Name: gavaging adult zebrafish
Uploaded: 2013-08-11T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Gavaging Adult Zebrafish at JoVE.com

The Rockefeller University Comparative Biovitenskap Senter gitt støtte til dette prosjektet. Vi takker Janelle Monnas for teknisk assistanse.

En. Klargjøre Bedøvelse Solution <ol><li> Tilbered en oppløsning av 150 mg / L av MS-222 i systemet vann enten fra en stamløsning eller fra pulverisert form. </li><li> Kontroller pH ved hjelp av et pH-meter. </li><li> Buffer med natriumbikarbonat etter behov inntil pH-verdien ligger mellom 7-7,5. </li><li> Forbered en tank av system vann gratis fra MS-222 for fisken å komme seg i. utvinning tid er vanligvis mindre enn 1 min. </li></ol> 2. Klargjøre gavage Apparatus <ol><li> Skjær den k...

<ol>
	<li>Royes, J. -. A. B., Chapman, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Preparing Your Own Fish Feeds. , (2009).</li><li>Gomez-Gil, B., Cabanillas-Ramos, J., Paez-Brambila, A., Roque, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardization+of+the+bioencapsulation+of+enrofloxacin+and+oxytetracycline+in+Artemia+fransciscana+Kellogg.">Standardization of the bioencapsulation of enrofloxacin and oxytetracycline in Artemia fransciscana Kellogg.</a> Aquaculture. 196, 1-12 (1906).</li><li>Langdon, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microparticle+types+for+delivering+nutrients+to+marine+fish+larvae.">Microparticle types for delivering nutrients to marine fish larvae.</a> Aquaculture. 227, 259-275 (2003).</li><li>Langdon, C., Nordgreen, A., Hawkyard, M., Hamre, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+wax+spray+beads+for+delivery+of+low-molecular+weight,+water+soluble+nutrients+and+antibiotics+to+Artemia.">Evaluation of wax spray beads for delivery of low-molecular weight, water soluble nutrients and antibiotics to Artemia.</a> Aquaculture. 284, 151-158 (2008).</li><li>Zang, L., Morikane, D., Shimada, Y., Tanaka, T., Nishimura, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Novel+Protocol+for+the+Oral+Administration+of+Test+Chemicals+to+Adult+Zebrafish.">A Novel Protocol for the Oral Administration of Test Chemicals to Adult Zebrafish.</a> Zebrafish. 8, 203-210 (2011).</li><li>Goldsmith, J. R., Jobin, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Think+Small:+Zebrafish+as+a+Model+System+of+Human+pathology.">Think Small: Zebrafish as a Model System of Human pathology.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. , (2012).</li><li>Tysnes, K. R., Jorgensen, A., Poppe, T., Midtlyng, P. J., Robertson, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preliminary+expermients+on+use+of+zebrafish+as+a+laboratory+model+for+Giardia+duodenalis+infection.">Preliminary expermients on use of zebrafish as a laboratory model for Giardia duodenalis infection.</a> Acta Parasitologica. 57, 1-6 (2012).</li><li>Marie, B., Huet, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+a+toxic+cyanobacterial+bloom+(Planktothris+agardhii)+on+fish:+Insights+from+histopathological+and+quantitative+proteomic+assessments+following+the+oral+exposure+of+medaka+fish+(Oryzias+latipes).">Effects of a toxic cyanobacterial bloom (Planktothris agardhii) on fish: Insights from histopathological and quantitative proteomic assessments following the oral exposure of medaka fish (Oryzias latipes).</a> Aquatic Toxicology. 114-115, 39-48 (2012).</li><li>Canadian Council on Animal Care. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> CCAC guidelines on: the care and use of fish in research, teaching and testing. , (2005).</li><li>Harper, C., Lawrence, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Laboratory Zebrafish. , (2011).</li><li>De Tolla, L. J., Srinivas, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+for+the+Care+and+Use+of+Fish+in+Research.">Guidelines for the Care and Use of Fish in Research.</a> ILAR Journal. 37 (4), (1995).</li><li>Topic Popovic, N., Strunjak-Perovic, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tricaine+methane-sulfonate+(MS-222)+application+in+fish+anaesthesia.">Tricaine methane-sulfonate (MS-222) application in fish anaesthesia.</a> Journal of Applied Ichthyology. 28, 553-564 (2012).</li><li>Field, H. A., Kelley, K. A., Martell, L., Goldstein, A. M., Serluca, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+gastrointestinal+physiology+using+a+novel+intestinal+transit+assay+in+zebrafish.">Analysis of gastrointestinal physiology using a novel intestinal transit assay in zebrafish.</a> Neurogastroenterology &amp; Motility. 21, 304-312 (2009).</li></ol>

Betydning Denne teknikken er en forbedring, og gir flere fordeler over de to tidligere beskrevne teknikker for gavaging voksen sebrafisk. Først tillater bruk av en svamp for å holde fisken en person til å utføre prosedyren, i motsetning til en tidligere beskrevet teknikk krever to personer. Syv andre er kateter implantasjon slange mer fleksibel enn IV kateter, noe som kan bidra til å redusere sekundære trauma på grunn til perforeringen på samme måte som med butte spisser spr...

Aktuelle metoder for administrering av forbindelser muntlig til sebrafisk inkludere administrering av forbindelser topp-belagt på fôr, blandet inn i gelatin dietter 1, bioencapsulated inn saltlake reker 2, blandet med lipid innkapslede dietter tre, voks spray perler fire og via gluten-baserte dietter. 5 Begrensninger disse metodene for oral administrasjon inkluderer høy utvasking priser og ufullstendige eller uforutsigbar sammensatte forbruk av hver enkelt fisk. Disse variablene er problematisk fordi i smittsomme sykdommer studier, vel vitende om infeksiøs dose gis til fisken kan være kritisk for studier suksess. Også har tidligere arbeid vist at visse forbindelser administreres i vannbad forårsake giftig lesjon til sebrafisk gjellene før de påvirker tarmen som kan være under studien oppstå. 6 Gavage er en standard metode som brukes i andre laboratorie dyrearter å administrere nøyaktige mengder av et produkt med aknown konsentrasjon for studier i biomedisinsk og farmasøytisk forskning. Bare nylig har metoder for gavaging sebrafisk blitt beskrevet i litteraturen. En teknikk som er beskrevet er en to-person med anvendelse av et 24-G kateter kappe festet til en 2-20 ul pipette for å levere 5 ul oppløsning. 7. Fremgangsmåten beskrevet hadde en dødelighet på 8,7% og 39% på den første og andre rettssaken, henholdsvis, og mesteparten av dødelighet ble tilskrevet drektige tisper. Den andre gavage teknikken beskrevet brukt stump-tipped tilførsel med sonde sprøyter for å administrere 5 ul oppløsning til medakas (Oryzias latipes). 8 Informasjon om dødeligheten ikke ble levert og nøyaktige prosessen for å utføre gavage ble ikke beskrevet. Ifølge den kanadiske Council on Animal Care og Laboratory Sebrafisk, opp til 1% av fiskens kroppsvekt kan administreres via sonde. 9,10 Vårt mål var å utvikle en repeterbare, sikker og effektiv metode for å levere presise mengder compounds muntlig til voksen sebrafisk av begge kjønn og i alle stadier av reproduksjon. Denne fremgangsmåten vil kunne anvendes for en hvilken som helst studie hvor nøyaktig oral dosering av en forbindelse er nødvendig.

<table border="1">
<tbody>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Equipment</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>A sponge</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1-cc luer lock syringe</td>
 <td>Becton Dickinson &amp; Co</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>22-G Micro-Renathane Implantation tubing (cut)</td>
 <td>Braintree Scientific, Inc.</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1 22-G needle (cut, if needed)</td>
 <td>Becton Dickinson &amp; Co</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>pH meter</td>
 <td>Hanna probe</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1 scalpel blade</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>[header]</td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Reagent/Material</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>MS-222 (Finquel)</td>
 <td>Argent Laboratories</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 </tbody>
</table>

gavaging adult zebrafish

Den zebrafisk har blitt en viktig in vivo modell i biomedisinsk forskning. Effektive metoder må utvikles og utnyttes til å levere forbindelser eller agenter på løsninger for vitenskapelig forskning. Gjeldende metoder for administrering av forbindelser oralt til voksne zebrafisk er unøyaktig på grunn av variasjon i frivillige konsum av fisken. En sonde prosedyren ble utviklet for å levere presise mengder av smittestoffer til sebrafisk for studier i biomedisinsk forskning. Voksen zebrafisk over 6 måneders alder ble bedøvd med 150 mg / L av bufret MS-222 og gavaged med 5 pl av løsningen ved hjelp av fleksible kateter implantasjon slange festet til et kutt 22-G nålespissen. Den fleksible slangen ble senket ned i munnhulen av zebrafisk til spissen av produksjonsrøret forlenget forbi gjellene (ca. 1 cm). Løsningen ble deretter sprøytet sakte inn i tarmkanalen. Denne metoden var effektiv på 88% av tiden, med fisk utvinne uneventfully. DetteFremgangsmåten er også effektiv som en person kan magesonde 20-30 fisk i en time. Denne metoden kan benyttes for å administrere midler for smittsomme sykdommer studier, eller forstadier av andre forbindelser i voksen zebrafisk.

Begge kjønn av fisk, herunder drektige tisper ble vellykket gavaged (figur 1). En vellykket prosedyre tar mindre enn ett minutt uten væske sett spennende gjellene eller munn. Slangen går lett, uten kraft, uten blod sett på kateteret fjernes. Fremgangsmåten er hurtig, som krever omtrent 10 min til gavage 3-4 fisk, med et gjennomsnitt på 30-45 sekunder per fisk. Zebrafisk bør ikke gavaged med mer enn 5 ul av en hvilken som helst løsning. Gavage med 10 mL løsninger ga ...

Watch this Scientific Journal Video about Gavaging Adult Zebrafish at JoVE.com

Gavaging Adult Zebrafish

Gavaging Adult Sebrafisk

Den økende bruk av zebrafisk som en dyremodell krever utvikling av effektive metoder for levering av kjente mengder av nevnte forbindelser og oppløsninger. Den gavage prosedyren beskrevet nedenfor gir mulighet for oral levering av presise volumer av løsningen pålitelig, sikkert og effektivt til voksen sebrafisk.

The zebrafish has become an important in vivo model in biomedical research. Effective methods must be developed and utilized to deliver compounds or ...

Research

JoVE Journal

Biology

Transplantation of Whole Kidney Marrow in Adult Zebrafish

Hematopoietic stem cells (HSC) are a rare population of pluripotent cells that maintain all the differentiated blood lineages throughout the life of an ...

Retro-orbital Injection in Adult Zebrafish

Drug treatment of whole animals is an essential tool in any model system for pharmacological and chemical genetic studies. Intravenous (IV) injection is ...

Dissection of Organs from the Adult Zebrafish

Over the last 20 years, the zebrafish has become a powerful model organism for understanding vertebrate development and disease.  Although experimental ...

Intraperitoneal Injection into Adult Zebrafish

A convenient method for chemically treating zebrafish is to introduce the reagent into the tank water, where it will be taken up by the fish. However, ...

Dissection of the Adult Zebrafish Kidney

Researchers working in the burgeoning field of adult stem cell biology seek to understand the signals that regulate the behavior and function of stem ...

Heart Dissection in Larval, Juvenile and Adult Zebrafish, Danio rerio

Heart Dissection in Larval, Juvenile and Adult Zebrafish, Danio rerio

Zebrafish have become a beneficial and practical model organism for the study of embryonic heart development (see recent reviews1-6), however, work ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo electroporation av Morpholinos til Adult sebrafisk Retina

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

In vivo electroporation av Morpholinos i Regenerating Adult sebrafisk Halefinner

Certain species of urodeles and teleost fish can regenerate their tissues. Zebrafish have become a widely used model to study the spontaneous regeneration ...

Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish

Blood Collection for biokjemisk analyse i Voksen sebrafisk

The zebrafish has been used as an animal model for studies of several human diseases. It can serve as a powerful preclinical platform for studies of ...