Name: gavaging adult zebrafish
Uploaded: 2013-08-11T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Gavaging Adult Zebrafish at JoVE.com

The Rockefeller University Comparative Bioscience Center gav stöd för detta projekt. Vi tackar Janelle Monnas för tekniskt bistånd.

Ett. Förberedelse av bedövningslösningen <ol><li> Bered en lösning av 150 mg / L av MS-222 i systemet vatten antingen från en stamlösning eller från pulverform. </li><li> Verifiera pH med användning av en pH-meter. </li><li> Buffert med natriumbikarbonat behövs som tills pH är mellan 7-7,5. </li><li> Förbered en tank med systemvattnet fri från MS-222 för fisken att återhämta sig i. Tiden för återhämtning är typiskt mindre än 1 min. </li></ol> 2. Förbereda sondmatning Apparatu...

<ol>
	<li>Royes, J. -. A. B., Chapman, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Preparing Your Own Fish Feeds. , (2009).</li><li>Gomez-Gil, B., Cabanillas-Ramos, J., Paez-Brambila, A., Roque, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardization+of+the+bioencapsulation+of+enrofloxacin+and+oxytetracycline+in+Artemia+fransciscana+Kellogg.">Standardization of the bioencapsulation of enrofloxacin and oxytetracycline in Artemia fransciscana Kellogg.</a> Aquaculture. 196, 1-12 (1906).</li><li>Langdon, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microparticle+types+for+delivering+nutrients+to+marine+fish+larvae.">Microparticle types for delivering nutrients to marine fish larvae.</a> Aquaculture. 227, 259-275 (2003).</li><li>Langdon, C., Nordgreen, A., Hawkyard, M., Hamre, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+wax+spray+beads+for+delivery+of+low-molecular+weight,+water+soluble+nutrients+and+antibiotics+to+Artemia.">Evaluation of wax spray beads for delivery of low-molecular weight, water soluble nutrients and antibiotics to Artemia.</a> Aquaculture. 284, 151-158 (2008).</li><li>Zang, L., Morikane, D., Shimada, Y., Tanaka, T., Nishimura, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Novel+Protocol+for+the+Oral+Administration+of+Test+Chemicals+to+Adult+Zebrafish.">A Novel Protocol for the Oral Administration of Test Chemicals to Adult Zebrafish.</a> Zebrafish. 8, 203-210 (2011).</li><li>Goldsmith, J. R., Jobin, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Think+Small:+Zebrafish+as+a+Model+System+of+Human+pathology.">Think Small: Zebrafish as a Model System of Human pathology.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. , (2012).</li><li>Tysnes, K. R., Jorgensen, A., Poppe, T., Midtlyng, P. J., Robertson, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preliminary+expermients+on+use+of+zebrafish+as+a+laboratory+model+for+Giardia+duodenalis+infection.">Preliminary expermients on use of zebrafish as a laboratory model for Giardia duodenalis infection.</a> Acta Parasitologica. 57, 1-6 (2012).</li><li>Marie, B., Huet, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+a+toxic+cyanobacterial+bloom+(Planktothris+agardhii)+on+fish:+Insights+from+histopathological+and+quantitative+proteomic+assessments+following+the+oral+exposure+of+medaka+fish+(Oryzias+latipes).">Effects of a toxic cyanobacterial bloom (Planktothris agardhii) on fish: Insights from histopathological and quantitative proteomic assessments following the oral exposure of medaka fish (Oryzias latipes).</a> Aquatic Toxicology. 114-115, 39-48 (2012).</li><li>Canadian Council on Animal Care. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> CCAC guidelines on: the care and use of fish in research, teaching and testing. , (2005).</li><li>Harper, C., Lawrence, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Laboratory Zebrafish. , (2011).</li><li>De Tolla, L. J., Srinivas, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+for+the+Care+and+Use+of+Fish+in+Research.">Guidelines for the Care and Use of Fish in Research.</a> ILAR Journal. 37 (4), (1995).</li><li>Topic Popovic, N., Strunjak-Perovic, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tricaine+methane-sulfonate+(MS-222)+application+in+fish+anaesthesia.">Tricaine methane-sulfonate (MS-222) application in fish anaesthesia.</a> Journal of Applied Ichthyology. 28, 553-564 (2012).</li><li>Field, H. A., Kelley, K. A., Martell, L., Goldstein, A. M., Serluca, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+gastrointestinal+physiology+using+a+novel+intestinal+transit+assay+in+zebrafish.">Analysis of gastrointestinal physiology using a novel intestinal transit assay in zebrafish.</a> Neurogastroenterology &amp; Motility. 21, 304-312 (2009).</li></ol>

Signifikans Denna teknik är en förbättring och ger flera fördelar över de två tidigare beskrivna tekniker för gavaging vuxna zebrafisk. Först tillåter användning av en svamp för att hålla tillbaka fisken en person att utföra proceduren, i motsats till en tidigare beskrivna tekniken kräver två personer. 7 det andra är kateter implantation slang mer flexibel än IV-katetrar, som kan hjälpa till att minimera sekundära trauma på grund till perforering på liknande sät...

Nuvarande metoder för att administrera föreningarna oralt till zebrafisk inkluderar administrering föreningar toppbelagd på foder, blandas in i gelatin dieter 1, bioencapsulated in artemia 2, blandat med lipid inkapslade dieter 3, vax sprej pärlor 4 och via gluten-baserade dieter. 5 Begränsningar av dessa metoder för oral administration inkluderar höga urlakningshastigheter och ofullständig eller oförutsägbara förening konsumeras av fisk. Dessa variabler är problematiskt eftersom i infektionssjukdomar studier, i vetskap om smittsam dos administreras till fisken kan vara kritisk för studier framgång. Dessutom har tidigare arbete visat att vissa föreningar administreras i vattenbad orsaka toxisk skada som zebrafisk gälar innan de intestinala effekter som kan vara under utredning sker. 6 Sondmatning är en vanlig metod som används i andra försöksdjurart att administrera exakta kvantiteter av en produkt med akNown koncentration för studier i biomedicinsk och farmaceutisk forskning. Först nyligen har metoder för gavaging zebrafisk har beskrivits i litteraturen. En teknik som beskrivs är en två-person som använder en 24-G katetermantel ansluten till en 2-20 l pipett för att leverera 5 pl lösning. 7 Den beskrivna metoden hade en dödlighet på 8,7% och 39% på den första och andra rättegång, respektive, de flesta av dödligheten tillskrevs dräktiga honor. Den andra sondmatning beskrivna tekniken används trubbig spets sondmatning sprutor för att administrera 5 pl lösning till medakas (Oryzias latipes). Var 8 Information om dödligheten inte tillhandahålls och den exakta processen att utföra sondmatning beskrevs inte. Enligt den kanadensiska rådet om Animal Care och Laboratoriet Zebrafish, upp till 1% av fiskens kroppsvikt kan administreras via sondmatning. 9,10 Vårt mål var att utveckla en repeterbar, säker och effektiv metod för att leverera precisa volymer compounds oralt till vuxna zebrafisk av båda könen och i alla stadier. Detta förfarande skulle gälla för någon studie där noggrann oral dosering av en förening krävs.

<table border="1">
<tbody>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Equipment</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>A sponge</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1-cc luer lock syringe</td>
 <td>Becton Dickinson &amp; Co</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>22-G Micro-Renathane Implantation tubing (cut)</td>
 <td>Braintree Scientific, Inc.</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1 22-G needle (cut, if needed)</td>
 <td>Becton Dickinson &amp; Co</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>pH meter</td>
 <td>Hanna probe</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1 scalpel blade</td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>[header]</td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Reagent/Material</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>MS-222 (Finquel)</td>
 <td>Argent Laboratories</td>
 <td></td>
 <td></td>
 </tr>
 </tbody>
</table>

gavaging adult zebrafish

Den zebrafisk har blivit en viktig in vivo-modell i den biomedicinska forskningen. Effektiva metoder måste utvecklas och utnyttjas för att leverera föreningar eller medel i lösningar för vetenskaplig forskning. Nuvarande metoder för att administrera föreningarna oralt till vuxna zebrafisk är felaktiga på grund av variationer i frivillig konsumtion av fisk. En sondmatning förfarande har utvecklats för att ge exakta mängder av smittämnen som zebrafisk för studier i biomedicinsk forskning. Vuxna zebrafisk över 6 månaders ålder sövdes med 150 mg / L av buffrad MS-222 och sondmatades med 5 pl lösning med slangar kateter implantation bifogas ett snitt 22-G nål spets. Den flexibla slangen sänktes in i den orala håligheten hos zebrafisk tills spetsen av slangen utskjuten förbi gälarna (cirka 1 cm). Lösningen injicerades sedan långsamt i tarmkanalen. Denna metod var effektiv 88% av tiden, med fisk återhämtar händelselöst. Dettaförfarandet är också effektiv som en person kan sondmatning 20-30 fisk i en timme. Denna metod kan användas för att exakt administrera medel för infektionssjukdomar studier eller studier av andra föreningar i vuxen zebrafisk.

Båda könen av fisk, inklusive dräktiga honor framgångsrikt sondmatades (Figur 1). En lyckad procedur tar mindre än en minut utan vätska sett lämnar gälarna eller munnen. Slangen går lätt, utan våld, utan blod ses vid katetern avlägsnas. Proceduren är snabb och kräver ungefär 10 min till sondmatning 3-4 fisk, med ett genomsnitt på 30 till 45 sekunder per fisk. Zebrafisk ska inte sondmatades med mer än 5 ìl av varje lösning. Sondmatning med 10 pl lösningar ...

Watch this Scientific Journal Video about Gavaging Adult Zebrafish at JoVE.com

Gavaging Adult Zebrafish

Gavaging vuxna zebrafisk

Den ökande användningen av zebrafisk som en djurmodell kräver utveckling av effektiva metoder för leverans av kända mängder av föreningar och lösningar. Den sondmatning förfarande som beskrivs nedan medger oral tillförsel av exakta volymer av lösning pålitligt, säkert och effektivt för vuxna zebrafisk.

The zebrafish has become an important in vivo model in biomedical research. Effective methods must be developed and utilized to deliver compounds or ...

Research

JoVE Journal

Biology

Transplantation of Whole Kidney Marrow in Adult Zebrafish

Transplantation av hela Njure Marrow i vuxen Zebrafish

Hematopoietic stem cells (HSC) are a rare population of pluripotent cells that maintain all the differentiated blood lineages throughout the life of an ...

Retro-orbital Injection in Adult Zebrafish

Retro-orbital injektionsvätska till vuxna Zebrafish

Drug treatment of whole animals is an essential tool in any model system for pharmacological and chemical genetic studies. Intravenous (IV) injection is ...

Dissection of Organs from the Adult Zebrafish

Dissektion av organ från vuxna Zebrafish

Over the last 20 years, the zebrafish has become a powerful model organism for understanding vertebrate development and disease.  Although experimental ...

Intraperitoneal Injection into Adult Zebrafish

Intraperitoneal injektion i vuxen Zebrafish

A convenient method for chemically treating zebrafish is to introduce the reagent into the tank water, where it will be taken up by the fish. However, ...

Dissection of the Adult Zebrafish Kidney

Dissekering av vuxna Zebrafish Kidney

Researchers working in the burgeoning field of adult stem cell biology seek to understand the signals that regulate the behavior and function of stem ...

Heart Dissection in Larval, Juvenile and Adult Zebrafish, Danio rerio

Heart Dissection in Larval, Juvenile and Adult Zebrafish, Danio rerio

Hjärta Dissection i Larvernas, unga och vuxna Zebrafish, Danio rerio</em

Zebrafish have become a beneficial and practical model organism for the study of embryonic heart development (see recent reviews1-6), however, work ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo elektroporering av Morpholinos i Adult Zebrafish Retina

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

In vivo Elektroporering av Morpholinos i Regenerating Adult Zebrafish stjärtfenan

Certain species of urodeles and teleost fish can regenerate their tissues. Zebrafish have become a widely used model to study the spontaneous regeneration ...

Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish

Blodinsamling för biokemisk analys i vuxen Zebrafish

The zebrafish has been used as an animal model for studies of several human diseases. It can serve as a powerful preclinical platform for studies of ...