Name: in vitro coculture assay to assess pathogen induced neutrophil trans-epithelial migration
Uploaded: 2014-01-06T15:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In vitro Coculture Assay to Assess Pathogen Induced Neutrophil Trans-epithelial Migration at JoVE.com

وقد تم دعم هذا العمل ماليا من قبل المعاهد القومية للصحة (1 R01 AI095338-01A1).

يجب تنفيذ الخطوات (1-3) في بيئة معقمة تحت غطاء تدفق صفح. 
1. كولاجين طلاء Transwells
<ol><li>جعل محلول الكولاجين 30 ميكروغرام / مل. تمييع 3 ملغ / مل مخزون الكولاجين 1:100 في الإيثانول 60٪ التي تم تمريرها من خلال وحدة تصفية 0.2 ميكرومتر.</li>
	<li>دوامة المخفف 30 ميكروغرام / مل الحل. ملاحظة: ليس من ...

هجرة العدلات عبر الأسطح الظهارية المخاطية هي سمة شائعة في أمراض الأمراض بعد العدوى بمسببات الأمراض البكتيرية3. تقدم المنهجية الموصوفة هنا نهجا سريعا ومباشرا لعزل هذا الحدث المنفصل تجريبيا باستخدام خلية بشرية مشتقة من نظام الفحص المشترك في المختبر الذي يقدم نماذج لميزة العملي?...

السطوح المخاطية بمثابة حواجز مادية ومناعية توفر الحماية من التهديدات الخارجية المنتشرة في البيئة1،2. يمكن اختراق هذا الحاجز الظهاري الواقي عندما تغزو الكائنات المسببة للأمراض2. في حالة الممرض البكتيري ، غالبا ما يحرض هذا اللقاء على عملية التهابية عن طريق تنشيط الجهاز المناعي الفطري مما يؤدي إلى تعبئة سريعة للخلايا الحبيبية المستجيبة الأولى المعروفة باسم العدلات2-4. يتم إنتاج عوامل العلاج الكيميائي التي تسهل تجنيد العدلات جزئيا من قبل الخلايا الظهارية المخاطية التي تسعى لتخليص المضيف من الممرض المخالف2-4. يمكن أن يسبب تسلل العدلات المفرط أو غير المحسوم للسطح الظهاري المخاطي أمراضا كبيرة1،5. هذا هو نتيجة لتلف الأنسجة غير محددة الناجمة عن ترسانة العدلات المضادة للبكتيريا5-7. في مثل هذه الحالات ، تطغى قدرة إزالة البكتيريا من العدلات من خلال تدمير الأنسجة المضيفة أثناء الإهانة المعدية.  يمكن أن يؤدي تعطيل وظيفة الحاجز الظهاري الواقي إلى تعزيز تعرض الأنسجة الأساسية للكائنات الحية الدقيقة و / أو السموم ، مما يزيد من تفاقم أمراض الأمراض8،9. ويمكن ملاحظة هذه العواقب في أجهزة متعددة بما في ذلك الرئة والجهاز الهضمي1,5. وعلاوة على ذلك ، تتميز الحالات الالتهابية غير المعدية مثل نوبات الربو الشديدة ومرض الانسداد الرئوي المزمن (COPD) ومتلازمة الضائقة التنفسية الحادة (ARDS) ومرض التهاب الأمعاء (IBD) بالاختراق المرضي للحاجز الظهاري المخاطي من خلال استجابة العدلاتالمفرطة 4،5،10-12.
عملية معقدة من تجنيد العدلات بعد العدوى المخاطية ينطوي على عدة خطوات مجزأة1,5,13,14. أولا، العدلات يجب أن تخرج عن الدورة الدموية عن طريق سلسلة من التفاعلات بين الخلايا التي تسهل الهجرة عبر البطانية1،13. العدلات المقبل التنقل الفضاء الخلالي القائمة التي تحتوي على مصفوفة خارج الخلية1,14. للوصول إلى تجويف الغشاء المخاطي المصاب ، يجب أن تهاجر العدلات عبر الحاجز الظهاري1،4،5. وغالبا ما يتم التحقيق في هذه الظاهرة متعددة الخطوات المعقدة في المجموع باستخدام نماذج حيوانية في الجسم الحي للعدوى15. هذه النماذج مفيدة لتحديد ضرورة وجود عوامل محددة، مثل chemokines، جزيئات التصاق، أو مسارات الإشارات التي تشارك في العملية الشاملة ولكنها غير كافية إلى حد كبير لحل المساهمات الجزيئية الحاسمة لكل خطوة مجزأة متميزة16. وقد شارك في زراعة نظم المختبر النمذجة عبر البطانية، عبر مصفوفة، أو الهجرة عبر الظهارية من العدلات مفيدة بشكل خاص في هذا الصدد1،14،16،17.
وقد تم تطوير نظام قوي للثنايا المشتركة للتحقق من شفرة الآليات المسؤولة عن الهجرة عبر الظهارية العدلات استجابة للعدوى المسببة للأمراض18-22. هذا النموذج ينطوي على إصابة السطح apical من طبقات الخلايا الظهارية البشرية المستقطبة مع مسببات الأمراض البكتيرية تليها تطبيق العدلات البشرية المعزولة حديثا على سطح basolateral18-22. تهاجر العدلات عبر الحاجز الظهاري استجابة للمنتجات الكيميائية المشتقة من الظهارية التي تفرز بعد العدوى المسببة للأمراض18،21-23. وقد تم استخدام هذا النظام النموذجي باستخدام الثقافات الظهارية المعوية والرئة المعرضة لمسببات الأمراض البكتيرية المناسبة الأنسجة محددة وكشف النقاب عن آليات جزيئية جديدة من المرجح أن تكون مهمة لعملية تجنيد العدلات خلال العدوى المخاطية3,8,19,24-28. قوة هذا النموذج في المختبر الزراعة المشتركة هو أن النهج الاختزالي تمكن المحقق من التلاعب تجريبيا الممرض، حاجز الظهارية، و / أو العدلات في نظام تسيطر عليها بشكل جيد، استنساخ عالية، وغير مكلفة إلى حد ما. يمكن الاستفادة من البصيرة التي تم جمعها من هذا النهج بشكل فعال لإجراء تحليل مركز للأحداث المجزأة أثناء توظيف العدلات باستخدام نماذج عدوى الجسم الحي 22,29,30.
توضح هذه المقالة الخطوات المتعددة اللازمة لنجاح إنشاء هذا النموذج القابل للاستنساخ لاستكشاف الهجرة العدلية الناجمة عن مسببات الأمراض عبر الظهارية. وترد الحواجز الظهارية الرئة المصابة بمسببات الأمراض Pseudomonas aeruginosa في هذه المقالة; ومع ذلك، يمكن استبدال الظهارة الأنسجة الأخرى ومسببات الأمراض مع تعديلات طفيفة. البذر وزراعة طبقات الخلايا الظهارية الرئة المستقطبة على الكولاجين المقلوب المغلفة مرشحات عبرويل نفاذية مفصلة هنا، كما هو نمو المسببة للأمراض P. aeruginosa وعزل العدلات من الدم كله. يتم تقديم كيفية دمج هذه المكونات لمراقبة الهجرة الناجمة عن مسببات الأمراض العدلات عبر الظهارية جنبا إلى جنب مع الضوابط الإيجابية والسلبية المناسبة لإنشاء المقايسة القابلة للاستنساخ. وتناقش براعة هذا النهج لدراسة مختلف جوانب الهجرة العدلية الناجمة عن مسببات الأمراض عبر الظهارية مع الإشارة إلى دراسات محددة في الأدبيات.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1470">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">NCl-H292 cells</td>
			<td style="width:147px;">ATCC</td>
			<td style="width:137px;">CRL-1848</td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">RPMI-1640 medium</td>
			<td style="width:147px;">ATCC</td>
			<td style="width:137px;">30-2001</td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Pseudomonas aeruginosa PAO1</td>
			<td style="width:147px;">ATCC</td>
			<td style="width:137px;">#47085</td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Escherichia coli MC1000</td>
			<td style="width:147px;">ATCC</td>
			<td style="width:137px;">#39531</td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">D-PBS (1x) liquid</td>
			<td style="width:147px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:137px;">14190-144</td>
			<td style="width:667px;">without calcium and magnesium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Heat Inactivated Fetal bovine serum</td>
			<td style="width:147px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:137px;">10082-147</td>
			<td style="width:667px;">10% added to culture medium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Penicillin-Streptomycin</td>
			<td style="width:147px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:137px;">15140-122</td>
			<td style="width:667px;">100x: 10,000 units of penicillin and 10,000 &#181;g of streptomycin per ml.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Trypsin-EDTA (0.05%)</td>
			<td style="width:147px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:137px;">25300-062</td>
			<td style="width:667px;">50 ml aliquots are stored frozen at -20 &#186;C.&#160; Aliquot in use can be stored at 4 &#186;C short-term.&#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Hank&#39;s Balanced Salt Solution - HBSS(-)</td>
			<td style="width:147px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:137px;">14175-079</td>
			<td style="width:667px;">Sterile, without calcium and magnesium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Trypan Blue Solution</td>
			<td style="width:147px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:137px;">15250-061.</td>
			<td style="width:667px;">Stock = 0.4%</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Collagen, Rat Tail</td>
			<td style="width:147px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:137px;">A10483-01</td>
			<td style="width:667px;">Can also be isolated in the laboratory directly from the tails of rats using standard protocols</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Citric acid</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">C1909-500G</td>
			<td style="width:667px;">Component of 1 M citrate buffer and acid citrate dextrose (ACD) solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Sodium Citrate</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">S4641-500G</td>
			<td style="width:667px;">Component of 1 M citrate buffer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Dextrose anhydrous</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">D8066-250G</td>
			<td style="width:667px;">Component of acid citrate dextrose (ACD) solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Ammonium Chloride</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">213330-500G</td>
			<td style="width:667px;">Component of red blood cell (RBC) lysis buffer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Sodium bicarbonate</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">S6014-500G</td>
			<td style="width:667px;">Component of red blood cell (RBC) lysis buffer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">EDTA</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">ED-100G</td>
			<td style="width:667px;">Component of red blood cell (RBC) lysis buffer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">HBSS(+) powder</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">H1387-10L</td>
			<td style="width:667px;">Key component of HBSS+</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">HEPES</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">H3375-500G</td>
			<td style="width:667px;">Component of HBSS+</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Sigmacote</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">SL2-25ML</td>
			<td style="width:667px;">Follow vendor instructions to coat glass pipette tips</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Triton X-100</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">T-9284</td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">2,2&#39;-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt (ABTS)</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">A9941-50TAB</td>
			<td style="width:667px;">Key component of ABTS substrate solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">30% Hydrogen Peroxide Solution</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">H1009-100ML</td>
			<td style="width:667px;">Component of ABTS substrate solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">N-Formyl-Met-Leu-Phe (fMLP or fMLF)</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">F-3506</td>
			<td style="width:667px;">A Stock solution of 10 mM in DMSO should be prepared and aliquots stored at -20 &#186;C.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Gelatin Type B</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:137px;">M-12026</td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Pseudomonas isolation agar&#160;</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:137px;">DF0927-17-1</td>
			<td style="width:667px;">Follow manufacturer&#8217;s instructions to make PIA plates</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Ficoll-Paque PLUS&#160;</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:137px;">45-001-749</td>
			<td style="width:667px;">Optional, can improve neutrophil purity</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;"></td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td style="width:137px;"></td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;"></td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td style="width:137px;"></td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;"></td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td style="width:137px;"></td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;"></td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td style="width:137px;"></td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;"></td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td style="width:137px;"></td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Name of Material / Equipment</td>
			<td style="width:147px;">Company</td>
			<td style="width:137px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:667px;">Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">24-well migration plate</td>
			<td style="width:147px;">Corning Incorporated</td>
			<td style="width:137px;">#3524</td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">24-well wash plate</td>
			<td style="width:147px;">Falcon</td>
			<td style="width:137px;">35-1147</td>
			<td style="width:667px;">Can be reused if soaked in 70% ethanol and washed thoroughly prior to reuse</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">96-well plate</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:137px;">#12565501</td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:520px;">Transwell Permeable Supports&#160;</td>
			<td style="width:147px;">Corning Incorporated</td>
			<td style="width:137px;">#3415</td>
			<td style="width:667px;">Polycarbonate; Diameter: 6.5 mm; Growth area: 0.33 cm2; Dish style: 24-well plate; Pore size: 3.0 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Petri dish</td>
			<td style="width:147px;">Falcon</td>
			<td style="width:137px;">35-1013</td>
			<td style="width:667px;">Each Petri dish holds 24 inverted 0.33 cm2 Transwells.&#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">500 ml 0.2 &#956;m filter / flask</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:137px;">09-740-25A</td>
			<td style="width:667px;">To sterilize acid citrate dextrose (ACD) solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">5-3/4 in glass Pasteur pipette</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:137px;">13-678-20A</td>
			<td style="width:667px;">Coat tips with Sigmacote prior to use</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Hemostat</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:137px;">13-812-14</td>
			<td style="width:667px;">Curved, Serrated</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Invertoskop Inverted Microscope</td>
			<td style="width:147px;">Zeiss</td>
			<td style="width:137px;">#342222</td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Versa-Max Microplate Reader</td>
			<td style="width:147px;">Molecular Devices</td>
			<td style="width:137px;">#432789</td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vitro coculture assay to assess pathogen induced neutrophil trans-epithelial migration

الأسطح المخاطية بمثابة حواجز واقية ضد الكائنات المسببة للأمراض. يتم تنشيط الاستجابات المناعية الفطرية عند استشعار مسببات الأمراض مما يؤدي إلى تسلل الأنسجة مع الخلايا الالتهابية المهاجرة ، في المقام الأول العدلات. هذه العملية لديها القدرة على أن تكون مدمرة للأنسجة إذا كانت مفرطة أو عقدت في حالة لم تحل.  ويمكن استخدام النماذج المستنبطة في المختبر لدراسة الآليات الجزيئية الفريدة المشاركة في الهجرة العدلية الناجمة عن مسببات الأمراض عبر الظهارية. يوفر هذا النوع من النماذج براعة في التصميم التجريبي مع فرصة للتلاعب الخاضع للرقابة من مسببات الأمراض، حاجز الظهارية، أو العدلات. العدوى المسببة للأمراض من السطح apical من monolayers الظهارية المستقطبة نمت على مرشحات عبرويل نفاذية يحرض القاعدية ذات الصلة من الناحية الفسيولوجية لهجرة apical عبر الظهارية من العدلات المطبقة على السطح القاعدي. يوضح النموذج المختبري الموصوف هنا الخطوات المتعددة اللازمة لإثبات هجرة العدلات عبر طبقة أحادية ظهارية رئوية مستقطبة أصيبت بمسببات الأمراض P. aeruginosa (PAO1). يوصف بذر وزراعة الحيوانات المتحولة التي يمكن اختراقها بخلايا ظهارية رئوية مشتقة من الإنسان ، إلى جانب عزل العدلات من الدم البشري الكامل وزراعة PAO1 وK12 E. coli غير المسببة للأمراض (MC1000).  وتظهر عملية الهجرة والتحليل الكمي للنيوتروفيل المهاجر بنجاح والتي تمت تعبئتها استجابة للعدوى المسببة للأمراض ببيانات تمثيلية، بما في ذلك الضوابط الإيجابية والسلبية. يمكن معالجة هذا النظام النموذجي في المختبر وتطبيقه على الأسطح المخاطية الأخرى. يمكن أن تكون الاستجابات الالتهابية التي تنطوي على تسلل العدلات المفرط مدمرة للأنسجة المضيفة ويمكن أن تحدث في غياب العدوى المسببة للأمراض. إن الفهم الأفضل للآليات الجزيئية التي تعزز الهجرة عبر الظهارية العدلية من خلال التلاعب التجريبي بنظام الفحص المشترك في المختبر الموصوف هنا لديه إمكانات كبيرة لتحديد أهداف علاجية جديدة لمجموعة من الأمراض المعدية المخاطية وكذلك الالتهابات.

وقد أظهرت العديد من الدراسات أن الطبقات الظهارية المصابة بمسببات الأمراض تسهل الهجرة عبر الظهارية العدلية3,8,19,24-28,31,32. يحدث هذا عن طريق تحريض ممرض محدد لتدرج كيموتاتاتيك مشتق من الخلايا الظهارية3,23. على سبيل المثال، المسببة للأمراض P. aeruginosa التفاعل مع السطح apical من خلايا الظ?...

Watch this Scientific Journal Video about In vitro Coculture Assay to Assess Pathogen Induced Neutrophil Trans-epithelial Migration at JoVE.com

In vitro Coculture Assay to Assess Pathogen Induced Neutrophil Trans-epithelial Migration

في المختبر المقايسة المشتركة لتقييم الهجرة العدلية المستحثة المسببة للأمراض عبر الظهارية

الهجرة عبر الظهارية العدلات استجابة للعدوى البكتيرية المخاطية يساهم في الإصابة الظهارية والأمراض السريرية. وقد تم تطوير نموذج في المختبر يجمع بين مسببات الأمراض، والعدلات البشرية، وطبقات الخلايا الظهارية البشرية المستقطبة التي تزرع على مرشحات عبرويل لتسهيل التحقيقات نحو كشف الآليات الجزيئية التي تنسق هذه الظاهرة.

Mucosal surfaces serve as protective barriers against pathogenic organisms.&#160;Innate immune responses are activated upon sensing pathogen leading to ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

In vitro Coculture Assay to Assess Pathogen Induced Neutrophil Trans-epithelial Migration

Assay for Pathogen-Associated Molecular Pattern (PAMP)-Triggered Immunity (PTI) in Plants

Assay for Pathogen-Associated Molecular Pattern PAMP-Triggered Immunity PTI in Plants

مقايسة لمسببات الأمراض ، المرتبطين نمط الجزيئية (PAMP) - الحفز الحصانة (كونا) في النباتات

To perceive potential pathogens in their environment, plants use pattern recognition receptors (PRRs) present on their plasma membranes. PRRs recognize ...

Tracking Neutrophil Intraluminal Crawling, Transendothelial Migration and Chemotaxis in Tissue by Intravital Video Microscopy

تتبع الزحف داخل اللمعة العدلات ، والهجرة والانجذاب الكيميائي Transendothelial في الأنسجة بواسطة الميكروسكوب فيديو Intravital

The recruitment of circulating leukocytes from blood stream to the inflamed tissue is a crucial and complex process of inflammation1,2. In the ...

Quantitative In vitro Assay to Measure Neutrophil Adhesion to Activated Primary Human Microvascular Endothelial Cells under Static Conditions

Quantitative In vitro Assay to Measure Neutrophil Adhesion to Activated Primary Human Microvascular Endothelial Cells under Static Conditions

كمي<em&gt; في المختبر</em&gt; الفحص لقياس التصاق العدلات إلى تنشيط الخلايا البطانية الاوعية الدموية الدقيقة الإنسان الأساسية بموجب الشروط ثابت

The vascular  endothelium plays an integral part in the inflammatory response. During the  acute phase of inflammation, endothelial cells (ECs) are ...

Quantitative Assessment of Human Neutrophil Migration Across a Cultured Bladder Epithelium

التقييم الكمي للهجرة العدلات الإنسان وعبر مثقف المثانة الظهارة

The recruitment of immune cells from the periphery to the site of inflammation is an essential step in the innate immune response at any mucosal surface. ...

Human Neutrophil Flow Chamber Adhesion Assay

غرفة تدفق العدلات الإنسان التصاق الفحص

Neutrophil firm adhesion to endothelial cells plays a critical role in inflammation in both health and disease. The process of neutrophil firm adhesion ...

Neutrophil Isolation and Analysis to Determine their Role in Lymphoma Cell Sensitivity to Therapeutic Agents

عزل وتحليل العدلة لتحديد ما دورها في الغدد اللمفاوية حساسية الخلية وكلاء العلاجية

Neutrophils are the most abundant (40% to 75%) type of white blood cells and among the first inflammatory cells to migrate towards the site of ...

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

رواية في المختبر الجرح المقايسة الشفاء لتقييم الهجرة الخلية

The aim of this work is to show a novel method to evaluate the ability of some immunomodulatory molecules, such as antimicrobial peptides (AMPs), to ...

Analysis of Shear Flow-induced Migration of Murine Marginal Zone B Cells In Vitro

تحليل القص الناجمة عن تدفق الهجرة من المنطقة الهامشية الفاري ب الخلايا في المختبر

Marginal zone B cells (MZBs) are a population of B cells that reside in the mouse splenic marginal zones that envelop follicles. To reach the follicles, ...

A High-throughput Assay to Assess and Quantify Neutrophil Extracellular Trap Formation

مقايسة الفائق تقييم وتقدير حجم تشكيل العَدلات فخ خارج الخلية

Neutrophil extracellular traps (NETs) are immunogenic extracellular DNA structures that can be released by neutrophils upon a wide variety of triggers. ...

Opsonophagocytic Killing Assay to Assess Immunological Responses Against Bacterial Pathogens

أوبسونوفاجوسيتيك قتل المقايسة لتقييم الاستجابات المناعية ضد مسببات الأمراض البكتيرية

A key aspect of the immune response to bacterial colonization of the host is phagocytosis. An opsonophagocytic killing assay (OPKA) is an experimental ...