Name: isolation of adipose tissue immune cells
Uploaded: 2013-05-22T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Adipose Tissue Immune Cells at JoVE.com

JSO bir NIH Ruth L. Kirschstein NRSA (F32 DK091040) tarafından desteklenen, AK Amerikan Diyabet Derneği (7-10-MI-05) bir Doktora Sonrası Araştırma Bursu tarafından desteklenen ve AHH bir Amerikan Kalp Derneği Kurulmuş Araştırmacı Ödülü tarafından desteklenmektedir (12EIA8270000). Akış sistometri deneyleri VMC Sitometrisi paylaşılan kaynak yapılmıştır. VMC Sitometrisi Paylaşılan Kaynak Vanderbilt Sindirim Hastalıkları Araştırma Merkezi (DK058404) tarafından desteklenmektedir.

1. Reaktifler ve Malzemeleri Bundan önce deneysel protokol başlamadan, aşağıdaki reaktifler hazırlamak: <ol><li> % 70 etanol </li><li> 1X PBS </li><li> 1X DPBS (Ca ve Mg olmadan),% 0.5 BSA ile takviye edilmiş </li><li> FACS tamponu: 1X DPBS (Ca ve Mg), 2 mM EDTA,% 1 FCS </li><li> ACK tamponu: 150 mM NH4CI, 10 mM KHCO 3 ve su içinde 0.1 mM EDTA Na2 </li></ol> 2. Yağ Doku Hasat ve Hazırlık <ol><li> Her kurumun özel IACUC ...

<ol>
	<li>Rodbell, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolism+of+Isolated+Fat+Cells.+I.+Effects+of+Hormones+on+Glucose+Metabolism+and+Lipolysis.">Metabolism of Isolated Fat Cells. I. Effects of Hormones on Glucose Metabolism and Lipolysis.</a> The Journal of Biological Chemistry. 239, 375-380 (1964).</li><li>Danse, L. H., Verschuren, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fish+oil-induced+yellow+fat+disease+in+rats.+III.+Lipolysis+in+affected+adipose+tissue.">Fish oil-induced yellow fat disease in rats. III. Lipolysis in affected adipose tissue.</a> Veterinary Pathology. 15, 544-548 (1978).</li><li>Weisberg, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Obesity+is+associated+with+macrophage+accumulation+in+adipose+tissue.">Obesity is associated with macrophage accumulation in adipose tissue.</a> The Journal of Clinical Investigation. 112, 1796-1808 (2003).</li><li>Xu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+inflammation+in+fat+plays+a+crucial+role+in+the+development+of+obesity-related+insulin+resistance.">Chronic inflammation in fat plays a crucial role in the development of obesity-related insulin resistance.</a> The Journal of Clinical Investigation. 112, 1821-1830 (2003).</li><li>Mathis, D., Shoelson, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunometabolism:+an+emerging+frontier.">Immunometabolism: an emerging frontier.</a> Nature Reviews. Immunology. 11, 81 (2011).</li><li>Stefanovic-Racic, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+cells+promote+macrophage+infiltration+and+comprise+a+substantial+proportion+of+obesity-associated+increases+in+CD11c++cells+in+adipose+tissue+and+liver.">Dendritic cells promote macrophage infiltration and comprise a substantial proportion of obesity-associated increases in CD11c+ cells in adipose tissue and liver.</a> Diabetes. 61, 2330-2339 (2012).</li><li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+deficiency+and+pharmacological+stabilization+of+mast+cells+reduce+diet-induced+obesity+and+diabetes+in+mice.">Genetic deficiency and pharmacological stabilization of mast cells reduce diet-induced obesity and diabetes in mice.</a> Nature Medicine. 15, 940-945 (2009).</li><li>Feuerer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lean,+but+not+obese,+fat+is+enriched+for+a+unique+population+of+regulatory+T+cells+that+affect+metabolic+parameters.">Lean, but not obese, fat is enriched for a unique population of regulatory T cells that affect metabolic parameters.</a> Nature Medicine. 15, 930-939 (2009).</li><li>Nishimura, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD8++effector+T+cells+contribute+to+macrophage+recruitment+and+adipose+tissue+inflammation+in+obesity.">CD8+ effector T cells contribute to macrophage recruitment and adipose tissue inflammation in obesity.</a> Nature Medicine. 15, 914-920 (2009).</li><li>Winer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normalization+of+obesity-associated+insulin+resistance+through+immunotherapy.">Normalization of obesity-associated insulin resistance through immunotherapy.</a> Nature Medicine. 15, 921-929 (2009).</li><li>Winer, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=B+cells+promote+insulin+resistance+through+modulation+of+T+cells+and+production+of+pathogenic+IgG+antibodies.">B cells promote insulin resistance through modulation of T cells and production of pathogenic IgG antibodies.</a> Nature Medicine. 17, 610-617 (2011).</li><li>Wu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+invariant+natural+killer+T+cells+by+lipid+excess+promotes+tissue+inflammation,+insulin+resistance,+and+hepatic+steatosis+in+obese+mice.">Activation of invariant natural killer T cells by lipid excess promotes tissue inflammation, insulin resistance, and hepatic steatosis in obese mice.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 109. , 1143-1152 (2012).</li><li>Wu, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Eosinophils+sustain+adipose+alternatively+activated+macrophages+associated+with+glucose+homeostasis.">Eosinophils sustain adipose alternatively activated macrophages associated with glucose homeostasis.</a> Science. 332, 243-247 (2011).</li><li>Elgazar-Carmon, V., Rudich, A., Hadad, N., Levy, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophils+transiently+infiltrate+intra-abdominal+fat+early+in+the+course+of+high-fat+feeding.">Neutrophils transiently infiltrate intra-abdominal fat early in the course of high-fat feeding.</a> Journal of Lipid Research. 49, 1894-1903 (2008).</li><li>Talukdar, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophils+mediate+insulin+resistance+in+mice+fed+a+high-fat+diet+through+secreted+elastase.">Neutrophils mediate insulin resistance in mice fed a high-fat diet through secreted elastase.</a> Nature Medicine. 18, 1407-1412 (2012).</li><li>Hagman, D. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterizing+and+quantifying+leukocyte+populations+in+human+adipose+tissue:+impact+of+enzymatic+tissue+processing.">Characterizing and quantifying leukocyte populations in human adipose tissue: impact of enzymatic tissue processing.</a> Journal of Immunological Methods. 386, 50-59 (2012).</li><li>Basu, S., Campbell, H. M., Dittel, B. N., Ray, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purification+of+specific+cell+population+by+fluorescence+activated+cell+sorting+(FACS).">Purification of specific cell population by fluorescence activated cell sorting (FACS).</a> J. Vis. Exp. (41), e1546 (2010).</li><li>Kotecha, N., Krutzik, P. O., Irish, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Web-based+analysis+and+publication+of+flow+cytometry+experiments.">Web-based analysis and publication of flow cytometry experiments.</a> Current Protocols in Cytometry. Chapter 10, Unit 10 (2010).</li><li>Cho, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiogenic+role+of+LYVE-1-positive+macrophages+in+adipose+tissue.">Angiogenic role of LYVE-1-positive macrophages in adipose tissue.</a> Circulation Research. 100, e47-e57 (2007).</li><li>Roederer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spectral+compensation+for+flow+cytometry:+visualization+artifacts,+limitations,+and+caveats.">Spectral compensation for flow cytometry: visualization artifacts, limitations, and caveats.</a> Cytometry. 45, 194-205 (2001).</li></ol>

Obezite metabolik sonuçlara bağışıklık sisteminin rolü artan ilgi AT bağışıklık hücreleri karakterize etmek için flow sitometri yaygın kullanımı yol açmıştır. Tam protokolü kendi deneyim ve ekipmanları mevcut dayalı laboratuarlar arasında farklılık olsa da, kritik adımlar kollajenaz sindirim, diferansiyel santrifüj, ve hücre yüzey antijeni etiketleme içerir. Bu makalenin amacı AT ve / veya akım sitometri performans ile çalışan sınırlı deneyimi ile araştırmacılara SVF AT ve izol...

Tarihsel olarak, yağ dokusu (AT) enerji dengesi yanıt olarak genişler ve sözleşmeleri lipid depo, bir asal organı olarak incelendi. Şimdi AT aktif doğrudan beslenme davranışları ve sistemik glikoz dengesini etkileyen hormonlar, bir dizi salgılar dinamik bir endokrin organı temsil anlıyorum. Buna ek olarak, son on yıl içinde stromal vasküler fraksiyonu (SVF) yanı sıra, homeostasis katkıları için AT ikamet eden bağışıklık hücrelerinin çok sayıda nüfus için artan bir takdir olmuştur. Ilk olarak 1964 1&#39;de Rodbell tarafından tanımlanmıştır adiposit ve SVF bir kollajenaz sindirimi kullanma yeteneği ayrı ve ardından diferansiyel santri. Kollajenaz II genellikle adiposit insülin reseptörlerinin 1 bakım nedeniyle adiposit ve SVF ayrılması için kullanılır. AT erken, enzimatik fraksiyon öncelikle adipo çalışma istihdam edildimetabolizması Eritrosit ve preadipositlerden izole etmek. Daha yakın zamanlarda, akış sitometrelerinde yaygın olarak kullanılması ve ticari fluorofor-konjuge antikor giderek artan sayıda ile birlikte bu teknik, bağışıklık hücrelerinin AT karakterizasyonu kolaylaştırmıştır. AT iltihaplı bağışıklık hücrelerinin varlığı daha önce 2 tarif edilmiş olmasına rağmen, Weisberg ve arkadaşlarının seminal kağıtları. Xu ve ark. yayınlanan 2003 yılında inflamatuvar sitokinler salgılarlar ve AT-özel ve sistemik insülin direnci 3,4 ile ilişkili obezitede makrofajlar AT birikimi (ATM), belgelemek için ilk idi. Bu gözlemler soruşturma yeni bir alan temelinde son zamanlarda, &quot;immunometabolism,&quot; 5 icat olarak görev yaptı ve dendritik hücreler 6, mast hücreleri 7, T hücreleri 8 dahil olmak üzere çeşitli bağışıklık hücre popülasyonlarının, karıştığı çalışmalarla takip edilmiştir -10, 11 B hücreleri, NKT hücreleri, 12, 13 eozinofiller ve nötrofiller obezite ilişkili insülin direncinin geliştirilmesinde 14,15. Bu makalenin amacı SVF AT hücreleri izole etmek ve ATM karakterize ve akış sitometri ile T hücreleri AT için kullanılan kollajenaz özeti tekniğin ayrıntılı bir açıklama sunmaktır. Bu protokol AT fare için optimize edilmiştir, ancak, izleyiciler 16 AT insan için bu tekniğin optimizasyonu hakkında geniş detay veren mükemmel bir makale okuyarak yararlanabilir. Bu makalenin hedef kitlesi sınırlı deneyimi AT fare ile çalışan ve akım sitometri performans ile araştırmacılar içerir. Zaman ve kaynak ile hücresel verim ve canlılığı dengelemek için birkaç pratik hususlar bağışıklık hücre popülasyonlarının AT tanımlamak için de en uygun akım sitometri kontrol grubu olarak sunulmaktadır. Protokolde ek olarak, okuyucu referr vardıruygun kontrolleri ve tazminatlar 17 dahil etmek akım sitometri teknik yönlerini bazı mükemmel bir tartışma için Basu ve ark. tarafından yapılan son vallahi makaleye ed.

<table border="1">
 <tbody>
 <tr>
 <td>Name</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalog #</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>DPBS (no Ca or Mg) 10 x 500 ml</td>
 <td>Life Technologies</td>
 <td>14190-250</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>DAPI</td>
 <td>Life Technologies</td>
 <td>D3571</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>BSA</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>A2153-100G</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>collagenase</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>C6885-5G</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>propidium iodide solution</td>
 <td>Sigma</td>
 <td>P4864-10 ml</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>stable stack 20 microliter</td>
 <td>Rainin</td>
 <td>SS-L10</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>20 microliter filter tips</td>
 <td>Rainin</td>
 <td>SRL10F</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>stable stack 250 microliter tips</td>
 <td>Rainin</td>
 <td>SS-L250</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1000 microliter tips</td>
 <td>Rainin</td>
 <td>GPS-L1000</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>1000 microliter filter tips</td>
 <td>Rainin</td>
 <td>GP-L1000F</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>250 microliter Filter Tips</td>
 <td>Rainin</td>
 <td>SR-L200F</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>FC Block</td>
 <td>BD Biosciences</td>
 <td>553142</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>fisher 100mn strainers</td>
 <td>Fisherbrand</td>
 <td>22-363-549</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>medium weigh dish</td>
 <td>Fisherbrand</td>
 <td>02-202B</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>aluminum foil</td>
 <td>Fisherbrand</td>
 <td>1213100</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>mincing scissors</td>
 <td>Fisherbrand</td>
 <td>089531B</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Vortex</td>
 <td>Fisherbrand</td>
 <td>2215365</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>50 ml conical tubes</td>
 <td>BD Falcon</td>
 <td>14-959-49A</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>filter top FACS tubes</td>
 <td>BD Falcon</td>
 <td>352235</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>10 ml pipette case 200</td>
 <td>BD Falcon</td>
 <td>1367520</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>round bottom tubes</td>
 <td>BD Falcon</td>
 <td>352058</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>5 ml syringe</td>
 <td>BD Falcon</td>
 <td>309646</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>V Bottom Plates</td>
 <td>Costar</td>
 <td>07-200-107</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>transfer bulb pipette</td>
 <td>Thermo Scientific</td>
 <td>13-711-22</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Shaker</td>
 <td>Thermo Scientific</td>
 <td>11 676 071</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Adhesive mat</td>
 <td>Thermo Scientific</td>
 <td>1368750</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Cell Culture Centrifuge</td>
 <td>Sorvall</td>
 <td>75253839</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Adapters</td>
 <td>Sorvall</td>
 <td>75003723</td>
 <td></td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Rat anti-mouse CD16/CD32</td>
 <td>BD Biosciences</td>
 <td>553142</td>
 <td>Concentration: 0.5 - 1 &mu;g/ 106 cells</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Rat anti-mouse F4/80</td>
 <td>eBioscience</td>
 <td>17-4801</td>
 <td>Fluorophore conjugate: APC 
 Concentration: 0.2 &mu;g/ 106 cells 
 Isotype control catalog number: 17-4321</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Rat anti-mouse CD11b</td>
 <td>eBioscience</td>
 <td>11-0112</td>
 <td>Fluorophore conjugate: FITC 
 Concentration: 0.5 &mu;g/ 106 cells 
 Isotype control catalog number: 11/1/4031</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Armenian Hamster anti-mouse CD11c</td>
 <td>eBioscience</td>
 <td>12-0114</td>
 <td>Fluorophore conjugate: PE 
 Concentration: 0.8 &mu;g/ 106 cells 
 Isotype control catalog number: Dec-88</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Goat anti-mouse MGL1/2</td>
 <td>R&amp;D Systems</td>
 <td>FAB4297P</td>
 <td>Fluorophore conjugate: PE 
 Concentration: 0.1 &mu;g/ 106 cells 
 Isotype control catalog number: IC108P</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Goat anti-mouse CD206</td>
 <td>R&amp;D Systems</td>
 <td>FAB2535P</td>
 <td>Fluorophore conjugate: PE 
 Concentration: 0.1 &mu;g/ 106 cells 
 Isotype control catalog number: IC108P</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Rat anti-mouse CCR2</td>
 <td>R&amp;D Systems</td>
 <td>FAB5538P</td>
 <td>Fluorophore conjugate: PE 
 Concentration: 0.1 &mu;g/ 106 cells 
 Isotype control catalog number: IC013P</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Armenian Hamster anti-mouse TCR&beta;</td>
 <td>BD Biosciences</td>
 <td>553174</td>
 <td>Fluorophore conjugate: APC 
 Concentration: 0.2 &mu;g/ 106 cells 
 Isotype control catalog number: 553956</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Rat anti-mouse CD8a</td>
 <td>BD Biosciences</td>
 <td>552877</td>
 <td>Fluorophore conjugate: PE-Cy7 
 Concentration: 0.8 &mu;g/ 106 cells 
 Isotype control catalog number: 552784</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Rat anti-mouse CD4</td>
 <td>BD Biosciences</td>
 <td>557956</td>
 <td>Fluorophore conjugate: Alexa Fluor 700 
 Concentration: 0.2 &mu;g/ 106 cells 
 Isotype control catalog number: 557963</td>
 </tr>
 </tbody>
</table>
Table 1. List of Materials and Reagents.

isolation of adipose tissue immune cells

Obez kemirgenler ve insanların yağ dokusunda artış makrofaj infiltrasyonu (AT) keşfinden lokal ve sistemik insülin direnci ile bağışıklık hücre katkı ilgi yoğunlaşmasına yol açmıştır. Yalın ve obez AT farklı bağışıklık hücre popülasyonlarının izolasyonu ve miktar şimdi immunometabolism laboratuvarlarda yaygın olarak kullanılan bir tekniktir; henüz çok dikkatli elde edilen verilerin güvenilir ve yorumlanabilir bir şekilde stromal vasküler hücre izolasyonu ve akım sitometri analizi hem alınmalıdır . Bu videoda, kıyma sindirmek ve bağışıklık hücre ile zenginleştirilmiş stromal vasküler kısmını izole nasıl gösterilmektedir. Daha sonra, biz antikor etiket makrofajlar ve T lenfositler ve nasıl akım sitometri deneylerde onlara doğru kapı için nasıl gösterir. Az yağlı beslenen yalın ve yüksek yağ ile beslenen obez fareler Temsilcisi akım sitometri araziler sağlanmaktadır. Bu analizin önemli bir unsuru, mutlaka antikorların kullanımımakrofajlar AT doğal autofluorescent kanallar, hem de uygun tazminat kontrollerin kullanımı floresan değil.

Diferansiyel santrifüj takip AT kollajenaz sindirim az yağlı (yağ% 10 kcal) veya yüksek yağ (yağ% 60 kcal) diyet (LFD ve YYD beslenen erkek C57BL/6J farelerin epididim yağ yastıkları gelen SVF izole etmek için kullanıldı sırasıyla) 16 hafta boyunca. SVF hücreleri, daha sonra FACS analizi ile uygun bir ATM (Şekil 1) ve T-hücreleri (Şekil 2) oranını ölçmek için bir fluorofor konjuge primer antikorlar ile işaretlenmiştir. Işık yayılımı, çift ayrımcılık ve...

Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Adipose Tissue Immune Cells at JoVE.com

Isolation of Adipose Tissue Immune Cells

Yağ dokusu (AT) yoğun bağışıklık hücre aktivasyonu ve etkileşim bir sitedir. Bağışıklık sisteminin hemen hemen tüm hücreleri AT mevcut olan oranını obezite etkilenir. Bağışıklık hücre popülasyonlarının AT uygun izolasyon, miktar ve karakterizasyonu immunometabolic hastalık rolleri anlamak için önemlidir.

Yağ Doku Bağışıklık Hücre İzolasyonu

The discovery of increased macrophage infiltration in  the adipose tissue (AT) of obese rodents and humans has led to an  intensification of interest in ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Measuring Calpain Activity in Fixed and Living Cells by Flow Cytometry

Sabit ve Yaşam Hücreler Sitometrisi ile Calpain Aktivitesi Ölçme

Calpains are ubiquitous intracellular, calcium-sensitive, neutral cysteine proteases 1. Calpains play crucial roles in many physiological processes, ...

Quantitative Assessment of Immune Cells in the Injured Spinal Cord Tissue by Flow Cytometry:  a Novel Use for a Cell Purification Method

Akış Sitometri Yaralı Omurilik Doku Bağışıklık Hücreleri Kantitatif Değerlendirilmesi: Hücre Arıtma Yöntemi Roman kullanın

Detection of immune cells in the injured central nervous system (CNS) using morphological or histological techniques has not always provided true ...

Seven Steps to Stellate Cells

Hücreler stellat Yedi Adımda

Hepatic stellate cells are liver-resident  cells of star-like morphology and are located in the space of Disse between  liver sinusoidal endothelial cells ...

Flow Cytometry Analysis of Immune Cells Within Murine Aortas

Bağışıklık Hücreleri murin aorta içinde Sitometrisi Analizi

Atherosclerosis is a chronic inflammatory process of medium and large size vessels that is characterized by the formation of plaques consisting of foam ...

Isolation of Functional Cardiac Immune Cells

Fonksiyonel Kardiyak Bağışıklık Hücreleri İzolasyon

Cardiac immune cells are gaining interest for the roles they play in the pathological remodeling in many cardiac diseases.1-5  These immune cells, which ...

Intravital Imaging of the Mouse Thymus using 2-Photon Microscopy

2-Foton Mikroskopi kullanarak Fare Thymus intravital Görüntüleme

Two-photon Microscopy (TPM) provides image acquisition in deep areas inside tissues and organs. In combination with the development of new stereotactic ...

Flow Cytometric Isolation of Primary Murine Type II Alveolar Epithelial Cells for Functional and Molecular Studies

Fonksiyonel ve Moleküler Çalışmalar Birincil murin Tip II alveol epitel hücrelerinde akım sitometri İzolasyonu

Throughout  the last years, the contribution of alveolar type II epithelial cells (AECII)  to various aspects of immune regulation in the lung has been ...

Isolation and Flow Cytometric Analysis of Immune Cells from the Ischemic Mouse Brain

İskemik Fare Beyin gelen Bağışıklık Hücreleri İzolasyon ve Akım Sitometrisi Analizi

Ischemic stroke initiates a robust inflammatory response that starts in the intravascular compartment and involves rapid activation of brain resident ...

Isolation, Characterization and Functional Examination of the Gingival Immune Cell Network

İzolasyon, Karakterizasyonu ve Dişeti Bağışıklık Hücre Ağı Fonksiyonel Sınav

Immune cell networks in tissues play a vital role in mediating local immunity and maintaining tissue homeostasis, yet little is known of the resident ...

Reliable and High Efficiency Extraction of Kidney Immune Cells

Böbrek Bağışıklık Hücreleri Güvenilir ve Yüksek Verimlilik Ekstraksiyon

Immune system activation occurs in multiple kidney diseases and pathophysiological processes.  The immune system consists of both adaptive and innate ...