Name: parabiosis in mice: a detailed protocol
Uploaded: 2013-10-06T21:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Parabiosis in Mice: A Detailed Protocol at JoVE.com

فإن الكتاب أود أن أشكر أدرين موسلي وLibuse Jerabek (ستانفورد) للحصول على المساعدة مع تقنية جراحية.

أجريت جميع الدراسات على الحيوانات وفقا للمبادئ التوجيهية للجنة رعاية الحيوان واستخدام UCLA والمعاهد الوطنية للصحة دليل لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية. مدة الإجراء هو موضح أدناه حوالي 45-60 دقيقة من البداية إلى النهاية. 1. إعداد ...

<ol>
	<li>Bert, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exp&#233;riences+et+consid&#233;rations+sur+la+greffe+animale.">Exp&#233;riences et consid&#233;rations sur la greffe animale.</a> Journal de l'Anatomie et de la Physiologie. 1, 69-87 .</li><li>Bunster, E., Meyer, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+methods+of+parabiosis.">Improved methods of parabiosis.</a> Anat. Rec. 57, 339-380 (1933).</li><li>Waskow, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+parabiotic+mice+for+the+study+of+DC+and+DC+precursor+circulation.">Generation of parabiotic mice for the study of DC and DC precursor circulation.</a> Methods Mol. Biol. 595, 413-428 (2010).</li><li>Finerty, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parabiosis+in+physiological+studies.">Parabiosis in physiological studies.</a> Physiol. Rev. 32, 277-302 (1952).</li><li>Aicher, A., Heeschen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonbone+marrow-derived+endothelial+progenitor+cells:+what+is+their+exact+location.">Nonbone marrow-derived endothelial progenitor cells: what is their exact location.</a> Circ. Res. 101, e102 (2007).</li><li>Abe, S., Boyer, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cells+derived+from+the+circulation+contribute+to+the+repair+of+lung+injury.">Cells derived from the circulation contribute to the repair of lung injury.</a> Am. J. Respir. Crit. Care Med. 170, 1158-1163 (2004).</li><li>Donskoy, E., Goldschneider, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thymocytopoiesis+is+maintained+by+blood-borne+precursors+throughout+postnatal+life.+A+study+in+parabiotic+mice.">Thymocytopoiesis is maintained by blood-borne precursors throughout postnatal life. A study in parabiotic mice.</a> J. Immunol. 148, 1604-1612 (1992).</li><li>Powell, A. E., Anderson, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fusion+between+Intestinal+epithelial+cells+and+macrophages+in+a+cancer+context+results+in+nuclear+reprogramming.">Fusion between Intestinal epithelial cells and macrophages in a cancer context results in nuclear reprogramming.</a> Cancer Res. 71, 1497-1505 (2011).</li><li>Duyverman, A. M., Kohno, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+transient+parabiosis+skin+transplantation+model+in+mice.">A transient parabiosis skin transplantation model in mice.</a> Nat. Protoc. 7, 763-770 (2012).</li><li>Ajami, B., Bennett, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+self-renewal+can+sustain+CNS+microglia+maintenance+and+function+throughout+adult+life.">Local self-renewal can sustain CNS microglia maintenance and function throughout adult life.</a> Nat. Neurosci. 10, 1538-1543 (2007).</li><li>Weissman, I. L., Jerabek, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tolerance+and+the+H-Y+antigen:+Requirement+for+male+T+cells,+but+not+B+cells,+to+induce+tolerance+in+neonatal+female+mice.">Tolerance and the H-Y antigen: Requirement for male T cells, but not B cells, to induce tolerance in neonatal female mice.</a> Transplantation. 37, 3-6 (1984).</li></ol>

طريقة تعايش التصاقي مناقشتها هنا يقدم الحد الأدنى من الصعوبات الفنية والنتائج في معدلات وفيات منخفضة. المرفق الركبة والكوع المفاصل هو تحسن كبير من Bunster وتقنية ماير. ومع ذلك، لا يزال الإجراء الغازية وبالتالي الحفاظ على ظروف معقمة طوال جراحة أمر حتمي. لمزيد من منع العد...

تعايش التصاقي، والانضمام إلى العمليات الجراحية في اثنين من الكائنات الحية، وكان أول وصف في عام 1864 من قبل بول بيرت باعتبارها وسيلة لتطوير نموذج لدراسة نظم الدورة الدموية المشتركة وتتألف من الانضمام للجلد والعضلات جدران اثنين من الفئران 1. تعايش التصاقي يعزز تشكيل الأوعية الدموية الدقيقة في موقع الالتهاب 3 وكان العديد من التطبيقات في الدراسات الفسيولوجية، مثل الاتصالات الهرمونية بين الغدة النخامية والغدد التناسلية وكذلك دور الكلى في ارتفاع ضغط الدم 4. واستخدمت كذلك للتحقيق في التوظيف ودمج الخلايا الاصلية في اتساع الأوعية الدموية 5، والهجرة من الخلايا الجذعية المكونة للدم 6، والاتجار اللمفاويات 7، وكذلك دور وحركية تعميم الخلايا الالتهابية أو وقف في الورم ورم خبيث 8،9، ومرض الاعصاب 10. واحدة ميزة كبيرة من الأكاذيب تعايش التصاقيفي أن الحيوانات شراكة تقاسم المستضدات الشائعة المتداولة، مما يسمح الهجرة الخلية واتساع الأوعية الدموية دون إحداث رد فعل مناعي. الأهم من ذلك، ويسمان وآخرون أظهرت أن تعايش التصاقي بين الفئران الذكور والإناث لا يؤدي إلى تشكيل الأجسام المضادة المضادة HY 11. في البروتوكول الأصلي التي وصفها بول بيرت وانضم الحيوانات اثنين معا من خلال اتصال الجلد والعضلات الجدران 1. ولكن هذه الطريقة تسبب ضغطا كبيرا على الحيوانات وأسفرت عن ارتفاع معدل الوفيات بسبب إصابة الجرح. منذ ذلك الحين، تم تعديل أسلوب تعايش التصاقي من قبل عدة مجموعات مع أبرزها هو موضوع البروتوكول المقترح من قبل Bunster وماير في عام 1933 2. وشملت طريقتهم الانضمام للمفاصل الكتف، تجاويف الجسم، والجلد، والسماح أفضل الدعم وألم أقل للحيوانات. في نفس الوقت، أدت الطريقة الجديدة في مجال الرعاية اللاحقة للعمليات الجراحية والحد الأدنى من دلالةانخفضت معدلات وفيات آبير. بروتوكول الموصوفة هنا هو تعديل للتقنية Bunster وماير التي هي أقل الغازية ويسمح الانضمام أكثر ثباتا. وهي ترتبط الفئران من خلال مفاصل الكوع والركبة وكذلك الجلد. هذا الانضمام يمنع تمديد الجلد وبالتالي يسبب ألم أقل والمضاعفات. نحن هنا وصف انضمامه من نوع البرية (WT) الماوس الكبار إلى GFP التأسيسي معربا عن الماوس. وتبين لنا أن أسبوعين بعد الجراحة يمكن أن نحقق 50٪ من الخيمرية الدم مما يدل على فعالية هذا الإجراء الجراحي لإنشاء نظام الدورة الدموية المشتركة.

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Name of equipment</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog number</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane-Phoenix</td>
			<td>Clipper</td>
			<td>NDC 57319-559-06</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Posi-Seal Induction Chamber</td>
			<td>Molecular Imaging Products</td>
			<td>AS-01-0530-SM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Portable Anesthesia System</td>
			<td>Molecular Imaging Products</td>
			<td>AS-01-0007</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gaymer T Pump</td>
			<td>Gaymar Industries, Inc</td>
			<td>TP650</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Warming Blanket (Heating pad)</td>
			<td>Kent Scientific Corp</td>
			<td>TP-22G</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5101</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools (FST)</td>
			<td>FST 14063-09</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder</td>
			<td>FST</td>
			<td>FST 12501-13</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrical shaver</td>
			<td>Oster</td>
			<td>Golden A5</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

parabiosis in mice: a detailed protocol

تعايش التصاقي هو اتحاد الجراحية اثنين من الكائنات السماح تقاسم الدورة الدموية. ربط الجلد من حيوانين يعزز تشكيل الأوعية الدموية الدقيقة في موقع الالتهاب. شركاء التعايش الالتصاقي مشاركة مستضدات المتداولة، وبالتالي خالية من رد فعل جهاز المناعة السلبية. وصف لأول مرة من قبل بول بيرت في عام 1864 1، وقد تم صقل الجراحة تعايش التصاقي بواسطة Bunster وماير في عام 1933 لتحسين البقاء على قيد الحياة الحيوانية 2. في البروتوكول الحالي، وانضم اثنين من الفئران جراحيا بعد تعديل Bunster وتقنية ماير. ترتبط الحيوانات من خلال مفاصل الكوع والركبة تليها مرفق من الجلد يمكن دعم قوي يحول دون الضغط على الجلد خياطة. هنا، نحن تصف بالتفصيل التعايش الالتصاقي الانضمام من كل مكان معربا عن GFP الماوس إلى البرية من نوع (WT) الماوس. بعد أسبوعين من الإجراء، يتم فصل زوج، ويمكن الكشف عن الخلايا GFP إيجابية من خلال تحليل تدفق cytometric في circulat الدمايون من الفأرة WT. والخيمرية الدم يسمح احد لدراسة إسهام الخلايا المنتشرة من حيوان واحد في الآخر.

نتائج المتوقعة للتعايش التصاقي اثنين من الكائنات هو مساهمة متساوية من نظام الدورة الدموية كل حيوان إلى الدورة الدموية شيوعا (الشكل 2). يمكن للمرء أن تحقق بسهولة موازنة ناجحة من دم الفئران WT وGFP إيجابية parabiosed عن طريق تحليل تدفق cytometric. هنا، تم الحصول على الدم ال...

Watch this Scientific Journal Video about Parabiosis in Mice: A Detailed Protocol at JoVE.com

Parabiosis in Mice: A Detailed Protocol

تعايش التصاقي في الفئران: بروتوكول مفصل

التعايش الالتصاقي انضمام اثنين من الكائنات الحية يؤدي إلى تطوير نظام الدورة الدموية المشتركة. في هذا البروتوكول، ونحن تصف الخطوات الجراحية لتشكيل التعايش الالتصاقي اتصال بين الماوس من النوع البري والتأسيسية، معربا عن GFP الماوس.

Parabiosis is a surgical union of two organisms allowing sharing of the blood circulation. Attaching the skin of two animals promotes formation of ...

Research

JoVE Journal

Medicine

The Trier Social Stress Test Protocol for Inducing Psychological Stress

اختبار الإجهاد ترير الاجتماعي بروتوكول لإحداث الضغط النفسي

This article demonstrates a psychological stress protocol for use in a laboratory setting.  Protocols that allow researchers to study the biological ...

Protocol for Long Duration Whole Body Hyperthermia in Mice

بروتوكول لونغ ارتفاع الحرارة المدة الجسم الجامع في الفئران

Hyperthermia is a general term used to define the increase in core body temperature above normal. It is often used to describe the increased core body ...

Collection Protocol for Human Pancreas

بروتوكول لجمع البنكرياس الإنسان

This dissection and sampling procedure was developed for the Network for Pancreatic Organ Donors with Diabetes (nPOD) program to standardize preparation ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

الحقن الشريان السباتي لوأضافا الدوائية وتحليل Taxanes في الفئران

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

A Simple Critical-sized Femoral Defect Model in Mice

بسيطة الحرجة الحجم فخذي عيب النموذجي في الفئران

While bone has a remarkable capacity for regeneration, serious bone trauma often results in damage that does not properly heal. In fact, one tenth of all ...

Heterotopic Renal Autotransplantation in a Porcine Model: A Step-by-Step Protocol

منتبذ الكلوي الزرع الذاتي في لحم الخنزير نموذج: بروتوكول خطوة بخطوة

Kidney transplantation is the treatment of choice for patients suffering from end-stage renal disease. It offers better life expectancy and higher quality ...

A Step by Step Protocol for Subretinal Surgery in Rabbits

خطوة بالبروتوكول الخطوة لجراحة تحت الشبكية في الأرانب

Age related macular degeneration (AMD), retinitis pigmentosa, and other RPE related diseases are the most common causes for irreversible loss of vision in ...

Creation of Abdominal Adhesions in Mice

إنشاء البطن التصاقات في الفئران

Abdominal adhesions consist of fibrotic tissue that forms in the peritoneal space in response to an inflammatory insult, typically surgery or ...

A Detailed Protocol for Perspiration Monitoring Using a Novel, Small, Wireless Device

بروتوكول مفصل لرصد العرق عن طريق رواية والصغيرة، جهاز لاسلكي

Perspiration monitoring can be utilized for the detection of certain diseases, such as thermoregulation and mental disorders, particularly when the ...

A Detailed Protocol for Physiological Parameters Acquisition and Analysis in Neurosurgical Critical Patients

بروتوكول مفصل للمعلمات الفسيولوجية اقتناء وتحليل في جراحة الأعصاب المرضى الحرجة

Intracranial pressure (ICP) monitoring is now widely used in neurosurgical critical patients. Besides mean ICP value, the ICP derived parameters such as ...