Name: a microplate assay to assess chemical effects on rbl-2h3 mast cell degranulation: effects of triclosan without use of an organic solvent
Uploaded: 2013-11-01T19:45:00
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LMW और RHK बायोमेडिकल साइंस और इंजीनियरिंग (GSBSE) की UMaine के ग्रेजुएट स्कूल द्वारा समर्थन कर रहे हैं; RHK भी मेन कृषि एवं वन प्रयोग स्टेशन द्वारा समर्थित किया गया था. अतिरिक्त धन जनरल मेडिकल साइंसेज के राष्ट्रीय संस्थान (एनआईएच P20-GM103423), मेन कृषि एवं वन प्रयोग स्टेशन (अनुदान संख्या ME08004 -10, जे ए जी), ज्वार केंद्र (NSF अनुदान # 1008498) राइजिंग मेन अग्रिम विश्वविद्यालय द्वारा प्रदान किया गया , और PhRMA नींव (जे ए जी) से औषध / टॉक्सिकोलॉजी में एक रिसर्च स्टार्टर अनुदान. हम डीआरएस धन्यवाद. प्रतिजन और कोशिकाओं के लिए डेविड Holowka और बारबरा बेयर्ड. हम हिना हाशमी, ऐलेजैंड्रो Velez, और उपकरणों और आदेश के साथ मदद के लिए एंड्रयू Abovian के लिए आभारी हैं. इस मेन कृषि एवं वन प्रयोग स्टेशन प्रकाशन संख्या 3311 है.

सभी बफर व्यंजनों प्रोटोकॉल पाठ के अंत में एक तालिका में शामिल हैं जो ध्यान दें. दिन 1: 1. कक्ष की तैयारी <ol><li> बढ़त के प्रभाव से बचने के लिए लेआउट पर परीक्षण के नमूने एकत्रित करना, 96 ...

2004 में, नाल एट अल. 1 degranulation के उच्च throughput के परीक्षण के लिए एक मस्तूल सेल biosensor है विकसित. यह हम अपने टीसीएस पढ़ाई के लिए अनुकूल है और इस वीडियो में विस्तृत है कि एक मजबूत परख है. पिछले नाल एट अल. 1 परख, मस्तूल ?...

a microplate assay to assess chemical effects on rbl-2h3 mast cell degranulation: effects of triclosan without use of an organic solvent

मस्त कोशिकाओं एलर्जी रोग और परजीवी के खिलाफ प्रतिरक्षा रक्षा में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं. एक बार (एक allergen द्वारा जैसे) सक्रिय है, वे degranulate, एक प्रक्रिया है कि एलर्जी मध्यस्थों के एक्सोसाइटोसिस में परिणाम है. दवाओं और विषैले पदार्थ से मस्तूल सेल degranulation की मॉड्यूलेशन मानव स्वास्थ्य पर सकारात्मक या प्रतिकूल प्रभाव पड़ सकता है. मस्त सेल समारोह चूहे basophilic ल्यूकेमिया मस्तूल कोशिकाओं के उपयोग (आरबीएल-2H3), 3-5 मानव श्लैष्मिक मस्तूल कोशिकाओं की एक व्यापक रूप से स्वीकार मॉडल के साथ विस्तार से विच्छेदित कर दिया गया है. 6 मस्तूल कोशिकाओं से histamine के साथ मिलकर में रैखिक जारी की है जो मस्त सेल दाना घटक और एलर्जी मध्यस्थ β-hexosaminidase, आसानी से और मज़बूती से करने के लिए उत्तरदायी है कि एक microplate परख में औसत दर्जे का प्रतिदीप्ति तीव्रता उपज, एक fluorogenic सब्सट्रेट के साथ प्रतिक्रिया के माध्यम से मापा जा सकता है उच्च throughput पढ़ाई 1. मूलतः नाल एट अल. 1 द्वारा प्रकाशित, हम स्क्रीनिंग ओ के लिए इस degranulation परख ढाल लियाच दवाओं और विषैले पदार्थ और यहाँ इसके उपयोग के प्रदर्शन. Triclosan कई उपभोक्ता उत्पादों में मौजूद है और इस आशय के लिए तंत्र अज्ञात है, हालांकि, मानव एलर्जी त्वचा रोग 7-11 में एक चिकित्सकीय सहायता होना पाया गया है कि एक व्यापक स्पेक्ट्रम एंटीबायोटिक एजेंट है. यहाँ हम मस्तूल सेल degranulation पर triclosan के प्रभाव के लिए एक परख प्रदर्शित करता है. हमने हाल ही में triclosan जोरदार मस्तूल सेल समारोह 2 को प्रभावित करता है कि पता चला है. एक कार्बनिक विलायक के उपयोग से बचने के प्रयास में, triclosan गर्मी और सरगर्मी के साथ जलीय बफर में सीधे भंग कर रहा है, और उसके एवज में एकाग्रता 12 (ε 280 = 4200 एल / एम / सेमी का उपयोग) यूवी विज़ स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री का उपयोग करने की पुष्टि की है. इस प्रोटोकॉल, अधिक मोटे तौर पर उनके एलर्जी की संभावित मस्तूल सेल degranulation पर उनके प्रभाव का निर्धारण करने के लिए रसायनों की एक किस्म के साथ इस्तेमाल किया जा करने की क्षमता है, और.

50 को जब गरम डिग्री सेल्सियस 90 मिनट के लिए, टीसीएस के लिए यूवी विज़ absorbance के स्पेक्ट्रम के रूप में चित्र 1 में दिखाया 280 एनएम पर एक चोटी के साथ ~ 260 और 300 एनएम के बीच एक मजबूत, चिकनी वक्र, पैदा करता है. 280 एनएम पर प्रकाश?...

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A Microplate Assay to Assess Chemical Effects on RBL-2H3 Mast Cell Degranulation: Effects of Triclosan without Use of an Organic Solvent

मस्त सेल degranulation, एलर्जी मध्यस्थों की रिहाई, एलर्जी, अस्थमा, और परजीवी रक्षा में महत्वपूर्ण है. यहाँ हम degranulation पर दवाओं और विषैले पदार्थ के प्रभाव का आकलन करने के लिए तकनीक 1 का प्रदर्शन, कार्यप्रणाली हाल ही में जीवाणुरोधी एजेंट triclosan 2 के शक्तिशाली निरोधात्मक प्रभाव प्रदर्शन करने के लिए उपयोग किया.

एक कार्बनिक विलायक के इस्तेमाल के बिना Triclosan का प्रभाव: आरबीएल-2H3 मस्त सेल degranulation पर रासायनिक प्रभाव का आकलन करने के लिए एक microplate परख

Mast cells play important roles in allergic disease and immune defense against parasites. Once activated (e.g. by an allergen), they degranulate, a ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Measurement of Antibody Effects on Cellular Function of Isolated Cardiomyocytes

एंटीबॉडी प्रभाव का मापन पृथक cardiomyocytes की सेलुलर समारोह पर

Dilated cardiomyopathy  (DCM) is one of the main causes for heart failure in younger adults1.  Although genetic disposition and exposition to toxic ...

Investigating the Effects of Probiotics on Pneumococcal Colonization Using an In Vitro Adherence Assay

Investigating the Effects of Probiotics on Pneumococcal Colonization Using an In Vitro Adherence Assay

एक का प्रयोग न्यूमोकोकल औपनिवेशीकरण पर प्रोबायोटिक्स के प्रभाव की जांच<em&gt; इन विट्रो</em&gt; पालन परख

Adherence of Streptococcus pneumoniae (the pneumococcus) to the epithelial lining of the nasopharynx can result in colonization and is considered a ...

Analyzing the Effects of Stromal Cells on the Recruitment of Leukocytes from Flow

प्रवाह से leukocytes की भर्ती पर stromal कोशिकाओं के प्रभाव का विश्लेषण

Stromal cells regulate the recruitment of circulating leukocytes during inflammation through cross-talk with neighboring endothelial cells. Here we ...

Investigating Mast Cell Secretory Granules; from Biosynthesis to Exocytosis

मस्तूल सेल स्रावी Granules की जांच कर; जैवसंश्लेषण से exocytosis के लिए

Mast Cells (MC) are secretory cells of the immune system that accomplish their physiological and pathological functions by releasing pre-formed and newly ...

A Miniaturized Glycan Microarray Assay for Assessing Avidity and Specificity of Influenza A Virus Hemagglutinins

उत्सुकता और इन्फ्लुएंजा एक वायरस Hemagglutinins की विशिष्टता का आकलन करने के लिए एक छोटी glycan माइक्रोएरे परख

Influenza A virus (IAV) hemagglutinins recognize sialic acids on the cell surface as functional receptors to gain entry into cells. Wild waterfowl are the ...

Implementation of a Permeable Membrane Insert-based Infection System to Study the Effects of Secreted Bacterial Toxins on Mammalian Host Cells

एक पारगम्य झिल्ली सम्मिलित आधारित संक्रमण प्रणाली के कार्यान्वयन के स्तनधारी मेजबान कोशिकाओं पर स्रावित बैक्टीरियल विषाक्त पदार्थों के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए

Many bacterial pathogens secrete potent toxins to aid in the destruction of host tissue, to initiate signaling changes in host cells or to manipulate ...

Flow Cytometric Analysis of Particle-bound Bet v 1 Allergen in PM10

कण-बाउंड बेट वी PM10 में 1 allergen के प्रवाह cytometric विश्लेषण

Flow cytometry is a method widely used to quantify suspended solids such as cells or bacteria in a size range from 0.5 to several tens of micrometers in ...

Visualizing the Effects of Sputum on Biofilm Development Using a Chambered Coverglass Model

Biofilm विकास पर थूक के प्रभाव Visualizing एक संभाग coverglass मॉडल का उपयोग

Biofilms consist of groups of bacteria encased in a self-secreted matrix. They play an important role in industrial contamination as well as in the ...

Fluorescence-based Neuraminidase Inhibition Assay to Assess the Susceptibility of Influenza Viruses to The Neuraminidase Inhibitor Class of Antivirals

प्रतिदीप्ति आधारित neuraminidase निषेध परख विषाणु-विरोधी की neuraminidase अवरोध करनेवाला वर्ग के लिए इन्फ्लूएंजा वायरस की संवेदनशीलता का आकलन करने के लिए

The neuraminidase (NA) inhibitors are the only class of antivirals approved for the treatment and prophylaxis of influenza that are effective against ...

Isolation of Peritoneum-derived Mast Cells and Their Functional Characterization with Ca2+-imaging and Degranulation Assays

Isolation of Peritoneum-derived Mast Cells and Their Functional Characterization with Ca2+-imaging and Degranulation Assays

मूत्रमार्ग के अलगाव-प्राप्त मस्तूल कोशिकाओं और उनके 2 सीए के साथ कार्यात्मक लक्षण वर्णन+-इमेजिंग और दानेदार परख

Mast cells (MCs), as a part of the immune system, play a key role in defending the host against several pathogens and in the initiation of the allergic ...