Name: parabiosis in mice: a detailed protocol
Uploaded: 2013-10-06T21:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Parabiosis in Mice: A Detailed Protocol at JoVE.com

저자는 수술 기법에 대한 지원은 Adriane 모슬리와 Libuse 위 Jerabek (스탠포드) 감사의 말씀을 전합니다.

모든 동물 실험은 실험 동물의 관리 및 사용에 대한 UCLA의 동물 관리 및 사용위원회의 지침과 건강 가이드의 국립 연구소에 의해 수행되었다. 아래에 기술 된 절차의 지속 기간은 시작부터 끝까지 약 45-60 분이다. 1. 외과 분야의 제조 <ol><li> 깨끗한 동물 수술 방에서 절차를 수행합니다. </li><li> 장비 : 이소 플루 란 기화기, 가열 패드 Gaymer T 펌프. </li><li> 무균 도구 : 두 개의 ?...

<ol>
	<li>Bert, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exp&#233;riences+et+consid&#233;rations+sur+la+greffe+animale.">Exp&#233;riences et consid&#233;rations sur la greffe animale.</a> Journal de l'Anatomie et de la Physiologie. 1, 69-87 .</li><li>Bunster, E., Meyer, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+methods+of+parabiosis.">Improved methods of parabiosis.</a> Anat. Rec. 57, 339-380 (1933).</li><li>Waskow, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+parabiotic+mice+for+the+study+of+DC+and+DC+precursor+circulation.">Generation of parabiotic mice for the study of DC and DC precursor circulation.</a> Methods Mol. Biol. 595, 413-428 (2010).</li><li>Finerty, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parabiosis+in+physiological+studies.">Parabiosis in physiological studies.</a> Physiol. Rev. 32, 277-302 (1952).</li><li>Aicher, A., Heeschen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonbone+marrow-derived+endothelial+progenitor+cells:+what+is+their+exact+location.">Nonbone marrow-derived endothelial progenitor cells: what is their exact location.</a> Circ. Res. 101, e102 (2007).</li><li>Abe, S., Boyer, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cells+derived+from+the+circulation+contribute+to+the+repair+of+lung+injury.">Cells derived from the circulation contribute to the repair of lung injury.</a> Am. J. Respir. Crit. Care Med. 170, 1158-1163 (2004).</li><li>Donskoy, E., Goldschneider, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thymocytopoiesis+is+maintained+by+blood-borne+precursors+throughout+postnatal+life.+A+study+in+parabiotic+mice.">Thymocytopoiesis is maintained by blood-borne precursors throughout postnatal life. A study in parabiotic mice.</a> J. Immunol. 148, 1604-1612 (1992).</li><li>Powell, A. E., Anderson, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fusion+between+Intestinal+epithelial+cells+and+macrophages+in+a+cancer+context+results+in+nuclear+reprogramming.">Fusion between Intestinal epithelial cells and macrophages in a cancer context results in nuclear reprogramming.</a> Cancer Res. 71, 1497-1505 (2011).</li><li>Duyverman, A. M., Kohno, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+transient+parabiosis+skin+transplantation+model+in+mice.">A transient parabiosis skin transplantation model in mice.</a> Nat. Protoc. 7, 763-770 (2012).</li><li>Ajami, B., Bennett, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+self-renewal+can+sustain+CNS+microglia+maintenance+and+function+throughout+adult+life.">Local self-renewal can sustain CNS microglia maintenance and function throughout adult life.</a> Nat. Neurosci. 10, 1538-1543 (2007).</li><li>Weissman, I. L., Jerabek, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tolerance+and+the+H-Y+antigen:+Requirement+for+male+T+cells,+but+not+B+cells,+to+induce+tolerance+in+neonatal+female+mice.">Tolerance and the H-Y antigen: Requirement for male T cells, but not B cells, to induce tolerance in neonatal female mice.</a> Transplantation. 37, 3-6 (1984).</li></ol>

여기서 설명하는 parabiosis 방법은 낮은 사망률 최소한의 기술적 어려움과 결과를 제시한다. 무릎 및 팔꿈치 관절의 첨부 파일 Bunster과 메이어 기술의 상당한 개선이다. 그러나, 프로 시저 따라서 수술 내내 멸균 조건의 유지가 필수적이다 침습 남아있다. 상기 수술 부위의 감염을 방지하기 위해서는 parabiosed 동물 항생제의 조합을 수신하고 주기적으로 감시하는 것이 중요하다. 회사 지원을 보장하?...

Parabiosis, 수술은이 유기체의 접합은, 제 공유 순환계를 연구하는 모델을 개발하는 방법으로 폴 버트에 의해 1864 년에 설명되고이 한 쥐의 피부와 근육 벽의 결합으로 구성 하였다. Parabiosis 염증 3의 사이트에있는 미세 혈관의 형성을 촉진하고 뇌하수체와 생식선뿐만 아니라 고혈압 4 신장의 역할 사이의 호르몬 통신 등의 생리 학적 연구에서 여러 응용 프로그램을 가지고 있습니다. 그것은 또한, 혈관 신생 4.0, 조혈 줄기 세포 (6)의 이동, 및 림프구 매매 7뿐만 아니라 종양 전이 8,9에서 염증성 또는 줄기 세포 순환의 역할과 동역학에서 전구 세포의 모집 및 통합을 조사하기 위해 사용되어왔다 및 신경 퇴행성 질환 10. parabiosis 거짓말의 한 가지 중요한 장점그의 제휴 동물 면역 반응을 유발하지 않고 세포의 이동과 혈관 신생을 허용, 일반적인 순환 항원을 공유 할 수 있습니다. 중요한 것은, 와이즈맨 등.이 남성과 여성의 생쥐 사이 parabiosis을 보여 주었다은 11 항체 안티 HY의 형성으로 이어질하지 않습니다. 폴 버트에 의해 설명 원래의 프로토콜에서 두 동물은 피부와 근육 벽 (1)의 연결을 통해 함께 합류했다. 그러나이 방법은, 동물에 상당한 부담을 야기 인해 상처의 감염에 높은 사망률의 결과. 그 이후 parabiosis 기술은 가장 지배적 인 1933 년 2 Bunster과 메이어에 의해 제안 된 프로토콜 인으로 여러 그룹에 의해 수정되었습니다. 그들의 방법은 동물에 대한 더 나은 지원 및 더 적은 고통을 허용, 견갑골의 관절, 체강, 피부의 결합 포함되어 있습니다. 동시에, 새로운 방법은 최소의 수술 치료와 유의 귀착cantly는 사망률을 감소. 여기에 설명 된 프로토콜은 덜 침습적이고 탄력이 합류 할 수 Bunster과 메이어 기술의 변형이다. 즉, 마우스는 팔꿈치, 무릎 관절뿐만 아니라 피부를 통해 연결된다. 따라서이 결합을 막고 피부의 확장과 적은 통증과 합병증의 원인이됩니다. 여기에서 우리는 마우스를 표현하는 구성 적 GFP에 야생형 (WT) 성인 마우스의 결합을 설명합니다. 우리는 수술 후 2 주 우리가 공유 순환계를 만드는이 수술의 효능을 입증 혈액 키메라 비율​​의 50 %를 달성 할 수 있음을 보여준다.

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Name of equipment</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog number</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane-Phoenix</td>
			<td>Clipper</td>
			<td>NDC 57319-559-06</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Posi-Seal Induction Chamber</td>
			<td>Molecular Imaging Products</td>
			<td>AS-01-0530-SM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Portable Anesthesia System</td>
			<td>Molecular Imaging Products</td>
			<td>AS-01-0007</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gaymer T Pump</td>
			<td>Gaymar Industries, Inc</td>
			<td>TP650</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Warming Blanket (Heating pad)</td>
			<td>Kent Scientific Corp</td>
			<td>TP-22G</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5101</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools (FST)</td>
			<td>FST 14063-09</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder</td>
			<td>FST</td>
			<td>FST 12501-13</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrical shaver</td>
			<td>Oster</td>
			<td>Golden A5</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

parabiosis in mice: a detailed protocol

Parabiosis 혈행의 공유를 허용하는 두 가지 생물의 연합 수술이다. 이 동물의 피부에 부착하면 염증 부위에서의 미세 혈관 형성을 촉진한다. Parabiotic 파트너는 순환 항원을 공유하고, 따라서 불리한 면역 반응의 무료입니다. 먼저 1864 년 1 폴 버트에 의해 설명, parabiosis 수술은 동물의 생존 2을 개선하기 위해 1933 년에 Bunster과 메이어에 의해 세련되었다. 현재 프로토콜에서 두 개의 마우스는 수술 Bunster과 메이어 기술의 변경 다음과 결합된다. 동물은 봉합 피부에 부담을 방지 확고한 지원을 허용하는 피부의 첨부 파일 다음에 팔꿈치와 무릎 관절을 통해 연결되어있다. 여기서, 우리는 세부 사항에서 야생형 (WT) 마우스에 마우스를 표현하는 유비쿼터스 GFP의 결합 parabiotic에 대해 설명합니다. 혈액 circulat 두 주 절차 후에, 한 쌍의 분리되고 GFP 양성 세포는 유세포 분석에 의해 검출 될 수있다WT 마우스의 이온. 혈액 키메라는 하나가 다른 하나의 동물에서 순환 세포의 기여를 조사 할 수있다.

두 생물의 parabiosis의 예상 결과는 일반적인 혈액 순환에 각 동물의 순환 시스템의 동일한 기여 (그림 2)입니다. 하나는 쉽게 유세포 분석에 의한 parabiosed WT와 GFP 긍정적 인 생쥐의 혈액의 성공적인 평형을 확인할 수 있습니다. 여기에, 정맥의 혈액은 수술 후에 2 주에 모두 parabionts의 꼬리에서 얻어진 것으로, (적혈구를 제외하는) 말초 혈액 세포에 대한 분획 하였다. 분별 조혈 유래 세?...

Watch this Scientific Journal Video about Parabiosis in Mice: A Detailed Protocol at JoVE.com

Parabiosis in Mice: A Detailed Protocol

마우스의 Parabiosis : 자세한 프로토콜

이 유기체의 접합 Parabiotic 공유 순환 시스템의 개발에 이르게한다. 이 프로토콜에서, 우리는 야생형 마우스와 구성 적 GFP 발현 마우스 사이 parabiotic 연결을 형성하는 수술 단계를 설명한다.

Parabiosis is a surgical union of two organisms allowing sharing of the blood circulation. Attaching the skin of two animals promotes formation of ...

Research

JoVE Journal

Medicine

The Trier Social Stress Test Protocol for Inducing Psychological Stress

심리적 스트레스를 유발을위한 모금 사회 스트레스 테스트 프로토콜

This article demonstrates a psychological stress protocol for use in a laboratory setting.  Protocols that allow researchers to study the biological ...

연구

의학

Protocol for Long Duration Whole Body Hyperthermia in Mice

마우스의 긴 기간 온 몸이 고열에 대한 프로토콜

Hyperthermia is a general term used to define the increase in core body temperature above normal. It is often used to describe the increased core body ...

Collection Protocol for Human Pancreas

인간의 췌장을위한 컬렉션 프로토콜

This dissection and sampling procedure was developed for the Network for Pancreatic Organ Donors with Diabetes (nPOD) program to standardize preparation ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

마우스의 탁산의 약동학 및 약력 학적 분석을위한 경동맥 팅크

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

A Simple Critical-sized Femoral Defect Model in Mice

마우스의 간단한 임계 크기의 대퇴 결함 모델

While bone has a remarkable capacity for regeneration, serious bone trauma often results in damage that does not properly heal. In fact, one tenth of all ...

Heterotopic Renal Autotransplantation in a Porcine Model: A Step-by-Step Protocol

돼지 모델에서 이소성 신장자가 이식 : 단계별 프로토콜

Kidney transplantation is the treatment of choice for patients suffering from end-stage renal disease. It offers better life expectancy and higher quality ...

A Step by Step Protocol for Subretinal Surgery in Rabbits

토끼의 망막 수술에 대한 단계 프로토콜에 의해 단계

Age related macular degeneration (AMD), retinitis pigmentosa, and other RPE related diseases are the most common causes for irreversible loss of vision in ...

Creation of Abdominal Adhesions in Mice

마우스의 복부 유착의 창조

Abdominal adhesions consist of fibrotic tissue that forms in the peritoneal space in response to an inflammatory insult, typically surgery or ...

A Detailed Protocol for Perspiration Monitoring Using a Novel, Small, Wireless Device

소설을 사용하여 땀 모니터링에 대한 자세한 프로토콜, 소형, 무선 장치

Perspiration monitoring can be utilized for the detection of certain diseases, such as thermoregulation and mental disorders, particularly when the ...

A Detailed Protocol for Physiological Parameters Acquisition and Analysis in Neurosurgical Critical Patients

생리 적인 매개 변수에 대 한 자세한 프로토콜 수집 및 신경외과 중요 한 환자 분석

Intracranial pressure (ICP) monitoring is now widely used in neurosurgical critical patients. Besides mean ICP value, the ICP derived parameters such as ...