JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

0:00

Overview

0:39

Gel Purification: Basic Principles

1:51

The Gel Purification Procedure

4:51

Application

6:04

Summary

Purificação de Gel

A purificação de gel é usada para recuperar fragmentos de DNA após a separação eletroforética. A recuperação de DNA de um gel de agarose inclui três passos básicos: ligação, lavagem e eluição de uma coluna de sílica. Acredita-se que o DNA se liga à sílica na presença de sal alto através de uma ponte de sal. Após a ligação, o DNA é lavado de impurezas e elucido sob condições de baixo sal interrompendo essa interação.

Este vídeo passa por um procedimento passo-a-passo generalizado para cortar uma banda do gel, solubilização de gel, purificação através da ligação a uma coluna de sílica, e elução de DNA purificado. Além disso, a apresentação discute várias dicas para garantir a purificação bem sucedida do gel, incluindo a importância de executar um gel de agarose com um marcador ou escada que tenha DNA de tamanhos conhecidos.

A purificação de gel é um procedimento padrão realizado para recuperar fragmentos de DNA desejados de géis agarose após separação eletroforética. Depois de dissolver o fragmento de gel e executá-lo através de um filtro especializado, este procedimento produz DNA livre de impurezas como sais, nucleotídeos livres e enzimas, adequados para aplicações a jusante.

O princípio básico por trás da recuperação de DNA do gel de agarose envolve uma sequência de passos de ligaçã...

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

-- Views

Related Videos

Application Videos

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved