Name: noninvasive intratracheal intubation to study the pathology and physiology of mouse lung
Uploaded: 2013-11-08T22:00:00
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Este trabajo fue apoyado por el Programa de Investigación Intramural del Instituto Nacional del Cáncer, el Centro para la Investigación del Cáncer.

El siguiente protocolo describe un método no invasivo, simple y rápida para entregar materiales de interés para los pulmones del ratón. Este procedimiento fue aprobado por el Comité de Cuidado de Animales y el empleo del Instituto Nacional del Cáncer. 1. Anestesia <ol><li> En primer lugar, anestesiar el ratón utilizando una mezcla de ketamina y xilazina (100 mg / kg de peso corporal y 10 mg / kg de peso corporal, respectivamente). Este es el ACUC recomienda la anestesia y la dosis. ...

<ol>
	<li>Das, S., Macdonald, K., Chang, H. Y., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+of+mouse+lung+intubation.">A simple method of mouse lung intubation.</a> J. Vis. Exp. (73), e50318 (2013).</li><li>Miller, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualization+of+murine+intranasal+dosing+efficiency+using+luminescent+Francisella+tularensis:+effect+of+instillation+volume+and+form+of+anesthesia.">Visualization of murine intranasal dosing efficiency using luminescent Francisella tularensis: effect of instillation volume and form of anesthesia.</a> PLoS One. 7, e31359 (2012).</li><li>Rayamajhi, M., Redente, E. F., Condon, T. V., Gonzalez-Juarrero, M., Riches, D. W., Lenz, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-surgical+intratracheal+instillation+of+mice+with+analysis+of+lungs+and+lung+draining+lymph+nodes+by+flow+cytometry.">Non-surgical intratracheal instillation of mice with analysis of lungs and lung draining lymph nodes by flow cytometry.</a> J. Vis. Exp. (51), e2702 (2011).</li><li>Riesenfeld, E. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhaled+salmeterol+and/or+fluticasone+alters+structure/function+in+a+murine+model+of+allergic+airways+disease.">Inhaled salmeterol and/or fluticasone alters structure/function in a murine model of allergic airways disease.</a> Respir. Res. 11, 22 (2010).</li><li>Rivera, B., Miller, S., Brown, E., Price, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+for+endotracheal+intubation+of+mice+and+rats+used+in+imaging+studies.">A novel method for endotracheal intubation of mice and rats used in imaging studies.</a> Contemp. Top. Lab Anim. Sci. 44, 52-55 (2005).</li><li>Bonniaud, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+transforming+growth+factor+beta1-induced+lung+fibrosis+is+blocked+by+an+orally+active+ALK5+kinase+inhibitor.">Progressive transforming growth factor beta1-induced lung fibrosis is blocked by an orally active ALK5 kinase inhibitor.</a> Am. J. Res. Crit. Care Med. 171, 889-898 (2005).</li><li>Bivas-Benita, M., Zwier, R., Junginger, H. E., Borchard, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-invasive+pulmonary+aerosol+delivery+in+mice+by+the+endotracheal+route.">Non-invasive pulmonary aerosol delivery in mice by the endotracheal route.</a> Eur. J. Pharm. Biopharm. 61, 214-218 (2005).</li><li>Haegens, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myeloperoxidase+deficiency+attenuates+lipopolysaccharide-induced+acute+lung+inflammation+and+subsequent+cytokine+and+chemokine+production.">Myeloperoxidase deficiency attenuates lipopolysaccharide-induced acute lung inflammation and subsequent cytokine and chemokine production.</a> J. Immunol. 182, 7990-7996 (2009).</li><li>Jackson, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exposure+of+pregnant+mice+to+carbon+black+by+intratracheal+instillation:+toxicogenomic+effects+in+dams+and+offspring.">Exposure of pregnant mice to carbon black by intratracheal instillation: toxicogenomic effects in dams and offspring.</a> Mutat. Res. 745, 73-83 (2012).</li><li>Bodewes, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogenesis+of+Influenza+A/H5N1+virus+infection+in+ferrets+differs+between+intranasal+and+intratracheal+routes+of+inoculation.">Pathogenesis of Influenza A/H5N1 virus infection in ferrets differs between intranasal and intratracheal routes of inoculation.</a> Am. J. Pathol. 179, 30-36 (2011).</li><li>Winslow, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suppression+of+lung+adenocarcinoma+progression+by+Nkx2-1.">Suppression of lung adenocarcinoma progression by Nkx2-1.</a> Nature. 473, 101-104 (2011).</li></ol>

Intubación intratraqueal aquí descrito es un método no invasivo simple, pero excelente para entregar de manera uniforme los materiales de interés para los pulmones del ratón. Este método permite el estudio del efecto y / o función del material administrado en la fisiología y / o patología de pulmón. Los materiales administrados pueden ser moléculas endógenas, tales como citocinas, o materiales exógenos tales como productos químicos xenobióticos / fármacos, carcinógenos, contaminantes, alérgenos, o viru...

Pulmón es un órgano donde muchas enfermedades devastadoras son comúnmente diagnosticados. Entre ellos, el cáncer de pulmón es el segundo cáncer más diagnosticado en hombres y mujeres, y la causa más común de muerte por cáncer. Enfermedad pulmonar obstructiva crónica, también conocida como el enfisema y la bronquitis crónica, es una enfermedad muy grave y la tercera causa principal de muerte en los Estados Unidos. En 2011, se estimó que 25,9 millones de estadounidenses tenían asma, incluyendo 7,1 millones de niños menores de 18 años. El asma es la tercera causa de hospitalización entre los niños menores de 15 años (American Lung Association, <a href="http://www.lung.org" target="_blank">http://www.lung.org</a> ). Con el fin de estudiar la fisiopatología y / o la etiología de estas enfermedades devastadoras y sus mecanismos subyacentes, el uso de modelos precisos es crítica en relación con la administración conveniente y no invasiva de varios materiales de interés para pulmón. Los ratones proporcionan una de las mejores modelos deestudiar los mecanismos moleculares que subyacen a la patología y fisiología de enfermedades pulmonares a causa de la creciente disponibilidad de knockout y los ratones transgénicos y una gran cantidad de información genética disponible. Varios métodos han sido utilizados por un número de investigadores en diferentes contextos para entregar materiales de interés para los pulmones del ratón, incluyendo inhalación, instilación intranasal, la instilación intratraqueal, y la intubación endotraqueal 1-4. Este último procedimiento no ha sido utilizado de forma rutinaria, ya que se considera más bien difícil de realizar. Intubación intratraqueal se describe en el presente documento es un método no invasivo, simple y rápida para entregar materiales de interés para los pulmones del ratón con el fin de estudiar el efecto de los materiales entregados en los patrones de expresión de genes, la patología y / o la fisiología del pulmón 5. Esta técnica asegura la entrega de materiales exógenos a todo un pulmón y no implica cualquier tipo de cirugía la supervivencia y por lo tanto se likely ser aprobado por los comités de cuidado y uso de animales institucionales.

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>KetaVed</td>
			<td>Vedco</td>
			<td></td>
			<td>Ketamine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AnaSed Injection 20 mg</td>
			<td>LLOYD</td>
			<td></td>
			<td>Xylazine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BioLite Stand</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>RIS100</td>
			<td>For mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BioLite Intubation Illumination System</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>BIO MI-KIT</td>
			<td>For mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>22 G, 1 inch i.v. catheter</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>SR-OX2225CA</td>
			<td>For mice below 30 g.&#160;Catheter is used only for the case where the Intubation Illumination System is not used.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>or</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 G, 1 inch i.v. catheter</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>SR-OX2025CA</td>
			<td>For mice over 30 g.&#160;Catheter is used only for the case where the Intubation Illumination System is not used.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Catheter is used only for the case where the Intubation Illumination System is not used</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

noninvasive intratracheal intubation to study the pathology and physiology of mouse lung

El uso de un modelo que imita el estado de las enfermedades pulmonares en los seres humanos es crítico para el estudio de la fisiopatología y / o la etiología de una enfermedad en particular y para el desarrollo de la intervención terapéutica. Con la creciente disponibilidad de knockout y transgénicos derivados, junto con una gran cantidad de información genética, los ratones proporcionan una de las mejores modelos para estudiar los mecanismos moleculares que subyacen a la patología y la fisiología de las enfermedades pulmonares. Inhalación, instilación intranasal, la instilación intratraqueal, y la intubación endotraqueal son las técnicas más utilizadas por varios investigadores para administrar los materiales de interés para los pulmones del ratón. Hay pros y los contras de cada técnica en función de los objetivos de un estudio. Aquí un método intubación endotraqueal no invasivo que puede entregar directamente materiales exógenos a los pulmones del ratón se presenta. Esta técnica se aplica para administrar bleomicina a los pulmones del ratón como un modelo para estudiar la fibrosis pulmonar. &lt;/ P&gt;

Inicialmente, la solución de color verde teñido se utiliza para intubar ratones durante la práctica. El pulmón fue resecado inmediatamente después de la intubación para examinar cómo de manera uniforme el color se distribuye en el pulmón (Figura 2). Esta técnica se ha aplicado para estudiar la fibrosis pulmonar inducida por bleomicina utilizando ratones C57BL / 6. Cuando los ratones fueron intubados por vía intratraqueal con 1,2 U / kg de bleomicina o solución salina como control y la necrops...

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Noninvasive Intratracheal Intubation to Study the Pathology and Physiology of Mouse Lung

El uso de un modelo que imita el estado de las enfermedades pulmonares en los seres humanos es crítico para el estudio de la fisiopatología y / o la etiología de una enfermedad en particular y para el desarrollo de la intervención terapéutica. Aquí un método intubación endotraqueal no invasivo que puede entregar directamente materiales exógenos a los pulmones del ratón se presenta.

No Invasiva Intratraqueal Intubación para Estudiar la Patología y Fisiología de pulmón de ratón

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