Name: an experimental model to study tuberculosis-malaria coinfection upon natural transmission of mycobacterium tuberculosis and plasmodium berghei
Uploaded: 2014-02-17T21:00:00
Duration: 9 min 2 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Experimental Model to Study Tuberculosis-Malaria Coinfection upon Natural Transmission of Mycobacterium tuberculosis and Plasmodium berghei at JoVE.com

فإن الكتاب أود أن أشكر ميريام استر لتكاثر البعوض. وأيد هذا العمل عن طريق التمويل في المنزل من مركز أبحاث Borstel وانضم التمويل من قبل مركز العدوى لايبنتز.

<ol>
	<li>Mueller, A. -. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Natural+Transmission+of+Plasmodium+berghei+Exacerbates+Chronic+Tuberculosis+in+an+Experimental+Co-Infection+Model.">Natural Transmission of Plasmodium berghei Exacerbates Chronic Tuberculosis in an Experimental Co-Infection Model.</a> PLoS ONE. 7, e48110 (2012).</li><li>Korbel, D. S., Schneider, B. E., Schaible, U. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Innate+immunity+in+tuberculosis:+myths+and+truth.">Innate immunity in tuberculosis: myths and truth.</a> Microbes Infect. 10, 995-1004 (2008).</li><li>Aly, A. S., Vaughan, A. M., Kappe, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malaria+parasite+development+in+the+mosquito+and+infection+of+the+mammalian+host.">Malaria parasite development in the mosquito and infection of the mammalian host.</a> Annu. Rev. Microbiol. 63, 195-221 (2009).</li><li>Cirimotich, C. M., Dong, Y., Garver, L. S., Sim, S., Dimopoulos, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mosquito+immune+defenses+against+Plasmodium+infection.">Mosquito immune defenses against Plasmodium infection.</a> Dev. Compar. Immuno. 34, 387-395 (2010).</li><li>Page, K. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mycobacterium-induced+potentiation+of+type+1+immune+responses+and+protection+against+malaria+are+host+specific.">Mycobacterium-induced potentiation of type 1 immune responses and protection against malaria are host specific.</a> Infect. Immun. 73, 8369-8380 (2005).</li><li>Hawkes, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malaria+exacerbates+experimental+mycobacterial+infection+in+vitro+and+in+vivo.">Malaria exacerbates experimental mycobacterial infection in vitro and in vivo.</a> Microbes Infect. 12, 864-874 (2010).</li><li>Scott, C. P., Kumar, N., Bishai, W. R., Manabe, Y. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Short+report:+modulation+of+Mycobacterium+tuberculosis+infection+by+Plasmodium+in+the+murine+model.">Short report: modulation of Mycobacterium tuberculosis infection by Plasmodium in the murine model.</a> Am. J. Trop. Med. Hyg. 70, 144-148 (2004).</li><li>Hoffman, S. L., Doolan, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Malaria+vaccines-targeting+infected+hepatocytes.">Malaria vaccines-targeting infected hepatocytes.</a> Nat. Med. 6, 1218-1219 (2000).</li><li>Mueller, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetically+attenuated+Plasmodium+berghei+liver+stages+persist+and+elicit+sterile+protection+primarily+via+CD8+T+cells.">Genetically attenuated Plasmodium berghei liver stages persist and elicit sterile protection primarily via CD8 T cells.</a> Am. J. Pathol. 171, 107-115 (2007).</li><li>Mueller, A. K., Labaied, M., Kappe, S. H., Matuschewski, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetically+modified+Plasmodium+parasites+as+a+protective+experimental+malaria+vaccine.">Genetically modified Plasmodium parasites as a protective experimental malaria vaccine.</a> Nature. 433, 164-167 (2005).</li><li>Nussenzweig, R. S., Vanderberg, J., Most, H., Orton, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+immunity+produced+by+the+injection+of+x-irradiated+sporozoites+of+plasmodium+berghei.">Protective immunity produced by the injection of x-irradiated sporozoites of plasmodium berghei.</a> Nature. 216, 160-162 (1967).</li><li>Vaughan, J. A., Scheller, L. F., Wirtz, R. A., Azad, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infectivity+of+Plasmodium+berghei+sporozoites+delivered+by+intravenous+inoculation+versus+mosquito+bite:+implications+for+sporozoite+vaccine+trials.">Infectivity of Plasmodium berghei sporozoites delivered by intravenous inoculation versus mosquito bite: implications for sporozoite vaccine trials.</a> Infect. Immun. 67, 4285-4289 (1999).</li><li>Coleman, J., Juhn, J., James, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissection+of+midgut+and+salivary+glands+from+Ae.+aegypti+mosquitoes.">Dissection of midgut and salivary glands from Ae. aegypti mosquitoes.</a> J. Vis. Exp. , e228 (2007).</li><li>Franke-Fayard, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Plasmodium+berghei+reference+line+that+constitutively+expresses+GFP+at+a+high+level+throughout+the+complete+life+cycle.">A Plasmodium berghei reference line that constitutively expresses GFP at a high level throughout the complete life cycle.</a> Mol. Biochem. Parasitol. 137, 23-33 (2004).</li><li>Lin, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loss-of-function+analyses+defines+vital+and+redundant+functions+of+the+Plasmodium+rhomboid+protease+family.">Loss-of-function analyses defines vital and redundant functions of the Plasmodium rhomboid protease family.</a> Mol. Microbiol. 88, 318-338 (2013).</li><li>Bancroft, J. D. G., M, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Theory and Practice of Histological Techniques. , (2007).</li><li>Schneider, B. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+role+for+IL-18+in+protective+immunity+against+Mycobacterium+tuberculosis.">A role for IL-18 in protective immunity against Mycobacterium tuberculosis.</a> Eur. J. Immunol. 40, 396-405 (2010).</li><li>Craig, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+animal+models+for+research+on+severe+malaria.">The role of animal models for research on severe malaria.</a> PLoS Pathog. 8, e1002401 (2012).</li><li>de Souza, J. B., Hafalla, J. C., Riley, E. M., Couper, K. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+malaria:+why+experimental+murine+models+are+required+to+understand+the+pathogenesis+of+disease.">Cerebral malaria: why experimental murine models are required to understand the pathogenesis of disease.</a> Parasitology. 137, 755-772 (2010).</li><li>Van den Steen, P. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunopathology+and+dexamethasone+therapy+in+a+new+model+for+malaria-associated+acute+respiratory+distress+syndrome.">Immunopathology and dexamethasone therapy in a new model for malaria-associated acute respiratory distress syndrome.</a> Am. J. Respir. Crit. Care Med. 181, 957-968 (2010).</li></ol>

والكتاب ليس لديهم ما يكشف.

وصفنا كيف الفئران يمكن أن يصاب مثمر مع المواضيع المتميزة وP. berghei عبر الطرق الطبيعية للعدوى. نطبق تأسيس بروتوكولات عدوى السل إلى دراسة تجريبية 13 أو 12 الملاريا والتي اعتمدت مؤخرا لدراسة لهم عدوى مرافقة بين المواضيع المتميزة والمتصورة في نموذج الفأر 1. الخطوات الأكثر أهمية بالنسبة لالتهابات الناجحة هي انتقال مسببات الأمراض سواء على الأرقام المطلوبة. يجب أن لا تكون الأسهم المتفطرات مضى عليها أكثر من 2 سنوات لأنها سوف تفقد جدوى مع مرور الوقت، وسوف عيار مصممة أصلا للأسهم على الأرجح لن تكون دقيقة. ونتيجة لذلك، فإن الجرعات العدوى تكون أقل بكثير مما كان متوقعا. لذلك، ينبغي تحديد التتر كفو الثقافات الأسهم كل بضعة أشهر. نفس القدر من الأهمية هو زراعة موحدة وجيل من الأسهم المواضيع المتميزة في المقام الأول. ظروف مثل الثقافةالمتوسطة، وملاحق، والوقت، وحجم يجب أن تكون موحدة لكي تكون قادرا على مقارنة البيانات من التجارب باستخدام مخزونات مختلفة من المواضيع المتميزة. المتفطرات تميل إلى تتجمع خلال الثقافة، وبالتالي فإنه من المهم للحفاظ على ظروف ثقافة موحدة، والبكتيريا الحصاد في مرحلة النمو نفسه و resuspend في كثير من الأحيان خلال aliquoting. خلاف ذلك يمكن أن يكون هناك تباين واسع في التتر كفو ونتيجة العدوى. توليد دفعات البعوض المصابة متجانس هو خطوة حاسمة أخرى. منذ البعوض المختلفة وتتغذى على كل فأر الفردية، من المهم أن جميع من البعوض تستخدم لعدوى التجربة واحدة تأتي من نفس الدفعة والتي تستخدم فقط تلك دفعات حيث يصاب أكثر من 90٪ من البعوض. النموذج الحالي يمكن استخدامها لتشريح الاستجابات المناعية والتحويرات المناعي في مجموعة المصابون عن طريق مقارنتها إلى الاستجابات المناعية في المضيفين المصابة واحد. يمكننا تطبيق فامنهجيات rious زارة راسخة مثل الأنسجة، المناعية، تحليل الخلوي من السكان الخلايا المناعية، أو PCR وELISA للخلوى وكشف chemokine للأنسجة أو سوائل جسم من الفائدة. تجدر الإشارة إلى أن مثل هذه النماذج الماوس على قيود معينة. في حين أن الغالبية العظمى من المصابين MTB تطوير عدوى كامنة مع عدم وجود علامات لهذه الأعراض السريرية والفئران تطوير مرض مزمن مع التدريجي أمراض الرئة. لا يزال، C57BL / 6 الفئران هي مقاومة نسبيا للإصابة MTB ولا تطوير حبيبية الكلاسيكية كما لوحظ في مرضى السل الإنسان. ونتيجة لذلك، وردود الفعل immunopathological في الماوس لا تعكس ولا مرض السل الكامنة الإنسان ولا نشطة بشكل مناسب. على الرغم من التباين بين المرض الكامنة والمزمنة في الإنسان والفأر، وقد استخدمت على نطاق واسع الفئران لتحديد ودراسة العوامل المضيفة التي تتحكم العدوى المواضيع المتميزة وأدوات قيمة والتي لا غنى عنها للتحقيقالاستجابات المناعية في الأمراض المعدية. الأهم من ذلك، القابلية للإصابة MTB اختلافا كبيرا بين السلالات الفطرية الماوس استخداما وسلالات أكثر عرضة مثل DBA أو C3H يمكن تضمينها في الدراسات وشارك في العدوى واحد. علاوة على ذلك، وبصرف النظر عن الأنواع الممرض الموصوفة هنا، يمكن أن تستخدم أي نوع من الأنواع المتفطرة الأخرى ذات الاهتمام (على سبيل المثال العزلات السريرية). وبالمثل، في حين يعيد يوجد نموذج واحد الملاريا جميع جوانب المرض الإنسان نماذج الماوس مختلفة لا تشبه جوانب مختلفة من عدوى الملاريا البشرية المكتسبة بشكل طبيعي. على سبيل المثال، P. berghei أنكا وP. ودرس yoelii YM/17XL على نطاق واسع من النماذج البشرية (المتصورة المنجلية التي يسببها) الملاريا الحادة، مع P. berghei أنكا التي تعتبر نموذجا ممتازا للإنسان malari الدماغي و 14،15. P. berghei NK65 هو نموذج ممتاز لhyperparasitaemia وفقر الدم الحاد الملاريا، وقد تم مؤخراوصفها بأنها نموذج تجريبي لمتلازمة المرتبطة بالملاريا الحادة الضائقة التنفسية (MA-ARDS 16). باستخدام نموذج عدوى مرافقة وصفها، ويمكن أن تظهر في الآونة الأخيرة أن المتزامنة P. عدوى berghei NK65 تفاقم السل المزمن 1. وبصرف النظر عن استخدام مختلف الطفيليات القوارض والملاريا، ويمكن تكييفها ترتيب وتوقيت الأحداث العدوى اعتمادا على سؤال البحث الأساسي. في هذا المجال، وقد تكون العدوى المصاحبة المتصورة في الوقت الحاضر من العدوى المكتسبة MTB أو في وقت لاحق. في كل من السيناريوهات قد تتأثر الاستجابات المناعية لMTB والمتصورة بشكل مختلف. وبالتالي، يمكن أن تصاب الفئران مع sporozoites المتصورة إما قبل أو بعد الإصابة MTB. علاوة على ذلك، يمكن الطعن الفئران في أوقات مختلفة إصابة آخر المواضيع المتميزة لتقييم أثر الاستجابة المناعية التي يسببها المتصورة على الحادة مقابل المزمنةالسل. الأهم من ذلك، عند اختيار طفيلي الملاريا لدراسة عدوى مرافقة الملاريا والسل، وينبغي للمرء أن يكون على علم بأن بعض سلالات الملاريا القوارض تسبب المرض الحاد في بعض سلالات الفئران والاستسلام للإصابة خلال أيام أو أسابيع فقط في حين MTB يسبب التهابات مزمنة وطويلة الأمد في مناعيا الفئران. وبالتالي، توقيت عدوى مرافقة أمر بالغ الأهمية من أجل تجنب الوفاة المبكرة من حيوانات التجارب. يبقى التشكيل الحصانة المضيف عن طريق العدوى المتزامنة مع الأنواع الممرض متعددة غير مفهومة. توفر لدينا نموذج عدوى مرافقة التجريبية أداة قوية لتحقيق المتفطرة - التفاعل المتصورة مع الجهاز المناعي للمضيف المصابون وسوف تسهم في فهمنا كيف يمكن أن تؤثر coinfections المرضية، نتيجة المرض، والتطعيم، والمناعي، والعلاج.

نادرا ما يتعرض البشر لالممرض واحد فقط. ولا سيما في المناطق التي يرتفع فيها عدد الإصابات مثل أفريقيا جنوب الصحراء الكبرى، coinfections تمثل مشكلة صحية عامة ولكن رئيس بالتقدير للغاية. والسل، والملاريا هي الالتهابات البكتيرية والطفيلية الأكثر انتشارا في البشر، على التوالي وما زالت الأسباب الرئيسية للمراضة والوفيات في السكان الفقراء في المناطق المدارية. على الرغم من تداخل جغرافي واسع بين السل والملاريا وعدد كبير من الأفراد المعرضين لخطر عدوى مرافقة، والقليل جدا هو المعروف عن التفاعلات بين مختلف وغالبا مواجهة المنظمين والمستجيبات المناعي أثارت في وقت واحد ضد طفيليات الملاريا والعصيات السلية في الأفراد المصابون. نماذج القوارض من الإصابات المختلطة تسمح تميز الفرق التفاعلات المناعية ضد مسببات الأمراض متميزة في مضيف واحد، وبالتالي تسليط الضوء على influ المتبادلةبسبب الخلافات تحوير علم الأمراض والنتائج السريرية للمرض الفردية، والتي سوف تساعد أيضا على تحديد توصيات جديدة لعلاج والوقاية. أنشأنا نموذج الفأر التجريبية التي تمكننا من تحقيق في تداعيات الناجمة عن العدوى المتزامنة مع المتفطرة السلية (MTB) وأنواع القوارض المتصورة ضمن نفس المضيف 1. الأهم من ذلك، لمحاكاة الإصابات البشرية المكتسبة بشكل طبيعي قدر الإمكان، نموذجنا تنفذ الطرق الطبيعية للعدوى يستخدمها كل من مسببات الأمراض. السل هو عدوى المحمولة جوا، وبالتالي الذي يظهر أساسا في الرئتين. العامل المسبب، تبث MTB من قبل أشخاص يعانون من مرض نشطة عبر الطريق الهباء الجوي عندما طرد قطرات المعدية أثناء السعال أو العطس. وهكذا، والعدوى الهباء الجوي هو الأسلوب المفضل لتقليد العدوى الطبيعية. لا يمكن أن يتحقق جيل من الجسيمات العالقة في الهواء التي تحتوي على MTB عن طريق استخدامنظام التعرض للاستنشاق. هذا كله غرفة تعرض الجسم يسمح تعريض حيوانات التجارب لMTB التي تحتوي على قطرات المعدية (الشكل 1) والتي يتم استنشاقها إلى الحويصلات الهوائية في الرئتين حيث يبدأ المرض 2. الملاريا من ناحية أخرى هي الأمراض المنقولة بالنواقل الناجمة عن الأوالي، apicomplexan طفيلي المتصورة التي تبث بشكل طبيعي عن طريق لدغة أنثى البعوض أنوفيلي. خلال وجبة الدم، تترسب sporozoites المعدية تحت الجلد وتصل في وقت لاحق المضيف الكبد عن طريق مجرى الدم. داخل خلايا الكبد أن تتطور وتتكاثر بسرعة في schizonts مرحلة الكبد. في نهاية المطاف، schizonts ناضجة تمزق والافراج عن الآلاف من الإمراض merozoites الجيل الأول في مجرى الدم حيث بدء دورة التدريجي للغزو الخلية الحمراء، والنسخ، وتمزق الخلايا الحمراء، والاجتياح 3. في دورة حياة المتصورة continUES لبعض merozoites تتطور إلى مراحل الطفيلي الجنسي، من الذكور والإناث gametocytes، والتي يمكن تناولها عن طريق البعوض خلال وجبات الدم. في البعوض، sporozoites المتصورة تطوير داخل بيض التوكسوبلازما المقيمين في المعي المتوسط ​​البعوض ويهاجر في نهاية المطاف إلى الغدد اللعابية لإحالتها إلى 3،4 مضيف آخر. بينما في النماذج الحيوانية التجريبية تسليم MTB عبر الأيروسول والطريق وبالتالي الأكثر أهمية هو شائع جدا، وقد أجريت العديد من الدراسات العدوى القوارض المتصورة بما في ذلك الدراسات التجريبية على عدوى مرافقة الملاريا السل 5-7 خارج عن طريق إصابة الفئران مع الكريات الحمراء مطفول، مما أدى لعدوى الملاريا مرحلة الدم مع استبعاد مرحلة مرحلة الكبد سريريا الصامتة. ومع ذلك، فإن المرحلة الكبد هو خطوة إلزامية خلال العدوى وذات الصلة لمكافحة الحصانة متصوري 8-11. لذا نعتبر أنه من المهم أن تشمل فتاه كبديبورصة عمان من انتقال الملاريا والصيانة في دراسات كل من الملاريا وعدوى مرافقة الملاريا السل، على التوالي. بالإضافة إلى ذلك، فقد تبين أن تنتقل بشكل طبيعي sporozoites هي أكثر من تلك المعدية التي تنتقل عن طريق العدوى إبرة 12، والتي دفعتنا إلى تأسيس عدوى الملاريا من قبل لدغة البعوض بدلا من حقن معزولة الغدة اللعابية sporozoites مشتقة. الطريقة الوحيدة للحصول على البعوض المعدية للانتقال الطبيعية من طفيليات الملاريا هو الحفاظ على دورة الحياة الكاملة للطفيل في كل من الفقاريات المضيف (هنا الماوس) والبعوض الناقل للمرض. وبالتالي، الوصول إلى معمل الحشرات للصيانة الطفيلي أمر لا مفر منه من أجل أداء الإرسال الطبيعية عن طريق لدغة. وقد وضعت لدينا بروتوكول الموصوفة هنا لمعرفة كيف عدوى مرافقة مع المتصورة sporozoites التأثيرات على السل المزمن 1. للقيام بذلك، يصاب الفئران الهباء الجوي مع م. السل و4في وقت لاحق 0 يوم، عندما M. وصلت عدوى السل المرحلة المزمنة، ويتعرض الفئران لبعوض الملاريا المعدية. يمكن اتباعها نتائج كل من الملاريا والسل في الحيوانات المصابون من خلال رصد الطفيل في الدم والحمل البكتيري في الأنسجة، على التوالي. في بروتوكول لدينا، فإننا سوف تصف بالتفصيل كيفية تصيب الفئران مع كل مسببات الأمراض من طريق العدوى الطبيعية، وكيف لتأكيد انتقال الممرض ناجحة. في أيدينا، وحققت معدل الإصابة عادة لكلا الالتهابات التجريبية هو 100٪. ويمكن تطبيق هذه البروتوكولات لدراسة كل على حدة أو الالتهابات، كما نفعل، لنموذج ودراسة عدوى مرافقة بين اثنين من الأمراض المعدية الأكثر تحديا الإنسان. هذا النموذج ينطبق على الأنواع المتفطرة والقوارض المتصورة أخرى خارجة عن تلك الموصوفة في هذا البروتوكول.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="650">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="105">
			<td height="105" style="height:105px;width:216px;">Buraton</td>
			<td style="width:124px;">Sch&#252;lke</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:191px;">active ingredients: aldehyds (formaldehyde, glutaraldehyde, oxalaldehyde, ethyl hexanal)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Middlebrook 7H9&#160;</td>
			<td style="width:124px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">M0178</td>
			<td style="width:191px;">For Mtb broth cultures</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Middlebrook 7H11&#160;</td>
			<td style="width:124px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:119px;">283810</td>
			<td style="width:191px;">Agar medium for Mtb culture</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Middlebrook OADC enrichment medium</td>
			<td style="width:124px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:119px;">212240</td>
			<td style="width:191px;">Add to 7H9 and 7H11 for Mtb culture</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Staining Dish</td>
			<td style="width:124px;">Science Services</td>
			<td style="width:119px;">E62542-12</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">24-Slide Holder w/Handle</td>
			<td style="width:124px;">Science Services</td>
			<td style="width:119px;">E62543-06</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Giemsas Azur-Eosin-Methylene blue solution</td>
			<td style="width:124px;">Merck Millipore</td>
			<td style="width:119px;">109204</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Wright&#180;s stain</td>
			<td style="width:124px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">W0625</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Inhalation Exposure System</td>
			<td style="width:124px;">Glas-Col</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Nebulizer-Venturi</td>
			<td style="width:124px;">Glas-Col</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Ice cream cups</td>
			<td style="width:124px;">H&#228;agen-Dazs</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:191px;">Used as mosquito cages</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Metal-frame mosquito cages</td>
			<td style="width:124px;">BioQuip Products</td>
			<td style="width:119px;">1450A</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an experimental model to study tuberculosis-malaria coinfection upon natural transmission of mycobacterium tuberculosis and plasmodium berghei

Coinfections تحدث بشكل طبيعي بسبب التداخل الجغرافي للأنواع متميزة من الكائنات الحية المسببة للأمراض. العدوى المتزامنة على الأرجح تعدل الاستجابة المناعية منها إلى كل الممرض واحد، وبالتالي قد تؤثر المرضية ونتائج المرض. المرضى المصابون قد تستجيب بشكل مختلف أيضا للتدخلات المضادة للعدوى. لم يدرس عدوى مرافقة بين السل الناجم عن المتفطرات وطفيل الملاريا المتصورة، وكلاهما coendemic في أجزاء كثيرة من أفريقيا جنوب الصحراء الكبرى، بالتفصيل. من أجل الاقتراب من التحدي ولكن علميا وسريريا مسألة ذات أهمية كبيرة كيف عدوى مرافقة الملاريا السل تعدل الحصانة المضيفة وبالطبع من كل مرض، أنشأنا نموذجا الماوس التجريبية التي تسمح لنا لتشريح الاستجابات المناعية أثارت لكلا مسببات الأمراض في البلد المضيف المصابون . من المذكرة، من أجل تقليد الأكثر تحديدا الإصابات البشرية المكتسبة بشكل طبيعي، ونحن أداء التجريبيةالعدوى من الفئران مع كل مسببات الأمراض من خلال مساراتها الطبيعية للعدوى، أي الهباء الجوي ودغة البعوض، على التوالي.

إصابة الفئران مع المواضيع المتميزة وP. berghei عبر الطريق الطبيعي، أي الهباء الجوي ودغة البعوض، على التوالي، في نتائج متسقة وقابلة للتكرار العدوى لجميع الحيوانات (الجدول 1) 1. يمكننا رصد العدوى ناجحة وبالطبع كل من الملاريا والسل من خلال تحديد وقوع الأولي (سبقة الظهور) وعدد من الطفيليات في الدم (P. berghei الطفيل) وعبء المواضيع المتميزة في مختلف الأجهزة، على التوالي. ويرد مثال على نجاح انتقال طفيل الملاريا عن طريق لدغ البعوض المعدية في الجدول (1) والشكل (3). أدت التغذية من 10 البعوض المصابة حيوان بوغي على كل الماوس في معدل الإصابة بنسبة 100٪ على نحو ما أكده وجود الطفيليات مرحلة الدم 4-5 أيام في وقت لاحق (الجدول 1 والشكل 3A). الأهم من ذلك، نجد أعداد الطفيل مماثلة في دم الفئران الفردية من نفس غرام التجريبيةموعة، مشيرا إلى أن انتقال حيوان بوغي بالنتائج دغة بعوضة في عدوى متسقة وقابلة للتكرار. بمقارنة سبقة الظهور في السيطرة على الفئران السذاجة مع أنه في الحيوانات MTB-المصابون، يمكننا أن نرى أن يتم تأخير سبقة الظهور بشكل طفيف في الفئران التي تم preinfected مع MTB (الجدول 1، الشكل 3B) 1. ونحن قد ذكرت سابقا 1، يمكننا تحديد أثر MTB عدوى مرافقة على مسار الملاريا بحلول الطفيل الرصد اليومي في مسحات الدم بالغيمزا الملطخة كما هو مبين في الشكل 3B. إصابة الفئران مع MTB عن طريق استخدام أحد نتائج التعرض للاستنشاق في نظام ترسب ناجحة من البكتيريا في الرئتين مع تقلب منخفض نسبيا بين الفئران الفردية (الشكل 4A). يمكننا متابعة الأحمال الفطرية في الرئتين والأعضاء الأخرى من الفائدة مع مرور الوقت عن طريق تقرير كفو. مثال لتحميل الفطرية في رئاتإصابة المواضيع المتميزة C57BL / 6 الفئران في غياب أو وجود P. ويظهر في الشكل 4B berghei. الجدول 1. سبقة الظهور بعد انتقال حيوان بوغي بواسطة لدغة البعوض. جميع الفئران وضعت العدوى المرحلة الدم بعد انتقال طبيعي للP. berghei sporozoites بواسطة لدغة البعوض. مقتبس من 1 بلوس وان، 7 (10)، e48110 بإذن. <table border="1" cellpadding="0" cellspacing="0" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> مجموعة الماوس التجريبية (C57BL / 6) </td><td> تحدي بنسبة 10 دغات البعوض المعدية </td><td> عدد مرحلة الدم الحيوانات إيجابية / عدد الحيوانات لكل مجموعة </td><td> يعني سبقة الظهور [د] </td></tr><tr><td> السذاجة </td><td> P. berghei </td><td> 7/7 </td><td> 4،4 </td></tr><tr><td> المواضيع المتميزة المصابين </td><td> P. berghei </td><td> 7/7 </td><td> 5،5 </t<html> د&gt; </tr></tbody></table><img alt="الشكل 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50829/50829fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50829/50829fig1.jpg" /> الشكل 1. . يتعرض الخطة الشاملة للإجراءات التجريبية C57BL / 6 الفئران لMTB التي تحتوي على قطرات في غرفة الهباء الجوي غلاس كولونيل. بعد يوم واحد العدوى الهباء الجوي، يتم التحقق من امتصاص المواضيع المتميزة من خلال تحليل كفو في الرئة. بعد 40 يوما MTB التحدي (عندما أصبح السل المزمن في الفئران المصابة)، تتعرض الحيوانات لP. إصابة berghei البعوض. لتأكيد انتقال حيوان بوغي ناجحة ومتابعة مسار عدوى المتصورة، ويتم رصد الطفيل في مسحات الدم اليومية بالغيمزا الملطخة اعتبارا من 3 أيام بعد لدغة البعوض. / files/ftp_upload/50829/50829fig2highres.jpg &quot;سرك =&quot; / files/ftp_upload/50829/50829fig2.jpg &quot;/&gt; الشكل 2. رسم من قفص البعوض. ترد البعوض المعدية داخل الكرتون مثل نصف باينت الآيس كريم الكرتون. يتم قطع فتحة صغيرة في جانب من الكرتون ومغطاة بطبقة مزدوجة من اللاتكس مع فتحة قطع في كل قطعة لإنشاء مدخل آمن للبعوض. وسجلت قطعة من ورق الترشيح على الجزء السفلي من داخل الكرتون لامتصاص القطرات. يتم إغلاق أكواب الآيس كريم قبالة مع المعاوضة (شبكة النايلون) الذي هو ثابت للكرتون بواسطة شريط وشريط مطاطي. <img alt="الرقم 3" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50829/50829fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50829/50829fig3.jpg" /> الرقم 3. الطفيل في الدم. A) مثال لرايت سيصدره اللطاخة الدموية الملون تظهر الكريات الحمراء مطفول (شريط مقياس، 20 &amp; #تم رصد م) B) الطفيل في الدم عن طريق تحليل الماوس اليومية مسحات الدم ملطخة بالغيمزا؛ 181. الفئران المصابون لديهم انخفاض الطفيل مقارنة مع الفئران المصابة المتصورة واحد (ن = 10)، وتظهر النتائج على النحو يعني ± SD؛ *** ف &lt;0،001. طبع من 1 بلوس وان، 7 (10)، e48110 بإذن. <img alt="الرقم 4" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50829/50829fig4highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50829/50829fig4.jpg" /> الشكل 4. الكشف عن MTB في الرئة. وقد تم الطعن C57BL / 6 الفئران الهباء الجوي مع 100 كفو من المواضيع المتميزة وبعد 40 يوما، المصابون P. berghei بواسطة لدغة البعوض. A) بعد يوم واحد من عدوى الهباء الجوي تم التحقق من امتصاص العدد المطلوب من المواضيع المتميزة من قبل الطلاء الخليط الرئة كله من أجل تقرير CFU. ب) البكتيرياتم تحديد لتر الأحمال في وقت عدوى مرافقة في الرئة لست] من 3 الفئران عن طريق تحليل كفو (MTB d40/d0). بعد 12 يوما عدوى مرافقة، كانت مطلية لست] الرئة لتحليل كفو لتحديد تأثير المتصورة عدوى مرافقة على السيطرة MTB. نلاحظ، أن أعدادا المواضيع المتميزة في الرئتين زادت خلال عدوى مرافقة مع P. berghei NK65. وضع العلامات المحور السيني: الوقت بعد MTB -infection/time بعد عدوى مرافقة. مقتبس من 1 بلوس وان، 7 (10)، e48110 بإذن.

Watch this Scientific Journal Video about An Experimental Model to Study Tuberculosis-Malaria Coinfection upon Natural Transmission of Mycobacterium tuberculosis and Plasmodium berghei at JoVE.com

An Experimental Model to Study Tuberculosis-Malaria Coinfection upon Natural Transmission of Mycobacterium tuberculosis and Plasmodium berghei

والسل، والملاريا وهما من الإصابات الأكثر انتشارا في البشر والأسباب الرئيسية للمراضة والوفيات في السكان الفقراء في المناطق المدارية. أنشأنا نظام نموذج تجريبي لدراسة نتائج عدوى مرافقة الملاريا والسل في الفئران بعد التحدي مع كل مسببات الأمراض عبر الطريق الطبيعية للعدوى.

نموذج تجريبي لدراسة الملاريا والسل عدوى مرافقة على انتقال الطبيعية السل المتفطرة و المتصورة berghei</i

Coinfections naturally occur due to the geographic overlap of distinct types of pathogenic organisms. Concurrent infections most likely modulate the ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

An Experimental Model to Study Tuberculosis-Malaria Coinfection upon Natural Transmission of Mycobacterium tuberculosis and Plasmodium berghei

Sample Preparation of Mycobacterium tuberculosis Extracts for Nuclear Magnetic Resonance Metabolomic Studies

Sample Preparation of Mycobacterium tuberculosis Extracts for Nuclear Magnetic Resonance Metabolomic Studies

تحضير العينة من<em&gt; المتفطرة السلية</em&gt; خلاصات لدراسات النووية المغناطيسي الرنين Metabolomic

Mycobacterium tuberculosis is a major cause of mortality in human beings on a global scale. The emergence of both multi- (MDR) and extensively-(XDR) ...

Growth of Mycobacterium tuberculosis Biofilms

Growth of Mycobacterium tuberculosis Biofilms

نمو المتفطرة السلية الأغشية الحيوية

Mycobacterium tuberculosis, the etiologic agent of human tuberculosis, has an extraordinary ability to survive against environmental stresses including ...

An In vitro Co-infection Model to Study Plasmodium falciparum-HIV-1 Interactions in Human Primary Monocyte-derived Immune Cells

An In vitro Co-infection Model to Study Plasmodium falciparum-HIV-1 Interactions in Human Primary Monocyte-derived Immune Cells

و<em&gt; في المختبر</em&gt; المشارك عدوى نموذج لدراسة<em&gt; المتصورة المنجلية</em&gt; HIV-1-التفاعلات في الإنسان خلايا الوحيدات المشتقة الابتدائية المناعي

Plasmodium falciparum, the causative agent  of the deadliest form of malaria, and human immunodeficiency virus type-1 (HIV-1) are among the most important ...

Isolation and Analysis of Brain-sequestered Leukocytes from Plasmodium berghei ANKA-infected Mice

Isolation and Analysis of Brain-sequestered Leukocytes from Plasmodium berghei ANKA-infected Mice

العزلة وتحليل الدماغ المعزول من الكريات البيضاء<em&gt; المتصورة berghei</em&gt; ANKA الفئران المصابة

We describe a method for isolation and  characterization of adherent inflammatory cells from brain blood vessels of P. berghei ANKA-infected mice. ...

Demonstrating a Multi-drug Resistant Mycobacterium tuberculosis Amplification Microarray

Demonstrating a Multi-drug Resistant Mycobacterium tuberculosis Amplification Microarray

مما يدل على متعدد المخدرات مقاومة<em&gt; السل المتفطرة</em&gt; التضخيم ميكروأري

Simplifying microarray workflow is a necessary first step for creating MDR-TB microarray-based diagnostics that can be routinely used in lower-resource ...

A Novel Microdissection Approach to Recovering Mycobacterium tuberculosis Specific Transcripts from Formalin Fixed Paraffin Embedded Lung Granulomas

A Novel Microdissection Approach to Recovering Mycobacterium tuberculosis Specific Transcripts from Formalin Fixed Paraffin Embedded Lung Granulomas

مقاربة الرواية تسليخ مجهري ليتعافى<em&gt; السل المتفطرة</em&gt; نصوص محددة من الفورمالين الثابتة جزءا لا يتجزأ من البارافين الرئة أورام حبيبية

Microdissection has been used for the examination of tissues at DNA, RNA, and protein levels for over a decade. Laser capture microscopy (LCM) is the most ...

A 3D Human Lung Tissue Model for Functional Studies on Mycobacterium tuberculosis Infection

A 3D Human Lung Tissue Model for Functional Studies on Mycobacterium tuberculosis Infection

نموذج الأنسجة 3D الرئة الإنسان للدراسات وظيفية على<em&gt; المتفطرة السلية</em&gt; العدوى

Tuberculosis (TB) still holds a major threat to the health of people worldwide, and there is a need for cost-efficient but reliable models to help us ...

System for Efficacy and Cytotoxicity Screening of Inhibitors Targeting Intracellular Mycobacterium tuberculosis

System for Efficacy and Cytotoxicity Screening of Inhibitors Targeting Intracellular Mycobacterium tuberculosis

نظام لفعالية والسمسة فحص مثبطات استهداف بين الخلايا<em&gt; المتفطرة السلية</em

Mycobacterium tuberculosis, the causative agent of tuberculosis (TB), is a leading cause of morbidity and mortality worldwide. With the increased spread ...

A High-throughput Compatible Assay to Evaluate Drug Efficacy against Macrophage Passaged Mycobacterium tuberculosis

A High-throughput Compatible Assay to Evaluate Drug Efficacy against Macrophage Passaged Mycobacterium tuberculosis

وإنتاجية عالية الفحص المدعم لتقييم فعالية الدواء ضد بلعم Passaged<em&gt; المتفطرة السلية</em

The early drug development process for anti-tuberculosis drugs is hindered by the inefficient translation of compounds with in vitro activity to ...

Imaging Mycobacterium tuberculosis in Mice with Reporter Enzyme Fluorescence

Imaging Mycobacterium tuberculosis in Mice with Reporter Enzyme Fluorescence

تصوير بكتريا السل في الفئران مع "مراسل إنزيم الأسفار"

Reporter enzyme fluorescence (REF) utilizes substrates that are specific for enzymes present in target organisms of interest for imaging or detection by ...