Name: gavaging adult zebrafish
Uploaded: 2013-08-11T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Gavaging Adult Zebrafish at JoVE.com

המרכז השוואתי באוניברסיטת רוקפלר Bioscience סיפק תמיכה לפרויקט זה. אנו מודים Monnas janelle לקבלת סיוע טכני.

1. הכנת ההרדמה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן פתרון של 150 מ&quot;ג / ליטר של MS-222 במערכת מים או מפתרון מניות או מצורת האבקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק את ה-pH בעזרת מד pH. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חיץ עם סודה לשתייה לפי צורך עד pH הוא בין 7-7.5. </li><li sty...

<ol>
	<li>Royes, J. -. A. B., Chapman, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Preparing Your Own Fish Feeds. , (2009).</li><li>Gomez-Gil, B., Cabanillas-Ramos, J., Paez-Brambila, A., Roque, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardization+of+the+bioencapsulation+of+enrofloxacin+and+oxytetracycline+in+Artemia+fransciscana+Kellogg.">Standardization of the bioencapsulation of enrofloxacin and oxytetracycline in Artemia fransciscana Kellogg.</a> Aquaculture. 196, 1-12 (1906).</li><li>Langdon, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microparticle+types+for+delivering+nutrients+to+marine+fish+larvae.">Microparticle types for delivering nutrients to marine fish larvae.</a> Aquaculture. 227, 259-275 (2003).</li><li>Langdon, C., Nordgreen, A., Hawkyard, M., Hamre, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+wax+spray+beads+for+delivery+of+low-molecular+weight,+water+soluble+nutrients+and+antibiotics+to+Artemia.">Evaluation of wax spray beads for delivery of low-molecular weight, water soluble nutrients and antibiotics to Artemia.</a> Aquaculture. 284, 151-158 (2008).</li><li>Zang, L., Morikane, D., Shimada, Y., Tanaka, T., Nishimura, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Novel+Protocol+for+the+Oral+Administration+of+Test+Chemicals+to+Adult+Zebrafish.">A Novel Protocol for the Oral Administration of Test Chemicals to Adult Zebrafish.</a> Zebrafish. 8, 203-210 (2011).</li><li>Goldsmith, J. R., Jobin, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Think+Small:+Zebrafish+as+a+Model+System+of+Human+pathology.">Think Small: Zebrafish as a Model System of Human pathology.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. , (2012).</li><li>Tysnes, K. R., Jorgensen, A., Poppe, T., Midtlyng, P. J., Robertson, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preliminary+expermients+on+use+of+zebrafish+as+a+laboratory+model+for+Giardia+duodenalis+infection.">Preliminary expermients on use of zebrafish as a laboratory model for Giardia duodenalis infection.</a> Acta Parasitologica. 57, 1-6 (2012).</li><li>Marie, B., Huet, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+a+toxic+cyanobacterial+bloom+(Planktothris+agardhii)+on+fish:+Insights+from+histopathological+and+quantitative+proteomic+assessments+following+the+oral+exposure+of+medaka+fish+(Oryzias+latipes).">Effects of a toxic cyanobacterial bloom (Planktothris agardhii) on fish: Insights from histopathological and quantitative proteomic assessments following the oral exposure of medaka fish (Oryzias latipes).</a> Aquatic Toxicology. 114-115, 39-48 (2012).</li><li>Canadian Council on Animal Care. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> CCAC guidelines on: the care and use of fish in research, teaching and testing. , (2005).</li><li>Harper, C., Lawrence, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Laboratory Zebrafish. , (2011).</li><li>De Tolla, L. J., Srinivas, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+for+the+Care+and+Use+of+Fish+in+Research.">Guidelines for the Care and Use of Fish in Research.</a> ILAR Journal. 37 (4), (1995).</li><li>Topic Popovic, N., Strunjak-Perovic, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tricaine+methane-sulfonate+(MS-222)+application+in+fish+anaesthesia.">Tricaine methane-sulfonate (MS-222) application in fish anaesthesia.</a> Journal of Applied Ichthyology. 28, 553-564 (2012).</li><li>Field, H. A., Kelley, K. A., Martell, L., Goldstein, A. M., Serluca, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+gastrointestinal+physiology+using+a+novel+intestinal+transit+assay+in+zebrafish.">Analysis of gastrointestinal physiology using a novel intestinal transit assay in zebrafish.</a> Neurogastroenterology &amp; Motility. 21, 304-312 (2009).</li></ol>

משמעות טכניקה זו היא שיפור ומספקת מספר יתרונות על פני שתי הטכניקות המתוארות בעבר לgavaging דג הזברה מבוגר. ראשית, שימוש בספוג כדי לרסן את הדגים מאפשר לאדם אחד כדי לבצע את ההליך, בניגוד לטכניקה שתוארה לעיל דורשת שני אנשים. 7 שנית, צ?...

שיטות קיימים כיום למתן דרך הפה לדג זברת תרכובות כוללות תרכובות בניהול עליונה מצופות על הזנה, מעורבב לדיאטות ג&#39;לטין 1, bioencapsulated למלח שרימפס 2, מעורבב עם שומני דיאטות כמוס 3, שעוות חרוזים תרסיס 4 ובאמצעות דיאטות המבוססות על גלוטן. 5 מגבלות שיטות של אוראלי אלה כוללות שיעורי שטיפה גבוהים וצריכת מתחם שלמה או בלתי צפויה על ידי דגים בודדים. המשתנים האלה הם בעייתיים, כי במחקרים למחלות זיהומיות, ביודעו את מינון התולעת ניתן לדגים עשוי להיות קריטי להצלחת מחקר. כמו כן, עבודה קודמת הראתה כי תרכובות מסוימות המנוהלות באמבטיות מים לגרום לנגע רעיל לדג הזברה זימים לפני שפעת המעיים שעשויות להיות תחת מחקר להתרחש. 6 Gavage הוא שיטה סטנדרטית המשמשת במינים של בעלי חיים במעבדה אחרים כדי לנהל את הכמויות מדויקות של מוצר עם AKריכוז Nown למחקר במחקר ביו ותרופות. רק לאחרונה יש שיטות לgavaging דג הזברה תואר בספרות. טכניקה אחת היא שיטה שתוארה שני אדם באמצעות נדן קטטר 24-G המחובר לפיפטה μl 2-20 כדי לספק 5 μl של פתרון. 7 השיטה המתוארת היה שיעור תמותה של 8.7% ו -39% ביום הראשון והשני משפט, בהתאמה; ביותר של התמותה יוחס לנשים הרות להולדת. הטכניקה השנייה gavage תאר מזרקים gavage קהה שקצהו המשמש לניהול של 5 μl פתרון לmedakas (latipes Oryzias). 8 מידע על תמותה לא היה קיים ואת התהליך של ביצוע gavage לא תואר מדויק. לדברי המועצה הקנדית בטיפול בבעלי חיים ובמעבדת דג הזברה, עד 1% ממשקל גופו של הדג יכולה להינתן דרך gavage. 9,10 המטרה שלנו הייתה לפתח שיטת הדיר, יעילה ובטוחה של אספקת כמויות מדויקות של comק&quot;ג במתן דרך פה לדג זברה מבוגר משני המינים ובכל השלבים של רבייה. הליך זה יהיה רלוונטי לכל מחקר שבו נדרש מינון אוראלי מדויק של מתחם.

<table border="1">
<tbody>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Equipment</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>A sponge</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1-cc luer lock syringe</td>
 <td>Becton Dickinson &amp; Co</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>22-G Micro-Renathane Implantation tubing (cut)</td>
 <td>Braintree Scientific, Inc.</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1 22-G needle (cut, if needed)</td>
 <td>Becton Dickinson &amp; Co</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>pH meter</td>
 <td>Hanna probe</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1 scalpel blade</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>[header]</td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Reagent/Material</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>MS-222 (Finquel)</td>
 <td>Argent Laboratories</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 </tbody>
</table>

gavaging adult zebrafish

דג הזברה הפכה חשובה במודל vivo במחקר ביו. שיטות יעילות חייבים להיות מפותחות ומנוצלות כדי לספק תרכובות או סוכנים בפתרונות למחקר מדעי. שיטות קיימים כיום למתן דרך הפה לתרכובות דג הזברה למבוגרים הן לא מדויקות בגלל שונות בצריכה בהתנדבות על ידי הדג. הליך gavage פותח כדי לספק כמויות מדויקות של חומרים מזהמים לדג הזברה למחקר במחקר ביו. דג הזברה מבוגר מעל גיל 6 חודשים היו מורדם עם 150 מ&quot;ג / ליטר של נאגר MS-222 וgavaged עם 5 μl של פתרון באמצעות צינורות השתלת צנתר גמישים המחובר לקצה מחט 22-G לחתוך. הצינור גמיש שהוריד לתוך חלל הפה של דג הזברה עד הקצה של הצינור הוארך בעבר את הזימים (כ 1 ס&quot;מ). הפתרון היה לאחר מכן הזריק לאט לתוך המעי. שיטה זו הייתה יעילה 88% מהזמן, עם דג מחלים ללא אירועים מיוחדים. זההליך הוא גם יעיל כאדם אחד יכול gavage 20-30 דגים בשעה אחת. שיטה זו יכולה לשמש לניהול סוכנים דווקא ללימודי מחלות זיהומיות, או מחקרים של תרכובות אחרות בדג זברה מבוגר.

שני המינים של דגים, כולל נשים הרות להולדת היו gavaged בהצלחה (איור 1). הליך מוצלח לוקח פחות מדקה אחת עם נוזל לא ראה יציאה מהזימים או בפה. הצינור נכנס בקלות, בלי כוח, בלי דם ראה עם הסרת הקטטר. ההליך הוא מהיר, הדורש כ -10 דקות לgavage 3 עד 4 דגים, עם ממוצע של 30-45 שניות לכל דגים. ...

Watch this Scientific Journal Video about Gavaging Adult Zebrafish at JoVE.com

Gavaging Adult Zebrafish

Gavaging דג הזברה למבוגר

השימוש הגובר של דג הזברה כמודל חיה דורש פיתוח שיטות יעילות לאספקה ​​של כמויות ידועות של תרכובות ופתרונות. ההליך המתואר להלן gavage מאפשר משלוח האוראלי של כמויות מדויקות של פתרון אמין, בטוח ויעיל לדג זברה מבוגר.

The zebrafish has become an important in vivo model in biomedical research. Effective methods must be developed and utilized to deliver compounds or ...

Research

JoVE Journal

Biology

Transplantation of Whole Kidney Marrow in Adult Zebrafish

השתלה של מח כליות שלמים דג הזברה למבוגרים

Hematopoietic stem cells (HSC) are a rare population of pluripotent cells that maintain all the differentiated blood lineages throughout the life of an ...

Retro-orbital Injection in Adult Zebrafish

רטרו מסלולית הזרקה של דג הזברה למבוגרים

Drug treatment of whole animals is an essential tool in any model system for pharmacological and chemical genetic studies. Intravenous (IV) injection is ...

Dissection of Organs from the Adult Zebrafish

Dissection של איברים מן דג הזברה למבוגרים

Over the last 20 years, the zebrafish has become a powerful model organism for understanding vertebrate development and disease.  Although experimental ...

Intraperitoneal Injection into Adult Zebrafish

הזרקה לתוך intraperitoneal דג הזברה למבוגרים

A convenient method for chemically treating zebrafish is to introduce the reagent into the tank water, where it will be taken up by the fish. However, ...

Dissection of the Adult Zebrafish Kidney

Dissection של הכליה דג הזברה למבוגרים

Researchers working in the burgeoning field of adult stem cell biology seek to understand the signals that regulate the behavior and function of stem ...

Heart Dissection in Larval, Juvenile and Adult Zebrafish, Danio rerio

Heart Dissection in Larval, Juvenile and Adult Zebrafish, Danio rerio

הלב Dissection ב הזחל, דג הזברה לנוער ו למבוגרים, Danio rerio</em

Zebrafish have become a beneficial and practical model organism for the study of embryonic heart development (see recent reviews1-6), however, work ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

ב electroporation vivo של Morpholinos לתוך הרשתית דג הזברה למבוגרים

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

ב electroporation vivo של Morpholinos לתוך למבוגרים התחדשות זנב סנפיר דג הזברה

Certain species of urodeles and teleost fish can regenerate their tissues. Zebrafish have become a widely used model to study the spontaneous regeneration ...

Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish

הדם אוסף של ניתוח ביוכימי דג הזברה למבוגרים בלבד

The zebrafish has been used as an animal model for studies of several human diseases. It can serve as a powerful preclinical platform for studies of ...