Name: gavaging adult zebrafish
Uploaded: 2013-08-11T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Gavaging Adult Zebrafish at JoVE.com

De Rockefeller University Comparative Bioscience Center steun verleend aan dit project. Wij danken Janelle Monnas voor technische ondersteuning.

1. Voorbereiden van de verdoving Solution <ol><li> Bereid een oplossing van 150 mg / l MS-222 systeem in water, hetzij uit een voorraadoplossing of poedervorm. </li><li> Controleer de pH met een pH-meter. </li><li> Buffer met natriumbicarbonaat als nodig totdat de pH tussen 7-7.5. </li><li> Bereid een tank van het systeem water vrij van MS-222 voor de vissen om te herstellen inch De hersteltijd is meestal minder dan 1 minuut. </li></ol> 2. Voorbereiden van de Gavage Apparatus <ol><li> Snijd d...

<ol>
	<li>Royes, J. -. A. B., Chapman, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Preparing Your Own Fish Feeds. , (2009).</li><li>Gomez-Gil, B., Cabanillas-Ramos, J., Paez-Brambila, A., Roque, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardization+of+the+bioencapsulation+of+enrofloxacin+and+oxytetracycline+in+Artemia+fransciscana+Kellogg.">Standardization of the bioencapsulation of enrofloxacin and oxytetracycline in Artemia fransciscana Kellogg.</a> Aquaculture. 196, 1-12 (1906).</li><li>Langdon, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microparticle+types+for+delivering+nutrients+to+marine+fish+larvae.">Microparticle types for delivering nutrients to marine fish larvae.</a> Aquaculture. 227, 259-275 (2003).</li><li>Langdon, C., Nordgreen, A., Hawkyard, M., Hamre, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+wax+spray+beads+for+delivery+of+low-molecular+weight,+water+soluble+nutrients+and+antibiotics+to+Artemia.">Evaluation of wax spray beads for delivery of low-molecular weight, water soluble nutrients and antibiotics to Artemia.</a> Aquaculture. 284, 151-158 (2008).</li><li>Zang, L., Morikane, D., Shimada, Y., Tanaka, T., Nishimura, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Novel+Protocol+for+the+Oral+Administration+of+Test+Chemicals+to+Adult+Zebrafish.">A Novel Protocol for the Oral Administration of Test Chemicals to Adult Zebrafish.</a> Zebrafish. 8, 203-210 (2011).</li><li>Goldsmith, J. R., Jobin, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Think+Small:+Zebrafish+as+a+Model+System+of+Human+pathology.">Think Small: Zebrafish as a Model System of Human pathology.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. , (2012).</li><li>Tysnes, K. R., Jorgensen, A., Poppe, T., Midtlyng, P. J., Robertson, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preliminary+expermients+on+use+of+zebrafish+as+a+laboratory+model+for+Giardia+duodenalis+infection.">Preliminary expermients on use of zebrafish as a laboratory model for Giardia duodenalis infection.</a> Acta Parasitologica. 57, 1-6 (2012).</li><li>Marie, B., Huet, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+a+toxic+cyanobacterial+bloom+(Planktothris+agardhii)+on+fish:+Insights+from+histopathological+and+quantitative+proteomic+assessments+following+the+oral+exposure+of+medaka+fish+(Oryzias+latipes).">Effects of a toxic cyanobacterial bloom (Planktothris agardhii) on fish: Insights from histopathological and quantitative proteomic assessments following the oral exposure of medaka fish (Oryzias latipes).</a> Aquatic Toxicology. 114-115, 39-48 (2012).</li><li>Canadian Council on Animal Care. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> CCAC guidelines on: the care and use of fish in research, teaching and testing. , (2005).</li><li>Harper, C., Lawrence, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Laboratory Zebrafish. , (2011).</li><li>De Tolla, L. J., Srinivas, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+for+the+Care+and+Use+of+Fish+in+Research.">Guidelines for the Care and Use of Fish in Research.</a> ILAR Journal. 37 (4), (1995).</li><li>Topic Popovic, N., Strunjak-Perovic, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tricaine+methane-sulfonate+(MS-222)+application+in+fish+anaesthesia.">Tricaine methane-sulfonate (MS-222) application in fish anaesthesia.</a> Journal of Applied Ichthyology. 28, 553-564 (2012).</li><li>Field, H. A., Kelley, K. A., Martell, L., Goldstein, A. M., Serluca, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+gastrointestinal+physiology+using+a+novel+intestinal+transit+assay+in+zebrafish.">Analysis of gastrointestinal physiology using a novel intestinal transit assay in zebrafish.</a> Neurogastroenterology &amp; Motility. 21, 304-312 (2009).</li></ol>

Betekenis Deze techniek is een verbetering en biedt een aantal voordelen ten opzichte van de twee eerder beschreven technieken gavaging volwassen zebravissen. Ten eerste, het gebruik van een spons om de vis te beperken kan een persoon om de procedure uit te voeren, in tegenstelling tot een eerder beschreven techniek waarbij twee mensen. 7 tweede katheter implantatie slang flexibeler dan intraveneuze katheters, die kunnen helpen bij het ​​minimaliseren secundaire trauma door tegen...

Huidige methoden voor het toedienen van verbindingen oraal aan zebravis het toedienen van verbindingen top-bekleed op voer, gemengd in gelatine diëten 1, bioencapsulated in Artemia 2, gemengd met lipide ingekapselde diëten 3, waxspray kralen 4 en via gluten-gebaseerde diëten. 5 Beperkingen van deze methoden van orale toediening omvatten hoge uitloogsnelheden en onvolledige of onvoorspelbare verbinding consumptie door de individuele vissen. Deze variabelen zijn problematisch omdat de besmettelijke ziekte in studies, het kennen van de infectieuze dosis toegediend aan de vis kan zijn van cruciaal belang voor studiesucces. Ook heeft vorige werk aangetoond dat bepaalde verbindingen toegediend in waterbaden toxische laesie aan kieuwen zebravis voordat de intestinale effecten die kunnen worden onder onderzoek plaatsvinden. 6 Maagsonde is een standaard methode die wordt gebruikt in andere proefdier is om precieze hoeveelheden van een product toedienen met aknown concentratie voor de studie in biomedisch en farmaceutisch onderzoek. Pas sinds kort hebben methoden voor gavaging zebravis is in de literatuur beschreven. Een techniek beschreven twee personen onder toepassing van een 24-G katheterschacht bevestigd aan een 2-20 ul pipet 5 pl oplossing te leveren. 7 De beschreven werkwijze had een sterftecijfer van 8,7% en 39% op de eerste en tweede proef, respectievelijk meeste sterfte werd toegeschreven aan zwangere vrouwen. De tweede maagsonde beschreven techniek gebruikt stompe getipt maagsonde spuiten tot 5 pl oplossing voor medakas (Oryzias latipes). 8 Informatie over de sterfte was niet voorzien en de exacte proces van het uitvoeren van de maagsonde werd niet beschreven toedienen. Volgens de Canadese Raad over Animal Care en het Laboratorium zebravis, tot 1% van de vis lichaamsgewicht kan worden toegediend via een maagsonde. 9,10 Ons doel was om een herhaalbare, veilige en efficiënte methode voor het leveren van nauwkeurige volumes com ontwikkelenpond mondeling naar volwassen zebravissen van beide geslachten en in alle fasen van de broedperiode. Deze procedure geschikt is voor een studie die nauwkeurige orale dosering van een verbinding noodzakelijk zijn.

<table border="1">
<tbody>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Equipment</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>A sponge</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1-cc luer lock syringe</td>
 <td>Becton Dickinson &amp; Co</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>22-G Micro-Renathane Implantation tubing (cut)</td>
 <td>Braintree Scientific, Inc.</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1 22-G needle (cut, if needed)</td>
 <td>Becton Dickinson &amp; Co</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>pH meter</td>
 <td>Hanna probe</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1 scalpel blade</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>[header]</td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Reagent/Material</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>MS-222 (Finquel)</td>
 <td>Argent Laboratories</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 </tbody>
</table>

gavaging adult zebrafish

De zebravis is een belangrijk geworden in vivo model in het biomedisch onderzoek. Effectieve methoden moeten worden ontwikkeld en gebruikt om verbindingen of agenten leveren oplossingen voor wetenschappelijk onderzoek. Huidige methoden voor het toedienen van verbindingen oraal aan volwassen zebravissen zijn onjuist van de variabiliteit van de vrijwillige consumptie door de vis. Een maagsonde procedure werd ontwikkeld om precieze hoeveelheden van infectieuze agentia te leveren bij de zebravis voor studie in het biomedisch onderzoek. Volwassen zebravissen meer dan 6 maanden oud werden verdoofd met 150 mg / L van gebufferde MS-222 en gavaged met 5 pl oplossing met flexibele katheter implantatie slang bevestigd aan een cut 22-G naald. De flexibele buis werd neergelaten in de mondholte van de zebravis tot het uiteinde van de buis gestrekt boven de kieuwen (ca. 1 cm). De oplossing werd vervolgens langzaam geïnjecteerd in het darmkanaal. Deze methode is effectief 88% van de tijd, met vis herstellen uneventfully. Dezeprocedure is ook efficiënt als een persoon kan 20-30 vissen een maagsonde in een uur. Deze methode kan worden gebruikt om precies te beheren middelen voor infectieziekten studies of studies van andere verbindingen in volwassen zebravissen.

Beide geslachten van vis, waaronder zwangere vrouwen werden met succes gavaged (figuur 1). Een succesvolle procedure duurt minder dan een minuut met geen vloeistof gezien het verlaten van de kieuwen of de mond. De slang gaat gemakkelijk, zonder geweld, zonder bloed gezien bij verwijdering van de katheter. De procedure is snel en vereist ongeveer 10 min tot maagsonde 3-4 vis, met een gemiddelde van 30-45 sec per vis. Zebravis mag niet gavaged met meer dan 5 pl van elke oploss...

Watch this Scientific Journal Video about Gavaging Adult Zebrafish at JoVE.com

Gavaging Adult Zebrafish

Gavaging Adult zebravis

Het toenemende gebruik van zebravis als diermodel vereist de ontwikkeling van effectieve methoden voor het leveren van bekende hoeveelheden van verbindingen en oplossingen. De maagsonde hieronder beschreven procedure maakt het mogelijk voor de orale aflevering van de precieze omvang van de oplossing betrouwbaar, veilig en efficiënt op volwassen zebravissen.

The zebrafish has become an important in vivo model in biomedical research. Effective methods must be developed and utilized to deliver compounds or ...

Research

JoVE Journal

Biology

Transplantation of Whole Kidney Marrow in Adult Zebrafish

Transplantatie van Whole nier Marrow in Adult zebravis

Hematopoietic stem cells (HSC) are a rare population of pluripotent cells that maintain all the differentiated blood lineages throughout the life of an ...

Retro-orbital Injection in Adult Zebrafish

Retro-orbitale injectie in Adult zebravis

Drug treatment of whole animals is an essential tool in any model system for pharmacological and chemical genetic studies. Intravenous (IV) injection is ...

Dissection of Organs from the Adult Zebrafish

Dissectie van organen van de Adult zebravis

Over the last 20 years, the zebrafish has become a powerful model organism for understanding vertebrate development and disease.  Although experimental ...

Intraperitoneal Injection into Adult Zebrafish

Intraperitoneale injectie in de Adult zebravis

A convenient method for chemically treating zebrafish is to introduce the reagent into the tank water, where it will be taken up by the fish. However, ...

Dissection of the Adult Zebrafish Kidney

Dissectie van de Adult zebravis Kidney

Researchers working in the burgeoning field of adult stem cell biology seek to understand the signals that regulate the behavior and function of stem ...

Heart Dissection in Larval, Juvenile and Adult Zebrafish, Danio rerio

Heart Dissection in Larval, Juvenile and Adult Zebrafish, Danio rerio

Hart Dissection in larvale, jeugdige en volwassen zebravis, Danio rerio</em

Zebrafish have become a beneficial and practical model organism for the study of embryonic heart development (see recent reviews1-6), however, work ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Elektroporatie van Morpholinos in de Adult zebravis Retina

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

In vivo Elektroporatie van Morpholinos in het regenereren van Adult Zebravissen Tail Fin

Certain species of urodeles and teleost fish can regenerate their tissues. Zebrafish have become a widely used model to study the spontaneous regeneration ...

Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish

Bloedafname voor biochemische analyse bij volwassen zebravis

The zebrafish has been used as an animal model for studies of several human diseases. It can serve as a powerful preclinical platform for studies of ...