Name: in vivo imaging method to distinguish acute and chronic inflammation
Uploaded: 2013-08-16T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av Nancy Lurie Marks Foundation. Vi takker Dr. Nancy E. Kohl for kritisk lesing av manuskriptet. Vi takker Kin K. Wong for hans hjelp i utarbeidelsen av denne videoen rapporten.

Merk: Alle dyrestudier ble utført under godkjente institusjonelle protokoller og dyr omsorg retningslinjer. En. Reagenser og løsninger <ol><li> PMA-løsning for sc inokulering: Fremstill en stamløsning av forbol 12-myristat 13-acetat (PMA) ved 5 mg / ml i DMSO. Oppbevar stamløsning ved -20 ° C. Før inokulering, tine stamløsning og fortynnet til 1 mg / ml PMA i PBS. </li><li> LPS-løsning for sc inokulering: Oppløs lipopolysakkarid (LPS fra Salmonella enter...

<ol>
	<li>Premack, B. A., Schall, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemokine+receptors:+gateways+to+inflammation+and+infection.">Chemokine receptors: gateways to inflammation and infection.</a> Nat. Med. 2, 1174-1178 (1996).</li><li>Singer, A. J., Clark, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cutaneous+wound+healing.">Cutaneous wound healing.</a> N. Engl. J. Med. 341, 738-746 (1999).</li><li>Wellen, K. E., Hotamisligil, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation,+stress,+and+diabetes.">Inflammation, stress, and diabetes.</a> J. Clin. Invest. 115, 1111-1119 (2005).</li><li>Weitzman, S. A., Gordon, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+and+cancer:+role+of+phagocyte-generated+oxidants+in+carcinogenesis.">Inflammation and cancer: role of phagocyte-generated oxidants in carcinogenesis.</a> Blood. 76, 655-663 (1990).</li><li>Ridker, P. M., Cushman, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation,+aspirin,+and+the+risk+of+cardiovascular+disease+in+apparently+healthy+men.">Inflammation, aspirin, and the risk of cardiovascular disease in apparently healthy men.</a> N. Engl. J. Med. 336, 973-979 (1997).</li><li>Wyss-Coray, T., Mucke, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+in+neurodegenerative+disease--a+double-edged+sword.">Inflammation in neurodegenerative disease--a double-edged sword.</a> Neuron. 35, 419-432 (2002).</li><li>Hamilton, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colony-stimulating+factors+in+inflammation+and+autoimmunity.">Colony-stimulating factors in inflammation and autoimmunity.</a> Nat. Rev. Immunol. 8, 533-544 (2008).</li><li>Harlan, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leukocyte-endothelial+interactions.">Leukocyte-endothelial interactions.</a> Blood. 65, 513-525 (1985).</li><li>Bedard, K., Krause, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+NOX+family+of+ROS-generating+NADPH+oxidases:+physiology+and+pathophysiology.">The NOX family of ROS-generating NADPH oxidases: physiology and pathophysiology.</a> Physiol. Rev. 87, 245-313 (2007).</li><li>Rest, R. F., Spitznagel, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subcellular+distribution+of+superoxide+dismutases+in+human+neutrophils.+Influence+of+myeloperoxidase+on+the+measurement+of+superoxide+dismutase+activity.">Subcellular distribution of superoxide dismutases in human neutrophils. Influence of myeloperoxidase on the measurement of superoxide dismutase activity.</a> Biochem. J. 166, 145-153 (1977).</li><li>Hampton, M. B., Kettle, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inside+the+neutrophil+phagosome:+oxidants,+myeloperoxidase,+and+bacterial+killing.">Inside the neutrophil phagosome: oxidants, myeloperoxidase, and bacterial killing.</a> Blood. 92, 3007-3017 (1998).</li><li>Serhan, C. N., Savill, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resolution+of+inflammation:+the+beginning+programs+the+end.">Resolution of inflammation: the beginning programs the end.</a> Nat. Immunol. 6, 1191-1197 (2005).</li><li>Jiang, F., Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NADPH+oxidase-mediated+redox+signaling:+roles+in+cellular+stress+response,+stress+tolerance,+and+tissue+repair.">NADPH oxidase-mediated redox signaling: roles in cellular stress response, stress tolerance, and tissue repair.</a> Pharmacol. Rev. 63, 218-242 (2011).</li><li>Calafat, J., Kuijpers, T. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+small+intracellular+vesicles+in+human+blood+phagocytes+containing+cytochrome+b558+and+the+adhesion+molecule+CD11b/CD18.">Evidence for small intracellular vesicles in human blood phagocytes containing cytochrome b558 and the adhesion molecule CD11b/CD18.</a> Blood. 81, 3122-3129 (1993).</li><li>Johansson, A., Jesaitis, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Different+subcellular+localization+of+cytochrome+b+and+the+dormant+NADPH-oxidase+in+neutrophils+and+macrophages:+effect+on+the+production+of+reactive+oxygen+species+during+phagocytosis.">Different subcellular localization of cytochrome b and the dormant NADPH-oxidase in neutrophils and macrophages: effect on the production of reactive oxygen species during phagocytosis.</a> Cell. Immunol. 161, 61-71 (1995).</li><li>Kumar, A. P., Piedrafita, F. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peroxisome+proliferator-activated+receptor+gamma+ligands+regulate+myeloperoxidase+expression+in+macrophages+by+an+estrogen-dependent+mechanism+involving+the+-463GA+promoter+polymorphism.">Peroxisome proliferator-activated receptor gamma ligands regulate myeloperoxidase expression in macrophages by an estrogen-dependent mechanism involving the -463GA promoter polymorphism.</a> J. Biol. Chem. 279, 8300-8315 (2004).</li><li>Tseng, J. C., Kung, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+inflammatory+phagocytes.">In vivo imaging of inflammatory phagocytes.</a> Chem Biol. 19, 1199-1209 (2012).</li><li>Gross, S., Gammon, S. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioluminescence+imaging+of+myeloperoxidase+activity+in+vivo.">Bioluminescence imaging of myeloperoxidase activity in vivo.</a> Nat. Med. 15, 455-461 (2009).</li><li>Kielland, A., Blom, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+reactive+oxygen+and+nitrogen+species+in+inflammation+using+the+luminescent+probe+L-012.">In vivo imaging of reactive oxygen and nitrogen species in inflammation using the luminescent probe L-012.</a> Free Radic. Biol. Med. 47, 760-766 (2009).</li><li>Zhou, J., Tsai, Y. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+assessment+of+localized+inflammatory+responses.">Noninvasive assessment of localized inflammatory responses.</a> Free Radic. Biol. Med. 52, 218-226 (2012).</li><li>Karlsson, A., Nixon, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phorbol+myristate+acetate+induces+neutrophil+NADPH-oxidase+activity+by+two+separate+signal+transduction+pathways:+dependent+or+independent+of+phosphatidylinositol+3-kinase.">Phorbol myristate acetate induces neutrophil NADPH-oxidase activity by two separate signal transduction pathways: dependent or independent of phosphatidylinositol 3-kinase.</a> J. Leukoc. Biol. 67, 396-404 (2000).</li><li>Taylor, R. G., McCall, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histopathologic+features+of+phorbol+myristate+acetate-induced+lung+injury.">Histopathologic features of phorbol myristate acetate-induced lung injury.</a> Lab Invest. 52, 61-70 (1985).</li><li>Fukaya, S., Matsui, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overexpression+of+TNF-alpha-converting+enzyme+in+fibroblasts+augments+dermal+fibrosis+after+inflammation.">Overexpression of TNF-alpha-converting enzyme in fibroblasts augments dermal fibrosis after inflammation.</a> Lab Invest. 93, 72-80 (2013).</li><li>Lu, Y. C., Yeh, W. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LPS/TLR4+signal+transduction+pathway.">LPS/TLR4 signal transduction pathway.</a> Cytokine. 42, 145-151 (2008).</li><li>Aitken, R. J., Buckingham, D. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactive+oxygen+species+and+human+spermatozoa:+analysis+of+the+cellular+mechanisms+involved+in+luminol-+and+lucigenin-dependent+chemiluminescence.">Reactive oxygen species and human spermatozoa: analysis of the cellular mechanisms involved in luminol- and lucigenin-dependent chemiluminescence.</a> J. Cell. Physiol. 151, 466-477 (1992).</li><li>Allen, R. C., Loose, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phagocytic+activation+of+a+luminol-dependent+chemiluminescence+in+rabbit+alveolar+and+peritoneal+macrophages.">Phagocytic activation of a luminol-dependent chemiluminescence in rabbit alveolar and peritoneal macrophages.</a> Biochem. Biophys. Res. Commun. 69, 245-252 (1976).</li><li>Caldefie-Chezet, F., Walrand, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Is+the+neutrophil+reactive+oxygen+species+production+measured+by+luminol+and+lucigenin+chemiluminescence+intra+or+extracellular?+Comparison+with+DCFH-DA+flow+cytometry+and+cytochrome+c+reduction.">Is the neutrophil reactive oxygen species production measured by luminol and lucigenin chemiluminescence intra or extracellular? Comparison with DCFH-DA flow cytometry and cytochrome c reduction.</a> Clin. Chim. Acta. 319, 9-17 (2002).</li><li>Dahlgren, C., Aniansson, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pattern+of+formylmethionyl-leucyl-phenylalanine-induced+luminol-+and+lucigenin-dependent+chemiluminescence+in+human+neutrophils.">Pattern of formylmethionyl-leucyl-phenylalanine-induced luminol- and lucigenin-dependent chemiluminescence in human neutrophils.</a> Infect. Immun. 47, 326-328 (1985).</li><li>Dahlgren, C., Karlsson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Respiratory+burst+in+human+neutrophils.">Respiratory burst in human neutrophils.</a> J. Immunol. Methods. 232, 3-14 (1999).</li><li>Aerts, C., Wallaert, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Release+of+superoxide+anion+by+alveolar+macrophages+in+pulmonary+sarcoidosis.">Release of superoxide anion by alveolar macrophages in pulmonary sarcoidosis.</a> Ann. N.Y. Acad. Sci. 465, 193-200 (1986).</li><li>Zhang, N., Francis, K. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+detection+of+myeloperoxidase+activity+in+deep+tissues+through+luminescent+excitation+of+near-infrared+nanoparticles.">Enhanced detection of myeloperoxidase activity in deep tissues through luminescent excitation of near-infrared nanoparticles.</a> Nat Med. , (2013).</li></ol>

I denne rapporten viser vi en Bioluminescens metode for ikke-invasiv bildediagnostikk av betennelse i levende dyr. Å dra nytte av to luminescerende substrater, luminol og lucigenin, kan metoden skille mellom forskjellige faser av betennelse. Luminol bioluminescens er forbundet med nøytrofiler i den akutte fase av inflammasjon, mens lucigenin bioluminescens er mediert av makrofager i den kroniske fase. Relativt små (MW = 177,16 g / mol) og elektrisk uladede, kan luminol lett trenge gjennom både plasma og phagosomal m...

Betennelse er en svært regulert biologisk respons som er involvert i en rekke sykdommer hos mennesker, deriblant en mikrobiell infeksjon, sårheling 2, 3 diabetes, 4 kreft, hjerte-5, neurodegenerative 6, 7 og autoimmune sykdommer. Tissue betennelse krever riktig koordinering av forskjellige immunceller for å oppnå patogen clearance, vevsreparasjon, og sykdom-oppløsning. Nøytrofile granulocytter og makrofager er viktige immun mediatorer av vev betennelse. I den akutte fasen av betennelse, nøytrofile granulocytter er de første reaksjoner til ulike skadelige stimuli og vevsskade åtte. De nøytrofile raskt extravasate fra sirkulasjon til stedet av skader, hvor cellene inaktivere invaderende mikrober ved å slippe anti-mikrobielle granulater og fagocytose. Under fagocytose, sluker nøytrofile invaderende mikrober inn phagosomes, innen hvilke celler produsere høye nivåer av superoxide (O 2 · -). Phagosomal superoksid er den primære kilden til mange nedstrøms reaktive oksygen arter (ROS). For eksempel kan superoksyd bli dismutated til hydrogenperoksid (H 2 O 2) ved spontan dismutation eller ved superoksid dismutase (SOD) 9, 10. I nøytrofile, konverterer myeloperoxidase (MPO) videre hydrogen peroxide til anti-mikrobiell hypoklorsyre (HOCl) 11. Som inflammatoriske responser fortsette, sirkulerende monocytter gradvis migrere inn i skadestedet og differensieres til modne makrofager to, hvis fagocytisk funksjon bidra til å fjerne inaktivert patogener og celle rusk. I tillegg, som en viktig regulator i den senere fase av inflammasjon, fremmer makrofag vevsreparasjon ved fremstilling av anti-inflammatoriske cytokiner 12 og ved å generere ekstracellulær ROS på et lavere nivå 9.. ROS generert på dette senere tidspunkt regulere vev ombygging, nye fartøy dannelse, og reepithelialization 13. Phagocyte NADPH oksidase (Phox) er den primære kilden til superoksydproduksjon i begge nøytrofile granulocytter og makrofager ni. Phox er en multi-subenheten kompleks hvis montering er strengt regulert ni. Den holoenzyme inneholder flere cytosoliske regulatoriske subenheter (P67 phox, P47 phox, p40 phox, og RAC) og en membran-bundet heterodimer cytokrom b 558 (består av subenheten CYBA og CYBB). Cytokrom b 558 er reaksjonen kjerne innen hvilke CYBB subenhet (også kjent som P91 phox og NOX2) utfører den primære redoks kjedereaksjon 9.. Interessant, sin samling områder er forskjellige mellom nøytrofile granulocytter og makrofager. I hviler neutrofiler, er cytokrom-b 558 for det meste finnes i membranen av intracellulær lagringsgranuler 14. Under fagocytose, nøytrofile montere holoenzymes på 9 phagosomes, der høye nivåer av MPO aktivitet er også til stede. Nøytrofile Phox raskt forbruker oksygen og utøver sin mikrobedrepende makt ved ROS produksjon, kalles et fenomen luftveiene burst 11. I kontrast, makrofager ha et lavere nivå av ekspresjon og MPO cytokrom b 558 er for det meste finnes i plasma membranen 15, 16.. Således neutrofiler produsere høye nivåer av superoksid for anti-mikrobiell aktivitet, mens makrofager genererer mindre superoksid for regulatoriske funksjoner 15. Siden betennelsen er en intrikat in vivo prosessen, ville ikke-invasive imaging metoder spesifikke for ulike faser av betennelse tillate kvantitativ og langsgående vurdering av sykdom modeller. Ved hjelp av mekanistiske undersøkelser har vi tidligere demonstrert bruk av to kjemiluminescerende midler, luminol (5-amino-2 ,3-dihydro-1 ,4-phthalazinedione) og lucigenin (bis-N-metylakridinium nitrat), For ikke-invasiv bildediagnostikk av akutte og sene (kronisk) stadier av betennelse, henholdsvis 17. Luminol muliggjør visualisering av neutrofil MPO-aktivitet i den akutte fase av inflammasjon 18-20, mens lucigenin bioluminescens kan brukes til å vurdere makrofag aktivitet i forbindelse med den sen fase eller kronisk inflammasjon 17. I dette manuskriptet, brukte vi to eksperimentelle betennelse modeller (sc PMA og sc LPS) for å demonstrere disse imaging teknikker.

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Name of Reagent/Material</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO</td>
			<td>P8139</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipopolysaccharide from Salmonella enterica serotype enteritidis</td>
			<td>Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO</td>
			<td>L2012</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luminol (5-amino-2,3-dihydro-1,4-phthalazinedione, sodium salt)</td>
			<td>Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO</td>
			<td>A4685</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lucigenin (bis-N-methylacridinium nitrate)</td>
			<td>Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO</td>
			<td>M8010</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IVIS Spectrum imaging system with Living Imaging 4.2 software package</td>
			<td>Caliper LS/Perkin Elmer, Hopkinton, MA</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo imaging method to distinguish acute and chronic inflammation

Betennelse er en grunnleggende del av mange menneskelige sykdommer. I denne videoen rapporten, viser vi ikke-invasive bioluminesens imaging teknikker som skiller akutt og kronisk betennelse i musemodeller. Med vevsskade eller patogen invasjon, nøytrofile granulocytter er den første linjen i forsvaret, spiller en viktig rolle i formidling av akutt inflammatorisk respons. Som den inflammatoriske reaksjonen utvikler seg, sirkulerende monocytter gradvis migrere inn i skadestedet og differensieres til modne makrofager, som formidler kronisk betennelse og fremme vev reparasjon ved å fjerne vev rusk og produsere anti-inflammatoriske cytokiner. Intraperitoneal injeksjon av luminol (5-amino-2 ,3-dihydro-1 ,4-phthalazinedione, natriumsalt) muliggjør påvisning av akutt inflammasjon i stor grad mediert av vev-infiltrere nøytrofiler. Luminol reagerer spesifikt med superoxide generert innenfor phagosomes av nøytrofile siden bioluminesens resultater fra en myeloperoxidase (MPO)-mediert reaksjon. Lucigenin (bis-N-metylakridinium nitrat) også reagerer med superoksid for å generere bioluminescens. Imidlertid er lucigenin bioluminescens uavhengig av MPO og det utelukkende er avhengig av phagocyte NADPH oksidase (Phox) i makrofager ved kronisk inflammasjon. Sammen luminol og lucigenin tillate ikke-invasiv visualisering og langsgående vurdering av ulike phagocyte populasjoner på tvers av både akutte og kroniske inflammatoriske faser. Gitt den viktige rollen av betennelse i en rekke humane sykdommer, tror vi at dette ikke-invasiv fremgangsmåte for billeddannelse kan bidra til å undersøke de differensielle rollene til neutrofiler og makrofager i en rekke patologiske tilstander.

Vi utførte langsgående Bioluminescens bildebehandling for å vurdere akutt og kronisk betennelse i eksperimentelle betennelse modeller. Forbol 12-myristat 13-acetat (PMA) er et kraftig protein-kinase C (PKC) agonist som aktiverer Phox for superoksydanion produksjon og utløser intense akutte inflammatoriske responser 21.. SC-injeksjon av 50 mg av PMA i NCR nakne mus forårsaket hurtig hudirritasjon og akutt inflammasjon ved injeksjonssteder 18, 22, 23. Vi utførte daglig avbildning i 4 dager med ...

Watch this Scientific Journal Video about In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation at JoVE.com

In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation

Vi beskriver en ikke-invasiv fremgangsmåte for billeddannelse for å skille inflammatoriske stadier. Systemisk levering av luminol avslører områder av akutt betennelse avhengige MPO aktivitet i nøytrofile granulocytter. I kontrast muliggjør injeksjon av lucigenin for visualisering av kronisk betennelse avhengig Phox aktivitet i makrofager.

In vivo avbildning metode for å skille akutte og kroniske betennelser

Inflammation is a fundamental aspect of many human diseases. In this video report, we demonstrate non-invasive bioluminescence imaging techniques that ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation

Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

Two-photon (2P) microscopy is a high resolution imaging technique that has been broadly adapted by biologists.  The value of 2P microscopy is that it ...

Using Eggs from Schistosoma mansoni as an In vivo Model of Helminth-induced Lung Inflammation

Using Eggs from Schistosoma mansoni as an In vivo Model of Helminth-induced Lung Inflammation

Bruke Egg fra<em&gt; Schistosoma mansoni</em&gt; Som en<em&gt; In vivo</em&gt; Modell av Helminth-indusert lungebetennelse

Schistosoma parasites are blood flukes that infect an estimated 200 million people worldwide 1. In chronic infection with Schistosoma, the severe ...

Bioluminescent Bacterial Imaging In Vivo

Bioluminescent Bacterial Imaging In Vivo

Bioluminescent Bakteriell Imaging<em&gt; In Vivo</em

This video describes the use of whole body bioluminesce imaging (BLI) for the study of bacterial trafficking in live mice, with an emphasis on the use of ...

A Mouse Model for Pathogen-induced Chronic Inflammation at Local and Systemic Sites

A Mouse Modell for Patogen Utløst kronisk betennelse på lokale og systemiske nettsteder

Chronic inflammation is a major driver of pathological tissue damage and a unifying characteristic of many chronic diseases in humans including ...

An Ex vivo Model of an Oligodendrocyte-directed T-Cell Attack in Acute Brain Slices

An Ex vivo Model of an Oligodendrocyte-directed T-Cell Attack in Acute Brain Slices

En<em&gt; Ex vivo</em&gt; Modell av en oligodendrocyte styrt T-Cell angrep i akutt hjerneskiver

Death of oligodendrocytes accompanied by destruction of neurons and axons are typical histopathological findings in cortical and subcortical grey matter ...

An Optimized Method for Isolating and Expanding Invariant Natural Killer T Cells from Mouse Spleen

En optimalisert metode for å isolere og utvide Invariant Natural Killer T-celler fra mus Spleen

The ability to rapidly secrete cytokines upon stimulation is a functional characteristic of the invariant natural killer T (iNKT) cell lineage. iNKT cells ...

A Non-invasive and Technically Non-intensive Method for Induction and Phenotyping of Experimental Bacterial Pneumonia in Mice

En ikke-invasiv og Teknisk Non-intensiv metode for induksjon og fenotyping of Experimental bakteriell lungebetennelse hos mus

Although community-acquired pneumonia remains a major public health problem, murine models of bacterial pneumonia have recently facilitated significant ...

Non-invasive In Vivo Fluorescence Optical Imaging of Inflammatory MMP Activity Using an Activatable Fluorescent Imaging Agent

Non-invasive In Vivo Fluorescence Optical Imaging of Inflammatory MMP Activity Using an Activatable Fluorescent Imaging Agent

Non-invasiv<em&gt; In vivo</em&gt; Fluorescens Optisk Imaging av Inflammatorisk MMP Aktivitet ved hjelp av en aktiverbar fluorescerende Imaging Agent

This paper describes a non-invasive method for imaging matrix metalloproteinases (MMP)-activity by an activatable fluorescent probe, via in vivo ...

Murine Lymphocyte Labeling by 64Cu-Antibody Receptor Targeting for In Vivo Cell Trafficking by PET/CT

Murine Lymphocyte Labeling by 64Cu-Antibody Receptor Targeting for In Vivo  Cell Trafficking by PET/CT

Murine Lymfocytter Merking av<sup&gt; 64</sup&gt; Cu-antistoff Reseptor for målretting<em&gt; In Vivo</em&gt; Celletrafikken av PET / CT

This protocol illustrates the production of 64Cu and the chelator conjugation/radiolabeling of a monoclonal antibody (mAb) followed by murine lymphocyte ...

An Efficient and Simple Method to Establish NK and T Cell Lines from Patients with Chronic Active Epstein-Barr Virus Infection

En effektiv og enkel metode for å etablere NK og T cellelinjer fra pasienter med kronisk aktiv Epstein - Barr virusinfeksjon

A number of methods have been described to establish NK/T cell lines from patients with lymphoma or lymphoproliferative syndrome. These methods employed ...