Separazione delle proteine con SDS-PAGE

Sodium Dodecyl Sulfate Poly-Acrylamide Gel Electrophoresis, o SDS-PAGE, è una tecnica ampiamente utilizzata per separare miscele di proteine in base alle loro dimensioni e nient'altro. SDS, un detergente anionico, viene utilizzato per produrre una carica uniforme attraverso la lunghezza delle proteine che sono state linearizzate. Caricandole prima in un gel a base di poliacrilammide e poi applicando un campo elettrico al gel, le proteine rivestite di SDS vengono quindi separate. Il campo elettrico agisce come forza motrice, attirando le proteine rivestite SDS verso l'anodo con proteine più grandi che si muovono più lentamente rispetto alle piccole proteine. Al fine di identificare le proteine in base alle dimensioni, gli standard proteici di dimensioni note vengono caricati insieme ai campioni e vengono eseguiti nelle stesse condizioni.

Questo video presenta un'introduzione a SDS-PAGE spiegando prima la teoria alla base e successivamente dimostrando la sua procedura passo-passo. Vengono discussi vari parametri sperimentali, come la concentrazione di poliacrilammide e la tensione applicata al gel. Vengono introdotti metodi di colorazione a valle come Coomassie e macchie d'argento e vengono presentate variazioni del metodo, come l'elettroforesi su gel 2D.