Name: using click chemistry to measure the effect of viral infection on host-cell rna synthesis
Uploaded: 2013-08-09T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using Click Chemistry to Measure the Effect of Viral Infection on Host-Cell RNA Synthesis Video at JoVE.com

Biz fare poliklonal anti-RVFV antiserum ve akış sitometri ile yardım için UTMB Sitometrisi Core Tesisi M. Griffin sağlamak için RB Tesh teşekkür ederim. Bu çalışma UTMB.OL de James W. McLaughlin Bursu Fonu desteklenmiştir tarafından desteklenmiştir UTMB.BK de Aşı Geliştirme için Sealy Merkezi&#39;nden Batı Bölgesel Mükemmellik Merkezi, NIH hibe R01 AI08764301 ve finansman ile 5 U54 AI057156 tarafından desteklenmiştir Bir Maurice R. Hilleman Erken-Evre Kariyer Araştırmacı Ödülü.

Floresan mikroskobu ile transkripsiyon analizi 1. MP-12 ve AB ile Etiket Doğan RNA ile hücreler enfekte <ol><li> 12-iyi doku kültürü plakası içine Sıra 12-mm yuvarlak lamelleri, iyi başına bir lamel. </li></ol> Not: hücreleri kuyularda yerleştirmeden önce sorun lamelleri bağlı kalarak, poli-L-lisin (MW ≥ 70.000) ile kat var. Bu amaçla, 5 dakika boyunca poli-L-lisin H2O içinde steril, 0.1 mg / ml çözelti daldırmak lamell...

<ol>
	<li>Fakan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+support+for+RNA+synthesis+in+the+cell+nucleus.">Structural support for RNA synthesis in the cell nucleus.</a> Methods Achiev. Exp. Pathol. 12, 105-140 (1986).</li><li>Jensen, P. O., Larsen, J., Christiansen, J., Larsen, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow+cytometric+measurement+of+RNA+synthesis+using+bromouridine+labelling+and+bromodeoxyuridine+antibodies.">Flow cytometric measurement of RNA synthesis using bromouridine labelling and bromodeoxyuridine antibodies.</a> Cytometry. 14, 455-458 (1993).</li><li>Jao, C. Y., Salic, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploring+RNA+transcription+and+turnover+in+vivo+by+using+click+chemistry.">Exploring RNA transcription and turnover in vivo by using click chemistry.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105, 15779-15784 (2008).</li><li>Rostovtsev, V. V., Green, L. G., Fokin, V. V., Sharpless, K. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+stepwise+huisgen+cycloaddition+process:+copper(I)-catalyzed+regioselective+"ligation"+of+azides+and+terminal+alkynes.">A stepwise huisgen cycloaddition process: copper(I)-catalyzed regioselective "ligation" of azides and terminal alkynes.</a> Angew Chem. Int. Ed. Engl. 41, 2596-2599 (2002).</li><li>Tornoe, C. W., Christensen, C., Meldal, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peptidotriazoles+on+solid+phase:+[1,2,3]-triazoles+by+regiospecific+copper(i)-catalyzed+1,3-dipolar+cycloadditions+of+terminal+alkynes+to+azides.">Peptidotriazoles on solid phase: [1,2,3]-triazoles by regiospecific copper(i)-catalyzed 1,3-dipolar cycloadditions of terminal alkynes to azides.</a> J. Org. Chem. 67, 3057-3064 (2002).</li><li>Kalveram, B., Lihoradova, O., Ikegami, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NSs+protein+of+rift+valley+fever+virus+promotes+posttranslational+downregulation+of+the+TFIIH+subunit+p62.">NSs protein of rift valley fever virus promotes posttranslational downregulation of the TFIIH subunit p62.</a> J. Virol. 85, 6234-6243 (2011).</li><li>Kalveram, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rift+Valley+fever+virus+NSs+inhibits+host+transcription+independently+of+the+degradation+of+dsRNA-dependent+protein+kinase+PKR.">Rift Valley fever virus NSs inhibits host transcription independently of the degradation of dsRNA-dependent protein kinase PKR.</a> Virology. , (2012).</li><li>Head, J. A., Kalveram, B., Ikegami, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+analysis+of+Rift+Valley+fever+virus+NSs+encoding+a+partial+truncation.">Functional analysis of Rift Valley fever virus NSs encoding a partial truncation.</a> PLoS One. 7, e45730 (2012).</li><li>Lihoradova, O. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+Rift+Valley+Fever+Virus+MP-12+Strain+Encoding+NSs+of+Punta+Toro+Virus+or+Sandfly+Fever+Sicilian+Virus.">Characterization of Rift Valley Fever Virus MP-12 Strain Encoding NSs of Punta Toro Virus or Sandfly Fever Sicilian Virus.</a> PLoS Negl Trop Dis. 7, e2181 (2013).</li><li>Kalveram, B., Ikegami, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toscana+Virus+NSs+Protein+Promotes+Degradation+of+Double-Stranded+RNA-Dependent+Protein+Kinase.">Toscana Virus NSs Protein Promotes Degradation of Double-Stranded RNA-Dependent Protein Kinase.</a> J. Virol. , (2013).</li><li>Schmaljohn, C., Nichol, S., Knipe, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> In Fields Virology. , 1741-1789 (2007).</li><li>Le May, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TFIIH+transcription+factor,+a+target+for+the+Rift+Valley+hemorrhagic+fever+virus.">TFIIH transcription factor, a target for the Rift Valley hemorrhagic fever virus.</a> Cell. 116, 541-550 (2004).</li><li>Caplen, H., Peters, C. J., Bishop, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mutagen-directed+attenuation+of+Rift+Valley+fever+virus+as+a+method+for+vaccine+development.">Mutagen-directed attenuation of Rift Valley fever virus as a method for vaccine development.</a> J. Gen. Virol. 66, 2271-2277 (1985).</li><li>Ikegami, T., Won, S., Peters, C. J., Makino, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rescue+of+infectious+Rift+Valley+fever+virus+entirely+from+cDNA,+analysis+of+virus+lacking+the+NSs+gene,+and+expression+of+a+foreign+gene.">Rescue of infectious Rift Valley fever virus entirely from cDNA, analysis of virus lacking the NSs gene, and expression of a foreign gene.</a> J. Virol. 80, 2933-2940 (2006).</li><li>Vyboh, K., Ajamian, L., Mouland, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+viral+RNA+by+fluorescence+in+situ+hybridization+(FISH).">Detection of viral RNA by fluorescence in situ hybridization (FISH).</a> J. Vis. Exp. , e4002 (2012).</li><li>Reich, E., Goldberg, I. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Actinomycin+and+nucleic+acid+function.">Actinomycin and nucleic acid function.</a> Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol. 3, 183-234 (1964).</li><li>Holmes, K. L., Lantz, L. M., Russ, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conjugation+of+fluorochromes+to+monoclonal+antibodies.">Conjugation of fluorochromes to monoclonal antibodies.</a> Curr. Protoc. Cytom. Chapter 4 (Unit 4 2), (2001).</li></ol>

Sağlanan protokolü doğmakta olan RNA içine üridin analog AB&#39;nin birleşme ile konak hücre transkripsiyon viral enfeksiyon etkisini ölçmek için bir yöntem açıklanır. Hızlı, hassas olduğunu ve radyoaktif izotopların kullanımı dayanmaz: Bu yöntem önceki yöntemlere göre birçok avantajı vardır. Ayrıca yöntem, floresan mikroskobu veya esas itibariyle aynı reaktifler kullanılarak akış sitometrisi ile sayısal veriler ile niteliksel verileri vermek üzere adapte edilebilir. Viral antijenler i...

<html> Geleneksel olarak, transkripsiyonel aktivitesini radyoaktif (3H-üridin) 1 ya dahil edilmesi ile ölçülür ya da doğmakta olan RNA içine (BrU) 2 nükleosidlerin halojenli edilmiştir. Bu üridin analoglan, hücreler tarafından alınır nükleosit kurtarma yolu ile üridin trifosfat (UTP) haline dönüştürüldü ve daha sonra yeni sentezlenen RNA&#39;nın dahil edilmiştir. 3H-üridin zaman alıcı olabilir otoradyografi, veya parıldama ile tespit edilebilir edilir özel ekipman gerektiren, sayma. Ayrıca, radyoaktif izotopların kullanımı yüksek çevreleme biyogüvenlik laboratuarları dahil olmak üzere, laboratuvar ortamlarında bir dizi pratik olmayabilir. BrU RNA ikincil yapı antikor bağlayıcı bir sterik engel olabilir olarak çekirdek ya da RNA&#39;nın kısmen denatüre, ve antikorun erişimi sağlamak için sert geçirgenliği gerektirebilir anti-BrU antikorları ile immüno-boyama yoluyla tespit edilebilir. _content &quot;&gt; Burada açıklanan protokol en son gerilme RVFV MP-12 ile enfekte edilmiş hücrelerde transkripsiyonel aktivitesini ölçmek için kimya 3 tıklayın geliştirilmiştir. Click kimyası, son derece seçici ve etkili bir bakır (I) katalizli bir alkin arasındaki siklo-ilave reaksiyonu dayanır kullanır 4,5-bir azid yarımı. Bu protokol, enfekte olmuş hücrelerde Yeni oluşan RNA ilk üridin analog AB dahil edilmesi yoluyla etiketlenir. ikinci bir adımda, kurulmuş AB, floresan azit ile reaksiyona sokulması ile tespit edilir. Bu yöntemin en önemli avantajları , (1) bunun radyoaktif izotopların kullanımını gerektirmeyen ve (2) bu kadar sert geçirgenliği veya RNA denatürasyon gerektirmez. yetersiz tarafından engellenir değildir az 50 Da, floresan azid ile erişim arasında bir moleküler ağırlığa sahip Bir sınıf ile RNA&#39;nın tespiti birleştirirken geçirgenliği veya RNA sekonder yapısı. Dahası, araştırmacıların birincil antikor seçiminde sınırlı değildirviral proteinler için ical immün. Iki farklı yöntem, bu protokolde tarif edilmektedir: floresan mikroskobu (1-4), ve akış sitometrisi (adım 5-8) aracılığıyla transkripsiyon miktarının belirlenmesi için, bir transkripsiyon ile görüntülenmesi için, bir. Bu yöntemlerin her ikisi bir hücre-by-hücre olarak transkripsiyonel aktivite ve viral enfeksiyon arasında bir ilişki sağlar viral proteinler, bir hücre içi immün ile doğmakta olan RNA etiketleme birleştirir. Yazarlar, başarılı bir protokol RVFV suşu MP-12 6, Toscana virüsü (TOSV) 10 ile enfekte olan farklı MP-12 mutantları 7,8, 9, ve hücreler ile enfekte olmuş hücrelerin ile enfekte olmuş hücrelerin içinde transkripsiyonel aktiviteyi belirlemek için burada açıklanan kullandık. Burada tarif edilen protokol kolayca farklı virüs ile kullanılmak üzere adapte edilmiş ve belirli viral veya hücresel proteinlerin immünofloresan boyama içermek üzere modifiye edilebilir potansiyeline sahip olabilir.

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Name of Reagent/Material</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-ethynyl-uridine</td>
			<td>Berry &amp; Associates</td>
			<td>PY 7563</td>
			<td>dissolve in DMSO for 100 mM stock</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12-mm round coverslips</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>12-545-82</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 ml polystyrene tubes</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>352058</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Actinomycin D (ActD)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>9415</td>
			<td>dissolve in DMSO for 10 mM stock</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488 goat anti-mouse IgG</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A-11029</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin (BSA)</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc-2323</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CuSO4</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C-8027</td>
			<td>dissolve in H2O for 100 mM stock</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D-9542</td>
			<td>dissolve in H2O for 5 mg/ml stock</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>11965092</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>16000044</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fluorescent azide (Alexa Fluor 594-coupled)</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A10270</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fluorescent azide (Alexa Fluor 657-coupled)</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A10277</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoromount-G</td>
			<td>Southern Biotech</td>
			<td>0100-01</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-ascorbic acid</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A-5960</td>
			<td>dissolve in H2O for 500 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>paper filter</td>
			<td>VWRbrand</td>
			<td>28333-087</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>158127</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>15140122</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>poly-L-lysine (MW &ge; 70000)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P1274</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T-8787</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trizma base</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T-1503</td>
			<td>dissolve in H2O for 1.5 M stock, pH 8.5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>25200056</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence Microscope</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>e.g. Olympus IX71</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow Cytometer</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>e.g. BD Biosciences LSRII Fortessa</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

using click chemistry to measure the effect of viral infection on host-cell rna synthesis

Birçok RNA virüsleri hücresel savunma aşmak için bir araç olarak konakçı hücre transkripsiyonu inhibe etme yeteneği gelişmiştir. Bu virüslerin Çalışma için, enfekte olmuş hücrelerde transkripsiyonel aktivitesini ölçmek için bir hızlı ve güvenilir bir şekilde olması için bu nedenle önemlidir. Geleneksel olarak, transkripsiyon H-üridin gibi immün ile tespit takiben 5-bromouridine (BRU) gibi halojenlenmiş üridin analoglannın Otoradyografi veya sintilasyon sayımı veya birleşme ile tespit takiben 3 gibi radyoaktif nükleosidlerin ya da eklenmesi ile ölçülmüştür. BrU tespiti külfetli olabilir ve düşük hassasiyet muzdarip olurken radyoaktif izotopların kullanımı, ancak, özel ekipman gerektirir ve laboratuvar bir dizi mümkün değildir. Bir azid ve alkin bir bakır-katalize triazol oluşumu içerir yeni geliştirilen tıklayın kimya, şimdi hızlı ve highl sağlarBu iki yöntem y duyarlı bir alternatif. Click kimyası Yeni oluşan RNA önce bir floresan azid ile etiketin saptanması, ardından üridin analog 5-ethynyluridine (AB) eklenmesi ile etiketlenmiş olduğu, iki aşamalı bir işlemdir. Bu azidler görselleştirme için seçenekleri geniş bir yelpazede için izin, birkaç farklı fluorophores olarak mevcuttur. Bu protokol, MP-12 suşu tıklama kimya kullanılarak Rift Valley vebası virüsü (RVFV) ile enfekte edilmiş hücrelerde transkripsiyonel bastırma ölçmek için bir yöntem açıklanır. Aynı zamanda, bu hücrelerde viral proteinlerin ekspresyonu klasik immün hücre içi tarafından belirlenir. 8 detay akım sitometri ile transkripsiyonel bastırma ölçmek için bir yöntem ile 5 arasındaki adımları ise, 4 ayrıntılı floresan mikroskobu ile transkripsiyonel bastırma görselleştirmek için bir yöntem adım 1. Bu protokol, diğer virüsler ile kullanıma kolaylıkla adapte edilebilir.

RVFV bölgesinin NSS proteini (Bunyaviridae ailesi, cins Phlebovirus) 11 iki ayrı mekanizma ile konak hücre genel transkripsiyon inhibe eder: (i) kenetleme ile P62 arasında proteozomal degradasyonu teşvik, bazal transkripsiyon faktörü TFIIH 11 ve (ii) bir p44 alt birimi TFIIH 6 alt birimi. MP-12 suşu bir biyogüvenlik düzeyi 2 laboratuarda ele alınabilir ve diğer vahşi geçerlidir ABD&#39;de seçim aracı kural, dışında olduğundan RVFV MP-12 aşı suşu <...

Watch this Scientific Journal Video about Using Click Chemistry to Measure the Effect of Viral Infection on Host-Cell RNA Synthesis Video at JoVE.com

Using Click Chemistry to Measure the Effect of Viral Infection on Host-Cell RNA Synthesis Video (Video) | JoVE

Bu yöntem, Rift Valley vebası virüsü (RVFV) suşu, MP-12 ile enfeksiyon sonrası konakçı hücre transkripsiyon değişiklikleri ölçmek tıkırtı kimya kullanımı açıklanmaktadır. Sonuçlar floresan mikroskobu ile nitel görüntülendi veya akım sitometri ile kantitatif elde edilebilir. Bu yöntem, diğer virüs ile kullanılmak üzere uyarlanabilir.

Ana-Hücre RNA sentezi üzerinde Viral Enfeksiyon Etkisi Tedbir tıklayın Kimya Kullanımı

Many RNA viruses have evolved the ability to inhibit host cell transcription as a means to circumvent cellular defenses. For the study of these viruses, ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Using Click Chemistry to Measure the Effect of Viral Infection on Host-Cell RNA Synthesis

Using a Pan-Viral Microarray Assay (Virochip) to Screen Clinical Samples for Viral Pathogens

Using a Pan-Viral Microarray Assay (Virochip) to Screen Clinical Samples for Viral Pathogens (Video) | JoVE 

Viral Patojenler Klinik Örnekler Ekranına bir Pan-Viral Mikroarray Testi (Virochip)

The diagnosis of viral causes of many infectious diseases is difficult due to the inherent sequence diversity of viruses as well as the ongoing emergence ...

Isolation of Fidelity Variants of RNA Viruses and Characterization of Virus Mutation Frequency

Isolation of Fidelity Variants of RNA Viruses and Characterization of Virus Mutation Frequency (Video) | JoVE 

Virüs mutasyon Frekans RNA Virüsler ve Karakterizasyonu Fidelity Varyantlar izolasyonu

RNA viruses use RNA dependent RNA polymerases to replicate their genomes. The intrinsically high error rate of these enzymes is a large contributor to the ...

Amplifying and Quantifying HIV-1 RNA in HIV Infected Individuals with Viral Loads Below the Limit of Detection by Standard Clinical Assays

Amplifying and Quantifying HIV-1 RNA in HIV Infected Individuals with Viral Loads Below the Limit of Detection by Standard Clinical Assays (Video) | JoVE 

Standart Klinik Tahliller Algılama Sınırı Aşağıda Viral Yükler HIV enfekte kişilerde kuvvetlendirme ve HIV-1 RNA miktarının

Amplifying viral genes and quantifying HIV-1 RNA in HIV-1 infected individuals with viral loads below the limit of detection by standard assays (below ...

Separation of Single-stranded DNA, Double-stranded DNA and RNA from an Environmental Viral Community Using Hydroxyapatite Chromatography

Separation of Single-stranded DNA, Double-stranded DNA and RNA from an Environmental Viral Community Using Hydroxyapatite Chromatography (Video) | JoVE 

Tek iplikli DNA, çift iplikli DNA ve RNA Hidroksiapatit Kromatografisi kullanarak bir Çevre Viral Topluluk ayrılması

Viruses, particularly bacteriophages (phages), are the most numerous biological entities on Earth1,2.  Viruses modulate host cell abundance and diversity, ...

Chemoselective Modification of Viral Surfaces via Bioorthogonal Click Chemistry

Chemoselective Modification of Viral Surfaces via Bioorthogonal Click Chemistry (Video) | JoVE 

Bioorthogonal tıklayın Kimya ile Viral Yüzeylerin Kemoselektif Modifikasyonu

The modification of virus particles has received a significant amount of attention for its tremendous potential for impacting gene therapy, oncolytic ...

The Synergistic Effect of Visible Light and Gentamycin on Pseudomona aeruginosa Microorganisms

The Synergistic Effect of Visible Light and Gentamycin on Pseudomona aeruginosa Microorganisms Video (Video) | JoVE

Üzerinde görebilir Işık ve Gentamisin en Sinerjik Etkisi<em&gt; Pseudomona aeruginosa</em&gt; Mikroorganizmalar

Recently there were several publications on the  bactericidal effect of visible light, most of them claiming that blue part of  the spectrum (400 nm-500 ...

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro Video (Video) | JoVE

Polarize İnsan Havayolu bir sıvı kaplı Kültürünün Oluşturulması Solunum Patojenler için Host Hücre Yanıtı Okumak Epitel Calu-3 Hücreler<em&gt; In vitro</em

The  apical and basolateral surfaces of airway epithelial cells demonstrate  directional responses to pathogen exposure in  vivo. Thus, ideal in vitro ...

Using the Overlay Assay to Qualitatively Measure Bacterial Production of and Sensitivity to Pneumococcal Bacteriocins

Using the Overlay Assay to Qualitatively Measure Bacterial Production of and Sensitivity to Pneumococcal Bacteriocins Video (Video) | JoVE

Kaplama Testi kullanarak niteliksel Pnömokok Bakteriyosinlerin Bakteriyel Üretim ve Hassasiyet Tedbir

Streptococcus pneumoniae colonizes the highly diverse polymicrobial community of the nasopharynx where it must compete with resident organisms.  We have ...

Macrophage Cholesterol Depletion and Its Effect on the Phagocytosis of Cryptococcus neoformans

Macrophage Cholesterol Depletion and Its Effect on the Phagocytosis of Cryptococcus neoformans Video (Video) | JoVE

Makrofaj Kolesterol tükenmesi ve Fagositoz Üzerine Etkisi<em&gt; Cryptococcus neoformans</em

Cryptococcosis is a life-threatening infection caused by pathogenic fungi of the genus Cryptococcus. Infection occurs upon inhalation of spores, which are ...

The Development of Lyophilized Loop-mediated Isothermal Amplification Reagents for the Detection of Coxiella burnetii

The Development of Lyophilized Loop-mediated Isothermal Amplification Reagents for the Detection of Coxiella burnetii Video (Video) | JoVE

tespiti için Liyofilize Döngü aracılı İzotermal Amplifikasyon Reaktifler Gelişimi<em&gt; Coxiella burnetii</em

Coxiella burnetii, the agent causing Q fever, is an obligate intracellular bacterium. PCR based diagnostic assays have been developed for detecting C. ...