Name: quantitative and temporal control of oxygen microenvironment at the single islet level
Uploaded: 2013-11-17T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Quantitative and Temporal Control of Oxygen Microenvironment at the Single Islet Level at JoVE.com

Detta arbete stöddes av National Institutes of Health bidrag R01 DK091526 (JO), NSF 0.852.416 (DTE), och Chicago Diabetes Project.

1. Förbereda Mouse Islets <ol><li> Dissekera C57BL / 6 möss och isolera cellöar genom kollagenasdigestion och Ficoll densitetsgradient separation. (Se Jove artiklar som hänvisas till i 2,3). </li><li> Inkubera cellöar i RPMI-1640-medium innehållande 10% FBS, 1% penicillin / streptomycin och 20 mM HEPES i petriskålar (37 ° C, 5% CO2). Post-isolering, cellöar odling under 24 h före användning i experimenten. Använd holmar inom 1-2 dagar för att säkerställa jämna resultat. </li></ol>...

<ol>
	<li>Lo, J. F., Wang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Islet+Preconditioning+via+Multimodal+Microfluidic+Modulation+of+Intermittent+Hypoxia.">Islet Preconditioning via Multimodal Microfluidic Modulation of Intermittent Hypoxia.</a> Anal. Chem. 84 (4), 1987-1993 (2012).</li><li>Qi, M., Barbaro, B., Wang, S., Wang, Y., Hansen, M., Oberholzer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+Pancreatic+Islet+Isolation:+Part+I:+Digestion+and+Collection+of+Pancreatic+Tissue.">Human Pancreatic Islet Isolation: Part I: Digestion and Collection of Pancreatic Tissue.</a> J. Vis. Exp.. , e1125 (2009).</li><li>Qi, M., Barbaro, B., Wang, S., Wang, Y., Hansen, M., Oberholzer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+Pancreatic+Islet+Isolation:+Part+II:+Purification+and+Culture+of+Human+Islets.">Human Pancreatic Islet Isolation: Part II: Purification and Culture of Human Islets.</a> J. Vis. Exp.. , e1343 (2009).</li><li>Shapiro, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Islet+Transplantation+in+Seven+Patients+with+Type+1+Diabetes+Mellitus+Using+a+Glucocorticoid-Free+Immunosuppressive+Regimen.">Islet Transplantation in Seven Patients with Type 1 Diabetes Mellitus Using a Glucocorticoid-Free Immunosuppressive Regimen.</a> N. Engl. J. Med. 343 (4), 230-238 (2000).</li><li>Adewola, A. F., Wang, Y., Harvat, T., Eddington, D. T., Lee, D., Oberholzer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Multi-Parametric+Islet+Perifusion+System+within+a+Microfluidic+Perifusion+Device.">A Multi-Parametric Islet Perifusion System within a Microfluidic Perifusion Device.</a> J. Vis. Exp.. , e1649 (2010).</li><li>Mohammed, J. S., Wang, Y., Harvat, T. A., Oberholzer, J., Eddington, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+device+for+multimodal+characterization+of+pancreatic+islets.">Microfluidic device for multimodal characterization of pancreatic islets.</a> Lab Chip. 9, 97-106 (2009).</li><li>Carreras, A., Kayali, F., Zhang, J., Hirotsu, C., Wang, Y., Gozal, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolic+Effects+Of+Intermittent+Hypoxia+In+Mice:+Steady+Versus+High+Frequency+Applied+Hypoxia+Daily+During+The+Rest+Period.">Metabolic Effects Of Intermittent Hypoxia In Mice: Steady Versus High Frequency Applied Hypoxia Daily During The Rest Period.</a> AJP - Regu Physiol. 303 (7), 700-709 (2012).</li><li>Lee, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time-dependent+changes+in+glucose+and+insulin+regulation+during+intermittent+hypoxia+and+continuous+hypoxia.">Time-dependent changes in glucose and insulin regulation during intermittent hypoxia and continuous hypoxia.</a> Eur. J. Appl. Physiol. , (2012).</li><li>Kane, B. J., Zinner, M. J., Yarmush, M. L., Toner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liver-specific+functional+studies+in+a+microfluidic+array+of+primary+mammalian+hepatocytes.">Liver-specific functional studies in a microfluidic array of primary mammalian hepatocytes.</a> Anal. Chem. 78, 4291-4298 (2006).</li><li>Lam, R. H. W., Kim, M. C., Thorsen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Culturing+aerobic+and+anaerobic+bacteria+and+mammalian+cells+with+a+microfluidic+differential+oxygenator.">Culturing aerobic and anaerobic bacteria and mammalian cells with a microfluidic differential oxygenator.</a> Anal. Chem. 81, 5918-5924 (2009).</li><li>Polinkovsky, M., Gutierrez, E., Levchenko, A., Groisman, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fine+temporal+control+of+the+medium+gas+content+and+acidity+and+on-chip+generation+of+series+of+oxygen+concentrations+for+cell+cultures.">Fine temporal control of the medium gas content and acidity and on-chip generation of series of oxygen concentrations for cell cultures.</a> Lab Chip. 9, 1073-1084 (2009).</li><li>Mehta, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+measurement+and+control+of+oxygen+levels+in+microfluidic+poly(dimethylsiloxane)+bioreactors+during+cell+culture.">Quantitative measurement and control of oxygen levels in microfluidic poly(dimethylsiloxane) bioreactors during cell culture.</a> Biomed. Microdev. 9 (2), 123-134 (2007).</li><li>Vollmer, A. P., Probstein, R. F., Gilbert, R., Thorsen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+an+integrated+microfluidic+platform+for+dynamic+oxygen+sensing+and+delivery+in+a+flowing+medium.">Development of an integrated microfluidic platform for dynamic oxygen sensing and delivery in a flowing medium.</a> Lab Chip. 5, 1059-1066 (2005).</li><li>Chen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+oxygen+gradients+in+microfluidic+devices+for+cell+culture+using+spatially+confined+chemical+reactions.">Generation of oxygen gradients in microfluidic devices for cell culture using spatially confined chemical reactions.</a> Lab Chip. 11, 3626-3633 (2011).</li><li>Lo, J. F., Sinkala, E., Eddington, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxygen+gradients+for+open+well+cellular+cultures+via+microfluidic+substrates.">Oxygen gradients for open well cellular cultures via microfluidic substrates.</a> Lab Chip. 10, 2394-2401 (2010).</li></ol>

De olika formerna integrerade i denna holme hypoxi teknik presentera flera punkter noteras här för felsökning. Först de isolerade öarna fortsätter att brytas ned och upplösas i kultur på grund av matsmältningsenzymer från körtelceller. Standardisera försök till 1-2 dagar efter holme isolering är alltså avgörande för att få konsekventa resultat. För det andra, det vattenhaltiga flödet stoppas under hypoxi och intermittent hypoxi för att förhindra konvektiv clearance vid gränsen mellan laminärt fl?...

Dynamisk hypoxi är viktigt i biologi, särskilt för holme transplantationer Dynamisk hypoxi är en viktig fysiologisk och patofysiologisk parameter i många biologiska vävnader. Förändring av syre, till exempel, är en potent utvecklingssignal i angiogenes. Dessutom, rumsliga och tidsmässiga mönster i hypoxi modulera HIF1-alfa och spela roller i sjukdomar som cancer i bukspottkörteln. Hypoxia är också en påverkande faktor som påverkar holme transplantationsresultat. Nyligen har tidsmässigt svängningar av hypoxi, eller intermittent hypoxi (IH) visade fördelar i &quot;prekonditionerande&quot; holmar 1. Men både statiska och övergående hypoxi effekter på holme fysiologi har ännu inte förstått eller studerade, främst på grund av brist på lämpliga verktyg för att kontrollera holme s mikromiljö. Holmar välvaskulariserade in vivo Pankreasöar är 50-400<html> 56, m sfäriska aggregat av endokrina celler, inklusive betaceller och alfaceller som är ansvariga för glukoshomeostas. När cellöar exponeras för stimulerande glukos i blodet, upptag och glykolys ledningen till ATP-produktion, vilket öppnar upp ATP-känsliga kalium (KATP) kanaler och resulterar i kalciuminflöde som utlöser exocytos av insulin granuler. Syre är viktigt för att driva detta hårt ämnesomsättning och insulinutsöndring är avsevärt påverkad av dynamiken i blodflödet och syretillförseln förutom glukos gradienter. Holmar utföra lätt denna glukos-insulinsvar in vivo eftersom de är mycket perfusion i bukspottkörteln, var och en inom en cell längd från en kapillär fartyg. Dock är det tätt nät av intraislet kapillärer bort av kollagenas under holme isolering 2,3. Följaktligen är både syre och näringsämnen leveranser begränsas till en 100 ìm omkrets på grund av diffusion begränsningar. steg &quot;&gt; Aktuella tekniker har begränsad framgång i att återskapa holme mikromiljö Åter holme infödda syre-och glukosdynamik, nyckeln till modellering fysiologiska och patofysiologiska förhållanden, är svårt att uppnå med standard hypoxiska kammare som kräver genomarbetade flöde och saknar kontinuerlig övervakning av ö-funktioner. Dessutom transplantationsterapier för typ I-diabetes utsätta isolerade öar till hypoxi i leverportalsystem 4, som har mycket lägre pO 2 (&lt;2%, 5-15 mm Hg) jämfört med fysiologisk bukspottkörteln (5,6%, 40 mm Hg). Efter transplantationen, öarna transplantat ta två veckor eller mer ska revascularized. Det har visat sig att hypoxisk exponering försämrar islet glukos-insulin-kopplingsmekanism. Bland de stimulus-sekrekopplingsfaktorer, kalcium signalering, mitokondriella potentialer och insulin kinetik kan enkelt kontrolleras med hjälp av mikrofluidik. Vår tidigare mikroflödesteknik visade denna real-tid övervakning med exakt modulering av den vattenbaserade mikromiljö runt enda holme 5,6. Dock är kvantifiering av holmen är hypoxisk försämring brottats med bristen på samtidiga stimulans-och övervakningsteknik. Därför kan kombinera mikroflödeskontroll av syre och holme övervakning förbättra holme hypoxi studier. Mikrofluidik kan återskapa och modulera den vattenbaserade och syre mikromiljö Den standardteknik på mjuk-och kultur hypoxi studier har baserats på hypoxiska kammare. I allmänhet är de hypoxiska kamrarna ger enkla syrehalter med ekvilibreringstider i ~ 10-30 min, oförenliga med minut-skalas dynamisk hypoxi. Två nya studier använde små anpassade kammare för intermittent hypoxi exponering på hela möss, med motstridiga resultat på glukos-inducerad insulinsvaret 7,8. Tänk på att i hela djurnivån, är det respireras syret inte direkt trantänkt att holme kapillär PO2, på grund av kontrollerna i andningsorganen. Dessutom har dessa studier inte har standardiserade syrenivåer, och inte heller ge realtid åtgärder på vävnadsnivå holmar. Å andra sidan kan syre mikrofluidik träffa dessa begränsningar genom att reglera syre via gas-kanalnätverk. Dessutom är mikrofluidik kompatibel med levande avbildning under syremodulering, en bedrift för tillfället inte möjligt med vanliga hypoxiska kammare. Ett antal av dessa nya mikrofluidik närmar utnyttja gas permeabilitet polydimetylsiloxan att lösa syrehalter i mikrokanaler som strömmar media över målceller 9-14. Dessa enheter har också integrerat flera diskreta syrehalter, fluorescensbaserade syresensorer, samt även kemisk syregenerering på chip. Vätskekristallbaserade mikrofluidik har svårt att bibehålla stabila, kontinuerliga gradienter som jagt är beroende av konvektiv blandning, som är känslig för flödesförhållandena. I jämförelse, den teknik som vi använder här är inriktad på att minska diffusion path of syreavgivning. Gasen solvatisering och skjuvflöde elimineras genom direkt diffunderar syre över ett membran besås med celler eller holme vävnader. Detta tar bort de extra mikrofluidik som krävs för att styra solvatisering och förhindrar onödig skjuvspänning till holmarna, som i sig kan utlösa insulinfrisättning. Denna plattform har använts för att visa att reaktiva syreradikaler (ROS) uppreglering både hyperoxic och hypoxiska ytterligheter (2-97% O 2) i cellkultur 1,15. På grund av den direkta leveransen av syre och avlägsnande av skjuvning flöde, ger vår diffusion-baserad plattform den optimala mikroflödes lösningen för att studera holme hypoxi. Multimodal stimulans och övervakning Diffusion-baserade mikroflödes innebär också ytterligare fördelar när anpassad för att studera holme milcrophysiology. Genom att använda ett membran som en diffusionsbarriär kan vätskan vara isolerad från de syre modulationer, vilket möjliggör kontroll av vattenhaltiga glukos stimuleringar oberoende av hypoxiska stimuleringar. Detta skapar en sandwichliknande samtidig stimulering som rumsligt pin-points leverans till holmarna. Dessutom, eftersom gasen är tidsmässigt moduleras via datorise microinjectors, kan vi modulera syrekoncentrationen 21-0% digitalt med övergående tid mindre än 60 sek. De dynamiska kontroller av syre och glukos mikromiljö vid mikroskopet tillåter en realtid multimodal protokoll som inte skulle vara möjligt eller utomordentligt besvärlig med vanliga hypoxiska kammare. Med hjälp av denna enhet, var kalciumsignalering (Fura-AM), mitokondriella potentialer (Rhodamine 123), och insulin kinetik (ELISA) övervakas för att ge en fullständig bild av den dynamiska glukos-insulin svar under hypoxi.

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Reagent/Material</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spinner</td>
			<td>Laurell</td>
			<td>WS-400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SU8</td>
			<td>MicroChem</td>
			<td>SU8-2150/SU8-2100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Hotplate</td>
			<td>PMC Dataplate</td>
			<td>722A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UV Curing Lamp</td>
			<td>OmniCure</td>
			<td>S1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PMDS</td>
			<td>Dow Chemical</td>
			<td>Sylgard 184</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corona Wand</td>
			<td>ETP</td>
			<td>BD-20AC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuum Chamber</td>
			<td>Bel-Art</td>
			<td>420220000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microdispensers</td>
			<td>The Lee Company</td>
			<td>IKTX0322000A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 V and 20 V DC Power</td>
			<td>Radio Shack</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NI USB</td>
			<td>National Instrument</td>
			<td>NI USB-6501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermometer</td>
			<td>Omega Engineering, Inc.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peristaltic Pump</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>Minipulse 2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oxygen Sensor</td>
			<td>Ocean Optics</td>
			<td>NeoFox</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fraction Collector</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>203</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pippette</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>Finnpipette II 100&#956;l</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inverted Epifluorescence Microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>DMI 4000B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 ml Conical Tubes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fura-2 Fluorescence Dye</td>
			<td>Molecular Probes, Life Technologies</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rhodamine 123 Fluorescence Dye</td>
			<td>Molecular Probes, Life Technologies</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Culture Media</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>RPMI-1640</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30 in Silicone Tubings</td>
			<td>Cole-Parmer</td>
			<td></td>
			<td>1/16 in x 1/8 in</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 ml Eppendorf Tubes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Y-connectors</td>
			<td>Cole-Parmer</td>
			<td></td>
			<td>1/16 in and 4 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe Connectors</td>
			<td>Cole-Parmer</td>
			<td></td>
			<td>female Luer plug 1/16 in</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Connectors</td>
			<td>Cole-Parmer</td>
			<td></td>
			<td>1/16 in</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Elbow Connector</td>
			<td>Cole-Parmer</td>
			<td></td>
			<td>1/16 in</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

quantitative and temporal control of oxygen microenvironment at the single islet level

Samtidig syresättning och övervakning av glukos stimulus-sekrekopplingsfaktorer i en enda teknik är avgörande för modellering patofysiologiska tillstånd av holme hypoxi, speciellt i transplantations miljöer. Standard hypoxiska kammar tekniker kan inte modulera båda stimuli samtidigt och inte heller ger realtidsövervakning av glukos stimulus-sekrekopplingsfaktorer. För att lösa dessa problem, tillämpade vi en mångbottnad mikroflödessystem teknik för att integrera både vatten-och gasfas moduleringar via en diffusionsmembran. Detta skapar en stimulans smörgås runt microscaled holmar i den genomskinliga polydimetylsiloxan (PDMS) enhet, som möjliggör övervakning av de ovannämnda kopplingsfaktorer via fluorescensmikroskopi. Dessutom är ingångsgasen styrs av ett par microdispensers, ger kvantitativa, sub-minuten modulationer av syre mellan 0-21%. Denna intermittenta hypoxi används för att undersöka ett nytt fenomen på önt prekonditionering. Dessutom, beväpnade med multimodal mikroskopi, kunde vi titta på detaljerade kalcium och K ATP kanaldynamik under dessa hypoxiska händelser. Vi ser framför oss mikroflödes hypoxi, särskilt denna samtidiga dubbla fas teknik, som ett värdefullt verktyg för att studera holmar samt många ex vivo vävnader.

Centralt för denna islet hypoxi teknik är förmågan att modulera vattenhaltig och gasformig fas stimulering i samma mikroflödeskammare med minut skala transienter. Figur 1 är ett representativt resultat av a) dubbla stimuleringar och B) snabb module mäts inom holmen kammaren. Vattenbaserad modulation, visad genom införande av fluorescein i kammaren, uppnår jämvikt i 3-4 minuters blandning. Dessutom kan syre intensifieras 5-21% med snabba transienter, som möjliggör cykling syre med perioder s?...

Watch this Scientific Journal Video about Quantitative and Temporal Control of Oxygen Microenvironment at the Single Islet Level at JoVE.com

Quantitative and Temporal Control of Oxygen Microenvironment at the Single Islet Level

Mikroflödessyrekontroll ger mer än bara bekvämlighet och hastighet över hypoxiska kammare för biologiska experiment. Speciellt när förs via diffusion genom ett membran, kan mikroflödes syre ger samtidig vätska och gasfas modulationer på mikronivå. Denna teknik möjliggör dynamiska fler parametriska experiment kritiska för att studera holme patofysiologi.

Kvantitativ och Temporal Kontroll av syremikromiljö vid den inre Islet nivå

Simultaneous oxygenation and monitoring of glucose stimulus-secretion coupling factors in a single technique is critical for modeling pathophysiological ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

A Microfluidic-based Hydrodynamic Trap for Single Particles

En mikroflödessystem-baserad Hydrodynamisk fälla för enstaka partiklar

The ability to confine and manipulate single particles in free solution is a key enabling technology for fundamental and applied science.  Methods for ...

Spatio-Temporal Manipulation of Small GTPase Activity at Subcellular Level and on Timescale of Seconds in Living Cells

Tid och rum Manipulering av små GTPas aktivitet på Subcellulär nivå och Tidsplan sekunder i levande celler

Dynamic regulation of the Rho family of small guanosine triphosphatases (GTPases) with great spatiotemporal precision is essential for various cellular ...

Engineering a Bilayered Hydrogel to Control ASC Differentiation

Konstruerar en tvåskiktad Hydrogel till Control ASC differentiering

Natural polymers over the years have gained more importance because of their host biocompatibility and ability to interact with cells in vitro and in ...

Nanomanipulation of Single RNA Molecules by Optical Tweezers

Nanomanipulation av Single-RNA-molekyler med optisk pincett

A large portion of the human genome is transcribed but not translated. In this post genomic era, regulatory functions of RNA have been shown to be ...

A Label-free Technique for the Spatio-temporal Imaging of Single Cell Secretions

En etikett-fri teknik för spatiotemporala avbildning av en enda cell Secretions

Inter-cellular communication is an integral part of a complex system that helps in maintaining basic cellular activities. As a result, the malfunctioning ...

Engineering Molecular Recognition with Bio-mimetic Polymers on Single Walled Carbon Nanotubes

Engineering Molekylär igenkänning med Bio-mimetiska Polymers på Single vägg kolnanorör

Semiconducting single-wall carbon nanotubes (SWNTs) are a class of optically active nanomaterial that fluoresce in the near infrared, coinciding with the ...

A Microfluidic System with Surface Patterning for Investigating Cavitation Bubble(s)&#8211;Cell Interaction and the Resultant Bioeffects at the Single-cell Level

A Microfluidic System with Surface Patterning for Investigating Cavitation BubblesÃƒÆ’Ã‚Â¢ÃƒÂ¢Ã¢â‚¬Å¡Ã‚Â¬ÃƒÂ¢Ã¢â€šÂ¬Ã…â€œCell Interaction and the Resultant Bioeffects at the Single-cell Level

En mikroflödessystem med Surface Mönstring för utredning Kavitation Bubble (s) -cell Interaktion och den resulterande bioeffekter vid encelliga nivå

In this manuscript, we first describe the fabrication protocol of a microfluidic chip, with gold dots and fibronectin-coated regions on the same glass ...

An Ultrahigh-throughput Microfluidic Platform for Single-cell Genome Sequencing

En ultrahög kapacitet mikroflödessystem plattform för Single-cell Genomsekvensering

Sequencing technologies have undergone a paradigm shift from bulk to single-cell resolution in response to an evolving understanding of the role of ...

Patterning the Geometry of Human Embryonic Stem Cell Colonies on Compliant Substrates to Control Tissue-Level Mechanics

Mönster av geometrin hos humana embryonala stamcells kolonier på överensstämmande substrat för att kontrollera vävnadsnivå mekanik

Human embryonic stem cells demonstrate a unique ability to respond to morphogens in vitro by self-organizing patterns of cell fate specification that ...