Name: in vitro assay to evaluate the impact of immunoregulatory pathways on hiv-specific cd4 t cell effector function
Uploaded: 2013-10-15T17:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vitro Assay to Evaluate the Impact of Immunoregulatory Pathways on HIV-specific CD4 T Cell Effector Function at JoVE.com

Мы благодарим Гордона Фримена для обеспечения блокирующей антитела против PD-L1. Мы благодарим клиническое и лабораторное персонал на Массачусетского общего госпиталя и всех участников исследования за их неоценимую роль в этом проекте. Работа выполнена при поддержке Национального института аллергии и инфекционных заболеваний Национального института здоровья (PO1 АИ-080192; ДЭК), Национальный легочное сердце и крови Института Национальных Институтов Здоровья (РВЫХ1 HL-092565; ДЭК). ДЭК поддерживается исследовательский Scholar Карьера премии Фонда исследований в области здравоохранения Квебека (FRQS). FP поддерживается стипендий гранта Massachusetts General Hospital Исполнительного комитета по научным исследованиям и Гарвардской Глобального института здравоохранения (HGHI).

1. Истощение и Выделение РВМС с помощью Ficoll разъединении <ol><li> Разрушающим CD8 + Т-клеток путем добавления человека CD8 + Истощения Коктейль на 50 мкл / мл цельной крови. </li><li> Все хорошо перемешать и выдержать в течение 20 минут при комнатной температуре (18-25 ° C). </li><li> После инкубации, смешать ц...

<ol>
	<li>Zajac, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Viral+immune+evasion+due+to+persistence+of+activated+T+cells+without+effector+function.">Viral immune evasion due to persistence of activated T cells without effector function.</a> J. Exp. Med. 188, 2205-2213 (1998).</li><li>Wherry, E. J., Blattman, J. N., Murali-Krishna, K., vander Most, R., Ahmed, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Viral+persistence+alters+CD8+T-cell+immunodominance+and+tissue+distribution+and+results+in+distinct+stages+of+functional+impairment.">Viral persistence alters CD8 T-cell immunodominance and tissue distribution and results in distinct stages of functional impairment.</a> J. Virol. 77, 4911-4927 (2003).</li><li>Kwon, D. S., Kaufmann, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+and+detrimental+roles+of+IL-10+in+HIV+pathogenesis.">Protective and detrimental roles of IL-10 in HIV pathogenesis.</a> Eur. Cytokine Netw. 21, 208-214 (2010).</li><li>Porichis, F., Kaufmann, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+PD-1+in+HIV+pathogenesis+and+as+target+for+therapy.">Role of PD-1 in HIV pathogenesis and as target for therapy.</a> Curr. HIV/AIDS Rep. 9, 81-90 (2012).</li><li>Wherry, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T+cell+exhaustion.">T cell exhaustion.</a> Nat. 12, 492-499 (2011).</li><li>Trautmann, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Upregulation+of+PD-1+expression+on+HIV-specific+CD8++T+cells+leads+to+reversible+immune+dysfunction.">Upregulation of PD-1 expression on HIV-specific CD8+ T cells leads to reversible immune dysfunction.</a> Nat. Med. 12, 1198-1202 (2006).</li><li>Day, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PD-1+expression+on+HIV-specific+T+cells+is+associated+with+T-cell+exhaustion+and+disease+progression.">PD-1 expression on HIV-specific T cells is associated with T-cell exhaustion and disease progression.</a> Nature. 443, 350-354 (2006).</li><li>Brockman, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IL-10+is+up-regulated+in+multiple+cell+types+during+viremic+HIV+infection+and+reversibly+inhibits+virus-specific+T+cells.">IL-10 is up-regulated in multiple cell types during viremic HIV infection and reversibly inhibits virus-specific T cells.</a> Blood. 114, 346-356 (2009).</li><li>Barber, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restoring+function+in+exhausted+CD8+T+cells+during+chronic+viral+infection.">Restoring function in exhausted CD8 T cells during chronic viral infection.</a> Nature. 439, 682-687 (2006).</li><li>Zhang, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PD-1+up-regulation+is+correlated+with+HIV-specific+memory+CD8++T-cell+exhaustion+in+typical+progressors+but+not+in+long-term+nonprogressors.">PD-1 up-regulation is correlated with HIV-specific memory CD8+ T-cell exhaustion in typical progressors but not in long-term nonprogressors.</a> Blood. 109, 4671-4678 (2007).</li><li>Ndhlovu, Z. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-dimensional+immunomonitoring+models+of+HIV-1-specific+CD8+T-cell+responses+accurately+identify+subjects+achieving+spontaneous+viral+control.">High-dimensional immunomonitoring models of HIV-1-specific CD8 T-cell responses accurately identify subjects achieving spontaneous viral control.</a> Blood. 121, 801-811 (2013).</li><li>Porichis, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Responsiveness+of+HIV-specific+CD4+T+cells+to+PD-1+blockade.">Responsiveness of HIV-specific CD4 T cells to PD-1 blockade.</a> Blood. 118, 965-974 (2011).</li><li>Kwon, D. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD4++CD25++regulatory+T+cells+impair+HIV-1-specific+CD4+T+cell+responses+by+upregulating+interleukin-10+production+in+monocytes.">CD4+ CD25+ regulatory T cells impair HIV-1-specific CD4 T cell responses by upregulating interleukin-10 production in monocytes.</a> 86, 6586-6594 (2012).</li></ol>

Коллекция Супернатант является императивом частью этого эксперимента. При заготовке супернатантов для анализа Luminex аликвоты были сделаны и выдерживают при -80 ° С, чтобы предотвратить деградацию белков из-за циклов замерзания-оттаивания. Замораживания и оттаивания могут быть резкие п?...

Во стойких вирусных инфекций, вирусов конкретных-Т-клетки приобретают функциональные дефекты в процессе, известном как Т-клеток истощения. В начале естественных условиях исследования в мышиной LCMV модели хроническим вирусным инфекции установлено, что измученные вирус-специфических Т-клеток сократили цитолитическую функцию против инфицированных вирусом клеток, теряют способность к пролиферации и сократили способность производить цитокины, такие как IL-2, TNF- α и ИФН-γ 1,2. Сложная сеть иммунорегуляторных путей, таких как PD-1 и IL-10, которые активируется во время хронических инфекций и способствуют T дисфункции клеток (обзор в 3,4). В естественных введения блокирующих антител против этих ингибирующих путей в LCMV мыши модель восстановлен функцию истощенных вирус-специфических Т-клеток и повышенную вирусной зазор, указывая, что истощение Т-клеток представляет собой частично обратимый феномен (обзор в 5). Выводы по гоэ LCMV модель быстро распространяется на человека хронических вирусных инфекций, таких как ВГВ, ВГС и ВИЧ 5. При хроническом инфекции ВИЧ-1, ПД-1 и IL-10 Тропы активируется в инфицированных субъектов и коррелируют с параметрами прогрессирования заболевания, непосредственно с вирусной нагрузки и обратно с CD4, 6-8. Антитело блокада PD-1 или IL-10 пролиферации путей в пробирке восстановлен ВИЧ-специфических CD4 и CD8 Т-клеток, указывающих, что, подобно модели LCMV мыши, истощение Т-клеток у человека является частично обратимым явлением. Однако, в связи с деликатным характером экспериментов на образцах человека, а также ограничений в чувствительности анализов в лабораторных условиях, тщательного расследования функциональных профилей реставрационных достичь за счет этих мер поразительно отсутствует. Пролиферации анализы были, до сих пор, единственным надежным анализа в пробирке испытания в большинстве исследований, но есть замечательный отсутствие доказательств о влиянии этих Интерконвенций на: 1) убийство мощностью цитотоксических Т-клеток, 2) противовирусное действие Т-клеток на вирусную репликацию, 3) профиль секреции цитокинов и 4) воздействие на CD4 Т-клеток на других подмножеств клеток. Внутриклеточное окрашивание цитокинов (ICS) является очень полезным и широко используется проточной цитометрии на основе анализа, который используется для обнаружения продукцию цитокинов в клетках различных типов в обоих мышей и человека. Кроме того, было исследовано влияние антител блокады ингибирующих путей. В ICS анализов, секрецию цитокинов блокируется путем добавления брефельдин и / или монензин. Цитокины ловушке внутри клеток затем обнаружены с флуоресцентными антителами на полихроматическое проточной цитометрии. Продолжительность анализа обычно ограничивается 6 или 12 ч после антигенной стимуляции, так как оба брефелдин и Монензин, который обычно добавляют в течение 2 часов антиген того, являются токсичными к клеткам. ICS анализ является мощная техника, которая была полезна ян исследование влияния в естественных условиях введения блокировки вмешательства антител у мышей, где клетки были извлечены после определенного периода времени после воздействия антител 9. Тем не менее, есть несколько ограничений для применения этого экспериментального подхода для оценки влияния блокады ингибирующих рецепторов в образцах человека. При выполнении антител вмешательства ингибирующих путей в час стимуляции 6 или 12 в пробирке (обычно в случае с образцами человека), блокада ингибирующих рецепторы в большинстве случаев не изменяет частоту реагирования антиген-специфические Т-клетки, как измерить стандартными ICS анализов 6, 7. Измерения продукции в ячейке цитокинов по результатам теста средней или средней интенсивности флуоресценции дали противоречивые результаты 6, 7, 10. С другой стороны, когда ICS проводят при поздно момент времени после стимуляции (то есть шесть дней), изменения количества цитокинов, секретирующих слоктей можно наблюдать. Различия Совокупный эффект измененного пролиферации, выживания, и изменения в эффекторной функции, которые накапливаются в течение определенного периода времени 6. Один из способов частично преодолеть эти ограничения, чтобы инкубировать в течение более длительных периодов времени (например, 36 ч, 60 ч, и т.д..) С антигеном перед добавлением секреции цитокинов блокатор, не дожидаясь распространение произойти. Мы успешно использовали этот метод для определения кинетики секреции цитокинов ВИЧ-специфических CD4 и CD8 Т-клеток 11,12, однако, такой подход не в состоянии обнаружить небольшие ответов и не даст комплексный результат общая секреция цитокинов происходит так стимуляции. Таким образом, ICS не достаточно чувствительный метод для обнаружения воздействия блокады ингибирующих путей на количество цитокинов, продуцируемых активированными Т-клетками по сравнению с мРНК цитокинов количественного измерения или секреции цитокинов в supernatanт в тех же точках времени. Кроме того, большинство из цитокинов, продуцируемых активированными Т-клетками действовать в аутокринного моды, внося вклад в положительный или отрицательный обратной связи через взаимодействие с антиген-представляющих клеток. Таким образом, добавление брефельдин или монензин в ICS тесте предотвращает секрецию цитокинов и, таким образом, стимуляция Т-клеток не является оптимальным. Наконец, обнаружение нескольких цитокинов с ICS ограничена доступностью и чувствительностью антител для детекции цитокинов с проточной цитометрии, а также из-за ограниченности в количестве флуорохромов, которые могут быть использованы одновременно в любом данном панели. Мы разработали высокочувствительный в пробирке экспериментальный подход для оценки воздействия иммунорегуляторных путей в регуляции секреции цитокинов ВИЧ-специфических CD4 Т-клеток, а затем CD4 помощь антиген представляющих клеток (АПК) и естественных клеток-киллеров (NK-клетки). Этот метод также может быть использован для оценки ИТПМКТ блокады ингибирующих молекул на функции CD8 Т-клеток, разрушая лимфоциты CD4 от МНПК или путем стимулирования с оптимальными пептидов, которые признаны только CD8 Т-клеток. В отличие от внутриклеточного окрашивания цитокинов анализов, мы решили, чтобы не мешать секреции цитокинов ВИЧ-специфических Т-клеток CD4 для того, чтобы иметь возможность: 1) выполнить более точное количественное определение уровней цитокинов, производимых; 2) исследовать более широкий панель цитокинов или эффекторных молекул, и 3) оценить влияние цитокинов, произведенных ВИЧ-специфических CD4 Т-клеток на других подмножеств клеток. Мы стимулируют CD8 истощенных РВМС с ВИЧ-1 Gag пула пептидов в присутствии блокирующих антител для иммунорегуляторного пути интереса. По истечении заданного времени инкубации, обычно 48 часов, мы собираем супернатанты для измерения секрецию цитокинов с массивами бортовых и собирать ячейки гранул либо для фенотипического анализа различных подмножеств клеток или для транскрипции анализа. Следует отметить, что при Тего 48 раз час точка, мы не обнаружить значительное население пролиферирующих Т-клеток 12. Это гибкий подход и несколько адаптации этой конструкции могут быть применены для решения различных гипотез. Например, отдельные подмножества клеток (например, ВИЧ-специфических Т-клеток CD4 или PD-1 высоких CD4 Т-клеток и т.д.). Могут быть отсортированы после 12 ч инкубации до дальнейшей инкубации в течение 36 ч с последующим сбором и супернатантах клеточных осадков исследовать более конкретно воздействие мероприятий блокады на секрецию цитокинов, определенных субпопуляций МНПК.

<table border="1">
		<tbody>
		 <tr>
			<td>Name of Reagent/Material</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Hanks Balanced Salt Solution without Ca2+ or Mg2+</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H9394</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>R0883</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Histopaque-1077</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>10771</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Human Serum AB</td>
			<td>Gemini BioProducts</td>
			<td>100-512</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>30 001 CI</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>L-glutamine</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>25 005 CI</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>HEPES buffer</td>
			<td>Mediatech</td>
			<td>25060CI</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>FcR blocking reagent, human</td>
			<td>Miltenyi</td>
			<td>130-059-901</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>RosetteSep Human CD8+ Depletion Cocktail </td>
			<td>Stem Cell </td>
			<td>15663</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain Kit, for UV excitation</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>L23105</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Rneasy Mini Kit</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>74104</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Improm-II Reverse Transcription System</td>
			<td>Promega</td>
			<td>A3800</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Brilliant II SYBR qPCR Low Rox Master Mix</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>600830</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>BD Cytofix/Cytoperm Fixation/Permeabilization Solution Kit</td>
			<td>BD</td>
			<td>554714</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Tween-20</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>BP337100</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>IFN-&gamma; primer</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td></td>
			<td>FOR: CGAGATGACTTCGAAAAGCTGA REV: TCTTCGACCTCGAAACAGCA</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>GAPDH primer</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td></td>
			<td>FOR: TCATCATCTCTGCCCCCTCT REV: AGTGATGGCATGGACTGTGG</td>
		 </tr>
		</tbody>
 </table>

in vitro assay to evaluate the impact of immunoregulatory pathways on hiv-specific cd4 t cell effector function

Т-клеток истощение является основным фактором в неудачной возбудителя оформления во время хронических вирусных инфекций. Иммунорегуляторных пути, такие как PD-1 и IL-10, которые активируется после этого постоянного воздействия антигена и способствуют потере пролиферации, снижение цитолитического функции, и нарушение продукции цитокинов CD4 и CD8 Т-клеток. В мышиной модели инфекции LCMV, введение блокирующих антител против этих двух путей дополненной Т-клеточные реакции. Тем не менее, в настоящее время нет анализа в пробирке, чтобы измерить влияние такой блокады на секрецию цитокинов в клетках из образцов человека. Наш протокол и экспериментальный подход дает нам возможность точно и эффективно количественно восстановление продукции цитокинов по ВИЧ-специфических CD4 Т-клеток из ВИЧ-инфицированных субъектов. Здесь мы изображают экспериментальный дизайн в пробирке, который позволяет измерять секреции цитокинов ВИЧ-специфических CD4 Т-клеток и их влияние на другой челл подмножеств. CD8 T-клетки истощались из цельной крови и остальные РВМС выделяли с помощью метода разделения Ficoll. CD8 обедненного РВМС затем инкубировали с блокирующие антитела против PD-L1 и / или IL-10Rα и, после стимуляции ВИЧ-1 Gag пула пептидов, клетки инкубировали при 37 ° С, 5% СО 2. После 48 часов, супернатант собирали для анализа цитокинов бисера массивы и клеточные осадки собирали для любого фенотипического анализа с помощью проточной цитометрии или транскрипционный анализ с использованием Qrt-PCR. Для более детального анализа, различные клеточные популяции были получены путем селективного истощения подмножества из МНПК или путем сортировки с использованием проточной цитометрии, прежде чем оценивать в тех же анализов. Эти методы обеспечивают высокую чувствительность и специфичность подход для определения модуляцию продукции цитокинов на антиген-специфических Т-хелперов и для определения функциональных взаимодействий между различными популяций иммунных клеток.

При выполнении измерений цитокинов с помощью этой системы в пробирке, важно, чтобы иметь возможность различать антиген-специфические реакции по сравнению с без контроля стимуляции. В общем, мы рассмотрели положительные отзывы как любых значениях антигенной стимуляции, которые д?...

Watch this Scientific Journal Video about In Vitro Assay to Evaluate the Impact of Immunoregulatory Pathways on HIV-specific CD4 T Cell Effector Function at JoVE.com

In Vitro Assay to Evaluate the Impact of Immunoregulatory Pathways on HIV-specific CD4 T Cell Effector Function

Мы разработали анализ в пробирке, чтобы исследовать роль иммунорегуляторных путей в регуляции секреции цитокинов ВИЧ-специфических CD4 Т-клеток.

Анализ in vitro для оценки влияния иммунорегуляторных Пути на ВИЧ-специфических CD4 Т-клеток эффекторной функцией

T cell exhaustion is a major factor in failed pathogen clearance during chronic viral infections. Immunoregulatory pathways, such as PD-1 and IL-10, are ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

In Vitro Assay to Evaluate the Impact of Immunoregulatory Pathways on HIV-specific CD4 T Cell Effector Function

Retroviral Transduction of T-cell Receptors in Mouse T-cells

Ретровирусные трансдукция Т-клеточных рецепторов в мышь Т-клеток

T-cell receptors (TCRs) play a central role in the immune system. TCRs on T-cell surfaces can specifically recognize peptide antigens presented by antigen ...

Isolation and Th17 Differentiation of Na&iuml;ve CD4 T Lymphocytes

Isolation and Th17 Differentiation of NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve CD4 T Lymphocytes

Выделение и Th17 дифференцировки наивных CD4 Т-лимфоцитов

Th17 cells are a distinct subset of T cells that have been found to produce interleukin 17 (IL-17), and differ in function from the other T cell subsets ...

Investigating the Effects of Probiotics on Pneumococcal Colonization Using an In Vitro Adherence Assay

Investigating the Effects of Probiotics on Pneumococcal Colonization Using an In Vitro Adherence Assay

Исследование действия пробиотиков на пневмококковой колонизации Использование<em&gt; Экстракорпоральное</em&gt; Соблюдение Анализ

Adherence of Streptococcus pneumoniae (the pneumococcus) to the epithelial lining of the nasopharynx can result in colonization and is considered a ...

Transplantation of Tail Skin to Study Allogeneic CD4 T Cell Responses in Mice

Трансплантация кожи хвоста изучать Аллогенная лимфоцитов CD4 ответов у мышей

The study of T cell responses and their consequences during allo-antigen recognition requires a model that enables one to distinguish between donor and ...

Image-based Flow Cytometry Technique to Evaluate Changes in Granulocyte Function In Vitro

Image-based Flow Cytometry Technique to Evaluate Changes in Granulocyte Function In Vitro

Изображение на основе проточной цитометрии Методика оценки изменений в Гранулоцита функции<em&gt; In Vitro</em

Granulocytes play a key role in the body&#8217;s innate immune response to bacterial and viral infections. While methods exist to measure granulocyte ...

Induction of Murine Intestinal Inflammation by Adoptive Transfer of Effector CD4+CD45RBhigh T Cells into Immunodeficient Mice

Induction of Murine Intestinal Inflammation by Adoptive Transfer of Effector CD4+CD45RBhigh T Cells into Immunodeficient Mice

Индукционная мышиных воспаление кишечника с помощью приемных передачи эффекторных CD4<sup&gt; +</sup&gt; CD45RB<sup&gt; Высокая</sup&gt; Т-клеток в иммунодефицитных мышей

There are many different animal models available for studying the pathogenesis of human inflammatory bowel diseases (IBD), each with its own advantages ...

Mouse Na&#239;ve CD4+ T Cell Isolation and In vitro Differentiation into T Cell Subsets

Mouse NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve CD4+ T Cell Isolation and In vitro Differentiation into T Cell Subsets

Мышь наивного CD4<sup&gt; +</sup&gt; Т-клеток Выделение и<em&gt; В пробирке</em&gt; Дифференциация в Т-клеточных подмножеств

Antigen inexperienced (na&#239;ve) CD4+ T cells undergo expansion and differentiation to effector subsets at the time of T cell receptor (TCR) recognition ...

Application of Long-term cultured Interferon-&#947; Enzyme-linked Immunospot Assay for Assessing Effector and Memory T Cell Responses in Cattle

Application of Long-term cultured Interferon-ÃƒÅ½Ã‚Â³ Enzyme-linked Immunospot Assay for Assessing Effector and Memory T Cell Responses in Cattle

Применение Долгосрочный культивируют Интерферон-γ фермент-связанного Immunospot анализе для оценки эффекторных и памяти T-клеточные ответы у крупного рогатого скота

Effector and memory T cells are generated through developmental programing of na&#239;ve cells following antigen recognition. If the infection is ...

Imaging CD4 T Cell Interstitial Migration in the Inflamed Dermis

Воображение CD4 Т-клеток Внутритканевая миграции в воспаленном дермы

The ability of CD4 T cells to carry out effector functions is dependent upon the rapid and efficient migration of these cells in inflamed peripheral ...

An In Vitro Model of the Blood-brain Barrier Using Impedance Spectroscopy: A Focus on T Cell-endothelial Cell Interaction

An In Vitro Model of the Blood-brain Barrier Using Impedance Spectroscopy: A Focus on T Cell-endothelial Cell Interaction

<em&gt; In Vitro</em&gt; Модель гематоэнцефалического барьера Использование импедансной спектроскопии: основноевнимание- Т-клеток-эндотелиальной клеточное взаимодействие

Breakdown of the blood-brain barrier (BBB) is a critical step in the development of autoimmune diseases such as multiple sclerosis (MS) and its animal ...