Name: microrna in situ hybridization for formalin fixed kidney tissues
Uploaded: 2013-11-30T19:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about MicroRNA In situ Hybridization for Formalin Fixed Kidney Tissues at JoVE.com

وأيد هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية الأميركية للصحة منح HL082798 HL111580 و.

1. أقسام الكلى الأنسجة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم قطع الثابتة الفورمالين (10٪) أقسام الكلى جزءا لا يتجزأ من البارافين على شرائح المجهر في سمك 5 ملم باستخدام ميكرومولار HM 355 S. ويمكن تخزين الشرائح لعدة أشهر قبل التحليل. </li></ol><p class="jove_title" style=";text-ali...

<ol>
	<li>Nagalakshmi, V. K., Ren, Q., Pugh, M. M., Valerius, M. T., McMahon, A. P., Yu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dicer+regulates+thedevelopment+of+nephrogenic+and+ureteric+compartments+in+the+mammalian+kidney.">Dicer regulates thedevelopment of nephrogenic and ureteric compartments in the mammalian kidney.</a> Kidney Int. 79 (3), 317-330 (2011).</li><li>Ho, J., Pandey, P., Schatton, T., Sims-Lucas, S., Khalid, M., Frank, M. H., Hartwig, S., Kreidberg, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pro-apoptotic+protein+Bim+is+a+MicroRNA+target+in+kidney+progenitors.">The pro-apoptotic protein Bim is a MicroRNA target in kidney progenitors.</a> J. Am. Soc. Neph. 22 (6), 1053-1063 (2011).</li><li>Tian, Z., Greene, A. S., Pietrusz, J. L., Matus, I. R., Liang, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNA-target+pairs+in+the+rat+kidney+identified+by+microRNA+microarray,+proteomic,+and+bioinformaticanalysis.">MicroRNA-target pairs in the rat kidney identified by microRNA microarray, proteomic, and bioinformaticanalysis.</a> Genome Res. 18 (3), 404-411 (2008).</li><li>Mladinov, D., Liu, Y., Mattson, D. L., Liang, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNAs+contribute+to+the+maintenance+of+cell-type-specific+physiological+characteristics:+miR-192+targets+Na+/K+-ATPase+&#946;1.">MicroRNAs contribute to the maintenance of cell-type-specific physiological characteristics: miR-192 targets Na+/K+-ATPase &#946;1.</a> Nucleic Acids Res. 41 (2), 1273-1283 (2013).</li><li>Liu, Y., Taylor, N. E., Lu, L., Usa, K., Cowley, A. W., Ferreri, N. R., Yeo, N. C., Liang, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+medullary+microRNAs+in+Dahl+salt-sensitive+rats:+miR-29b+regulates+several+collagens+and+related+genes.">Renal medullary microRNAs in Dahl salt-sensitive rats: miR-29b regulates several collagens and related genes.</a> Hypertension. 55 (4), 974-982 (2010).</li><li>Kato, M., Zhang, J., Wang, M., Lanting, L., Yuan, H., Rossi, J. J., Natarajan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNA-192+in+diabetic+kidney+glomeruliand+its+function+in+TGF-b-induced+collagen+expression+via+inhibition+of+E-box+repressors.">MicroRNA-192 in diabetic kidney glomeruliand its function in TGF-b-induced collagen expression via inhibition of E-box repressors.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 104 (4), 3432-3437 (2007).</li><li>Krupa, A., Jenkins, R., Luo, D. D., Lewis, A., Phillips, A., Fraser, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loss+of+microRNA-192+promotes+fibrogenesis+in+diabetic+nephropathy.">Loss of microRNA-192 promotes fibrogenesis in diabetic nephropathy.</a> J. Am. Soc. Neph. 21 (3), 438-447 (2010).</li><li>Wang, B., Herman-Edelstein, M., Koh, P., Burns, W., Jandeleit-Dahm, K., Watson, A., Saleem, M., Goodall, G. J., Twigg, S. M., Cooper, M. E., Kantharidis, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=E-cadherin+expression+is+regulated+by+miR-192/215+by+a+mechanism+that+is+independent+of+the+profibrotic+effects+of+transforming+growth+factor-&#946;.">E-cadherin expression is regulated by miR-192/215 by a mechanism that is independent of the profibrotic effects of transforming growth factor-&#946;.</a> Diabetes. 59 (7), 1794-1802 (2010).</li><li>Kato, M., Arce, L., Wang, M., Putta, S., Lanting, L., Natarajan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+microRNA+circuit+mediates+transforming+growth+factor-&#946;1+autoregulation+in+renal+glomerular+mesangial+cells.">A microRNA circuit mediates transforming growth factor-&#946;1 autoregulation in renal glomerular mesangial cells.</a> Kidney Int. 80 (4), 358-368 (2011).</li><li>Gottardo, F., Liu, C. G., Ferracin, M., Calin, G. A., Fassan, M., Bassi, P., Sevignani, C., Byrne, D., Negrini, M., Pagano, F., Gomella, L. G., Croce, C. M., Baffa, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micro-RNA+profiling+in+kidney+and+bladder+cancers.">Micro-RNA profiling in kidney and bladder cancers.</a> Urol. Oncol. 25 (5), 387-392 (2007).</li><li>Juan, D., Alexe, G., Antes, T., Liu, H., Madabhushi, A., Delisi, C., Ganesan, S., Bhanot, G., Liou, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+a+microRNA+panel+for+clear-cell+kidney+cancer.">Identification of a microRNA panel for clear-cell kidney cancer.</a> Urol. 75 (4), 835-841 (2010).</li><li>Xu, X., Kriegel, A. J., Liu, Y., Usa, K., Mladinov, D., Liu, H., Fang, Y., Ding, X., Liang, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+ischemic+preconditioning+contributes+to+renal+protection+by+upregulation+of+miR-21.">Delayed ischemic preconditioning contributes to renal protection by upregulation of miR-21.</a> Kidney Int. 82 (11), 1167-1175 (2012).</li><li>Kriegel, A. J., Mladinov, D., Liang, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+study+of+microRNAs+and+its+application+in+kidney+disease+and+hypertension.">Translational study of microRNAs and its application in kidney disease and hypertension.</a> 122 (10), 439-447 (2012).</li><li>Kloosterman, W. P., Wienholds, E., de Bruijn, E., Kauppinen, S., Plasterk, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+situ+detection+of+miRNAs+in+animal+embryos+using+LNA-moidified+oligonucleotide+probes.">In situ detection of miRNAs in animal embryos using LNA-moidified oligonucleotide probes.</a> Nat. Methods. 3 (1), 27-29 (2006).</li><li>Nelson, P. T., Baldwin, D. A., Kloosterman, W. P., Kauppinen, S., Plasterk, R. H., Mourelatos, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RAKE+and+LNA-ISH+reveal+microRNA+expression+and+localization+in+archival+human+brain+tissue.">RAKE and LNA-ISH reveal microRNA expression and localization in archival human brain tissue.</a> RNA. 12 (2), 187-191 (2006).</li><li>Obernosterer, G., Martinez, J., Alenius, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Locked+nucleic+acid-based+in+situ+detection+of+microRNAs+in+mouse+tissue+sections.">Locked nucleic acid-based in situ detection of microRNAs in mouse tissue sections.</a> Nat. Protocols. 2 (6), 1508-1514 (2007).</li><li>Kriegel, A. J., Liu, Y., Cohen, B., Usa, K., Liu, Y., Liang, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MiR-382+targeting+of+kallikrein+5+contributes+to+renal+inner+medullary+interstitial+fibrosis.">MiR-382 targeting of kallikrein 5 contributes to renal inner medullary interstitial fibrosis.</a> Physiol. Genomics. 44 (4), 259-267 (2012).</li></ol>

كان الهدف من هذه المقالة لوصف بروتوكول لميرنا التهجين في الموقع الذي يعمل بشكل جيد في أنسجة الكلى الفورمالين الثابتة. بينما كان يعمل خارج هذا البروتوكول وقد تم تحديد العديد من المصادر المهمة للقطعة أثرية تلطيخ. يمكن الاهتمام الدقيق لهذه النقاط تساعد على تجنب تل...

الرنا الميكروي صغيرة (حوالي 22 النيوكليوتيدات طويلة) غير المكودة الرنا التي يتم إنتاجها التطور الطبيعي. أنها تعمل عادة لقمع بروتين تعبير من خلال القمع متعدية أو تدهور مرنا. miRNAs ربط لأهداف مرنا مع التكامل غير مكتملة، مما يجعل من الممكن لميرنا واحدة لقمع أهداف متعددة. فهم أي نوع من أنواع الخلايا والهياكل التعبير miRNAs هو جزء مهم من فهم الآليات التي من خلالها تغيرات في الخلية ميرنا التعبير وتأثير الظواهر الأنسجة. حين طرق مثل ميرنا التسلسل، QPCR والنشاف الشمالية يمكن استخدامها للكشف لل miRNAs في الأنسجة كله، لا يسمح هذا النهج واحد لتحديد أي نوع من الخلايا المحددة التي جاءت من داخل نسيج معين. تشريح المكونات الخلوية والهيكلية قبل التحليل باستخدام هذه الأساليب يمكن أن يكون صعبا للغاية والظروف اللازمة لتحقيق العزلة الكافية يمكن أن تؤدي إلى alterations في التعبير الجيني أو تدهور الرنا. الرنا الميكروي في الموقع التهجين هي الطريقة المستخدمة لتصور موقع الرنا الميكروي ومستويات التعبير في الأنسجة. هذا الأسلوب هو قيمة خاصة في الأنسجة تتكون من هياكل غير المتجانسة، مثل الكلى. وقد ثبت MicroRNAs للعب دور تنظيمي في 2،3 التنمية الكلى ووظائف الأعضاء 4. كما تبين التعديلات التعبير microRNA أن تشارك مع أمراض الكلى مثل التليف 5-10، اعتلال الكلية السكري 7، سرطان الكلى 11،12، وإصابة الكلى الحاد 13. في بحثنا، وجدنا أن تحسين الرنا الميكروي الموقع التهجين للأنسجة الكلى في كان قيمة لتحديد المواقع الهيكلية الدقيق ميرنا التعبير في كل من الصحة والمرض 14. تحديد التعبير أنبوبي والخلوية من microRNAs مختلفة أمر مهم لأن تنظيمها من تاقد يكون rgets تعتمد على الوظائف الخلوية. في الدول المريضة من المهم أيضا لتحديد كيفية إحداث تغييرات في التعبير ميرنا قد تؤثر على وظيفة. وكان الهدف من الطريقة الموصوفة هنا للبناء على منهجيات ISH القائمة التي وضعتها Kloosterman آخرون 15، 16،17 المحققين الآخرين، وتلك التي اقترحتها Exiqon 1 و تحسين طريقة لأنسجة الكلى الفورمالين الثابتة. وقد استخدمنا بنجاح هذا الأسلوب لتحديد الاختلافات الإقليمية المتميزة في الكلى التعبير الرنا الميكروي مير-382 مع جانب واحد انسداد الحالب 18. ويمكن استخدام هذا النهج مع الأنسجة الأخرى كذلك، مع التحسين إضافية.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="481">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:195px;">Paraformaldehyde</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:137px;">P6148</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:195px;">PBS</td>
			<td style="width:71px;">Gibco</td>
			<td style="width:137px;">70011044</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:195px;">Diethyl Pyrocarbonate</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:137px;">D5758</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:195px;">Tween-20</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:137px;">P1379</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:195px;">Xylenes</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:137px;">534056</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:195px;">Ethanol</td>
			<td style="width:71px;">Ultra Pure</td>
			<td style="width:137px;">200CSPTP</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:195px;">Tris-HCl</td>
			<td style="width:71px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:137px;">15506-017</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:195px;">CaCl2</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:137px;">C2536</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:195px;">Glycine</td>
			<td style="width:71px;">J.T. Baker</td>
			<td style="width:137px;">4059-00</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:195px;">Citric Acid</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:137px;">C2404</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:195px;">Formamide</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:137px;">F9037</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:195px;">20x SSC Buffer</td>
			<td style="width:71px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:137px;">15557-044</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:195px;">Heparin</td>
			<td style="width:71px;">SAGENT</td>
			<td style="width:137px;">25021-400-30</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:195px;">Yeast RNA</td>
			<td style="width:71px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:137px;">AM7118</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:195px;">MgCl2</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:137px;">M8266-1004</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:195px;">NaCl</td>
			<td style="width:71px;">J.T. Baker</td>
			<td style="width:137px;">4058-01</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:195px;">Proteinase K</td>
			<td style="width:71px;">Fermentas</td>
			<td style="width:137px;">EO0491</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:195px;">3&#8217; DIG- miRNA probe</td>
			<td style="width:71px;">Exiqon</td>
			<td style="width:137px;">miR dependent-05</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:195px;">3&#8217; DIG- Scrambled miR probe</td>
			<td style="width:71px;">Exiqon</td>
			<td style="width:137px;">99004-05</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:195px;">3&#8217; DIG- U6 miR probe</td>
			<td style="width:71px;">Exiqon</td>
			<td style="width:137px;">99002-05</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:195px;">Anti-Digoxigenin-Ab Fab</td>
			<td rowspan="2" style="width:71px;">Roche</td>
			<td rowspan="2" style="width:137px;">11093274910</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:195px;">Fragments</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:195px;">NBT/BCIP</td>
			<td style="width:71px;">Roche</td>
			<td style="width:137px;">11681451001</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:195px;">Permount</td>
			<td style="width:71px;">Fisher</td>
			<td style="width:137px;">SP15-500</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:195px;">Coverslips</td>
			<td style="width:71px;">Fisher</td>
			<td style="width:137px;">Fit to tissue size</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:195px;">Microtom HM 355 S</td>
			<td style="width:71px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:137px;">23-900-672</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:195px;">In-slide Out Hybridization Oven</td>
			<td style="width:71px;">Boekel</td>
			<td style="width:137px;">241000</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:195px;">Aluminum Tray Assembly</td>
			<td style="width:71px;">Boekel</td>
			<td style="width:137px;">C2403973</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:195px;">Stainless Steel Rack Insert</td>
			<td style="width:71px;">Boekel</td>
			<td style="width:137px;">C2403754</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

microrna in situ hybridization for formalin fixed kidney tissues

في هذه المادة ونحن تصف طريقة للكشف اللونية من ميرنا في الكلى من خلال الموقع التهجين مع digoxigenin في المفتاحية تحقيقات الرنا الميكروي. هذا البروتوكول، وضعت أصلا من قبل Kloosterman وزملاؤه للاستخدام واسع النطاق مع تحقيقات Exiqon ميرنا 1، تم تعديل للتغلب على التحديات الكامنة في تحليل ميرنا في أنسجة الكلى. وتشمل هذه القضايا مثل تحديد هيكل والصعب إزالة التحقيق المتبقية والأجسام المضادة. استخدام رقيقة نسبيا، 5 مم، أقسام الأنسجة يسمح لتصور واضح لهياكل الكلى، في حين تم الإبقاء على إشارة قوية التحقيق في الخلايا. بالإضافة إلى ذلك، تم تحسين ظروف الاعتقال والتحقيق الحضانة لتسهيل التصور والتعبير microRNA مع انخفاض الخلفية وإشارة غير محددة. هنا، يتم وصف بروتوكول الأمثل، الذي يغطي مجموعة الأنسجة الأولية وإعداد من خلال تركيب الشرائح في نهاية الإجراء. وcompone الأساسيةاليلة من هذا البروتوكول يمكن تغييرها لتطبيقها على الأنسجة الأخرى ونماذج ثقافة الخلية.

مجالات قسم الأنسجة التي تصبح جفت خلال التهجين، حضانات أو غسل الخطوات عموما في نهاية المطاف أكثر تلطيخ بحزن خلال تطوير NBT / BCIP. الشكل 1 يبين جزء من قسم الكلى الذي تراجع HybriSlip الخروج من حافة الأنسجة، والسماح لها لتصبح المجففة جزئيا. على الرغم الإماهة والتغطية في ...

Watch this Scientific Journal Video about MicroRNA In situ Hybridization for Formalin Fixed Kidney Tissues at JoVE.com

MicroRNA In situ Hybridization for Formalin Fixed Kidney Tissues

توضح هذه المقالة في البروتوكول الموقع التهجين الأمثل للكشف colormetric التعبير الرنا الميكروي في الفورمالين أقسام الكلى ثابتة.

الرنا الميكروي<em&gt; في الوضع الطبيعي</em&gt; التهجين للأنسجة الكلى الفورمالين الثابتة

In this article we describe a method for colorimetric detection of miRNA in the kidney through in situ hybridization with digoxigenin tagged microRNA ...

Research

JoVE Journal

Biology

MicroRNA In situ Hybridization for Formalin Fixed Kidney Tissues

Double Whole Mount in situ Hybridization of Early Chick Embryos

الجامعة جبل مزدوجة في الموقع التهجين لافراخ الدجاج في وقت مبكر

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Fluorescence in situ hybridization (FISH) Protocol in Human Sperm

Fluorescence in situ hybridization FISH Protocol in Human Sperm

مضان في الموقع التهجين (FISH) البروتوكول في الحيوانات المنوية البشرية

Aneuploidies are the most frequent chromosomal abnormalities in humans. Most of these abnormalities result from meiotic errors during the gametogenic ...

In Situ Hybridization for the Precise Localization of Transcripts in Plants

In Situ Hybridization for the Precise Localization of Transcripts in Plants

في الموقع التهجين لتوطين دقيقة من النصوص في النباتات

With the advances in genomics research of the past decade, plant biology has seen numerous studies presenting large-scale quantitative analyses of gene ...

Radioactive in situ Hybridization for Detecting Diverse Gene Expression Patterns in Tissue

Radioactive in situ Hybridization for Detecting Diverse Gene Expression Patterns in Tissue

المشعة في الموقع التهجين، لتحديد متنوعة أنماط التعبير الجيني في الأنسجة

Knowing the timing, level, cellular localization, and cell type that a gene is expressed in contributes to our understanding of the function of the gene. ...

Detection of Viral RNA by Fluorescence in situ Hybridization (FISH)

Detection of Viral RNA by Fluorescence in situ Hybridization FISH

الكشف عن الحمض النووي الريبي الفيروسي بواسطة الإسفار<em&gt; في الموقع</em&gt; التهجين (FISH)

Viruses  that infect cells elicit specific changes to normal cell functions which serve  to divert energy and resources for viral replication. Many ...

Analysis of Single-cell Gene Transcription by RNA Fluorescent In Situ Hybridization (FISH)

Analysis of Single-cell Gene Transcription by RNA Fluorescent In Situ Hybridization FISH

تحليل النسخ الجيني وحيدة الخلية التي كتبها نيون RNA<em&gt; في الموقع</em&gt; التهجين (FISH)

Adhesion of Plasmodium falciparum infected erythrocytes (IE) to human endothelial receptors during malaria infections is mediated by expression of PfEMP1 ...

Chromosome Replicating Timing Combined with Fluorescent In situ Hybridization

Chromosome Replicating Timing Combined with Fluorescent In situ Hybridization

التوقيت كروموسوم النسخ المتماثل جنبا إلى جنب مع نيون<em&gt; في الموقع</em&gt; التهجين

Mammalian DNA replication initiates at multiple sites along chromosomes at different times during S phase, following a temporal replication program. The ...

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

التصور والتحليل من جزيئات الرنا المرسال عن طريق الإسفار<em&gt; في الموضع</em&gt; التهجين في<em&gt; خميرة الخباز</em

The Fluorescence in situ Hybridization (FISH) method allows one to detect nucleic acids in the native cellular environment. Here we provide a protocol for ...

Proteomic Sample Preparation from Formalin Fixed and Paraffin Embedded Tissue

إعداد نموذج البروتين من الفورمالين الثابتة والبارافين جزءا لا يتجزأ من نسيج

Preserved clinical material is a unique source for proteomic investigation of human disorders. Here we describe an optimized protocol allowing large scale ...

qPCR Is a Sensitive and Rapid Method for Detection of Cytomegaloviral DNA in Formalin-fixed, Paraffin-embedded Biopsy Tissue

QPCR هو أسلوب حساس وسريع للكشف عن الحمض النووي من Cytomegaloviral في الفورمالين الثابتة، جزءا لا يتجزأ من البارافين-الأنسجة خزعة

It is crucial to identify cytomegalovirus (CMV) infection in the gastrointestinal (GI) tract of immunosuppressed patients, given their greater risk for ...