का विकास-वीडियो उपकरण

The use of video camera systems in ecological studies of fish continues to gain traction as a viable, non-extractive method of measuring fish lengths and ...

A Novel Method for the Pentosan Analysis Present in Jute Biomass and Its Conversion into Sugar Monomers Using Acidic Ionic Liquid

Pentosan के लिए एक उपंयास विधि जूट बायोमास में मौजूद विश्लेषण और चीनी मोनोमर अम्लीय ईओण तरल का उपयोग कर में अपने रूपांतरण

Recently, ionic liquids (ILs) are used for biomass valorization into valuable chemicals because of their remarkable properties such as thermal stability, ...

The Plant Infection Test: Spray and Wound-Mediated Inoculation with the Plant Pathogen Magnaporthe Grisea

The Plant Infection Test: Spray and Wound-Mediated Inoculation with the Plant Pathogen Magnaporthe Grisea

संयंत्र संक्रमण परीक्षण: स्प्रे और संयंत्र रोगज़नक़ Magnaporthe Grisea के साथ घाव मध्यस्थता टीका

Plants possess a powerful system to defend themselves against potential threats by pathogenic fungi. For agriculturally important plants, however, current ...

A New Portable In Vitro Exposure Cassette for Aerosol Sampling

A New Portable In Vitro Exposure Cassette for Aerosol Sampling

एयरोसोल नमूनाकरण के लिए विट्रो एक्सपोजर कैसेट में एक नया पोर्टेबल

This protocol introduces a new in vitro exposure system, capable of being worn, including its characterization and performance. Air-liquid interface (ALI) ...