Name: isolation of adipose tissue immune cells
Uploaded: 2013-05-22T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Adipose Tissue Immune Cells at JoVE.com

התזמורת סימפונית נתמכת על ידי NIH רות ל &#39;Kirschstein NRSA (F32 DK091040), AK נתמך על ידי מלגת דוקטורים מהאגודה האמריקנית לסוכרת (7-10-MI-05), והוא נתמך על ידי אהה פרס איגוד לב אמריקאי הוקם חוקר (12EIA8270000). ניסויי cytometry זרימה בוצעו במשאבים משותפים Cytometry זרימת VMC. משאבי cytometry זרימת VMC משותפים נתמך על ידי המרכז לחקר מחלות העיכול ונדרבילט (DK058404).

1. חומרים כימיים ומתכלה לפני שתתחיל בפרוטוקול הניסוי הזה, להכין את ריאגנטים הבאים: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 70% אתנול </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 1X PBS </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 1X DPBS (ללא Ca וMg) בתוספת 0.5% BSA </li><l...

<ol>
	<li>Rodbell, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolism+of+Isolated+Fat+Cells.+I.+Effects+of+Hormones+on+Glucose+Metabolism+and+Lipolysis.">Metabolism of Isolated Fat Cells. I. Effects of Hormones on Glucose Metabolism and Lipolysis.</a> The Journal of Biological Chemistry. 239, 375-380 (1964).</li><li>Danse, L. H., Verschuren, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fish+oil-induced+yellow+fat+disease+in+rats.+III.+Lipolysis+in+affected+adipose+tissue.">Fish oil-induced yellow fat disease in rats. III. Lipolysis in affected adipose tissue.</a> Veterinary Pathology. 15, 544-548 (1978).</li><li>Weisberg, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Obesity+is+associated+with+macrophage+accumulation+in+adipose+tissue.">Obesity is associated with macrophage accumulation in adipose tissue.</a> The Journal of Clinical Investigation. 112, 1796-1808 (2003).</li><li>Xu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+inflammation+in+fat+plays+a+crucial+role+in+the+development+of+obesity-related+insulin+resistance.">Chronic inflammation in fat plays a crucial role in the development of obesity-related insulin resistance.</a> The Journal of Clinical Investigation. 112, 1821-1830 (2003).</li><li>Mathis, D., Shoelson, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunometabolism:+an+emerging+frontier.">Immunometabolism: an emerging frontier.</a> Nature Reviews. Immunology. 11, 81 (2011).</li><li>Stefanovic-Racic, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+cells+promote+macrophage+infiltration+and+comprise+a+substantial+proportion+of+obesity-associated+increases+in+CD11c++cells+in+adipose+tissue+and+liver.">Dendritic cells promote macrophage infiltration and comprise a substantial proportion of obesity-associated increases in CD11c+ cells in adipose tissue and liver.</a> Diabetes. 61, 2330-2339 (2012).</li><li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+deficiency+and+pharmacological+stabilization+of+mast+cells+reduce+diet-induced+obesity+and+diabetes+in+mice.">Genetic deficiency and pharmacological stabilization of mast cells reduce diet-induced obesity and diabetes in mice.</a> Nature Medicine. 15, 940-945 (2009).</li><li>Feuerer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lean,+but+not+obese,+fat+is+enriched+for+a+unique+population+of+regulatory+T+cells+that+affect+metabolic+parameters.">Lean, but not obese, fat is enriched for a unique population of regulatory T cells that affect metabolic parameters.</a> Nature Medicine. 15, 930-939 (2009).</li><li>Nishimura, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD8++effector+T+cells+contribute+to+macrophage+recruitment+and+adipose+tissue+inflammation+in+obesity.">CD8+ effector T cells contribute to macrophage recruitment and adipose tissue inflammation in obesity.</a> Nature Medicine. 15, 914-920 (2009).</li><li>Winer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normalization+of+obesity-associated+insulin+resistance+through+immunotherapy.">Normalization of obesity-associated insulin resistance through immunotherapy.</a> Nature Medicine. 15, 921-929 (2009).</li><li>Winer, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=B+cells+promote+insulin+resistance+through+modulation+of+T+cells+and+production+of+pathogenic+IgG+antibodies.">B cells promote insulin resistance through modulation of T cells and production of pathogenic IgG antibodies.</a> Nature Medicine. 17, 610-617 (2011).</li><li>Wu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+invariant+natural+killer+T+cells+by+lipid+excess+promotes+tissue+inflammation,+insulin+resistance,+and+hepatic+steatosis+in+obese+mice.">Activation of invariant natural killer T cells by lipid excess promotes tissue inflammation, insulin resistance, and hepatic steatosis in obese mice.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 109. , 1143-1152 (2012).</li><li>Wu, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Eosinophils+sustain+adipose+alternatively+activated+macrophages+associated+with+glucose+homeostasis.">Eosinophils sustain adipose alternatively activated macrophages associated with glucose homeostasis.</a> Science. 332, 243-247 (2011).</li><li>Elgazar-Carmon, V., Rudich, A., Hadad, N., Levy, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophils+transiently+infiltrate+intra-abdominal+fat+early+in+the+course+of+high-fat+feeding.">Neutrophils transiently infiltrate intra-abdominal fat early in the course of high-fat feeding.</a> Journal of Lipid Research. 49, 1894-1903 (2008).</li><li>Talukdar, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophils+mediate+insulin+resistance+in+mice+fed+a+high-fat+diet+through+secreted+elastase.">Neutrophils mediate insulin resistance in mice fed a high-fat diet through secreted elastase.</a> Nature Medicine. 18, 1407-1412 (2012).</li><li>Hagman, D. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterizing+and+quantifying+leukocyte+populations+in+human+adipose+tissue:+impact+of+enzymatic+tissue+processing.">Characterizing and quantifying leukocyte populations in human adipose tissue: impact of enzymatic tissue processing.</a> Journal of Immunological Methods. 386, 50-59 (2012).</li><li>Basu, S., Campbell, H. M., Dittel, B. N., Ray, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purification+of+specific+cell+population+by+fluorescence+activated+cell+sorting+(FACS).">Purification of specific cell population by fluorescence activated cell sorting (FACS).</a> J. Vis. Exp. (41), e1546 (2010).</li><li>Kotecha, N., Krutzik, P. O., Irish, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Web-based+analysis+and+publication+of+flow+cytometry+experiments.">Web-based analysis and publication of flow cytometry experiments.</a> Current Protocols in Cytometry. Chapter 10, Unit 10 (2010).</li><li>Cho, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiogenic+role+of+LYVE-1-positive+macrophages+in+adipose+tissue.">Angiogenic role of LYVE-1-positive macrophages in adipose tissue.</a> Circulation Research. 100, e47-e57 (2007).</li><li>Roederer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spectral+compensation+for+flow+cytometry:+visualization+artifacts,+limitations,+and+caveats.">Spectral compensation for flow cytometry: visualization artifacts, limitations, and caveats.</a> Cytometry. 45, 194-205 (2001).</li></ol>

עניין גובר בתפקידה של המערכת החיסונית בהשלכות מטבוליות של השמנה הוביל לשימוש הנרחב בזרימת cytometry לאפיין תאים חיסוניים של AT. אף על פי הפרוטוקול המדויק ישתנה בין מעבדות המבוססות על הניסיון שלהם וציוד זמין, כוללים את השלבים הקריטיים עיכול collagenase, צנטריפוגה ההפרש, וסימון ...

מבחינה היסטורית, רקמת השומן (AT) כבר נתפסה כאיבר אדיש של אחסון שומנים בדם, שמתרחב ומתכווץ בתגובה למאזן אנרגיה. כעת אנו מבינים כי AT מייצג איבר האנדוקרינית דינמי שמפריש באופן פעיל מספר ההורמונים, אשר משפיעים באופן ישיר התנהגות אכילה והומאוסטזיס הגלוקוז מערכתי. בנוסף, בעשור האחרון חלה עלייה הולכת וגובר לאוכלוסיות הרבות של תאים חיסוניים המתגוררות בכל חלק סטרומה וסקולרית (SVF), כמו גם את תרומתם ל-AT הומאוסטזיס. היכולת להפריד בין AT adipocyte וSVF באמצעות לעכל collagenase אחריו צנטריפוגה ההפרש תואר לראשונה בשנת 1964 על ידי Rodbell 1. Collagenase השני משמש לרוב להפרדת adipocyte וSVF בשל תחזוקה של הקולטנים לאינסולין adipocyte 1. חלוקה במוקדם, האנזימטית של AT הייתה בעיקר מועסק ללמוד adipocyte חילוף חומרים וכדי לבודד preadipocytes. לאחרונה, בטכניקה זו, בשילוב עם הזמינות הנרחבת של cytometers הזרימה ומספר הגדל וההולך של נוגדני fluorophore-מצומדות זמינים מסחרי, יש להקל אפיון של AT תאים חיסוניים. למרות נוכחותם של תאי מערכת חיסונית בדלקת שתוארה בעבר 2, את המסמכים על ידי הזרע וייסברג ואח&#39;. ושו et al. פורסם בשנת 2003 היו הראשון לתעד את ההצטברות של AT מקרופאגים (כספומטים) בהשמנה יתר, אשר מפרישה ציטוקינים דלקתיים ולתאם עם תנגודת לאינסולין AT ספציפית ומערכתית 3,4. תצפיות אלה שימש כבסיס לשדה חדש של חקירה לאחרונה שטבע, &quot;immunometabolism,&quot; 5 וכבר במעקב על ידי מחקרים לכך לאוכלוסיות תאי חיסון שונות, כוללים תאים דנדריטיים, תאי פיטום 6 7, 8 תאי T -10, 11, תאי B NKT תאים 12, 13, אאוזינופילים ונויטרופילים 14,15 בהתפתחות של תנגודת לאינסולין השמנת יתר קשור. מטרת מאמר זה היא לספק תיאור מפורט של הטכניקה לעכל collagenase משמשת לבודד תאים של AT SVF ולאפיין כספומטים ו-AT תאי T באמצעות cytometry הזרימה. פרוטוקול זה כבר מותאם לעכבר ב, עם זאת, צופים יכולים ליהנות מקריאת מאמר מצוין המספק פירוט נרחב על אופטימיזציה של טכניקה זו לאדם בגיל 16. קהל היעד של מאמר זה כולל חוקרים בעלי ניסיון מוגבל בעבודה עם עכבר ובביצוע cytometry זרימה. כמה שיקולים מעשיים לאיזון תשואה סלולרית וכדאיות עם זמן ומשאבים מוצגים כמו גם בקרות cytometry זרימה אופטימליות לאפיון AT אוכלוסיות תאים חיסוניים. בנוסף לפרוטוקול שלנו, קוראים referrאד למאמר יופיטר לאחרונה על ידי Basu et al. לדיון מצוין של חלק מההיבטים הטכניים של cytometry זרימה לכוללים בקרות ופיצויים נאותות 17.

<table border="1">
 <tbody>
 <tr>
 <td>Name</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalog #</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>DPBS (no Ca or Mg) 10 x 500 ml</td>
 <td>Life Technologies</td>
 <td>14190-250</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>DAPI</td>
 <td>Life Technologies</td>
 <td>D3571</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>BSA</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>A2153-100G</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>collagenase</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>C6885-5G</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>propidium iodide solution</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>P4864-10 ml</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>stable stack 20 microliter</td>
 <td>Rainin</td>
 <td>SS-L10</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>20 microliter filter tips</td>
 <td>Rainin</td>
 <td>SRL10F</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>stable stack 250 microliter tips</td>
 <td>Rainin</td>
 <td>SS-L250</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1000 microliter tips</td>
 <td>Rainin</td>
 <td>GPS-L1000</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1000 microliter filter tips</td>
 <td>Rainin</td>
 <td>GP-L1000F</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>250 microliter Filter Tips</td>
 <td>Rainin</td>
 <td>SR-L200F</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>FC Block</td>
 <td>BD Biosciences</td>
 <td>553142</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>fisher 100mn strainers</td>
 <td>Fisherbrand</td>
 <td>22-363-549</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>medium weigh dish</td>
 <td>Fisherbrand</td>
 <td>02-202B</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>aluminum foil</td>
 <td>Fisherbrand</td>
 <td>1213100</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>mincing scissors</td>
 <td>Fisherbrand</td>
 <td>089531B</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Vortex</td>
 <td>Fisherbrand</td>
 <td>2215365</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>50 ml conical tubes</td>
 <td>BD Falcon</td>
 <td>14-959-49A</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>filter top FACS tubes</td>
 <td>BD Falcon</td>
 <td>352235</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>10 ml pipette case 200</td>
 <td>BD Falcon</td>
 <td>1367520</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>round bottom tubes</td>
 <td>BD Falcon</td>
 <td>352058</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>5 ml syringe</td>
 <td>BD Falcon</td>
 <td>309646</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>V Bottom Plates</td>
 <td>Costar</td>
 <td>07-200-107</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>transfer bulb pipette</td>
 <td>Thermo Scientific</td>
 <td>13-711-22</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Shaker</td>
 <td>Thermo Scientific</td>
 <td>11 676 071</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Adhesive mat</td>
 <td>Thermo Scientific</td>
 <td>1368750</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Cell Culture Centrifuge</td>
 <td>Sorvall</td>
 <td>75253839</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Adapters</td>
 <td>Sorvall</td>
 <td>75003723</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Rat anti-mouse CD16/CD32</td>
 <td>BD Biosciences</td>
 <td>553142</td>
 <td>Concentration: 0.5 - 1 &mu;g/ 106 cells</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Rat anti-mouse F4/80</td>
 <td>eBioscience</td>
 <td>17-4801</td>
 <td>Fluorophore conjugate: APC 
 Concentration: 0.2 &mu;g/ 106 cells 
 Isotype control catalog number: 17-4321</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Rat anti-mouse CD11b</td>
 <td>eBioscience</td>
 <td>11-0112</td>
 <td>Fluorophore conjugate: FITC 
 Concentration: 0.5 &mu;g/ 106 cells 
 Isotype control catalog number: 11/1/4031</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Armenian Hamster anti-mouse CD11c</td>
 <td>eBioscience</td>
 <td>12-0114</td>
 <td>Fluorophore conjugate: PE 
 Concentration: 0.8 &mu;g/ 106 cells 
 Isotype control catalog number: Dec-88</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Goat anti-mouse MGL1/2</td>
 <td>R&amp;D Systems</td>
 <td>FAB4297P</td>
 <td>Fluorophore conjugate: PE 
 Concentration: 0.1 &mu;g/ 106 cells 
 Isotype control catalog number: IC108P</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Goat anti-mouse CD206</td>
 <td>R&amp;D Systems</td>
 <td>FAB2535P</td>
 <td>Fluorophore conjugate: PE 
 Concentration: 0.1 &mu;g/ 106 cells 
 Isotype control catalog number: IC108P</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Rat anti-mouse CCR2</td>
 <td>R&amp;D Systems</td>
 <td>FAB5538P</td>
 <td>Fluorophore conjugate: PE 
 Concentration: 0.1 &mu;g/ 106 cells 
 Isotype control catalog number: IC013P</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Armenian Hamster anti-mouse TCR&beta;</td>
 <td>BD Biosciences</td>
 <td>553174</td>
 <td>Fluorophore conjugate: APC 
 Concentration: 0.2 &mu;g/ 106 cells 
 Isotype control catalog number: 553956</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Rat anti-mouse CD8a</td>
 <td>BD Biosciences</td>
 <td>552877</td>
 <td>Fluorophore conjugate: PE-Cy7 
 Concentration: 0.8 &mu;g/ 106 cells 
 Isotype control catalog number: 552784</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Rat anti-mouse CD4</td>
 <td>BD Biosciences</td>
 <td>557956</td>
 <td>Fluorophore conjugate: Alexa Fluor 700 
 Concentration: 0.2 &mu;g/ 106 cells 
 Isotype control catalog number: 557963</td>
 </tr>
 </tbody>
</table>
Table 1. List of Materials and Reagents.

isolation of adipose tissue immune cells

הגילוי של חדירת מקרופאג גדל ברקמת השומן (AT) של מכרסמים ובני אדם סובלים מהשמנת יתר הוביל להתגברות העניין בתרומה של תאים חיסונית לעמידות לאינסולין מקומית ומערכתית. בידוד וכימות של אוכלוסיות תאי חיסון שונות ברזה והשמנת יתר בחברה הוא טכניקה מנוצל בדרך כלל במעבדות immunometabolism; טיפול עדיין קיצוני יש לנקוט הן בבידוד בתא בכלי דם סטרומה וניתוח תזרים cytometry כך שהנתונים המתקבלים הוא אמין ולפרש . בסרטון הזה אנחנו מדגימים איך בשר טחון, לעכל, ולבודד את החלק היחסי של כלי הדם המועשר בתאי סטרומה החיסונית. כתוצאה מכך, אנו מראים כיצד מקרופאגים נוגדני התווית ולימפוציטים מסוג T וכיצד כראוי שער עליהם בניסויי cytometry זרימה. חלקות זרימת cytometry נציג מעכברים שמנים שאוכלים שומן רזים וגבוהים בשומן האכילו נמוכים מסופקות. אלמנט קריטי של ניתוח זה הוא השימוש בנוגדנים שעושיםלא לזרוח בערוצים שבו במקרופאגים הם autofluorescent אופן טבעי, כמו גם שימוש בפקדי פיצוי הולם.

עיכול collagenase של AT אחריו צנטריפוגה ההפרש שימש לבודד את SVF מרפידות שומן epididymal של עכברים ממין זכר C57BL/6J האכיל שומן נמוך (10% מקלוריות שומן) או שומן גבוה (60% קלוריות משומנים) דיאטה (LFD וHFD , בהתאמה) במשך 16 שבועות. תאים של SVF אז תויגו עם נוגדנים ראשוניים fluorophore-מצומדות לכמת את שיעור...

Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Adipose Tissue Immune Cells at JoVE.com

Isolation of Adipose Tissue Immune Cells

רקמת שומן (AT) היא אתר של הפעלת תא חיסונית חזקה ואינטראקציה. כמעט בכל התאים של המערכת החיסונית נמצאים בAT ויחסים שלהם שונו על ידי השמנת יתר. בידוד נכון, כימות, ואפיון של אוכלוסיות בתא חיסון הם קריטיים להבנת תפקידם במחלה immunometabolic.

בידוד של תאים חיסוני רקמת שומן

The discovery of increased macrophage infiltration in  the adipose tissue (AT) of obese rodents and humans has led to an  intensification of interest in ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Measuring Calpain Activity in Fixed and Living Cells by Flow Cytometry

מדידת פעילות Calpain בתוך תאים חיים קבוע על ידי זרימת cytometry

Calpains are ubiquitous intracellular, calcium-sensitive, neutral cysteine proteases 1. Calpains play crucial roles in many physiological processes, ...

Quantitative Assessment of Immune Cells in the Injured Spinal Cord Tissue by Flow Cytometry:  a Novel Use for a Cell Purification Method

הערכה כמותית של תאים חיסוניים רקמות חוט השדרה נפגע על ידי זרימת cytometry: השתמש חדשנית שיטת טיהור Cell

Detection of immune cells in the injured central nervous system (CNS) using morphological or histological techniques has not always provided true ...

Seven Steps to Stellate Cells

שבעה צעדים Stellate תאים

Hepatic stellate cells are liver-resident  cells of star-like morphology and are located in the space of Disse between  liver sinusoidal endothelial cells ...

Flow Cytometry Analysis of Immune Cells Within Murine Aortas

ניתוח תזרים cytometry של תאים חיסוניים בתוך Aortas Murine

Atherosclerosis is a chronic inflammatory process of medium and large size vessels that is characterized by the formation of plaques consisting of foam ...

Isolation of Functional Cardiac Immune Cells

בידוד של תאים חיסוניים פונקציונלית לב

Cardiac immune cells are gaining interest for the roles they play in the pathological remodeling in many cardiac diseases.1-5  These immune cells, which ...

Intravital Imaging of the Mouse Thymus using 2-Photon Microscopy

הדמיה Intravital של קורנית עכבר באמצעות 2-פוטון מיקרוסקופית

Two-photon Microscopy (TPM) provides image acquisition in deep areas inside tissues and organs. In combination with the development of new stereotactic ...

Flow Cytometric Isolation of Primary Murine Type II Alveolar Epithelial Cells for Functional and Molecular Studies

בידוד Cytometric זרימה של תאים ראשוניים Murine Type II alveolar אפיתל ללימודים פונקציונליים ומולקולריים

Throughout  the last years, the contribution of alveolar type II epithelial cells (AECII)  to various aspects of immune regulation in the lung has been ...

Isolation and Flow Cytometric Analysis of Immune Cells from the Ischemic Mouse Brain

בידוד תזרים Cytometric ניתוח של תאים חיסוניים ממוח עכבר איסכמי

Ischemic stroke initiates a robust inflammatory response that starts in the intravascular compartment and involves rapid activation of brain resident ...

Isolation, Characterization and Functional Examination of the Gingival Immune Cell Network

בידוד, אפיון בחינה פונקציונלית של הרשת הסלולרית חניכיימיים החיסון

Immune cell networks in tissues play a vital role in mediating local immunity and maintaining tissue homeostasis, yet little is known of the resident ...

Reliable and High Efficiency Extraction of Kidney Immune Cells

הפקת יעילות אמינה גבוהה של תאים מכליות חיסון

Immune system activation occurs in multiple kidney diseases and pathophysiological processes.  The immune system consists of both adaptive and innate ...