Name: feeding of ticks on animals for transmission and xenodiagnosis in lyme disease research
Uploaded: 2013-08-31T21:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Feeding of Ticks on Animals for Transmission and Xenodiagnosis in Lyme Disease Research at JoVE.com

Yazarlar, teknik destek için Nicole Hasenkampf ve Amanda tardo teşekkür etmek istiyorum. Biz de Dr teşekkür ederim. Kılcal besleme yöntemiyle ilgili talimatlar için ıhlamur Hu ve Adriana Marques LeFlap muhafaza cihazı önerisi için, ve Dr Lise Gern. Bu çalışma NIH / NCRR Grant 8 P20 GM103458-09 (MEE) tarafından ve Araştırma Kaynakları Ulusal Merkezi ve hibe P51OD011104/P51RR000164 ile Ulusal Sağlık Enstitüleri Araştırma Altyapı Programları Ofisi (OriP) tarafından desteklenmiştir.

Lyme hastalığı araştırma için hayvanlar üzerinde kene aşılama ve besleme deneysel taslağı Şekil 1 &#39;de gösterilmiştir. 1.. Aşılayarak Nymphal Ixodes B ile keneler Kılcal Tüp-besleme kullanarak burgdorferi Kene ile manipülasyonlar yaparken, elastik kollu, eldiven ve tek bouffant kapakları beyaz laboratuvar mont giyilir. <ol><li> Bizim teknik Broadwater ark. 49 tarafından bildirilen de...

O liman B. keneler elde etmek için alt çalışmaları için burgdorferi, keneler şunlar olabilir: (1) larva aşamasında enfekte olan fareler üzerinde beslenen, (2) B daldırıldı ya larva veya nimf aşamasında 48-burgdorferi kültürler; (3) B. microinjected burgdorferi 47, ya da (4) kılcal boru beslenen B. 49. burgdorferi. bu yöntemlerin her biri, kene büyük bir kısmının enfeksiyon liman B için kullan...

2011 yılında, Lyme hastalığı Kuzey Amerika&#39;da (6. en yaygın Ulusal Bildirimi zorunlu hastalık oldu <a href="http://www.cdc.gov/lyme/stats/index.html" target="_blank">http://www.cdc.gov/lyme/stats/index.html</a> ). B. burgdorferi hem genetik ve antijenik (1 gözden), çok yönlü bir mikroptur. Onun genetik anayasa büyük (&gt; 900 kB) kromozomu içeren ve plazmid içerik izolatlar arasında değişen 21 plazmidler (12 doğrusal, dairesel 9), kadar. Çok plazmid açık okuma çerçevelerinin% 90 üzerinde bilinen herhangi bir bakteriyel dizilerine 2,3 ilgisiz olarak, bu spiroketlere öğrendim olmaktır. B. burgdorferi konak bağışıklık potansiyel hedefler olarak antijenleri geniş bir yelpazede sunar. Bununla birlikte, işlenmemiş bir enfeksiyon genellikle devam eder. Kene çevre ve omurgalı konak çevre ile spiroketlerine etkileşim B. tarafından alınmasını gerektirir Enfeksiyon süreci boyunca burgdorferi. Çeşitli plasmidle kodlanmışgenler farklı olarak sıcaklık, pH, hücre yoğunluğu ve kene ömrü 4-8, hatta aşamasında değişikliklere yanıt olarak ifade edilebilir olduğu bilinmektedir. B. Çalışma doğal yoldan neden olduğu enfeksiyona takip eden enzootik döngüsü boyunca burgdorferi adaptasyon ve konakçı tepkileri uygun hayvan modelleri üzerinde keneler beslemek için yeteneğine dayanır. Bu tür çalışmalar B. liman kenelerin üretme teknik zorlukları ile karşılanmaktadır burgdorferi ve modeli konak üzerinde kene verimli iletim ve / veya besleme sağlanması. Buna ek olarak, enfekte kenelerin tutucu ve geri gereklidir. Kullanılan modeller arasında farenin ve Lyme hastalığı araştırmalarında değerli bir araç olarak hizmet eder, her biri insan olmayan primatlar, bulunmaktadır. B için doğal bir rezervuar bir ana beyaz ayaklı fare gibi burgdorferi, laboratuvar fare B. tarafından kalıcı enfeksiyon destekleyen son derece duyarlı bir ana 9 burgdorferi. FolBöyle C3H suşu olarak hastalığa duyarlı farelerin enfeksiyonu lowing, spiroket cilt, mesane, kas, eklem ve kalp dahil olmak üzere birden dokulara yaymak. Neden olduğu enfeksiyona enflamatuar tepkiler hastalıklı kalp ve eklem dokusu yol açar. Spiroket bu ana inat ve bulaşıcı devam ederken, iltihabi lezyonlar değil insanlarda sürecinin aksine, aralıklı olabilir. Fare modeli böylece B. fazla bilgi vermiştir artrit ve karditis ve bağışıklık tepkileri dahil olmak üzere 10-12 ev burgdorferi kaynaklı patoloji,. Kene vektör 13-21 aktarım için bazı gerekli olması halinde patojenin açısından bakıldığında, farklı olarak memeli enfeksiyon sırasında ifade edilen bazı genlerin, karakterize edilmiştir. Çeşitli hayvan türlerinin Lyme hastalığı 22 incelemek için kullanılmış olmasına rağmen, rhesus macaques en yakın insan hastalığı 23&#39;ün çoklu organ karakter taklit eder. Diğer aksinehayvan modelleri, örneğin eritema migrans, Kardit, artrit ve periferal ve merkezi sinir sistemleri nöropati gibi hastalık belirtileri genişliği makaklarda gözlenmektedir. Farelerde, B. ana hazne erken ve geç-yaygın belirtileri nadir 9 iken burgdorferi, hastalık, fare zorlanma ve 24 yaş ile değişir. Buna ek olarak, diğer kemirgenler, Lagomorphs ve köpek her B&#39;den nörolojik hastalık sergilemek başarısız burgdorferi enfeksiyonu 25. Önemlisi, makaklar Lyme borreliosis, yani, erken lokalize, erken yaygın, ve geç evre Lyme hastalığının 26-28 her üç aşamadan karakteristik belirtileri gösterirler. Eritem migranlan (EM) insan vakalarının 29% 70-80 meydana düşünülmektedir, ve aynı zamanda rhesus makaklarda 28,30 görülür. Enfeksiyonu takiben spiroket çoklu organ inokülasyon sitesinden yaymak. Spirochetal DNA iskelet mu tespit edildiscles, kalp, safra kesesi, periferik sinir ve sinir ağı, hem de merkezi sinir sistemi (beyin, beyin sapı ve beyincik, omurilik ve dura mater) 31. Rezervuar yetkinlik 32-36 inceleyen ve B. çalışmalarda kene fareler üzerinde beslemek, kene kolonilerinin yayılması için bize ve diğer araştırma ekipleri tarafından kullanılmıştır burgdorferi 37-40 patogenezine. Bu teknik aynı zamanda xenodiagnosis ve farelerde 41-44 aşı etkinliğinin test edilmesi için kullanılmıştır. Biz Ixodes model geliştirme 28 için maymunları üzerinde kene beslenen, aşı etkinliği 45 bir çalışma, sebat ve sonrası antibiyotik tedavisine 46 değerlendirilmesinde xenodiagnosis için. O liman B. Keneler burgdorferi spiroket yaşam evrelerinde üzerinden iletilen olarak, enfekte fareler üzerinde larva besleme ve çalışmalar için perileri kullanılarak doğal bir enzootik döngüsü içinde muhafaza edilebilir. Bu rapordaBiz vahşi tip veya mutant B ile enfekte kene oluşturmak için nasıl talimat burgdorferi, kılcal tüp besleme kullanarak. Bu da mikroenjeksiyon ile 47 ve daldırma 48 ile gerçekleştirilebilir. B. yapay getirilmesi amacı keneler, kimin iletebilirliği bilinmeyen mutant suşlar çalışma olabilir, yüksek enfeksiyon oranı ile keneler bir grup oluşturmak için, ve bir temiz ve aksi bulaşmamış kene koloniyi koruyarak hata potansiyelini azaltmak için içine burgdorferi. Tutma ve dolu kenelerin iyileşme sağlamak için, böylece ek olarak,, fareler ve insan olmayan primatlar üzerinde kene besleme göstermektedir. Kene beslenmenin kullanımı B. bağışıklık tepkilerinin gelecek çalışmalar için gerekli olan burgdorferi enfeksiyonu, olası Lyme aşı etkinliği ve gizli enfeksiyonların tespiti için xenodiagnosis.

<table border="1">
		<tbody>
		 <tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Reagent</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>BSK-H</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>B-8291</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Ketamine HCl</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Tangle Trap coating Paste</td>
			<td>Ladd research</td>
			<td>T-131</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>SkinPrep</td>
			<td>Allegro Medical Supplies</td>
			<td>177364</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>LeFlap, 3" x 3"</td>
			<td>Monarch Labs</td>
			<td></td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Hypafix tape</td>
			<td>Allegro Medical Supplies</td>
			<td>191523</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>SkinBond</td>
			<td>Allegro Medical Supplies</td>
			<td>554536</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>UniSolve</td>
			<td>Allegro Medical Supplies</td>
			<td>176640</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Biatane Foam, adhesive 4"x4"</td>
			<td>Coloplast</td>
			<td>3420</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>DuoDerm CGF Dressing - 4" x 4", (3/4)" adhesive border </td>
			<td>Convatec</td>
			<td>187971 </td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Nonhuman primate jackets with flexible 2" back panels; add drawstrings at top and bottom</td>
			<td>Lomir Biomedical Inc.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>EQUIPMENT </td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Pipet puller</td>
			<td>David Kopf Instruments</td>
			<td>Model 700C</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Dark field microscope</td>
			<td>Leitz Wetzlar</td>
			<td>Dialux</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Dissecting microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>Zoom 2000</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Mouse caging</td>
			<td>Allentown caging</td>
			<td></td>
			<td></td>
		 </tr>
		</tbody>
 </table>

feeding of ticks on animals for transmission and xenodiagnosis in lyme disease research

Lyme hastalığı, Borrelia burgdorferi etken İletim, memeli bilgisayarlar üzerinde kene Ixodes türlerin eki ve kan beslenmesi ile oluşur. Doğada, bu zoonotik bakteriyel patojen rezervuar konak çeşitli kullanabilirsiniz, ancak beyaz ayaklı fare (Peromyscus leucopus) Kuzey Amerika&#39;da larva ve nimf keneler için birincil rezervuar olduğu. İnsanlar en sık B ile enfekte arızi ana nimf aşamasında. B. kene ısırması ile burgdorferi burgdorferi enzootik döngüsü boyunca onun ana uyarlar, böylece memeli konaklarda bu spiroketlerine ve bunların etkileri fonksiyonlarını keşfetmek yeteneği kene besleme kullanımını gerektirir. Buna ek olarak, (tespiti ve bulaşıcı bir maddenin geri kazanılması için doğal vektörü kullanılarak) xenodiagnosis tekniği şifreli enfeksiyonun çalışmalarda yararlı olmuştur. Elde etmek amacıyla nimf o liman B. keneler burgdorferi,Keneler kılcal tüpler aracılığıyla kültür canlı spiroketlerine beslenir. İki hayvan modelleri, fare ve insan olmayan primatlar, en çok kene besleme ilgili Lyme hastalığı çalışmaları için kullanılır. Biz, bu keneler üzerine beslenir ve enfeksiyon veya xenodiagnosis biri için hayvanlardan elde edilebilir olan yöntemleri göstermektedir.

Bu aktarım için hayvanlar üzerinde beslenir önce kılcal besleme tamamlanmasından sonra, keneler, genellikle 2-3 hafta boyunca 23 ° C&#39;de dinlenmiş. Kılcal-besleme tekniği kullanarak, beslenen% 90 üzerinde liman B. keneler bulduk burgdorferi. pozitif kenelerin yüzdesi yıkama ile tespit edilir daha sonra bir mikrofüj boru şeklindeki havan tokmağı ile steril PBS içinde onları ezme, peroksit ve etanol keneler. Orta bağırsak içeriği PBS içine dökülen slaytlar üzerinde sabit ve ...

Watch this Scientific Journal Video about Feeding of Ticks on Animals for Transmission and Xenodiagnosis in Lyme Disease Research at JoVE.com

Feeding of Ticks on Animals for Transmission and Xenodiagnosis in Lyme Disease Research

Lyme hastalığı Kuzey Amerika&#39;daki en sık bildirilen vektör kaynaklı bir hastalıktır. Etkeni, Borrelia burgdorferi keneler kene ile bulaşan bir spioket bakteridir. Hayvan modellerinde enfeksiyonun İletim ve saptama burada açıklandığı kene besleme, kullanılmasıyla optimize edilir.

Lyme Hastalığı Araştırma İletim ve Xenodiagnosis için Hayvanlar Keneler besleme

Transmission of the etiologic agent of Lyme disease, Borrelia burgdorferi, occurs by the  attachment and blood feeding of Ixodes species ticks on ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Biocontained Carcass Composting for Control of Infectious Disease Outbreak in Livestock

Hayvancılık Bulaşıcı Hastalık Salgın Kontrol Biocontained Karkas Kompostlama

Intensive livestock production systems are particularly vulnerable to natural or intentional (bioterrorist) infectious disease outbreaks. Large numbers of ...

RNA Interference in Ticks

Keneler de RNA Girişim

Ticks are obligate hematophagous ectoparasites of wild and domestic animals and humans, and are considered to be second worldwide to mosquitoes as vectors ...

Methods for Rapid Transfer and Localization of Lyme Disease Pathogens Within the Tick Gut

Hızlı Aktarım ve Lyme Hastalığı Patojenler lokalizasyonu için işaretleyin Gut içinde Yöntemleri

Lyme disease is caused by infection with the spirochete pathogen Borrelia burgdorferi, which is maintained in nature by a tick-rodent infection cycle 1.  ...

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

Ixodes scapularis Keneler gelen tükürük, Tükürük Bezi ve hemolimf Koleksiyonu

Ticks are found worldwide and afflict humans with many tick-borne illnesses. Ticks are vectors for pathogens that cause Lyme disease and tick-borne ...

Swab Sampling Method for the Detection of Human Norovirus on Surfaces

Yüzeyler İnsan Norovirus Tespiti sürüntü Örnekleme Yöntemi

Human noroviruses are a leading cause of epidemic and sporadic gastroenteritis worldwide. Because most infections are either spread directly via the ...

Protocols for Investigating the Host-tissue Distribution, Transmission-mode, and Effect on the Host Fitness of a Densovirus in the Cotton Bollworm

Pamuk Yeşilkurt bir densovirüs Host Fitness Host doku Dağılımı, İletim-modunu ve Etkisi incelenmesi için Protokoller

Many novel viruses have been discovered in animal hosts using next-generation sequencing technologies. Previously, we reported a mutualistic virus, ...

Assessment of the Cytotoxic and Immunomodulatory Effects of Substances in Human Precision-cut Lung Slices

Sitotoksik değerlendirilmesi ve insan hassas kesim akciğer dilimleri maddelerin etkileri Immunomodulatory

Respiratory diseases in their broad diversity need appropriate model systems to understand the underlying mechanisms and enable development of new ...

Collection and Processing of Lymph Nodes from Large Animals for RNA Analysis: Preparing for Lymph Node Transcriptomic Studies of Large Animal Species

Toplanması ve işlenmesi büyük hayvanlar lenf düğümlerinden RNA analizi için: büyük hayvan türlerinin lenf nodu Transcriptomic çalışmalar için hazırlanıyor

Large animals (both livestock and wildlife) serve as important reservoirs of zoonotic pathogens, including Brucella, Mycobacterium bovis, Salmonella, and ...

Sexual Transmission of American Trypanosomes from Males and Females to Naive Mates

Naive arkadaşları için kadın ve erkek üzerinden Amerikan Tripanozomlar cinsel iletim

American trypanosomiasis is transmitted to humans by triatomine bugs through the ingestion of contaminated food, by blood transfusions or accidently in ...

Highly Efficient Transfection of Primary Macrophages with In Vitro Transcribed mRNA

In Vitro Transcribed mRNA ile Primer Makrofajların Yüksek Verimli Transföytüsü

Macrophages are phagocytic cells specialized in detecting molecules of non-self origin. To this end, they are equipped with a large array of pattern ...