Name: polymalic acid-based nano biopolymers for targeting of multiple tumor markers: an opportunity for personalized medicine?
Uploaded: 2014-06-13T13:00:00
Duration: 14 min 20 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Polymalic Acid-based Nano Biopolymers for Targeting of Multiple Tumor Markers: An Opportunity for Personalized Medicine? at JoVE.com

We greatly acknowledge financial support by NIH R01 CA123495, U01 CA151815, R01 CA136841, grants from the Department of Neurosurgery at Cedars-Cedars Medical Center and Arrogene Technology Inc.

כל הניסויים לעמוד בתקנות בעלי החיים רשמיות לרבות פעולות כירורגיות ונזקקו לניתוח שבוצעו in vivo והנם בהתאם מלאים עם פרוטוקולי IACUC. 1. Bioproduction של Polymalic חומצה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגדול תרבות זרע מspherules על אגר ולהעביר plasmodia 100 מדיום תרבות מיליליטר באמצעות 25 ° C תרמו האמורה חממה ותרבות בינוני בסיס 8,9. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לייצר כמות גדושה הכבידה 500 plasmodia מייקר מיליליטר מתחת להדרה של אור על מנת למנוע נביגה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן 80 קאקו גרם 3 מושעה ב8 בינוני הבזליים L ב10 כלי bioreactor L. העבר 500 מיליליטר plasmodia מיקרו ארוז בתוך כלי תגובה הרכובים ולאפשר Bioprocess ל75 שעה ב ° C25, 10 L / זרימת דקות של אוויר מסונן ו150 ערבוב סל&quot;ד ידי בוחש מגזר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לסיים כאשר מרק התרבות יש pH 4.8 יציין את סוף הייצור של PMLA ולמדוד PMLA תוכן על ידי tהוא hydroxamate assay / Fe (III). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מצנן את המרק ל17 ° C ולאפשר לתאים להתיישב על ידי כוח הכבידה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מגניב 4 מעלות צלזיוס ולהתאים את ה-pH 7.5, להשתמש 2 M NaOH. לשאוב supernatant דרך עמודה מלאה ב1.5 L של DEAE-תאית בתחתית הכיוון למעלה (DEAE גרגר גס, equilibrated עם 20 מ&quot;מ טריס-HCl pH 7.5 ב 5 מעלות צלזיוס). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשטוף עם 3 עמודות של מאגר המכיל 0.3 M NaCl לאחר שינוי הכיוון מלמעלה עד למטה וelute PMLA בנוכחות 0.7 M NaCl. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התאם ל0.1 M CaCl 2 ולזרז PMLA-סידן עם 80% אתנול קר כקרח. Fractionate מעל Sephadex G25 לPMLA סידן של 80-300 kDa, 50-80 kDa, ו10-50 kDa, להשתמש במים בהיעדר החיץ ומלח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להעביר בכל שבריר מעל 120H Amberlite IR + טור, ומייד להקפיא את חומצת polymalic זרימה דרך בחנקן נוזלי לlyophilization. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מתמוסס באצטון היבש. לאחר סינון, להסיר ממסבזרם אוויר יבש, Lyophilize ולאחסן ב 20 ° C. מינוס </li></ol> 2. סינתזה של תרופות Nano מבוססות חומצת Polymalic <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל קבוצות carboxyl של PMLA (P) על ידי ערבוב 116 מ&quot;ג (1 מילימול יחידות malyl) של PMLA-H ב 1 מיליליטר של אצטון נטול מים ו1 מילימול carbodimide dicyclohexyl N-hydroxysuccinimide ו1 mmol ב2 פוראמיד מיליליטר דימתיל (DMF). מערבבים ב20 מעלות צלזיוס למשך 3 שעות. הוספת 0.05 מילימול של MPEG 5000-NH 2 (% 0.05 mol של יחידות malyl) בDMF מיליליטר 1 ואחריו 0.05 מילימול triethylamine (TEA). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף טיפה מומסת חכם בDMF 0.4 מילימול לאוצין אתיל אסתר (LOEt) (40% mol של יחידות malyl), 0.1 mmol 2-תיאול-1-ethylamine (2-MEA) (10% mol של יחידות malyl) ו0.5 מילימול תה, כל מומס בDMF. לאחר כל הוספה, לאפשר 1 שעות ולבדוק להשלמת תגובה על ידי שלילי ninhydrin תגובה (שכבת כרומטוגרפיה דקה, TLC). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אל תסיר NHS-אסתר שאריות ידי הידרוליזה ספונטנית עם פוספט שנאגרו מלוח (30 דקות, pH 6.8). Desalt מעל פ&quot;ד-10 עמודה, להשיג &quot;preconjugate&quot; כאבקה לבנה על ידי lyophilization. יבש חנות ב 20 ° C. מינוס </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממיסים 30 נוגדן מ&quot;ג (מב, IgG2a-κ) ב4.5 מיליליטר של 100 נתרן זרחה מ&quot;מ, 150 מ&quot;מ NaCl, pH 5.5. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להפחית את אגרות חוב דיסולפיד עם 5 מ&quot;מ טריס (אתיל 2-carboxy) hydrochloride phosphine ל30 דקות ב20 מעלות צלזיוס ולטהר מעל PD-10 עמודה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממיסים Mal-PEG 3400-Mal ב2 מיליליטר של אותו המאגר ולהוסיף את מב המופחת בנפח סופי של 10 מ&quot;ל ומערבבים לילה בשעה 4 ° C. להתרכז כדי 2.5 מיליליטר מעל 20 Vivaspin, הדרת 30 KD, ולטהר מעל Sephadex G75. ודא מוצר מעל שניות-HPLC ולמדוד כמות photometrically ב280 אורך גל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צרף Mal-PEG-Mal-מב ל&quot; preconjugate &quot;thiols קבלת P / / LOEt (40%) / מב (0.2%) / 2-MEA (10%) PEG 5000 (5%). עושה זאת על ידי ערבוב 5 מיליליטר של 200 nmol מב-PEG 3400-Mal 50 מ&quot;ג (P / MPEG 5000 / LOEt/2-MEA) בpH החיץ מעל 5.5, להתאים את הריכוז של sulfhydryl ל2 מ&quot;מ ולדגור על 20 מעלות צלזיוס במשך 3 שעות (להניב 98%). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Solubilize 3&#39;-H 2 N-AON בDMF / PBS (pH 7.2) ומגיב עם propionate N-succinimidyl-3-(2-pyridyldithio) (SPDP) ב( 1:1 V / V) DMF / מתנול (ninhydrin מבחן ) ולטהר AON-PDP מעל Sephadex-LH20 במתנול, ולאחר מכן במים וLyophilize. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגירה 800 nmol AONs הופעל במאגר 5.5 pH עם 3400-Mal-מב-preconjugate Mal-PEG מוכן לעיל לילה עד שתגובת מטבע דיסולפיד הוא הופסק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשלב ניאון אלקסה פלואוריד 680-maleimide להרכיב thioether עם פולימר-2-MEA-SH. לחסום sulfhydryls העודף עם 3-pyridyldithio-propionate (PDP) ולטהר מעל Sephadex G75. חנות ב 4 מעלות צלזיוס או הצמד קפוא ב -80 מעלות צלזיוס עד לשימוש נוסף. </li></ol> 3. מבחני ונכסים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע בדיקות לטוהר ויציבות ב-PBS וסרום על 4 מעלות צלזיוס ו37 ° C על ידי ניתוח שניות-HPLC. השתמש sulfonate הקלקר כMolecסטנדרטים משקל תואר בלבד. למדוד התפלגות גודל ננו וזטה פוטנציאלים. שימוש במערכות מסחריות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף למדגם μl 320 160 μl של 10% (w / v) כלוריד hydroxylammonium ו160 μl של 10% (w / v) NaOH. אחרי 10-15 דקות, לערבב עם 160 μl של 5% (w / v) Fe (III) Cl 3 ב12% (v / v) HCl ולקרוא 540 של hydroxamate / Fe (III). חישוב PMLA הנחת 1 מ&quot;ג / מיליליטר PMLA מתאים ל2.5 540. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Hydrolyze תרופת ננו הלילה ב2 M HCl ב110 ° C וחומצת מאלית assay בכרומטוגרפיה שלב הפוך עם התייחסות לדגימות ממוסמרות לתקני חומצת מאלית. קליב תרופת ננו עם 100 dithiothreitol מ&quot;מ ולמדוד morpholino-AON על ידי HPLC שלב התהפך כמותית נגד הסטנדרטים morpholino AON. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קח את התרופה הננו ללא מחשוף ולמדוד נוגדנים באמצעות ערכת assay חלבון. לכמת MPEG כך שהוא מאפשר התגובה שלה עם ferrothiocyanate אמוניום, ואז לחלץ עם כלורופורם ולקרוא הספיגה ב 510 ננומטר אורך גל 10 </sup&gt;. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע ELISA עם 5 μl של תרופת ננו (1-10 מב מיקרוגרם) לכל גם בדיקת פעילות נוגדנים וcolligation. השתמש 0.5 קולט מיקרוגרם / גם transferrin וHER2, בהתאמה, כאנטיגנים מצופים צלחת ונוגדנים משני מצמידים peroxidase. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חישוב% המושג עבור AON, MPEG ומב ביחס לחומצת מאלית (100%) ולהשוות עם% נועדו על ידי עיצוב (ראה דוגמאות טבלה 1 וטבלה 2). </li></ol> 4. בדיקה במבחנה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגירה הסמים ננו עם תאים בתרבית סרטן ומידה ששרדו תאים לאורך זמן על ידי הפעילות שלהם כדי להפחית מגיב צהוב [3 - (4,5-dimethylthiazol-2-י.ל.) -5 - (3-carboxymethoxyphenyl) -2 - (4 sulfophenyl- )-2H-tetrazolium, מלח פנימי] (MTS) לצבע כחול ולקרוא הספיגה היחסית עם פוטומטר. עקוב אחר הוראות על ידי ספק הערכה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן תמציות תאים במבחנה או vivo לשעבר למערבי סופג. השתמש ב מיצוי קר כקרחuffer המכיל SDS ומעכבי פרוטאז קוקטייל. חלבונים נפרדים על ידי צמצום ג&#39;ל אלקטרופורזה SDS-polyacrylamide. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> האם מערבי סופג לחלבונים של עניין בתמציות המדגם. השתמש בנוגדנים משני מצומדת לphosphatase אלקליין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש במיקרוסקופ confocal להפגין ספיגת תא ושיתוף לוקליזציה של פלטפורמה הננו תרופת פולימר, AON וendosomes באמצעות תיוג פלואורסצנטי. צרף אלקסה פלואוריד 680 לפלטפורמה המצומד ננו וLissamine לAONs כתוויות הקרינה. השתמש במיקרוסקופ סורק רפאים 5X ותאי סרטן חיים כדי להמחיש את ההפצה של המולקולות שכותרתו </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קרומי endosome כתם עם צבע פלואורסצנטי Styryl אדום ולהפגין colocalization endosome או שחרור. </li></ol> 5. בדיקה בvivo <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את המודל חיובי ל-HER2 האנושי בעכבר סרטן השד (Tac עירום עכבר: Cr: (MCR)-Foxnnm). הכנס 17β-אסטרדיול 0.72 מ&quot;ג שחרור גלולה (שחרור 90 ימים מסחר) שלubcutaneously בצווארו של כל עכבר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אז מזריק 1 x 10 7 תאים סרטניים BT-474 מתחת לעור לתוך האגף הימני ולתת לגידול לגדול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להתחיל טיפול כאשר גידולים הם 120 מ&quot;מ 3 בגודל על ידי הזרקה לוריד הזנב 150 המצומד ננו μl מכיל 2.5 מ&quot;ג / קילוגרם AON ו / או 4.5 מ&quot;ג / קילוגרם של כל נוגדן. לטיפול להזריק פעמיים בשבוע, לגמרי שש פעמים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למדוד את גודל גידול עם מחוגה פעמיים החלשה ולחשב כמויות תוך שימוש בנוסחה (אורך רוחב x עומק x) x (π / 6). להרדים בעלי חיים 2 שבועות לאחר הזריקה האחרונה ולאחר הרגעה עם תמיסה של קטמין וDexmedetomidine אחריו נקע בצוואר הרחם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבודד את הגידולים וחתכים כתם עם H &amp; E להערכה המורפולוגיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להערכת הפצת סמים בקנה מידה של בעלי חיים, להשתמש במערכת דימות פלואורסצנטי. להזריק את תרופת 680 ננו כותרת אלקסה פלואוריד ותמונה ב24 ו48 שעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדימו ולזהות פלואורידescence בגידולים ואיברים מבודדים וperfused. </li></ol>

<ol>
	<li>Koboldt, D. C., Fulton, R. S., McLellan, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+molecular+portraits+of+human+breast+tumors.+Cancer+Genome+Atlas+Network.">Comprehensive molecular portraits of human breast tumors. Cancer Genome Atlas Network.</a> Nature. 490, 61-70 (2012).</li><li>Kwong, L. N., Costello, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oncogenic+NRAS+signaling+differentially+regulates+survival+and+proliferation+in+melanoma.">Oncogenic NRAS signaling differentially regulates survival and proliferation in melanoma.</a> Nat. Med. 18, 1503-1510 (2012).</li><li>Gerlinger, M., Rowan, A. J., Gerlinger, M., Rowan, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intratumor+heterogeneity+and+branched+evolution+revealed+by+multiregion+sequencing.">Intratumor heterogeneity and branched evolution revealed by multiregion sequencing.</a> N. Engl. J. Med. 366, 883-892 (2012).</li><li>Yap, T. A., Workman, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploiting+the+cancer+genome:+strategies+for+the+discovery+and+clinical+development+of+targeted+molecular+therapies.">Exploiting the cancer genome: strategies for the discovery and clinical development of targeted molecular therapies.</a> Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 52, 549-573 (2012).</li><li>Chatterjee, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+Biomarkers:+Knowing+the+Present+and+Predicting+the+Future.">Cancer Biomarkers: Knowing the Present and Predicting the Future.</a> Future Oncol. 1, 37-50 (2005).</li><li>Suh, K. S., Sarojini, S., Youssif, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+Banking,+Bioinformatics,+and+Electronic+Medical+Records:+The+Front-End+Requirements+for+Personalized+Medicine.">Tissue Banking, Bioinformatics, and Electronic Medical Records: The Front-End Requirements for Personalized Medicine.</a> J. Oncology. , (2013).</li><li>Ljubimova, J. Y., Holler, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biocompatible+nanopolymers:+the+next+generation+of+breast+cancer+treatment.">Biocompatible nanopolymers: the next generation of breast cancer treatment.</a> Future Medicine, Nanomedicine. 7, 1-4 (2012).</li><li>Lee, B. -. S., Vert, M., Holler, E., Steinb&#252;chel, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Water-soluble aiphatic polyesters: poly(malic acid)s. Biopolymers 3a. , 75-103 (2002).</li><li>Lee, B. -. S., Fujita, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polycefin,+a+new+prototype+of+multifunctional+nanoconjugate+based+on+poly(beta-L-malic+acid)+for+drug+delivery.">Polycefin, a new prototype of multifunctional nanoconjugate based on poly(beta-L-malic acid) for drug delivery.</a> Bioconjugate Chem. 17, 317-326 (2006).</li><li>Nag, A., Mitra, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+colorimetric+assay+for+estimation+of+polyethylene+glycol+and+polyethylene+glycolated+protein+using+ammonium+ferrothiocyanate.">A colorimetric assay for estimation of polyethylene glycol and polyethylene glycolated protein using ammonium ferrothiocyanate.</a> Analytical Biochem. 237, 224-231 (1996).</li><li>Ding, H., Inoue, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+brain+tumor+growth+by+intravenous+poly(beta-L-malic)+acid+nanobioconjugate+with+pH-dependent+drug+release.">Inhibition of brain tumor growth by intravenous poly(beta-L-malic) acid nanobioconjugate with pH-dependent drug release.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 107, 18143-18148 (2010).</li><li>Inoue, S., Ding, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanobioconjugate+inhibition+of+HER2/neu+signaling+and+synthesis+provides+efficient+mouse+breast+cancer+treatment.">Nanobioconjugate inhibition of HER2/neu signaling and synthesis provides efficient mouse breast cancer treatment.</a> Cancer Research. 71, 1454-1464 (2011).</li><li>Maeda, H., Sawa, T., Konno, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+tumor-targeted+delivery+of+macromolecular+drugs,+including+the+EPR+effect+in+solid+tumor+and+clinical+overview+of+the+prototype+polymeric+drug+SMANS.">Mechanism of tumor-targeted delivery of macromolecular drugs, including the EPR effect in solid tumor and clinical overview of the prototype polymeric drug SMANS.</a> J. Control. Release. 74, 47-61 (2001).</li><li>Ljubimova, J. Y., Fujita, M., Ljubimov, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Poly(malic+acid)+nanoconjugates+containing+various+antibodies+and+oligonucleotides+for+multitargeting+drug+delivery.">Poly(malic acid) nanoconjugates containing various antibodies and oligonucleotides for multitargeting drug delivery.</a> Nanomed. 3, 247-265 (2008).</li><li>Inoue, S., Patil, R., Portilla-Arias, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+nanobioconjugate+inhibiting+EGFR+expression+in+triple+negative+breast+cancer.">Novel nanobioconjugate inhibiting EGFR expression in triple negative breast cancer.</a> PLoS One. 7, 1-9 (2012).</li><li>Patil, R., Portilla-Arias, J., Ding, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+Delivery+of+Doxorubicin+via+pH-Controlled+Hydrazone+Linkage+Using+Multifunctional+Nano+Vehicle+Based+on+Poly(&#946;-L-malic+Acid).">Cellular Delivery of Doxorubicin via pH-Controlled Hydrazone Linkage Using Multifunctional Nano Vehicle Based on Poly(&#946;-L-malic Acid).</a> Int. J. Mol. Sci. 13, 11681-11693 (2012).</li><li>Patil, R., Portilla-Arias, J., Ding, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temozolomide+delivery+to+tumor+cells+by+a+multifunctional+nano+vehicle+based+on+poly(&#946;-L-malic+acid).">Temozolomide delivery to tumor cells by a multifunctional nano vehicle based on poly(&#946;-L-malic acid).</a> Pharm. Res. 27, 2317-2329 (2010).</li><li>Ljubimova, J. Y., Portilla-Arias, J., Patil, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toxicity+and+efficacy+evaluation+of+multiple+targeted+polymalic+acid+conjugates+for+triple-negative+breast+cancer+treatment.">Toxicity and efficacy evaluation of multiple targeted polymalic acid conjugates for triple-negative breast cancer treatment.</a> J. Drug Target. 21, 956-967 (2013).</li></ol>

המחברים ג&#39;וליה י Ljubimova, קית&#39; ל שחור, וEggehard הולר הם בעלי מניות של Arrogene טכנולוגיה בע&quot;מ

המסלול הניסיוני להכנת תרופות הננו מפולימר טבעי מתכלה מוצג בם ניתן להשתמש בסינתזה של רפואה אישית. התיאור מתחיל בייצור והטיהור המבוקר של חומצת polymalic, אשר היא פלטפורמה תכליתית עבור סינתזת תרופת ננו. באמצעות שימוש בטכניקות לשחזור, הפולימר שהושג עם משקל מולקולרי גבוה ובטוהר קיצוני מתאים לסינתזות תרופות. הסינתזה מתוארת לתרופה ננו, שיוצגה לטיפול בסרטן השד מסוג HER2 החיובי ביעילות. התיאור יכול להיות מתורגם לסינתזות של רוב תרופות ננו האחרות לטיפול בסרטן. מיקוד כרוך נוגדנים כגון הרצפטין שקושרים אנטיגן הסרטני ספציפי, כגון חלבון HER2 או כל סמן גידול אחר שהפנים ביעילות. התרופה הננו מספקת מבחר של אנטיסנס וchemotherapeutics כי תהיה יעיל לעכב את הצמיחה של הסרטן תחת treatment. בדוגמא, הרצפטין מחייב HER2 וחישול מולקולת אנטיסנס ספציפי עם mRNA הביא לחסימה מתמשכת של HER2-איתות וצמצום חמור של סרטן השד מסוג HER2 חיובי קידוד-HER2. בהתבסס על העיקרון הבסיסי של מיקוד גידול ועיכוב של ביטוי גנים על ידי אנטיסנס יש לנו מסונתז עדכני מספר תרופות ננו אחרות וגליובלסטומה עכבות בהצלחה פרה אדם וסרטן השד משולש שלילי 11,14-18. העבודה סינתטית מתחילה עם הכנת פלטפורמה לסמים הננו מטוהר מאוד, שהוא חומצת polymalic מsupernatant התרבות של polycephalum Physarum (מינים של המשפחה &quot;עובש רפש&quot;). ההכנה מדגישה משקולות מולקולריות גבוהות של הפולימר, באופן עקרוני ומאפשר חיבור של מספר רב של נוגדנים, פפטידים, oligonucleotides ומולקולות אחרות הפועלות באספקת סמים פעילה ועיכוב גדילת גידול. Following culturing וטיהור מבוקרים, איכות שחזור של פולימר בתשואות צפויות כבר מיוצרת. הפולימר מאוחסן בתנאים נוחים לכל עת. הסינתזה של ננו conjugates PMLA החל בהפעלה הכימית של carboxylates פולימר התליון מתבצעת בכמה צעדים סינטטיים. בין צעדים, סינתזה יכולה להיות ממוקמת באופן אופציונלי בהמתנה ומאפשרת הכנת כמויות שרירותיות של תשומות לייצור ובכך ניתן להשתמש בעד קנה מידה. ההתקדמות של סינתזה ואחריו TLC והשניות-HPLC, ושניהם בהרכב והפעילות של התרופה הננו נשלט על ידי מבחני קבוצה ספציפית כימי כמותית, ELISA, ומגוון רחב של מידות פיזיות. הניסיון שלנו הוא שהסינתזות האלה כבר התקדמו בצורה חלקה וreproducibly עם תשואות וטהרה מצוינות. על ידי בחירה הספציפיות של oligonucleotides הנוגדנים וantisense כל גרסה של תרופת ננו היא לטובה מסונתזת כנדרש בPErsonalized רפואה. שיטות של הטיפול המוצלח של סרטן השד מסוג HER2 החיובי האנושי הן נציגים תקפים להכנת דגמי סרטן העכבר, יישום של תרופות ננו, הדמיה, וניתוח של גידול. התוצאות של בדיקות במבחנה כדאיות שימושיות בבחירת הקו הסלולרי והתרופה המובילה לשימוש בניסויים בבעלי החיים. בvivo ההדמיה Xenogen מאמתת כי התרופה הננו מועברת אכן לתוך הגידול. תוצאות מערביות סופג מגלה אם רמת חלבונים מסוימים הגיבה בצורה הצפויה במהלך טיפול בסרטן. מדידה של גודל גידול מודיעה על ההצלחה של הטיפול, כלומר כ עיכוב, מיתון או רגרסיה. הדוגמא המתוארת משקפת את הניסיון שלנו עם תרופות אחרות polymalic מבוסס חומצת ננו שמעידות על מידה גבוהה של חיזוי, שחזור והעדר הרעילות ראויה לציון. תוצאות אחרונות על רעילות ויעילות של t מרובהconjugates חומצת polymalic argeted לטיפול בסרטן השד משולש שלילי נמצא בתמיכה חזקה של רעיון זה 18. תכונת מפתח היא שתרופת ננו הוא מסוגל לחדור ביו מחסומים: מחסום האנדותל ידי extravasation לתוך ביניים גידול, קרום התא הסרטני על ידי ספיגת endosome, ושיבוש קרום endosome על ידי פעולה של קבוצות ethylester אוצין או trileucine. Extravasation וספיגת endosome הם השיגו באופן מהימן על ידי הנוגדנים הספציפיים המצורפים לתרופת ננו. נוגדני רצפטור transferrin אנטי עכבר מתווך זרם יעיל לגידול על ידי transcytosis, כנראה בגלל שהקולט הוא ביטוי יתר על רוב כלי דם של גידול. נוגדנים שונים קשורים בפונקציות מולקולת המצומד הננו זהות באופן ספציפי הכוונת הסמים הננו לגידול תא הנמען. נוכחותם של שני הנוגדנים, אחת לtranscytosis והשני לספיגת endosome, הוא חיוניים לתפקוד אופטימלי. ניתוח כמותי של מ &#39;חומצה ונוגדני Alic מומלץ ביותר על מנת לשלוט בהרכב אופטימלי של תרופת ננו. לבסוף יש לציין כי התרופה הננו קוולנטיים כל אחד ב-מספקת תרופה בטופס מצורף כימי בדרכם דרך כלי דם המארח לגידול תא הנמען. קובץ מצורף כימי הופך את רוב התרופות לא פעיל (prodrugs) עד שהם מחדש כמו תרופות בחינם על ידי מחשוף מהפלטפורמה המצומד ננו באתר הממוקד. זה חשוב כי שיטת ההפעלה מחדש מספקת רמה גבוהה של בטיחות במהלך לידה וסיכוי מינימאלי לעורר תופעות לוואי מזיקות. צדדיות, יעילות ובטיחות הן תכונות הכרחיות של רפואה מותאמת אישית טובה.

בעידן פוסט גנומי, כאשר הגנום של הסרטן כבר נפרם (המרכז הלאומי לביוטכנולוגיה והגנום סרטן האטלס), טיפול עתידי בסרטן יביא בחשבון מגוון גנטי של גידולים לעתים קרובות בתוך אותו הגידול 1-4. ביואינפורמטיקה ורצפי DNA מהירים, לא יקרים מאפשר רכישה של גנים / מוטציות ממאירות ברמה אישית 2,4,5. ברגע שהגנים זוהו, חולים יטופלו בתרופה מותאמת אישית כדי לשנות או להשתיק את הביטוי שלהם של גנים ממאירים 6. הצורך לפגוע בתאי סרטן ולספק תרופות לתאים אלה קוראים למערכות אספקת polyfunctional. ברור, תרופות ננו יכולות לענות על דרישה זו 7. בגל גואה של גילויי חלקיקים הוכיחו מתאימים להביא מטענים של תרופות כימותרפיות, חלבונים ו / או חומר גנטי פעיל לתאי סרטן. עם זאת, תופעות לוואי להישאר להיות מודעהלהתלבש. אחד מהם קשורות להיעדרם של פריקות ביולוגית עלול לגרום בתצהיר של חומר ברקמות ואיברים בריאים עם הסיכוי לעורר מחלות. כדי למזער את התצהיר, הצגנו חומצה רעילה ואינו immunogenic polymalic, שהוא ממוצא חיידקים ומתכלים לH 2 O ו-CO 2 8. אנו משתמשים בפולימר לסנתז סוג קוולנטיים All-in-אחד מסמי ננו. הוא מכיל chemotherapeutics המצורפת כימי כגון temozolomide, דוקסורוביצין, או אנטיסנס וקבוצות פונקציונליות המשרתות extravasation, מיקוד רקמות, משלוח endosomolytic. הסמים הם ביקע מהותי מפלטפורמת ננו כשהם הגיעו לתאים סרטניים הממוקדים, ובכך התחדשות פעילות התרופות המלאה שלהם. אנו מתארים את שיטת הייצור של חיידקים של פלטפורמת ננו הפולימר, הטיהור שלה, ואת הסינתזה הכימית של תרופה המכילה ננו Trastuzumab (הרצפטין) לטיפול בסרטןמיקוד ומולקולת אנטיסנס קצר לעיכוב של ייצור יתר של HER2. ביישום תרופת ננו לסרטן xenogeneic אדם חיובי ל-HER2 השד בעכברים בעירום, אנחנו מדגימים יעילות גבוהה של הטיפול בסרטן. עקרונות מיקוד גידול והשתקת הגן הציג כאן עבור תרופות הננו חומצת polymalic יכולים להיות מיושמים בטיפול במקרים אחרים של הסרטן.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="935">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:407px;">Name of Reagent/Material</td>
			<td style="width:263px;">Company</td>
			<td style="width:187px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:79px;">Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2-Mercapto-1-ethylamine (Cysteamine (2MEA)</td>
			<td style="width:263px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:187px;">30078-25G</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">4&#8217;,6-Diamidino-2-phenylindole (DAPI)</td>
			<td colspan="2">Vector Laboratories, Burlingame, CA</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">90-Day release 17&#946;-estradiol pellet&#160;</td>
			<td>Innovative Research of America</td>
			<td style="width:187px;"></td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Alexa Fluor 680 C2 maleimide</td>
			<td style="width:263px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:187px;">A20344</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Amberlite IR 120H</td>
			<td style="width:263px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:187px;">6428</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:407px;">Antifoam Y-30 Emulsion</td>
			<td style="width:263px;">Sigam-Aldrich</td>
			<td style="width:187px;">A5758</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:407px;">Anti-laminin-411 chain mAbs</td>
			<td style="width:263px;">Santa Cruz</td>
			<td style="width:187px;">SC-59980</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:407px;">Anti-pAkt mAb</td>
			<td style="width:263px;">Cell Signalling</td>
			<td style="width:187px;">9271S</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:407px;">Anti-PARB mAb</td>
			<td style="width:263px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:187px;">556494</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Anti-von Willebrand Factor antibody&#160;</td>
			<td>Abcam</td>
			<td style="width:187px;">AB6994</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:407px;">Bacto Yeast Extract</td>
			<td style="width:263px;">Bacto, Dickinson/Sparks, MD</td>
			<td style="width:187px;">212720</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Beta-actin</td>
			<td style="width:263px;">Cell Signalling</td>
			<td style="width:187px;">3700</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">BT-474&#160;</td>
			<td style="width:263px;">ATCC</td>
			<td style="width:187px;">HTB-20</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:407px;">Calcium Carbonate</td>
			<td style="width:263px;">Alfa Aesar</td>
			<td style="width:187px;">36337</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cell Proliferation Assay kit</td>
			<td>Promega, Madison, WI, USA</td>
			<td>PR-G3580</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Centriplus 100&#160;</td>
			<td>Millipore</td>
			<td style="width:187px;">4414</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dicyclohexylcarbodimide</td>
			<td style="width:263px;">Fluka</td>
			<td style="width:187px;">36650</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DMEM</td>
			<td style="width:263px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:187px;">D5796</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Eosin</td>
			<td style="width:263px;">Cardinal Health</td>
			<td style="width:187px;">S7439-4</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Galardin (MMP-inhibitors)&#160;</td>
			<td style="width:263px;">Santa Cruz</td>
			<td style="width:187px;">SC-994</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">GAPDH</td>
			<td style="width:263px;">Cell Signalling&#160;</td>
			<td style="width:187px;">2118</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Hematoxilin</td>
			<td style="width:263px;">Cardinal Health</td>
			<td style="width:187px;">S7439-3</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:407px;">Hemin from porcine</td>
			<td style="width:263px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:187px;">51280</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:407px;">Herceptin</td>
			<td style="width:263px;">Genentech</td>
			<td style="width:187px;">15534</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:407px;">Herceptin (Western blotting)</td>
			<td style="width:263px;">Cell Signalling</td>
			<td style="width:187px;">2165S</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:407px;">IgG2a-kappa murine malignoma</td>
			<td style="width:263px;">Sigma</td>
			<td style="width:187px;">M77695X5m</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Immun-Star AP Substrate Pack</td>
			<td style="width:263px;">Biorad</td>
			<td style="width:187px;">170-5012</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Immun-StarTM AP Substrate Pack&#160;</td>
			<td>Biorad</td>
			<td>170-5012</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:407px;">LAL Reagent water&#160;</td>
			<td style="width:263px;">Lonza, MD</td>
			<td style="width:187px;">W50-1000</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Laminin-411 mAbs</td>
			<td style="width:263px;">Abcam</td>
			<td style="width:187px;"></td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Leucine ethyl ester (LOEt)</td>
			<td style="width:263px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:187px;">61850-10G-F</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Limulus Amebocyte Lysate (LAL) PYROGENT-5000 tests</td>
			<td style="width:263px;">Cambrex BioScience</td>
			<td style="width:187px;">N384</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:407px;">Lissamin-Morpholino AON</td>
			<td style="width:263px;">Gene Tools</td>
			<td style="width:187px;">Custom made</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">L-malic acid&#160;</td>
			<td style="width:263px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:187px;">M6413</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Malate dehydrogenase&#160;</td>
			<td style="width:263px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:187px;">M2634</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Mal-PEG-Mal</td>
			<td style="width:263px;">Laysan</td>
			<td style="width:187px;">mal-PEG-mal-3400</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Matrigel</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td style="width:187px;">354248</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Milk, nonfat powdered&#160;</td>
			<td style="width:263px;">Proteomics</td>
			<td>M203-10G</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Morpholino oligonucleotides&#160;</td>
			<td style="width:263px;">GeneTools</td>
			<td style="width:187px;">custom made</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:407px;">mPEG5000</td>
			<td style="width:263px;">Lysan</td>
			<td style="width:187px;">mPEG-NH2-5000</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">N-hydroxysuccinimde (NHS)&#160;</td>
			<td style="width:263px;">ACROS Organics</td>
			<td style="width:187px;">15727100</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:407px;">Ninhydrin</td>
			<td style="width:263px;">Merck</td>
			<td style="width:187px;">1.06762.0100</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Nitrocellulose Membrane Filter Paper Sandwich</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>LC2001</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Nitrocellulose Membrane Filter Paper Sandwich, 0.45 &#181;m&#160;</td>
			<td style="width:263px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:187px;">LC2001</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Novex &#174; Tris-Glycine Transfer Buffer (25X)&#160;</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>LC3675</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Nude Mice [Tac:Cr:(MCr)-Foxnnm]&#160;</td>
			<td>Taconic</td>
			<td style="width:187px;"></td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:407px;">PBS pH 7.2 10x</td>
			<td style="width:263px;">Gibco</td>
			<td style="width:187px;">10010-49</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:407px;">PBS pH 7.2 1x</td>
			<td style="width:263px;">Gibco</td>
			<td style="width:187px;">70013</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PD-10 desalting columns</td>
			<td style="width:263px;">GE Healthcare</td>
			<td style="width:187px;">17-0851</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Physarum polycephalum M3CVII</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>204388</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pierce BCA protein assay&#160;</td>
			<td style="width:263px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:187px;">23225</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Protease inhibitor cocktail</td>
			<td style="width:263px;">Roche</td>
			<td style="width:187px;">1.18362E+11</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Protein Detector ELISA Kit</td>
			<td style="width:263px;">KPL</td>
			<td style="width:187px;">54-62-18</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;"></td>
			<td style="width:263px;"></td>
			<td style="width:187px;"></td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sephadex G-25 superfine</td>
			<td style="width:263px;">GE Healthcare</td>
			<td style="width:187px;">17-0031</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sephadex G-75&#160;</td>
			<td style="width:263px;">GE Healthcare</td>
			<td style="width:187px;">17-0050</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sephadex-LH20&#160;</td>
			<td style="width:263px;">GE Healthcare</td>
			<td style="width:187px;">17-0090</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">SKBR-3&#160;</td>
			<td style="width:263px;">ATCC</td>
			<td style="width:187px;">HTB-30</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">SPDP</td>
			<td style="width:263px;">Proteochem&#160;</td>
			<td style="width:187px;">C1116</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Streamline-DEAE</td>
			<td style="width:263px;">GE Healthcare</td>
			<td style="width:187px;">17-0994</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Styryl Red FM 1-43&#160;</td>
			<td>Life Technologies&#160;</td>
			<td style="width:187px;">T-3163</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;"></td>
			<td style="width:263px;"></td>
			<td style="width:187px;"></td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">TBS 10x</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>170-6435</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">TCEP</td>
			<td style="width:263px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:187px;">C4706-2G</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">TLC, silica coated aluminia sheets</td>
			<td style="width:263px;">Merck, Darmstadt, DE</td>
			<td style="width:187px;">60F254</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Trileucine (LLL)</td>
			<td style="width:263px;">Bachem</td>
			<td style="width:187px;">H-3915</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Triton X-114&#160;</td>
			<td style="width:263px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:187px;">X114</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tween&#174;20&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P1379</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;"></td>
			<td style="width:263px;"></td>
			<td style="width:187px;"></td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Vivaspin 20&#160;</td>
			<td style="width:263px;">VWR</td>
			<td style="width:187px;">14005-302</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:407px;">DAPI</td>
			<td style="width:263px;">Vector Laboratories, Burlingame, CA</td>
			<td style="width:187px;"></td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dexmedetomidine</td>
			<td style="width:263px;">Pfizer</td>
			<td style="width:187px;"></td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Atipamezole</td>
			<td style="width:263px;">Pfizer</td>
			<td style="width:187px;"></td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Carprofen</td>
			<td style="width:263px;">Pfizer</td>
			<td style="width:187px;"></td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Betadine</td>
			<td style="width:263px;">Foster and Smith, Wisconsin</td>
			<td style="width:187px;"></td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

polymalic acid-based nano biopolymers for targeting of multiple tumor markers: an opportunity for personalized medicine?

Tumors with similar grade and morphology often respond differently to the same treatment because of variations in molecular profiling. To account for this diversity, personalized medicine is developed for silencing malignancy associated genes. Nano drugs fit these needs by targeting tumor and delivering antisense oligonucleotides for silencing of genes. As drugs for the treatment are often administered repeatedly, absence of toxicity and negligible immune response are desirable. In the example presented here, a nano medicine is synthesized from the biodegradable, non-toxic and non-immunogenic platform polymalic acid by controlled chemical ligation of antisense oligonucleotides and tumor targeting molecules. The synthesis and treatment is exemplified for human Her2-positive breast cancer using an experimental mouse model. The case can be translated towards synthesis and treatment of other tumors.

Watch this Scientific Journal Video about Polymalic Acid-based Nano Biopolymers for Targeting of Multiple Tumor Markers: An Opportunity for Personalized Medicine? at JoVE.com

Polymalic Acid-based Nano Biopolymers for Targeting of Multiple Tumor Markers: An Opportunity for Personalized Medicine?

Biopolymers מבוסס חומצת Polymalic ננו עבור מיקוד של גידול סמנים מרובים: הזדמנות לרפואה מותאמת אישית?

דוגמא של תרופה הננו על בסיס חומצת polymalic מוצגת לקראת תכנון רציונלים של רפואה אישית כי הוא ישים לסרטן. הוא מתאר את הסינתזה של תרופת ננו לטיפול בסרטן השד אנושי מסוג HER2 חיובי בעכבר בעירום.

Tumors with similar grade and morphology often respond differently to the same treatment because of variations in molecular profiling. To account for this ...

Research

JoVE Journal

Chemistry

Glycan Node Analysis: A Bottom-up Approach to Glycomics

ניתוח צומת glycan: גישה מלמטה למעלה כדי glycomics

Synthesized in a non-template-driven process by enzymes called glycosyltransferases, glycans are key players in various significant intra- and ...

Highly Stable, Functional Hairy Nanoparticles and Biopolymers from Wood Fibers: Towards Sustainable Nanotechnology

מאוד יציבים, חלקיקים שעירים פונקציונליים Biopolymers סיבי עץ: לקראת ננוטכנולוגיה קיימא

Nanoparticles, as one of the key materials in nanotechnology and nanomedicine, have gained significant importance during the past decade. While ...

Synthesis of Protein Bioconjugates via Cysteine-maleimide Chemistry

Synthesis of Protein Bioconjugates via Cysteine-maleimide Chemistry

סינתזה של חלבון Bioconjugates<em&gt; דרך</em&gt; כימיה ציסטאין-maleimide

The chemical linking or bioconjugation of proteins to fluorescent dyes, drugs, polymers and other proteins has a broad range of applications, such as the ...

Low-energy Cathodoluminescence for (Oxy)Nitride Phosphors

Low-energy Cathodoluminescence for OxyNitride Phosphors

Cathodoluminescence בעלי אנרגיה נמוכה עבור (Oxy) ניטריד Phosphors

Nitride and oxynitride (Sialon) phosphors are good candidates for the ultraviolet and visible emission applications. High performance, good stability and ...

Preparation and Evaluation of 99mTc-labeled Tridentate Chelates for Pre-targeting Using Bioorthogonal Chemistry

Preparation and Evaluation of 99mTc-labeled Tridentate Chelates for Pre-targeting Using Bioorthogonal Chemistry

הכנה והערכה של<sup&gt; 99m</sup&gt; Tc שכותרתו Tridentate chelates לחינוך קדם-מיקוד שימוש Bioorthogonal לכימיה

Pre-targeting combined with bioorthogonal chemistry is emerging as an effective way to create new radiopharmaceuticals. Of the methods available, the ...

An Aptamer-based Sensor for Unchelated Gadolinium(III)

An Aptamer-based Sensor for Unchelated GadoliniumIII

חיישן מבוסס-Aptamer עבור Unchelated גדוליניום (III)

A method for determining the presence of unchelated trivalent gadolinium ion (Gd3+) in aqueous solution is demonstrated. Gd3+ is often present in samples ...

An Engineered Split-TET2 Enzyme for Chemical-inducible DNA Hydroxymethylation and Epigenetic Remodeling

אנזים פיצול-TET2 הנדסה כימית-inducible DNA Hydroxymethylation, שיפוץ Epigenetic

DNA methylation is a stable and heritable epigenetic modification in the mammalian genome and is involved in regulating gene expression to control ...

Co-expression of Multiple Chimeric Fluorescent Fusion Proteins in an Efficient Way in Plants

ביטוי משותף של מספר חלבונים Chimeric פיוז'ן פלורסנט בדרך יעילה בצמחים

Information about the spatiotemporal subcellular localization(s) of a protein is critical to understand its physiological functions in cells. Fluorescent ...

Iron Nanowire Fabrication by Nano-Porous Anodized Aluminum and its Characterization

ברזל יצוק בייצור ננו-נקבובי אלומיניום ואיפיון

Magnetic nanowires possess unique properties that have attracted the interest of different fields of research, including basic physics, biomedicine, and ...

Organic Structure-directing Agent-free Synthesis for *BEA-type Zeolite Membrane

מבנה אורגני-מכוון סוכן-סינתזה חינם עבור * בי-סוג Zeאוליט ממברנה

Membrane separation has drawn attention as a novel-energy saving separation process. Zeolite membranes have great potential for hydrocarbon separation in ...