Name: in vitro coculture assay to assess pathogen induced neutrophil trans-epithelial migration
Uploaded: 2014-01-06T15:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In vitro Coculture Assay to Assess Pathogen Induced Neutrophil Trans-epithelial Migration at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet økonomisk af NIH (1 R01 AI095338-01A1).

Trin (1-3) skal udføres i et sterilt miljø under en laminar flow hætte. 
1. Kollagen Coating Transwells
<ol><li>Lav en 30 μg/ml kollagenopløsning. 3 mg/ml kollagenbestand 1:100 fortyndes i 60% ethanol, der er passeret gennem en 0,2 μm filterenhed.</li>
	<li>Hvirvelfortyndet 30 μg/ml opløsning. Bemærk: Det er ikke nødvendigt at hvirvle 3 mg/ml kollagenbestandsopløsningen, da denne opløsning er ret tyktflydende, og der kan indføres luftbobler, hvilket potentielt reducerer...

Neutrofil migration på tværs af slimhinde epiteloverflader er et almindeligt træk i sygdomspatologi efter infektion med bakterielle patogener3. Den metode, der er beskrevet heri, tilbyder en hurtig, ligetil tilgang til eksperimentelt at isolere denne diskrete begivenhed ved hjælp af en menneskelig celle afledt in vitro coculture assay system, der modellerer et træk ved den inflammatoriske proces udløst af bakterielle infektioner. Dette system blev oprindeligt udviklet ved hjælp af polariserede ...

Slimhindeoverflader tjener som fysiske og immunologiske barrierer, der giver beskyttelse mod eksterne trusler, der er udbredt i miljøet1,2. Denne beskyttende epitelbarriere kan kompromitteres, når patogene organismer invaderer2. I tilfælde af et bakterielt patogen anstifter dette møde ofte en inflammatorisk proces ved at aktivere det medfødte immunsystem og udløse en hurtig mobilisering af førstehjælpere granulocytter kendt som neutrofiler2-4. Kemotaktiske midler, der letter neutrofil rekruttering, produceres delvis af slimhindeepitelecellerne, der søger at befri værten for det ulovlige patogen2-4. Overdreven eller uløst neutrofil infiltration af slimhindeepitelets overflade kan forårsage betydelig patologi1,5. Dette er en konsekvens af uspecifikke vævsskader forårsaget af antibakterielt neutrofilarsenal5-7. I sådanne tilfælde overskygges neutrofilers bakterielle clearancekapacitet af ødelæggelse af værtsvæv under en smitsom fornærmelse.  Forstyrrelse af den beskyttende epitelbarrierefunktion kan føre til øget eksponering af underliggende væv for mikroorganismer og/eller toksiner, hvilket yderligere forværrer sygdomspatologien8,9. Disse konsekvenser kan observeres i flere organsystemer, herunder lungerne og fordøjelseskanalen1,5. Desuden er ikke-infektiøse inflammatoriske tilstande som alvorlige anfald af astma, kronisk obstruktiv lungesygdom (KOL), akut respiratorisk nødsyndrom (ARDS) og inflammatorisk tarmsygdom (IBD) præget af det patologiske brud på slimhinde epitelbarrieren ved en overdreven neutrofil reaktion4,5,10-12.
Den komplekse proces med neutrofil rekruttering efter slimhindeinfektion involverer flere opdelte trin1,5,13,14. For det første skal neutrofiler afvige fra cirkulation via en række celle-til-celle-interaktioner, der letter trans-endotelmigration1,13. Neutrofiler navigerer derefter i eksisterende interstitiel plads, der indeholder ekstracellulær matrix1,14. For at nå lumen af den inficerede slimhinde skal neutrofiler derefter migrere over epitelbarrieren1,4,5. Dette indviklede multistep fænomen undersøges ofte samlet ved hjælp af in vivo dyremodeller af infektion15. Sådanne modeller er nyttige til at fastslå nødvendigheden af specifikke faktorer, såsom kemokiner, vedhæftningsmolekyler eller signalveje, der deltager i den samlede proces, men er stort set utilstrækkelige til at løse molekylære bidrag, der er kritiske for hvert særskilt opdelt trin16. Cocultured in vitro-systemer, der modellerer trans-endothelial, trans-matrix eller trans-epitelmigration af neutrofiler, har været særlig nyttige i denne henseende1.14,16,17.
Der er udviklet et robust cokulturanalysesystem med henblik på dechifrering af mekanismer, der er ansvarlige for neutrofil trans-epitelmigration som reaktion på patogen infektion18-22. Denne model indebærer at inficere den apikale overflade af polariserede menneskelige epitelcellelag med et bakterielt patogen efterfulgt af anvendelse af frisk isolerede menneskelige neutrofiler på basolateraloverfladen18-22. Neutrofiler migrerer over epitelbarrieren som reaktion på epitelbaserede kemotaktiske produkter, der udskilles efter patogen infektion18,21-23. Dette modelsystem er blevet anvendt ved hjælp af tarm- og lungeepitele kulturer, der er udsat for passende vævsspecifikke bakterielle patogener, og har afsløret nye molekylære mekanismer, der sandsynligvis er vigtige for den neutrofile rekrutteringsproces under slimhindeinfektion3,8,19,24-28. Styrken af denne in vitro coculture model er, at en reduktionistisk tilgang gør det muligt for investigator at eksperimentelt manipulere patogenet, epitelbarrieren og / eller neutrofil i et velkontrolleret, meget reproducerbart, ret billigt system. Indsigt indsamlet fra denne tilgang kan effektivt udnyttes til at gennemføre fokuseret analyse af opdelte begivenheder under neutrofil rekruttering ved hjælp af in vivo infektion modeller22,29,30.
Denne artikel viser de mange trin, der er nødvendige for en vellykket etablering af denne reproducerbare model for at udforske patogeninduceret neutrofil trans-epitelmigration. Lunge epitelbarrierer inficeret med patogenet Pseudomonas aeruginosa er omtalt i denne artikel; andre vævs epithelia og patogener kan dog erstattes med mindre ændringer. Såning og dyrkning af polariserede lunge epitelcellelag på omvendt kollagen belagt gennemtrængelig transwell filtre er beskrevet heri, som er væksten af patogene P. aeruginosa og isolering af neutrofiler fra fuldblod. Hvordan disse komponenter kombineres for at observere patogeninduceret neutrofil trans-epitelmigration præsenteres sammen med passende positive og negative kontroller for at etablere en reproducerbar analyse. Alsidigheden af denne tilgang til at undersøge forskellige aspekter af patogen induceret neutrofil trans-epitel migration diskuteres med henvisning til specifikke undersøgelser i litteraturen.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1470">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">NCl-H292 cells</td>
			<td style="width:147px;">ATCC</td>
			<td style="width:137px;">CRL-1848</td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">RPMI-1640 medium</td>
			<td style="width:147px;">ATCC</td>
			<td style="width:137px;">30-2001</td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Pseudomonas aeruginosa PAO1</td>
			<td style="width:147px;">ATCC</td>
			<td style="width:137px;">#47085</td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Escherichia coli MC1000</td>
			<td style="width:147px;">ATCC</td>
			<td style="width:137px;">#39531</td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">D-PBS (1x) liquid</td>
			<td style="width:147px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:137px;">14190-144</td>
			<td style="width:667px;">without calcium and magnesium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Heat Inactivated Fetal bovine serum</td>
			<td style="width:147px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:137px;">10082-147</td>
			<td style="width:667px;">10% added to culture medium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Penicillin-Streptomycin</td>
			<td style="width:147px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:137px;">15140-122</td>
			<td style="width:667px;">100x: 10,000 units of penicillin and 10,000 &#181;g of streptomycin per ml.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Trypsin-EDTA (0.05%)</td>
			<td style="width:147px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:137px;">25300-062</td>
			<td style="width:667px;">50 ml aliquots are stored frozen at -20 &#186;C.&#160; Aliquot in use can be stored at 4 &#186;C short-term.&#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Hank&#39;s Balanced Salt Solution - HBSS(-)</td>
			<td style="width:147px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:137px;">14175-079</td>
			<td style="width:667px;">Sterile, without calcium and magnesium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Trypan Blue Solution</td>
			<td style="width:147px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:137px;">15250-061.</td>
			<td style="width:667px;">Stock = 0.4%</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Collagen, Rat Tail</td>
			<td style="width:147px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:137px;">A10483-01</td>
			<td style="width:667px;">Can also be isolated in the laboratory directly from the tails of rats using standard protocols</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Citric acid</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">C1909-500G</td>
			<td style="width:667px;">Component of 1 M citrate buffer and acid citrate dextrose (ACD) solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Sodium Citrate</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">S4641-500G</td>
			<td style="width:667px;">Component of 1 M citrate buffer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Dextrose anhydrous</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">D8066-250G</td>
			<td style="width:667px;">Component of acid citrate dextrose (ACD) solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Ammonium Chloride</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">213330-500G</td>
			<td style="width:667px;">Component of red blood cell (RBC) lysis buffer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Sodium bicarbonate</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">S6014-500G</td>
			<td style="width:667px;">Component of red blood cell (RBC) lysis buffer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">EDTA</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">ED-100G</td>
			<td style="width:667px;">Component of red blood cell (RBC) lysis buffer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">HBSS(+) powder</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">H1387-10L</td>
			<td style="width:667px;">Key component of HBSS+</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">HEPES</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">H3375-500G</td>
			<td style="width:667px;">Component of HBSS+</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Sigmacote</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">SL2-25ML</td>
			<td style="width:667px;">Follow vendor instructions to coat glass pipette tips</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Triton X-100</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">T-9284</td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">2,2&#39;-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt (ABTS)</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">A9941-50TAB</td>
			<td style="width:667px;">Key component of ABTS substrate solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">30% Hydrogen Peroxide Solution</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">H1009-100ML</td>
			<td style="width:667px;">Component of ABTS substrate solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">N-Formyl-Met-Leu-Phe (fMLP or fMLF)</td>
			<td style="width:147px;">Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:137px;">F-3506</td>
			<td style="width:667px;">A Stock solution of 10 mM in DMSO should be prepared and aliquots stored at -20 &#186;C.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Gelatin Type B</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:137px;">M-12026</td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Pseudomonas isolation agar&#160;</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:137px;">DF0927-17-1</td>
			<td style="width:667px;">Follow manufacturer&#8217;s instructions to make PIA plates</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Ficoll-Paque PLUS&#160;</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:137px;">45-001-749</td>
			<td style="width:667px;">Optional, can improve neutrophil purity</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;"></td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td style="width:137px;"></td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;"></td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td style="width:137px;"></td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;"></td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td style="width:137px;"></td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;"></td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td style="width:137px;"></td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;"></td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td style="width:137px;"></td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Name of Material / Equipment</td>
			<td style="width:147px;">Company</td>
			<td style="width:137px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:667px;">Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">24-well migration plate</td>
			<td style="width:147px;">Corning Incorporated</td>
			<td style="width:137px;">#3524</td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">24-well wash plate</td>
			<td style="width:147px;">Falcon</td>
			<td style="width:137px;">35-1147</td>
			<td style="width:667px;">Can be reused if soaked in 70% ethanol and washed thoroughly prior to reuse</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">96-well plate</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:137px;">#12565501</td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:520px;">Transwell Permeable Supports&#160;</td>
			<td style="width:147px;">Corning Incorporated</td>
			<td style="width:137px;">#3415</td>
			<td style="width:667px;">Polycarbonate; Diameter: 6.5 mm; Growth area: 0.33 cm2; Dish style: 24-well plate; Pore size: 3.0 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Petri dish</td>
			<td style="width:147px;">Falcon</td>
			<td style="width:137px;">35-1013</td>
			<td style="width:667px;">Each Petri dish holds 24 inverted 0.33 cm2 Transwells.&#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">500 ml 0.2 &#956;m filter / flask</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:137px;">09-740-25A</td>
			<td style="width:667px;">To sterilize acid citrate dextrose (ACD) solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">5-3/4 in glass Pasteur pipette</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:137px;">13-678-20A</td>
			<td style="width:667px;">Coat tips with Sigmacote prior to use</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Hemostat</td>
			<td style="width:147px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:137px;">13-812-14</td>
			<td style="width:667px;">Curved, Serrated</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Invertoskop Inverted Microscope</td>
			<td style="width:147px;">Zeiss</td>
			<td style="width:137px;">#342222</td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:520px;">Versa-Max Microplate Reader</td>
			<td style="width:147px;">Molecular Devices</td>
			<td style="width:137px;">#432789</td>
			<td style="width:667px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vitro coculture assay to assess pathogen induced neutrophil trans-epithelial migration

Slimhindeoverflader tjener som beskyttende barrierer mod patogene organismer. Medfødte immunrespons aktiveres ved sensing patogen, der fører til infiltration af væv med migrerende inflammatoriske celler, primært neutrofiler. Denne proces har potentiale til at være ødelæggende for væv, hvis overdreven eller holdt i en uløst tilstand.  Cocultured in vitro modeller kan bruges til at studere de unikke molekylære mekanismer, der er involveret i patogen induceret neutrofil trans-epitel migration. Denne type model giver alsidighed i eksperimentelt design med mulighed for kontrolleret manipulation af patogenet, epitelbarrieren eller neutrofil. Patogen infektion af den apikale overflade af polariserede epitelmonolag, der dyrkes på gennemtrængelige transwellfiltre, anstifter fysiologisk relevant basolateral til apikale trans-epitelmigration af neutrofiler, der påføres basolateraloverfladen. Den in vitro-model, der er beskrevet heri, viser de mange trin, der er nødvendige for at demonstrere neutrofil migration på tværs af et polariseret lungeepitelemonolag, der er inficeret med patogen P. aeruginosa (PAO1). Såning og dyrkning af gennemtrængelige transwells med humane afledte lungeepitele celler er beskrevet sammen med isolering af neutrofiler fra fuldblod og dyrkning af PAO1 og nonpathogenic K12 E. coli (MC1000).  Emigrationsprocessen og den kvantitative analyse af migrerede neutrofiler, der er blevet mobiliseret som reaktion på patogen infektion, er vist med repræsentative data, herunder positive og negative kontroller. Dette in vitro-modelsystem kan manipuleres og påføres andre slimhindeoverflader. Inflammatoriske reaktioner, der involverer overdreven neutrofil infiltration, kan være ødelæggende for værtsvæv og kan forekomme i mangel af patogene infektioner. En bedre forståelse af de molekylære mekanismer, der fremmer neutrofil trans-epitelmigration gennem eksperimentel manipulation af det in vitro-cokultur assay-system, der er beskrevet heri, har et betydeligt potentiale til at identificere nye terapeutiske mål for en række mukosale infektiøse såvel som inflammatoriske sygdomme.

Flere undersøgelser har vist, at patogeninficerede epitellag letter neutrofil trans-epitelmigration3,8,19,24-28,31,32. Dette sker via en patogenspecifik induktion af en epitelcelleafledt neutrofil kemotaktisk gradient3,23. For eksempel forårsager patogen P. aeruginosa, der interagerer med lungeepitelecellernes apikale overflade, et betydeligt antal neutrofiler til at migrere over epitellaget18,22,25,26,33,34. Dette klinisk relevante analysesystem kan manipuleres på mange måde...

Watch this Scientific Journal Video about In vitro Coculture Assay to Assess Pathogen Induced Neutrophil Trans-epithelial Migration at JoVE.com

In vitro Coculture Assay to Assess Pathogen Induced Neutrophil Trans-epithelial Migration

In vitro Coculture Assay at vurdere Patogen induceret Neutrophil Trans-epitel Migration

Neutrofil trans-epitelmigration som reaktion på slimhindebakteriel infektion bidrager til epitelskader og kliniske sygdomme. En in vitro-model er blevet udviklet, der kombinerer patogen, humane neutrofiler og polariserede menneskelige epitelcellelag dyrket på transwellfiltre for at lette undersøgelser mod optrævling af de molekylære mekanismer, der orkestrerer dette fænomen.

Mucosal surfaces serve as protective barriers against pathogenic organisms.&#160;Innate immune responses are activated upon sensing pathogen leading to ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

In vitro Coculture Assay to Assess Pathogen Induced Neutrophil Trans-epithelial Migration

Assay for Pathogen-Associated Molecular Pattern (PAMP)-Triggered Immunity (PTI) in Plants

Assay for Pathogen-Associated Molecular Pattern PAMP-Triggered Immunity PTI in Plants

To perceive potential pathogens in their environment, plants use pattern recognition receptors (PRRs) present on their plasma membranes. PRRs recognize ...

Tracking Neutrophil Intraluminal Crawling, Transendothelial Migration and Chemotaxis in Tissue by Intravital Video Microscopy

The recruitment of circulating leukocytes from blood stream to the inflamed tissue is a crucial and complex process of inflammation1,2. In the ...

Quantitative In vitro Assay to Measure Neutrophil Adhesion to Activated Primary Human Microvascular Endothelial Cells under Static Conditions

Quantitative In vitro Assay to Measure Neutrophil Adhesion to Activated Primary Human Microvascular Endothelial Cells under Static Conditions

Kvantitative<em&gt; In vitro</em&gt; Assay til måling neutrofiladhæsion til Aktiverede primære humane mikrovaskulære endotelceller under statiske forhold

The vascular  endothelium plays an integral part in the inflammatory response. During the  acute phase of inflammation, endothelial cells (ECs) are ...

Quantitative Assessment of Human Neutrophil Migration Across a Cultured Bladder Epithelium

Kvantitativ vurdering af human neutrofil migration over en Kulturperler Blære epitel

The recruitment of immune cells from the periphery to the site of inflammation is an essential step in the innate immune response at any mucosal surface. ...

Human Neutrophil Flow Chamber Adhesion Assay

Human neutrofil strømningskammeret adhæsionsassay

Neutrophil firm adhesion to endothelial cells plays a critical role in inflammation in both health and disease. The process of neutrophil firm adhesion ...

Neutrophil Isolation and Analysis to Determine their Role in Lymphoma Cell Sensitivity to Therapeutic Agents

Neutrofil Isolering og analyse for at fastslå deres rolle i lymfom Cell Følsomhed til terapeutiske midler

Neutrophils are the most abundant (40% to 75%) type of white blood cells and among the first inflammatory cells to migrate towards the site of ...

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

En roman In Vitro sår Healing Assay for at evaluere celle Migration

The aim of this work is to show a novel method to evaluate the ability of some immunomodulatory molecules, such as antimicrobial peptides (AMPs), to ...

Analysis of Shear Flow-induced Migration of Murine Marginal Zone B Cells In Vitro

Analyse af Shear Flow-induceret Migration af Murine Marginal Zone B-celler In Vitro

Marginal zone B cells (MZBs) are a population of B cells that reside in the mouse splenic marginal zones that envelop follicles. To reach the follicles, ...

A High-throughput Assay to Assess and Quantify Neutrophil Extracellular Trap Formation

En høj overførselshastighed analyse til at vurdere og kvantificere neutrofile ekstracellulære fælde dannelse

Neutrophil extracellular traps (NETs) are immunogenic extracellular DNA structures that can be released by neutrophils upon a wide variety of triggers. ...

Opsonophagocytic Killing Assay to Assess Immunological Responses Against Bacterial Pathogens

Opsonophagocytic drab Assay at vurdere immunologiske reaktioner mod bakterielle patogener

A key aspect of the immune response to bacterial colonization of the host is phagocytosis. An opsonophagocytic killing assay (OPKA) is an experimental ...