JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

0:00

Overview

0:44

Principal Components of the Plasmid Purification Procedure

2:25

Plasmid Purification Procedure: Step by Step

5:53

Applications

7:51

Summary

טיהור פלסמיד

טיהור פלסמיד הוא טכניקה המשמשת לבודד ולטהר דנ"א פלסמיד מדנ"א גנומי, חלבונים, ריבוזומים ודפנות התא החיידקי. פלסמיד הוא דנ"א קטן, מעגלי, כפול גדילים המשמש כנשא של מולקולות דנ"א ספציפיות. כאשר הוא הוכנס לאורגניזם מארח באמצעות טרנספורמציה, פלסמיד ישוכפל, וייצור עותקים רבים של שבר הדנ"א הנחקר.

בסרטון וידאו זה, הליך כללי שלב אחר שלב מתואר כיצד לבצע טיהור plasmid. טיהור Plasmid כולל שלושה שלבים בסיסיים: צמיחת תרבית החיידקים, קצירה ותמיסה של החיידקים, וטיהור ה- DNA הפלסמיד. הסרטון מכיל הסבר שבו ניתן למצוא את הפלסמיד בכל שלב בפרוטוקול ולנתח באופן כמותי ואיכותי DNA פלסמיד עם ספקטרופוטומטר ו /או אלקטרופורזה ג'ל. ישנם סוגים שונים של שיטות טיהור plasmid זמין, אשר מכוונים לתשואה הרצויה, מספר עותק plasmid, ונפח תרבות חיידקים.

פלסמידים הם מעגליים, כרומוזומאליים נוספים, מולקולות דנ"א וביולוגיה מולקולרית הם פועלים כנשאים, או וקטורים, עבור שבר דנ"א ספציפי. חיידקים משמשים לשכפול פלסמידים, כך שהדנ"א שלך מעניין בייצור המוני. התהליך שבו חוקרים משיגים פלסמידים מחיידקים נקרא טיהור פלסמיד, אשר יוסבר בסרטון זה.

.css-f1q1l5{display:-webkit-box;display:-webkit-flex;display:-ms-flexbox;display:flex;-webkit-align-items:flex-end;-webkit-box-align:flex-end;-ms-flex-align:flex-end;align-items:flex-end;background-image:linear-gradient(180deg, rgba(255, 255, 255, 0) 0%, rgba(255, 255, 255, 0.8) 40%, rgba(255, 255, 255, 1) 100%);width:100%;height:100%;position:absolute;bottom:0px;left:0px;font-size:var(--chakra-fontSizes-lg);color:#676B82;}

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

-- Views

Related Videos

Application Videos

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved