Separação de Proteína com SDS-PAGE

Sulfato de sulfato de sódio Poli-Acrilamida Gel Electrophoresis, ou SDS-PAGE, é uma técnica amplamente utilizada para separar misturas de proteínas com base em seu tamanho e nada mais. SDS, um detergente aniônico, é usado para produzir uma carga uniforme em todo o comprimento das proteínas que foram linearizadas. Primeiro carregando-os em um gel feito de poliacrilamida e, em seguida, aplicando um campo elétrico ao gel, as proteínas revestidas de SDS são então separadas. O campo elétrico atua como a força motriz, atraindo proteínas revestidas de SDS em direção ao ânodo com proteínas maiores movendo-se mais lentamente do que pequenas proteínas. Para identificar proteínas por tamanho, padrões proteicos de tamanho conhecido são carregados junto com amostras e executados sob as mesmas condições.

Este vídeo apresenta uma introdução ao SDS-PAGE explicando primeiro a teoria por trás dele e, posteriormente, demonstrando seu procedimento passo-a-passo. Vários parâmetros experimentais, como a concentração de poliacrilamida e a tensão aplicada ao gel são discutidos. Métodos de coloração a jusante como Coomassie e manchas de prata são introduzidos, e variações do método, como a eletroforese de gel 2D são apresentadas.