הפרדת חלבון עם SDS-PAGE

נתרן דודסיל סולפט פולי-אקרילאמיד ג'ל אלקטרופורזה, או SDS-PAGE, היא טכניקה נפוצה להפרדת תערובות של חלבונים בהתבסס על גודלם ולא שום דבר אחר. SDS, חומר ניקוי אניוני, משמש לייצור מטען אחיד לאורך חלבונים שהיו ליניאריים. על ידי טעינתם תחילה לתוך ג'ל עשוי polyacrylamide ולאחר מכן החלת שדה חשמלי על הג'ל, חלבונים מצופים SDS מופרדים לאחר מכן. השדה החשמלי משמש ככוח המניע, ומושך את החלבונים מצופים SDS לכיוון האנודה עם חלבונים גדולים יותר הנעים לאט יותר מחלבונים קטנים. על מנת לזהות חלבונים לפי גודל, תקני חלבון בגודל ידוע נטענים יחד עם דגימות ומפעלים באותם תנאים.

סרטון זה מציג מבוא ל- SDS-PAGE על ידי הסבר תחילה התיאוריה שמאחוריו ולאחר מכן הדגמת הליך שלב אחר שלב שלה. פרמטרים ניסיוניים שונים, כגון ריכוז polyacrylamide ומתח להחיל על הג'ל נדונים. שיטות הכתמה במורד הזרם כמו Coomassie וכתמי כסף מוצגים, וריאציות של השיטה, כמו אלקטרופורזה ג'ל 2D מוצגים.