Name: assays for the identification of novel antivirals against bluetongue virus
Uploaded: 2013-10-11T23:00:00
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इस परियोजना अनुदान 1R03MH08127-01 और एनआईएच से प्र. ली को 7R03MH08127-02 के द्वारा समर्थित है, और UAB में चिकित्सा विभाग से प्रभाव निधियों द्वारा प्र. ली के लिए किया गया था. Molette फंड और Auburn विश्वविद्यालय से समर्थन की सराहना की है. हम भी काम के दौरान सुश्री पुलिन चे और श्री वलोडिमिर Musiienko से तकनीकी assistances धन्यवाद.

1. सेल, वायरस और antiviral यौगिकों <ol><li> बीएसआर कोशिकाओं, 5% भ्रूण बछड़ा सीरम (एफसीएस) युक्त बच्चा हम्सटर गुर्दे के व्युत्पन्न Dulbecco संशोधित ईगल मध्यम में (बीएचके) कोशिकाओं 10, (DMEM) को बनाए रखने, 100U/ml पेनिसिलिन और 100 मा?...

<ol>
	<li>Hemati, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bluetongue+virus+targets+conventional+dendritic+cells+in+skin+lymph.">Bluetongue virus targets conventional dendritic cells in skin lymph.</a> J. Virol. 83, 8789-8799 (2009).</li><li>Gu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+Virostatic+Agents+against+Bluetongue+Virus.">Novel Virostatic Agents against Bluetongue Virus.</a> PLoS ONE. 7, e43341 (2012).</li><li>Meiswinkel, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+2006+outbreak+of+bluetongue+in+northern+Europe--the+entomological+perspective.">The 2006 outbreak of bluetongue in northern Europe--the entomological perspective.</a> Prev. Vet. Med. 87, 55-63 (2008).</li><li>Szmaragd, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mortality+and+case+fatality+during+the+recurrence+of+BTV-8+in+northern+Europe+in+2007.">Mortality and case fatality during the recurrence of BTV-8 in northern Europe in 2007.</a> Vet. Rec. 161, 571-572 (2007).</li><li>Li, Q., Maddox, C., Rasmussen, L., Hobrath, J. V., White, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assay+development+and+high+throughput+antiviral+drug+screening+against+Bluetongue+virus.">Assay development and high throughput antiviral drug screening against Bluetongue virus.</a> Antiviral Research. 83, 267-273 (2009).</li><li>Noah, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cell-based+luminescence+assay+is+effective+for+high-throughput+screening+of+potential+influenza+antivirals.">A cell-based luminescence assay is effective for high-throughput screening of potential influenza antivirals.</a> Antiviral Res. 73, 50-59 (2007).</li><li>Che, P., Wang, L., Li, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+development,+optimization+and+validation+of+an+assay+for+high+throughput+antiviral+drug+screening+against+Dengue+virus.">The development, optimization and validation of an assay for high throughput antiviral drug screening against Dengue virus.</a> Int. J. Clin. Exp. Med. 2, 363-373 (2009).</li><li>Li, Q., Li, H., Blitvich, B. J., Zhang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Aedes+albopictus+inhibitor+of+apoptosis+1+gene+protects+vertebrate+cells+from+bluetongue+virus-induced+apoptosis.">The Aedes albopictus inhibitor of apoptosis 1 gene protects vertebrate cells from bluetongue virus-induced apoptosis.</a> Insect Mol. Biol. 16, 93-105 (2007).</li><li>Petty, R. D., Sutherland, L. A., Hunter, E. M., Cree, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+MTT+and+ATP-based+assays+for+the+measurement+of+viable+cell+number.">Comparison of MTT and ATP-based assays for the measurement of viable cell number.</a> J. Biolumin. Chemilumin. 10, 29-34 (1995).</li><li>Buchholz, U. J., Finke, S., Conzelmann, K. 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Virol. 73, 251-259 (1999).</li><li>Phillips, T., Jenkinson, L., McCrae, C., Thong, B., Unitt, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+high-throughput+human+rhinovirus+infectivity+cell-based+assay+for+identifying+antiviral+compounds.">Development of a high-throughput human rhinovirus infectivity cell-based assay for identifying antiviral compounds.</a> J. Virol. Methods. 173, 182-188 (2011).</li><li>Harvey, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tetracycline-inducible+packaging+cell+line+for+production+of+flavivirus+replicon+particles.">Tetracycline-inducible packaging cell line for production of flavivirus replicon particles.</a> J. Virol. 78, 531-538 (2004).</li><li>Puig-Basagoiti, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-throughput+assays+using+a+luciferase-expressing+replicon,+virus-like+particles,+and+full-length+virus+for+West+Nile+virus+drug+discovery.">High-throughput assays using a luciferase-expressing replicon, virus-like particles, and full-length virus for West Nile virus drug discovery.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 49, 4980-4988 (2005).</li><li>Puig-Basagoiti, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Triaryl+pyrazoline+compound+inhibits+flavivirus+RNA+replication.">Triaryl pyrazoline compound inhibits flavivirus RNA replication.</a> Antimicrob. Agents Chemother. 50, 1320-1329 (2006).</li><li>Duan, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+and+in+vivo+protection+against+the+highly+pathogenic+H5N1+influenza+virus+by+an+antisense+phosphorothioate+oligonucleotide.">In vitro and in vivo protection against the highly pathogenic H5N1 influenza virus by an antisense phosphorothioate oligonucleotide.</a> Antivir. Ther. 13, 109-114 (2008).</li><li>Ray, D., Shi, P. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+flavivirus+antiviral+drug+discovery+and+vaccine+development.">Recent advances in flavivirus antiviral drug discovery and vaccine development.</a> Recent Pat. Antiinfect. Drug Discov. 1, 45-55 (2006).</li><li>Severson, W. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-throughput+screening+of+a+100,000-compound+library+for+inhibitors+of+influenza+A+virus+(H3N2).">High-throughput screening of a 100,000-compound library for inhibitors of influenza A virus (H3N2).</a> J. Biomol. Screen. 13, 879-887 (2008).</li><li>Severson, W. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+validation+of+a+high-throughput+screen+for+inhibitors+of+SARS+CoV+and+its+application+in+screening+of+a+100,000-compound+library.">Development and validation of a high-throughput screen for inhibitors of SARS CoV and its application in screening of a 100,000-compound library.</a> J. Biomol. Screen. 12, 33-40 (2007).</li><li>Bolken, T. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+characterization+of+potent+small+molecule+inhibitor+of+hemorrhagic+fever+New+World+arenaviruses.">Identification and characterization of potent small molecule inhibitor of hemorrhagic fever New World arenaviruses.</a> Antivir. Res. 69, 86-97 (2006).</li><li>Van Loock, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+high-throughput+cellular+screening+assay+for+the+discovery+of+HIV-1+integrase+inhibitors.">A novel high-throughput cellular screening assay for the discovery of HIV-1 integrase inhibitors.</a> J. Virol. Methods. 179, 396-401 (2012).</li><li>Kampmann, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+silico+screening+of+small+molecule+libraries+using+the+dengue+virus+envelope+E+protein+has+identified+compounds+with+antiviral+activity+against+multiple+flaviviruses.">In silico screening of small molecule libraries using the dengue virus envelope E protein has identified compounds with antiviral activity against multiple flaviviruses.</a> Antiviral Res. 84, 234-241 (2009).</li><li>Kirchmair, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+anti-viral+agents+using+molecular+modeling+and+virtual+screening+techniques.">Development of anti-viral agents using molecular modeling and virtual screening techniques.</a> Infect. Disord. Drug Targets. 11, 64-93 (2011).</li></ol>

एंटीवायरल हिट की प्रारंभिक पहचान के लिए, एंटीवायरल दवाओं की खोज और विकास के लिए महत्वपूर्ण कदमों में से एक, एक quantifiable मार्कर का चयन एक सरल प्रोटोकॉल के विकास, पर्याप्त संकेत है और कम से कम 10% सीवी प्राप्त क?...

BTV जीनस Orbivirus, परिवार Reoviridae में एक प्रोटोटाइप डबल असहाय शाही सेना वायरस है. BTV दुनिया भर में 1,2 $ 3000000000 / वर्ष के नुकसान के साथ, भेड़, बकरी, पशु और अन्य घरेलू पशुओं सहित घरेलू पशुओं का सबसे महत्वपूर्ण रोगों में से एक है. विदेशी BTV सीरोटाइप में सूचीबद्ध एक महत्वपूर्ण पशु रोगज़नक़ है &quot;यूएसडीए उच्च परिणाम पशुधन रोगज़नक़ों.&quot; हाल ही में, फिर से उभरते BTV के उत्तरी यूरोप 3,4 भर में कई देशों में एक प्रमुख पशुओं में बीमारी का प्रकोप और भेड़ कारण बना हुआ है. इसके आर्थिक महत्व का एक परिणाम के रूप में और एक मॉडल प्रणाली के रूप में, BTV व्यापक, आणविक आनुवंशिक और संरचनात्मक अध्ययन का विषय रहा है, और कई टीके विकसित किया गया है. हालांकि, एंटीवायरल दवाओं की खोज के लिए उचित assays की कमी के कारण, BTV के खिलाफ उपलब्ध नहीं antivirals कर रहे हैं. मॉडल प्रणाली के रूप BTV का उपयोग हाल ही में एक उच्च throughput स्क्रीनिंग (HTS) अभियान में, हम घ, eveloped अनुकूलित और arboviruses 5 के खिलाफ संभावित व्यापक स्पेक्ट्रम antivirals की पहचान करने के लिए एक सीपीई आधारित परख मान्य. सीपीई आधारित परख तेजी से और नमूदार सीपीई / apoptosis 5-7 प्रेरित है कि वायरस के एक नंबर के खिलाफ antiviral दवाओं की खोज में इस्तेमाल किया गया है कि एक अच्छी तरह से मान्यता प्राप्त परख है. हमारी प्रणाली में, पोस्ट BTV संक्रमण, सीपीई हेला, बीएसआर, और HEK 293T 8 सहित हड्डीवाला कोशिकाओं में स्पष्ट है. BTV प्रेरित सीपीई CellTiter Glo सेल व्यवहार्यता अभिकर्मक किट (CTG किट) 9 सहित विभिन्न सेल व्यवहार्यता का पता लगाने के तरीकों का उपयोग और निगरानी की मात्रा निर्धारित किया जा सकता है. इस किट metabolically सक्रिय जीवित कोशिकाओं की उपस्थिति का संकेत है, जो सेलुलर एटीपी के quantitation पर आधारित संस्कृति में व्यवहार्य कोशिकाओं की संख्या प्रस्तुत किया, निर्धारित करता है. अनुकूलित शर्तों के तहत, यहाँ प्रस्तुत सीपीई आधारित परख &quot;मिश्रण और उपाय&quot; एक कदम प्रोटोकॉल, और स्थिर luminescent संकेतों के साथ लचीलेपन के साथ इसकी व्यवहार्यता दिखाया. इस बीच, जहरीले यौगिकों reduसेल व्यवहार्यता cing इस सीपीई आधारित परख में बाहर रखा जाएगा. सीपीई आधारित परख इसकी मजबूती और BTV के खिलाफ antiviral दवाओं की खोज के लिए विश्वसनीयता से पता चला है, और संभावित एंटीवायरल नेतृत्व यौगिक (ओं के छह उपन्यास क्लस्टर की पहचान की जाती है जो एनआईएच आण्विक पुस्तकालय लघु अणु भंडार (MLSMR), स्क्रीन करने के लिए इस्तेमाल किया गया है ) 5. एक संभावित antiviral यौगिक सीपीई आधारित परख का उपयोग पहचान की गई है, जब वह एंटीवायरल प्रभावकारिता और cytotoxicity 2 की सीमा निर्धारित करने के लिए दस एकाग्रता खुराक प्रतिक्रिया परख के लिए किए जाने की आवश्यकता होगी. एंटीवायरल प्रभावकारिता, 50% निरोधात्मक एकाग्रता (आईसी 50) या 50% प्रभावी एकाग्रता (ईसी 50) के रूप में प्रतिनिधित्व, आधारभूत और अधिकतम के बीच वायरस प्रेरित सीपीई आधे रास्ते को रोकता है जो एक दवा की एकाग्रता है. antivirals के cytotoxicity, 50% cytotoxicity एकाग्रता (सीसी 50) यानी, एकाग्रता हैआधारभूत और अधिकतम के बीच cytotoxicity का 50% उत्प्रेरण एक दवा की. 50% एसआई (एसआई 50) के रूप में चिह्नित चयनात्मक सूचकांक (एसआई), वायरस प्रेरित सीपीई के खिलाफ antiviral की विशिष्टता को निर्धारित करता है जो सीसी 50 / आईसी 50 से गणना की है. आईसी 50 (या चुनाव आयोग 50), सीसी 50 और एसआई 50 मानों एक antiviral यौगिक शक्तिशाली और आगे दवा के विकास के लिए चयनात्मक है कि यह निर्धारित करने के लिए महत्वपूर्ण उपाय कर रहे हैं. एक antiviral इन विट्रो में कोई प्रकट विषाक्तता से पता चला है, अभी तक रोका वायरस सीपीई और उत्पादक वायरल जीवन चक्र को प्रेरित किया, यह अपने एमओए 2 चिह्नित करने के लिए महत्वपूर्ण है. हम एंटीवायरल से प्रभावित है कि वायरल जीवन चक्र के संभावित कदम (ओं) निर्धारित करने के लिए TOA परख बाहर ले जाने से इस तरह के लक्षण वर्णन शुरू की. आम तौर पर, एंटीवायरल यौगिक अलग अलग समय पूर्व या बाद वायरस के संक्रमण में कोशिकाओं को जोड़ा गया. Antivirals संक्रमित कोशिकाओं को जोड़ा गया तो अपने लक्ष्य के लिए पोस्टपहले कदम के लिए जोड़ा गया है, जो एक की तुलना में जब चरण संक्रमण के दौरान, यह कम गतिविधि पर नतीजा होगा. इस प्रकार, TOA अध्ययन या तो वायरल जीवन चक्र या वायरल जीवन चक्र में शामिल मेजबान मशीनरी पर, एक यौगिक के antiviral प्रभावकारिता, और अपनी क्षमता को लक्ष्य निर्धारित करने के लिए महत्वपूर्ण है. सभी तीन assays के लिए, सेल व्यवहार्यता निर्माता अनुदेश 5 निम्नलिखित CTG किट का उपयोग कर निर्धारित किया गया था. इस प्रणाली का पता लगाने के लिए विभिन्न घर में सॉफ्टवेयर का उपयोग कर विश्लेषण किया जा सकता है कि पर्याप्त luminescence संकेत outputs. प्रत्येक परख कम से कम आठ प्रतिकृतियां के साथ तीन प्रतियों में मान्य है और प्रदर्शन किया गया था. सभी प्राप्त आंकड़ों के लिए, मतलब मूल्य (AVE), मानक विचलन (STDEV), और गुणांक भिन्नता (सीवी) सहित तीन मानकों, परख की मजबूती का निर्धारण करने के लिए विश्लेषण किया गया. परख की मजबूती निर्धारित किया गया है, डेटा आगे विश्लेषण किया और विभिन्न बायोस्टेटिक्स और ग्राफिक्स का उपयोग कर साजिश रची किया जाएगासी उपकरण 2.

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>1134218</td>
			<td>For cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>16000044</td>
			<td>For cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.05% Trypsin-EDTA</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>1000185</td>
			<td>For cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS</td>
			<td>Gbico</td>
			<td>1049769</td>
			<td>For cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CellTiter-Glo (CTG) kit</td>
			<td>Promega</td>
			<td>TB288</td>
			<td>For cell viability measurement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% ethanol</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>S25309B</td>
			<td>Diluted from 95%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antiviral huashilcompounds</td>
			<td>NIH MLSMR and de novo synthesis</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BTV-10</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>VR-187</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSR cell</td>
			<td>Developed in house</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Synergy-II multi-mode microplate reader</td>
			<td>BioTek</td>
			<td></td>
			<td>For luminescent signal reading</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MicroFlo select dispenser</td>
			<td>BioTek</td>
			<td></td>
			<td>Adding cells, virus, and reagents</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>384-well flat-bottom microplate</td>
			<td>CORNING</td>
			<td>28908031</td>
			<td>For cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gen. 5 software</td>
			<td>BioTek</td>
			<td></td>
			<td>For analysis of reading outputs from Synergy-II multi-mode microplate reader</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad Prism 5</td>
			<td>GraphPad</td>
			<td>Version 5</td>
			<td>For biostatic analysis and plot</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assays for the identification of novel antivirals against bluetongue virus

BTV के खिलाफ संभावित antivirals की पहचान करने के लिए, हम विकसित अनुकूलित और यहाँ प्रस्तुत तीन assays पुष्टि की है. सीपीई आधारित परख एक यौगिक किसी भी antiviral प्रभावकारिता दिखाया और बड़े परिसर पुस्तकालय स्क्रीन इस्तेमाल किया गया है कि क्या मूल्यांकन करने के लिए विकसित की पहली परख थी. इस बीच, antivirals के cytotoxicity भी सीपीई आधारित परख का उपयोग कर मूल्यांकन किया जा सकता है. खुराक प्रतिक्रिया परख चयनित एंटीवायरल के लिए प्रभावकारिता की सीमा निर्धारित करने के लिए डिजाइन किया गया था, 50% निरोधात्मक एकाग्रता (आईसी 50) या प्रभावी एकाग्रता (ईसी 50), और साथ ही cytotoxicity की अपनी सीमा (सीसी 50) अर्थात्. TOA परख BTV वायरल जीवन चक्र या मेजबान सेलुलर तंत्र पर संभव प्रभाव के दौरान उपन्यास antivirals के अंतर्निहित तंत्र निर्धारित करने के लिए प्रारंभिक एमओए अध्ययन के लिए नियुक्त किया गया था. ये assays सेल संस्कृति प्रणाली में antiviral प्रभावकारिता के मूल्यांकन के लिए महत्वपूर्ण हैं, और हमारे हाल के शोध का नेतृत्व करने के लिए इस्तेमाल किया गया हैBTV के खिलाफ उपन्यास antivirals के एक नंबर की पहचान करने के लिए आईएनजी.

1. परिसर के antiviral प्रभावकारिता सेल आधारित सीपीई परख, विकसित और अनुकूलित पहले 2,5 के रूप में वर्णित BTV के खिलाफ उपन्यास antivirals की पहचान करने के लिए luminescent आधारित CTG किट का उपयोग कर इन विट्रो में मान्...

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Assays for the Identification of Novel Antivirals against Bluetongue Virus

कोशिकाविकृति संबंधी प्रभाव (सीपीई) आधारित परख, खुराक प्रतिक्रिया परख और समय के जोड़ (TOA) परख सहित तीन assays, साथ ही, विकसित अनुकूलित, मान्य है और Bluetongue वायरस के खिलाफ उपन्यास antivirals (BTV) की पहचान करने के लिए उपयोग किया गया है नव पहचान antivirals के लिए संभव तंत्र की कार्रवाई (एमओए) निर्धारित करने के रूप में.

Bluetongue वायरस के खिलाफ उपन्यास antivirals की पहचान के लिए assays

To identify potential antivirals against BTV, we have  developed, optimized and validated three assays presented here. The CPE-based  assay was the first ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Viral Concentration Determination Through Plaque Assays: Using Traditional and Novel Overlay Systems

का प्रयोग पारंपरिक और उपन्यास ओवरले सिस्टम: पट्टिका assays के माध्यम से वायरल एकाग्रता दृढ़ संकल्प

Plaque assays remain one of the most accurate methods for the direct quantification of infectious virons and antiviral substances through the counting of ...

Immunofluorescence to Monitor the Cellular Uptake of Human Lactoferrin and its Associated Antiviral Activity Against the Hepatitis C Virus

हेपेटाइटिस सी वायरस के खिलाफ मानव लैक्टोफेरिन के सेलुलर तेज और उसके एसोसिएटेड Antiviral गतिविधि पर नजर रखने के लिए इम्यूनोफ्लोरेसेंस

Immunofluorescence is a laboratory technique commonly used to study many aspects of biology. It is typically used to visualize the distribution and/or ...

Early Viral Entry Assays for the Identification and Evaluation of Antiviral Compounds

प्रारंभिक वायरल एंट्री पहचान के लिए assays और antiviral यौगिकों का मूल्यांकन

Cell-based systems are useful for discovering antiviral agents. Dissecting the viral life cycle, particularly the early entry stages, allows a mechanistic ...

Qualitative and Quantitative Assays for Detection and Characterization of Protein Antimicrobials

जांच के लिए गुणात्मक और मात्रात्मक assays और प्रोटीन antimicrobials की विशेषता

Initial evaluations of large microbial libraries for potential producers of novel antimicrobial proteins require both qualitative and quantitative methods ...

Evaluation of the Efficacy And Toxicity of RNAs Targeting HIV-1 Production for Use in Gene or Drug Therapy

जीन या ड्रग थेरेपी में उपयोग के लिए लक्ष्य निर्धारण एचआईवी -1 उत्पादन प्रभावकारिता और आरएनए की विषाक्तता का मूल्यांकन

Small RNA therapies targeting post-integration steps in the HIV-1 replication cycle are among the top candidates for gene therapy and have the potential ...

Development and Identification of a Novel Subpopulation of Human Neutrophil-derived Giant Phagocytes In Vitro

Development and Identification of a Novel Subpopulation of Human Neutrophil-derived Giant Phagocytes In Vitro

विकास और मानव न्युट्रोफिल व्युत्पन्न विशालकाय phagocytes के एक उपन्यास उप-जनसंख्या की पहचान<em&gt; इन विट्रो</em

Neutrophils (PMN) are best known for their phagocytic functions against invading pathogens and microorganisms. They have the shortest half-life amongst ...

Fluorescence-based Neuraminidase Inhibition Assay to Assess the Susceptibility of Influenza Viruses to The Neuraminidase Inhibitor Class of Antivirals

प्रतिदीप्ति आधारित neuraminidase निषेध परख विषाणु-विरोधी की neuraminidase अवरोध करनेवाला वर्ग के लिए इन्फ्लूएंजा वायरस की संवेदनशीलता का आकलन करने के लिए

The neuraminidase (NA) inhibitors are the only class of antivirals approved for the treatment and prophylaxis of influenza that are effective against ...

Screening Assays to Characterize Novel Endothelial Regulators Involved in the Inflammatory Response

स्क्रीनिंग परख के लिए उपंयास Endothelial भड़काऊ प्रतिक्रिया में शामिल नियामकों विशेषताएं

The endothelial layer is essential for maintaining homeostasis in the body by controlling many different functions. Regulation of the inflammatory ...

Rapid, Safe, and Simple Manual Bedside Nucleic Acid Extraction for the Detection of Virus in Whole Blood Samples

तेजी से, सुरक्षित, और सरल मैनुअल बेडसाइड न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण पूरे रक्त के नमूनों में वायरस का पता लगाने के लिए

The rapid diagnosis of an infection is essential for the outbreak management, risk containment, and patient care. We have previously shown a method for ...

Identification of Coding and Non-coding RNA Classes Expressed in Swine Whole Blood

स्वाइन पूरे रक्त में व्यक्त कोडिंग और गैर कोडिंग आरएनए कक्षाओं की पहचान

The advent of innovative and increasingly powerful next generation sequencing techniques has opened new avenues into the ability to examine the underlying ...