Name: parabiosis in mice: a detailed protocol
Uploaded: 2013-10-06T21:30:00
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著者らは、手術法の支援のためにAdrianeモズレーとLibuse Jerabek（スタンフォード）に感謝したいと思います。

すべての動物実験は、実験動物の管理と使用に関するUCLA​​の動物管理使用委員会のガイドラインと健康ガイドの国立研究所に従って行った。以下の手順の持続時間は、最初から最後まで約45〜60分である。 1。手術野の調製<ol><li>きれいな動物の手術室での手順を実行します。 </li><li>設備：イソフルラン気化、加熱パッド付きGaymer Tポンプ。 </li><li>無菌ツール：2湾曲?...

<ol>
	<li>Bert, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exp&#233;riences+et+consid&#233;rations+sur+la+greffe+animale.">Exp&#233;riences et consid&#233;rations sur la greffe animale.</a> Journal de l'Anatomie et de la Physiologie. 1, 69-87 .</li><li>Bunster, E., Meyer, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+methods+of+parabiosis.">Improved methods of parabiosis.</a> Anat. Rec. 57, 339-380 (1933).</li><li>Waskow, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+parabiotic+mice+for+the+study+of+DC+and+DC+precursor+circulation.">Generation of parabiotic mice for the study of DC and DC precursor circulation.</a> Methods Mol. Biol. 595, 413-428 (2010).</li><li>Finerty, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parabiosis+in+physiological+studies.">Parabiosis in physiological studies.</a> Physiol. Rev. 32, 277-302 (1952).</li><li>Aicher, A., Heeschen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonbone+marrow-derived+endothelial+progenitor+cells:+what+is+their+exact+location.">Nonbone marrow-derived endothelial progenitor cells: what is their exact location.</a> Circ. Res. 101, e102 (2007).</li><li>Abe, S., Boyer, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cells+derived+from+the+circulation+contribute+to+the+repair+of+lung+injury.">Cells derived from the circulation contribute to the repair of lung injury.</a> Am. J. Respir. Crit. Care Med. 170, 1158-1163 (2004).</li><li>Donskoy, E., Goldschneider, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thymocytopoiesis+is+maintained+by+blood-borne+precursors+throughout+postnatal+life.+A+study+in+parabiotic+mice.">Thymocytopoiesis is maintained by blood-borne precursors throughout postnatal life. A study in parabiotic mice.</a> J. Immunol. 148, 1604-1612 (1992).</li><li>Powell, A. E., Anderson, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fusion+between+Intestinal+epithelial+cells+and+macrophages+in+a+cancer+context+results+in+nuclear+reprogramming.">Fusion between Intestinal epithelial cells and macrophages in a cancer context results in nuclear reprogramming.</a> Cancer Res. 71, 1497-1505 (2011).</li><li>Duyverman, A. M., Kohno, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+transient+parabiosis+skin+transplantation+model+in+mice.">A transient parabiosis skin transplantation model in mice.</a> Nat. Protoc. 7, 763-770 (2012).</li><li>Ajami, B., Bennett, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+self-renewal+can+sustain+CNS+microglia+maintenance+and+function+throughout+adult+life.">Local self-renewal can sustain CNS microglia maintenance and function throughout adult life.</a> Nat. Neurosci. 10, 1538-1543 (2007).</li><li>Weissman, I. L., Jerabek, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tolerance+and+the+H-Y+antigen:+Requirement+for+male+T+cells,+but+not+B+cells,+to+induce+tolerance+in+neonatal+female+mice.">Tolerance and the H-Y antigen: Requirement for male T cells, but not B cells, to induce tolerance in neonatal female mice.</a> Transplantation. 37, 3-6 (1984).</li></ol>

ここで説明並体結合の方法は、低死亡率の最低限の技術的な問題と結果を示す。膝や肘の関節の取り付けはBunsterとマイヤー技術の大幅な改善である。しかし、手順はこのように、手術を通して無菌状態の維持が不可欠である侵襲性のままになります。さらに、手術部位の感染を防止するためには、parabiosed動物は抗生物質の組み合わせを受信し、定期的に監視することが重要である。しっか?...

並体結合、2生物の外科的接合は、最初に共有循環系を研究するためのモデルを開発するための方法として、ポール·バートによって1864に記載され、2匹のラット1の皮膚や筋肉の壁の接合で構成された。並体結合は、炎症3部位での微小血管の形成を促進し、このような下垂体および生殖腺だけでなく、高血圧4における腎臓の役割の間のホルモン通信などの生理学的研究にはいくつかのアプリケーションを、持っていた。さらに、血管新生5、造血幹細胞6の移動、およびリンパ球輸送7、ならびに腫瘍転移8,9における炎症性または幹細胞を循環させる役割と動態に前駆細胞の動員および組込みを調べるために使用されているおよび神経変性疾患10。 並体結合の嘘の一つの重要な利点その中で提携した動物は、免疫学的反応を誘発することなく、細胞移動および血管新生を可能にする一般的な循環抗原を共有しています。重要なことには、ワイズマンらは、雄と雌のマウス間の並体結合は、抗HY抗体11の形成をもたらさない示した。 ポール·バートによって記述、元のプロトコルでは、2匹の動物は、皮膚と筋肉の壁1の接続を介して接合した。しかしながら、この方法は、動物に重大な歪みを引き起こし、傷口の感染による高い死亡率となった。それ以来、並体結合技術が最も優勢が1933 2でBunsterとマイヤーによって提案されたプロトコルであることをいくつかのグループにより改訂されました。彼らの方法は、動物のためのより良いサポートが少なく、痛みを許可する、肩甲骨の関節、体腔と皮膚の接合含まれています。同時に、新しい方法は、最小限の術後ケアとsignifiの結果cantlyは死亡率を減少させた。本明細書に記載されたプロトコルは、低侵襲性であり、強固な接合が可能とBunsterマイヤー法の改良法である。すなわち、マウスは肘と膝関節、並びに皮膚を介して接続されている。したがって、これは皮膚のを防止拡張子を結合し、痛みが少なく、合併症を引き起こす。ここでは、マウスを表現する構成的GFPに野生型（WT）成体マウスの接合について説明します。私たちは、手術後2週間は、我々が共有循環系を作成するために、この外科処置の有効性を実証する血液キメラの50％を達成できることを示している。

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Name of equipment</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog number</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane-Phoenix</td>
			<td>Clipper</td>
			<td>NDC 57319-559-06</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Posi-Seal Induction Chamber</td>
			<td>Molecular Imaging Products</td>
			<td>AS-01-0530-SM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Portable Anesthesia System</td>
			<td>Molecular Imaging Products</td>
			<td>AS-01-0007</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gaymer T Pump</td>
			<td>Gaymar Industries, Inc</td>
			<td>TP650</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Warming Blanket (Heating pad)</td>
			<td>Kent Scientific Corp</td>
			<td>TP-22G</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5101</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools (FST)</td>
			<td>FST 14063-09</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder</td>
			<td>FST</td>
			<td>FST 12501-13</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrical shaver</td>
			<td>Oster</td>
			<td>Golden A5</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

parabiosis in mice: a detailed protocol

並体結合は、血液循環の共有を可能にする2つの生物の外科的和集合である。 2動物の皮膚を取り付けることは、炎症部位での微小血管の形成を促進する。並体結合パートナーは、循環抗原を共有するため、有害な免疫反応の自由である。まず1864年1でポール·バートによって記述、並体結合手術は動物の生存2を改善するために1933年にBunsterとマイヤーによって精製した。現在のプロトコルでは、2匹のマウスを外科Bunsterとマイヤー法の改良法以下の接合されている。動物は縫合し、皮膚に負担を防ぐ強固なサポートを可能にする皮膚の取り付けに続いて、肘と膝関節を介して接続されている。ここで、我々は詳細に野生型（WT）マウスにマウスを表現するユビキタスGFPの合流並体結合を記述します。血液循環液の循環に二週間処置後、ペアを分離し、GFP陽性細胞をフローサイトメトリー分析によって検出することができるWTマウスのイオン。血液キメラ現象は、一方が他方にある1動物からの循環細胞の寄与を調べることができます。

2の生物の並体結合の予想結果は、一般的な血液循環（ 図2）に、それぞれの動物の循環系の等しい貢献である。一つは、簡単にフローサイトメトリー分析によってparabiosed WT及びGFP陽性マウスの血液の正常な平衡を確認することができます。ここでは、静脈血を、手術後2週間目に両方parabiontsの尾から得られ、（赤血球を除くために）、末梢血細胞を分画した。分画された造血由?...

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Parabiosis in Mice: A Detailed Protocol

マウスの並体結合：詳細なプロトコル

2つの生物の結合並体結合は、共有循環系の開発につながる。このプロトコルでは、野生型マウスと恒常的GFP発現マウスとの間の並体結合接続を形成するための手術ステップを記載している。

Parabiosis is a surgical union of two organisms allowing sharing of the blood circulation. Attaching the skin of two animals promotes formation of ...

Research

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