JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

0:00

Overview

0:43

ELISA: Components and Principles

4:03

Running an ELISA

7:18

Applications

9:53

Summary

שיטת אליסה

חיסון הקשור לאנזים (ELISA) מבוצע בדרך כלל כדי לזהות את הנוכחות ו/או הכמות של חלבון יעד של עניין בתוך מדגם ניסיוני. זיהוי חלבון היעד מתאפשר על ידי נוגדנים, מה להפוך את ELISA לחיסון. באמצעות סדרה של שלבי דגירה ושטיפה, נוגדנים אלה, המקושרים לעתים קרובות, או מצומדים, לאנזים, יזהו חלבון ציפוי בתחתית באר על צלחת microtiter. כאשר נחשף למצע, אנזים הקשור לנוגדנים יגרום לשינוי צבע, ובכך יציין את נוכחותו של חלבון העניין במדגם.

בסרטון זה, התיאוריה שמאחורי אופן העבודה של ELISAs מוסברת, כולל דיון בכריכה ראשונית ומשנית של נוגדנים וחשיבות חסימת צעדים. התיאוריה מלווה בפועל, ככל שהסרטון מתקדם להסבר על ההליך שלב אחר שלב. לבסוף, וריאציות של ELISA הסטנדרטי כגון כריך ו ELISAs תחרותי מוצגים, ויישומים בעולם האמיתי של שיטה זו, כגון בבדיקות הריון ללא מרשם מוסברים.

ELISA, או חיסון הקשורים לאנזים, היא שיטה נפוצה לקביעת נוכחות או היעדר חלבון יעד ספציפי.

באמצעות סדרה של שלבי כביסה וקשירה, נוגדן מצומד, או מקושר, לאנזים יזהה חלבון מטרה בתחתית צלחת 96-well. כאשר מצע נוסף לדגימה, תתרחש תגובה אנזימטית, שתגרום לשינוי צבע המאפשר זיהוי וכימות של חלבון היעד.

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

-- Views

Related Videos

Application Videos

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved