Name: an experimental model to study tuberculosis-malaria coinfection upon natural transmission of mycobacterium tuberculosis and plasmodium berghei
Uploaded: 2014-02-17T21:00:00
Duration: 9 min 2 s
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लेखकों मच्छर प्रजनन के लिए मरियम एस्टर धन्यवाद देना चाहूंगा. इस काम रिसर्च सेंटर Borstel से घर में धन के द्वारा समर्थित और लाइबनिट्स केंद्र संक्रमण से वित्त पोषण शामिल हो गया था.

<ol>
	<li>Mueller, A. -. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Natural+Transmission+of+Plasmodium+berghei+Exacerbates+Chronic+Tuberculosis+in+an+Experimental+Co-Infection+Model.">Natural Transmission of Plasmodium berghei Exacerbates Chronic Tuberculosis in an Experimental Co-Infection Model.</a> PLoS ONE. 7, e48110 (2012).</li><li>Korbel, D. S., Schneider, B. E., Schaible, U. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Innate+immunity+in+tuberculosis:+myths+and+truth.">Innate immunity in tuberculosis: myths and truth.</a> Microbes Infect. 10, 995-1004 (2008).</li><li>Aly, A. S., Vaughan, A. M., Kappe, S. 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लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है.

हम चूहों उत्पादकता एमटीबी और पी. से संक्रमित हो सकता है कि कैसे वर्णित संक्रमण के अपने प्राकृतिक मार्गों के माध्यम से berghei. हम प्रयोगात्मक तपेदिक 13 या मलेरिया के 12 अध्ययन करने के लिए संक्रमण प्रोटोकॉल स्थापित है और हाल ही में माउस मॉडल 1 में एमटीबी और प्लाज्मोडियम के बीच coinfection अध्ययन करने के लिए उन्हें अपनाया लागू होते हैं. सफल संक्रमण के लिए सबसे महत्वपूर्ण कदम वांछित संख्या में दोनों रोगजनकों का प्रसारण कर रहे हैं. वे समय के साथ व्यवहार्यता खो देंगे क्योंकि mycobacterial शेयरों में 2 साल से अधिक उम्र नहीं होना चाहिए, और शेयरों की मूल निर्धारित अनुमापांक सबसे अधिक संभावना अब नहीं सही हो जाएगा. नतीजतन, संक्रमण खुराक उम्मीद से काफी कम होगा. इसलिए, शेयर संस्कृतियों का CFU titers हर कुछ महीने निर्धारित किया जाना चाहिए. समान रूप से महत्वपूर्ण पहली जगह में मानकीकृत खेती और एमटीबी शेयरों की पीढ़ी है. जैसे संस्कृति की स्थितिमध्यम, पूरक, समय, और मात्रा एमटीबी की विभिन्न कंपनियों के शेयरों का उपयोग कर प्रयोगों से डेटा की तुलना करने में सक्षम होने के लिए तय की जानी चाहिए. माइक्रोबैक्टीरिया इसलिए यह फसल बैक्टीरिया एक ही विकास के चरण में, मानकीकृत संस्कृति की स्थिति रखने के लिए और aliquoting के दौरान अक्सर resuspend करने के लिए महत्वपूर्ण है, संस्कृति दौरान पेड़ों का झुरमुट के लिए करते हैं. अन्यथा CFU titers और संक्रमण के परिणाम में एक व्यापक बदलाव हो सकता है. एक ही ढंग से संक्रमित मच्छर बैचों की पीढ़ी में एक और महत्वपूर्ण कदम है. अलग मच्छरों प्रत्येक व्यक्ति माउस पर खिलाऊँगी के बाद से, यह एक संक्रमण प्रयोग के लिए इस्तेमाल मच्छरों के सभी एक ही बैच से आते हैं और मच्छरों की 90% से अधिक संक्रमित हैं जहां केवल उन बैचों उपयोग किया जाता है कि महत्वपूर्ण है. मौजूदा मॉडल ही संक्रमित मेजबान में प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के लिए यह तुलना द्वारा एक coinfected मेजबान में प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया और प्रतिरक्षा modulations काटना करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. हम VA लागू कर सकते हैंऐसे ऊतक विज्ञान, immunohistochemistry, प्रतिरक्षा सेल आबादी के cytometry विश्लेषण, या ब्याज के ऊतकों या शरीर के तरल पदार्थ को साइटोकाइन और केमोकाइन का पता लगाने के लिए पीसीआर और एलिसा के रूप में कुख्यात अच्छी तरह से स्थापित तरीके. यह इस तरह के माउस मॉडल कुछ सीमाएं हैं कि ध्यान दिया जाना चाहिए. एमटीबी से संक्रमित लोगों के बहुमत के नैदानिक ​​लक्षण के कोई संकेत नहीं के साथ एक अव्यक्त संक्रमण का विकास, जबकि चूहों प्रगतिशील फेफड़ों विकृति के साथ एक जीर्ण रोग का विकास. फिर भी, C57BL 6 / चूहों एमटीबी संक्रमण को अपेक्षाकृत प्रतिरोधी रहे हैं और मानव तपेदिक रोगियों में मनाया के रूप में शास्त्रीय granulomas विकसित नहीं है. नतीजतन, माउस में immunopathological प्रतिक्रियाओं उचित न तो अव्यक्त और न ही सक्रिय मानव तपेदिक की बीमारी को प्रतिबिंबित करते हैं. आदमी और माउस में अव्यक्त और पुरानी बीमारी के बीच विसंगति के बावजूद, चूहों बड़े पैमाने पर एमटीबी संक्रमण को नियंत्रित करने और जांच करने के लिए मूल्यवान और अपरिहार्य औजार हैं कि मेजबान कारकों की पहचान और अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया गया हैसंक्रामक रोगों में प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया. महत्वपूर्ण बात है, एमटीबी संक्रमण के लिए संवेदनशीलता अधिक इस्तेमाल किया जन्मजात माउस उपभेदों और ऐसे डीबीए या C3H के रूप में अधिक अतिसंवेदनशील तनाव के बीच काफी भिन्न सह और एकल संक्रमण के अध्ययन में शामिल किया जा सकता है. इसके अलावा, के अलावा यहाँ बताया रोगज़नक़ प्रजातियों से, ब्याज (जैसे चिकित्सीय आइसोलेट्स) के किसी अन्य माइकोबैक्टीरियम प्रजातियों का इस्तेमाल किया जा सकता है. कोई भी मलेरिया मॉडल मानव रोग अलग माउस मॉडल के सभी पहलुओं replicates, जबकि इसी तरह, बारीकी से स्वाभाविक रूप से प्राप्त कर लिया मानव मलेरिया संक्रमण के विभिन्न पहलुओं जैसे लगते है. उदाहरण के लिए, पी. berghei ANKA और पी. yoelii YM/17XL व्यापक रूप से पी. के साथ, मानव (पी. फाल्सीपेरम प्रेरित) गंभीर मलेरिया के मॉडल का अध्ययन कर रहे हैं berghei ANKA मानव मस्तिष्क malari है 14,15 के लिए एक शानदार मॉडल के रूप में माना जा रहा है. पी. berghei NK65 hyperparasitaemia और तीव्र मलेरिया एनीमिया के लिए एक शानदार मॉडल है, और हाल ही में किया गया हैमलेरिया से जुड़े तीव्र श्वसन संकट सिंड्रोम (एमए ARDS 16) के लिए एक प्रयोगात्मक मॉडल के रूप में वर्णित है. वर्णित coinfection मॉडल का उपयोग करना, हम हाल ही में दिखा सकता है कि समवर्ती पी. berghei NK65 संक्रमण जीर्ण तपेदिक 1 exacerbates. इसके अलावा अलग कृंतक मलेरिया परजीवी का उपयोग करने से, संक्रमण की घटनाओं का क्रम और समय अंतर्निहित अनुसंधान प्रश्न के आधार पर अनुकूलित किया जा सकता है. क्षेत्र में, सहवर्ती प्लाज्मोडियम संक्रमण एमटीबी संक्रमण के समय उपस्थित या बाद में प्राप्त किया जा सकता है. दोनों स्थितियों में एमटीबी और प्लाज्मोडियम के लिए प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया अलग ढंग से प्रभावित किया जा सकता है. इसलिए, चूहों से पहले या एमटीबी संक्रमण के बाद या तो प्लाज्मोडियम स्पोरोजोएट्स से संक्रमित हो सकते हैं. इसके अलावा, चूहों अलग अलग समय पर चुनौती दी जा सकती जीर्ण बनाम तीव्र पर प्लाज्मोडियम प्रेरित प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के प्रभाव का आकलन करने के लिए एमटीबी के बाद संक्रमणतपेदिक. मलेरिया तपेदिक coinfection के अध्ययन के लिए एक मलेरिया परजीवी का चयन करते समय महत्वपूर्ण बात है,, एक कुछ कृंतक प्लाज्मोडियम उपभेदों कुछ माउस उपभेदों में गंभीर बीमारी का कारण है और एमटीबी पुरानी और असुरक्षित में लंबे समय से स्थायी संक्रमण का कारण बनता है, जबकि केवल दिनों या हफ्तों के भीतर संक्रमण का शिकार पता होना चाहिए कि चूहों. इसलिए, coinfection के समय प्रायोगिक पशुओं की अकाल मृत्यु से बचने के लिए महत्वपूर्ण है. कई रोगज़नक़ प्रजातियों के साथ एक साथ संक्रमण से मेजबान उन्मुक्ति के मॉडुलन खराब समझ बनी हुई है. एक coinfected होस्ट की प्रतिरक्षा प्रणाली के साथ प्लाज्मोडियम बातचीत और coinfections रोगजनन, रोग परिणाम, टीकाकरण, immunodiagnostics, और चिकित्सा को प्रभावित कर सकते हैं कि कैसे हमारी समझ के लिए योगदान देगा - हमारी प्रयोगात्मक coinfection मॉडल माइकोबैक्टीरियम की जांच के लिए एक शक्तिशाली उपकरण प्रदान करता है.

मानव आबादी मुश्किल से ही केवल एक रोगज़नक़ के संपर्क में हैं. विशेष रूप से उप सहारा अफ्रीका के रूप में संक्रमण के उच्च घटना के साथ क्षेत्रों में, coinfections एक प्रमुख लेकिन अत्यधिक underappreciated सार्वजनिक स्वास्थ्य समस्या का प्रतिनिधित्व करते हैं. टीबी और मलेरिया क्रमशः मनुष्यों में सबसे अधिक प्रचलित जीवाणु और परजीवी के संक्रमण हैं और उष्णकटिबंधीय में गरीब आबादी में रुग्णता और मृत्यु दर के प्रमुख कारणों में बने हुए हैं. Coinfection के जोखिम में तपेदिक और मलेरिया और व्यक्तियों की एक बड़ी संख्या के बीच व्यापक भौगोलिक ओवरलैप के बावजूद, बहुत कम एक साथ coinfected व्यक्तियों में मलेरिया परजीवी और tubercle बेसिली के खिलाफ हासिल विभिन्न और अक्सर प्रतिकार प्रतिरक्षा नियामकों और effectors के बीच बातचीत के बारे में जाना जाता है. मिश्रित संक्रमण के कृंतक मॉडल इस प्रकार आपसी असर पर प्रकाश डालने वाली एक मेजबान में अलग रोगजनकों के खिलाफ अंतर प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं निस्र्पक की अनुमतियह भी उपचार और रोकथाम के लिए नई सिफारिशें की पहचान करने में मदद मिलेगी जो नियमन करने वाली विकृति और व्यक्तिगत रोग के नैदानिक ​​परिणाम, ences. हम एक ही मेजबान 1 भीतर माइकोबैक्टीरियम क्षयरोग (एमटीबी) के साथ समवर्ती संक्रमण की वजह से नतीजों और कृंतक प्लाज्मोडियम प्रजातियों की जांच करने के लिए सक्षम बनाता है, जो एक प्रयोगात्मक माउस मॉडल की स्थापना की है. महत्वपूर्ण बात है, यथासंभव स्वाभाविक रूप से प्राप्त कर लिया मानव संक्रमण का अनुकरण करने के लिए, हमारे मॉडल दोनों रोगजनकों द्वारा इस्तेमाल किया संक्रमण का प्राकृतिक मार्गों लागू करता है. क्षय रोग इसलिए मुख्य रूप से फेफड़ों में प्रकट होता है जो एक हवाई संक्रमण है. वे खांसने या छींकने के दौरान संक्रामक एयरोसोल बूंदों निष्कासित जब प्रेरणा का एजेंट, एमटीबी एयरोसोल ट्रेन के माध्यम से सक्रिय रोग के साथ लोगों के द्वारा फैलता है. इस प्रकार, एयरोसोल संक्रमण प्राकृतिक संक्रमण की नकल करने के लिए पसंद की विधि है. एमटीबी होते हैं कि हवाई कणों की पीढ़ी का उपयोग करके प्राप्त किया जा सकता हैएक साँस लेना जोखिम प्रणाली की. यह पूरे शरीर जोखिम कक्ष संक्रामक एयरोसोल बूंदों संक्रमण 2 शुरू की है जहां फेफड़ों के अलवियोली में साँस रहे हैं जो चित्रा (1) एमटीबी युक्त करने के लिए प्रायोगिक पशुओं को प्रकाश में लाने की अनुमति देता है. दूसरी ओर मलेरिया स्वाभाविक रूप से एक महिला Anopheline मच्छर के काटने से फैलता है कि प्रोटोजोआ, Apicomplexan परजीवी प्लाज्मोडियम की वजह से एक वेक्टर जनित रोग है. रक्त भोजन के दौरान संक्रामक बिजाणुज मेजबान त्वचा के नीचे जमा कर रहे हैं और बाद में रक्त प्रवाह के माध्यम से जिगर तक पहुँचने. Hepatocytes के भीतर ही वे विकास और तेजी से जिगर चरण schizonts में गुणा. आखिरकार, परिपक्व schizonts टूटना और वे लाल सेल आक्रमण, प्रतिकृति, लाल सेल टूटना, और reinvasion 3 के एक प्रगतिशील चक्र आरंभ जहां रक्त प्रवाह में रोगजनक पहली पीढ़ी खंडजाणु के हजारों जारी. प्लाज्मोडियम जीवन चक्र Continकुछ खंडजाणु रूप ues, यौन परजीवी चरणों में रक्त भोजन के दौरान मच्छरों द्वारा उठाया जा सकता है, जो पुरुष और महिला gametocytes, विकास. मच्छर में, प्लाज्मोडियम स्पोरोजोएट्स मच्छर आद्यमध्यांत्र में रहने oocysts के भीतर विकसित करने और अंत में एक और मेजबान 3,4 में आगे भेजने के लिए लार ग्रंथियों की ओर पलायन. प्रयोगात्मक पशु मॉडल में एयरोसोल और इस तरह सबसे अधिक प्रासंगिक मार्ग के माध्यम से एमटीबी की डिलीवरी बहुत आम है, वहीं मलेरिया तपेदिक coinfection 5-7 पर अध्ययन सहित कई प्रयोगात्मक कृंतक प्लाज्मोडियम संक्रमण पढ़ाई जन्म दे रही है, parasitized एरिथ्रोसाइट्स के साथ चूहों से संक्रमण से बाहर किया गया है चिकित्सकीय चुप जिगर चरण चरण को छोड़कर, जबकि रक्त चरण मलेरिया संक्रमण के लिए. हालांकि, जिगर चरण विरोधी plasmodial उन्मुक्ति 8-11 के लिए संक्रमण और प्रासंगिक दौरान एक अनिवार्य कदम है. हम यकृत पीएच शामिल करने के लिए यह इसलिए महत्वपूर्ण है पर विचारमलेरिया संचरण और क्रमशः मलेरिया और मलेरिया तपेदिक coinfection, दोनों की पढ़ाई में रखरखाव के एएसई. इसके अलावा, यह स्वाभाविक रूप से प्रेषित बिजाणुज बजाय पृथक लार ग्रंथि व्युत्पन्न बिजाणुज इंजेक्शन लगाने के काटने मच्छर से मलेरिया संक्रमण की स्थापना के लिए हमें प्रेरित जो सुई संक्रमण 12, के माध्यम से प्रेषित उन लोगों से ज्यादा संक्रामक है कि दिखाया गया है. मलेरिया परजीवी के प्राकृतिक प्रसारण के लिए संक्रामक मच्छरों को प्राप्त करने का एकमात्र तरीका हड्डीवाला मेजबान (यहाँ माउस) और मच्छर वेक्टर दोनों में परजीवी के पूरे जीवन चक्र को बनाए रखने की है. इस प्रकार, परजीवी के रखरखाव के लिए एक कीटपालन के लिए उपयोग काटने से प्राकृतिक संचरण प्रदर्शन करने के क्रम में अपरिहार्य है. यहाँ बताया हमारे प्रोटोकॉल प्लाज्मोडियम साथ coinfection पुरानी तपेदिक 1 पर प्रभाव डालता है बिजाणुज जांच के लिए कैसे विकसित किया गया था. ऐसा करने के लिए, चूहों एयरोसोल एम. से संक्रमित होते हैं तपेदिक और 40 दिन बाद, जब एम. तपेदिक संक्रमण चूहों मलेरिया संक्रामक मच्छरों को उजागर कर रहे हैं, पुरानी चरण तक पहुँच गया है. coinfected पशुओं में मलेरिया और तपेदिक दोनों के परिणाम क्रमश: ऊतकों में रक्त पेरासाइटिमिया और जीवाणु लोड की निगरानी के द्वारा पीछा किया जा सकता. हमारे प्रोटोकॉल में, हम उनके प्राकृतिक संक्रमण मार्ग और कैसे सफल रोगज़नक़ संचरण पुष्टि करने के लिए के माध्यम से दोनों रोगजनकों के साथ चूहों को संक्रमित करने के लिए कैसे विस्तार से वर्णन करेंगे. हमारे हाथ में, दोनों प्रयोगात्मक संक्रमण के लिए आमतौर पर हासिल की संक्रमण दर 100% है. इन प्रोटोकॉल सबसे चुनौतीपूर्ण मानव संक्रामक रोगों की दोनों के बीच coinfection मॉडल और अध्ययन करने के लिए हम क्या कर के रूप में अलग से संक्रमण या, दोनों का अध्ययन करने के लिए लागू किया जा सकता है. यह मॉडल इस प्रोटोकॉल में वर्णित लोगों परे अन्य माइकोबैक्टीरियम और कृंतक प्लाज्मोडियम प्रजातियों के लिए लागू है.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="650">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="105">
			<td height="105" style="height:105px;width:216px;">Buraton</td>
			<td style="width:124px;">Sch&#252;lke</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:191px;">active ingredients: aldehyds (formaldehyde, glutaraldehyde, oxalaldehyde, ethyl hexanal)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Middlebrook 7H9&#160;</td>
			<td style="width:124px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">M0178</td>
			<td style="width:191px;">For Mtb broth cultures</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Middlebrook 7H11&#160;</td>
			<td style="width:124px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:119px;">283810</td>
			<td style="width:191px;">Agar medium for Mtb culture</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Middlebrook OADC enrichment medium</td>
			<td style="width:124px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:119px;">212240</td>
			<td style="width:191px;">Add to 7H9 and 7H11 for Mtb culture</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Staining Dish</td>
			<td style="width:124px;">Science Services</td>
			<td style="width:119px;">E62542-12</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">24-Slide Holder w/Handle</td>
			<td style="width:124px;">Science Services</td>
			<td style="width:119px;">E62543-06</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Giemsas Azur-Eosin-Methylene blue solution</td>
			<td style="width:124px;">Merck Millipore</td>
			<td style="width:119px;">109204</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Wright&#180;s stain</td>
			<td style="width:124px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">W0625</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Inhalation Exposure System</td>
			<td style="width:124px;">Glas-Col</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Nebulizer-Venturi</td>
			<td style="width:124px;">Glas-Col</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Ice cream cups</td>
			<td style="width:124px;">H&#228;agen-Dazs</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:191px;">Used as mosquito cages</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Metal-frame mosquito cages</td>
			<td style="width:124px;">BioQuip Products</td>
			<td style="width:119px;">1450A</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an experimental model to study tuberculosis-malaria coinfection upon natural transmission of mycobacterium tuberculosis and plasmodium berghei

Coinfections स्वाभाविक रूप से होने के कारण रोगजनक जीवों के विशिष्ट प्रकार की भौगोलिक ओवरलैप करने के लिए होते हैं. समवर्ती संक्रमण सबसे अधिक संभावना प्रत्येक एकल रोगाणु संबंधित प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया मिलाना और इस तरह रोगजनन और रोग परिणाम को प्रभावित कर सकते हैं. Coinfected रोगियों को भी विरोधी संक्रामक हस्तक्षेप करने के लिए विभिन्न प्रकार से प्रतिक्रिया हो सकती है. माइक्रोबैक्टीरिया और उप सहारा अफ्रीका के कई हिस्सों में coendemic हैं जो दोनों मलेरिया परजीवी प्लाज्मोडियम,, के कारण के रूप में तपेदिक के बीच coinfection विस्तार से अध्ययन नहीं किया गया है. वैज्ञानिक और मलेरिया तपेदिक coinfection न्यूनाधिक मेजबान उन्मुक्ति और प्रत्येक रोग के पाठ्यक्रम, हम हमारे coinfected मेजबान में दोनों रोगजनकों को हासिल प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया काटना करने की अनुमति देता है कि एक प्रयोगात्मक माउस मॉडल की स्थापना कैसे चिकित्सकीय अत्यधिक प्रासंगिक सवाल चुनौतीपूर्ण लेकिन दृष्टिकोण करने के लिए आदेश में . ध्यान से, बहुत सटीक नकल स्वाभाविक रूप से प्राप्त कर लिया मानव संक्रमण के क्रम में, हम प्रयोगात्मक प्रदर्शनक्रमश: संक्रमण के अपने प्राकृतिक मार्गों, यानी एयरोसोल और मच्छर के काटने, द्वारा दोनों रोगजनकों के साथ चूहों के संक्रमण.

एमटीबी और पी. के साथ चूहों के संक्रमण प्राकृतिक मार्ग, यानी एयरोसोल और मच्छर के काटने, क्रमशः, सभी जानवरों (तालिका 1) के अनुरूप और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य संक्रमण में परिणाम के माध्यम से berghei 1. हम सफल संक्रमण और रक्त क्रमशः (पी. berghei पेरासाइटिमिया) और विभिन्न अंगों में एमटीबी के बोझ में प्रारंभिक घटना (prepatency) और परजीवियों की संख्या निर्धारित करने से मलेरिया और तपेदिक दोनों बेशक निगरानी कर सकते हैं. संक्रामक मच्छर काटने से सफल मलेरिया परजीवी संचरण का एक उदाहरण तालिका 1 और 3 चित्र में दिखाया गया है. 4-5 दिन बाद (1 टेबल और चित्रा 3) रक्त चरण परजीवी की उपस्थिति से इस बात की पुष्टि के रूप में प्रत्येक माउस पर 10 बीजाणुज संक्रमित मच्छरों का दूध पिलाने की एक 100% संक्रमण दर में हुई. महत्वपूर्ण बात है, हम एक ही प्रयोगात्मक जीआर के व्यक्तिगत चूहों के रक्त में भी इसी तरह का परजीवी नंबर मिलओयूपी, एक सुसंगत और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य संक्रमण में मच्छर के काटने के परिणाम से कि बीजाणुज प्रसारण का संकेत है. एमटीबी-coinfected पशुओं में उस के साथ भोले नियंत्रण चूहों में prepatency की तुलना करके, हम उस prepatency थोड़ा एमटीबी (तालिका 1, चित्रा 3 बी) के साथ preinfected गया था कि चूहों में देरी हो रही है देख सकते हैं 1. हम पहले से 1 की सूचना दी है के रूप में चित्रा 3 बी में दिखाया गया है, हम Giemsa से सना हुआ रक्त स्मीयरों में दैनिक निगरानी पेरासाइटिमिया द्वारा मलेरिया के पाठ्यक्रम पर एमटीबी coinfection के प्रभाव को निर्धारित कर सकते हैं. व्यक्तिगत चूहों (चित्रा -4 ए) के बीच अपेक्षाकृत कम परिवर्तनशीलता के साथ फेफड़ों में बैक्टीरिया की सफल बयान में एक साँस लेना जोखिम प्रणाली के परिणाम के उपयोग द्वारा एमटीबी के साथ चूहों के संक्रमण. हम फेफड़े और CFU दृढ़ संकल्प से समय के साथ हित के अन्य अंगों में माइक्रोबैक्टीरियल भार का पालन कर सकते हैं. के फेफड़ों में माइक्रोबैक्टीरियल लोड करने के लिए एक उदाहरणएमटीबी पी. के अभाव या उपस्थिति में C57BL 6 / चूहों संक्रमित berghei 4B चित्रा में दिखाया गया है. तालिका 1. Prepatency मच्छर काटने से बीजाणुज प्रसारण के बाद. सभी चूहों पी. के प्राकृतिक प्रसारण के बाद रक्त चरण संक्रमण विकसित berghei मच्छर काटने से स्पोरोजोएट्स. 1 एक PLoS, अनुमति के साथ 7 (10), e48110 से अनुकूलित. <table border="1" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td> प्रयोगात्मक माउस समूह (C57BL / 6) </td><td> 10 संक्रामक मच्छरों के काटने से चुनौती </td><td> समूह के अनुसार पशुओं के रक्त चरण सकारात्मक जानवरों / सं की संख्या </td><td> मीन prepatency [डी] </td></tr><tr><td> भोले </td><td> पी. berghei </td><td> 7/7 </td><td> 4,4 </td></tr><tr><td> एमटीबी संक्रमित </td><td> पी. berghei </td><td> 7/7 </td><td> 5,5 </t<html> डी&gt; </tr></tbody></table><img alt="चित्रा 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50829/50829fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50829/50829fig1.jpg" /> चित्रा 1. प्रयोगात्मक प्रक्रिया की समग्र योजना. C57BL 6 / चूहों एक Glas कर्नल एयरोसोल कक्ष में एमटीबी युक्त एयरोसोल बूंदों के संपर्क में हैं. एक दिन एयरोसोल संक्रमण के बाद, एमटीबी के तेज फेफड़ों की CFU विश्लेषण द्वारा सत्यापित है. (तपेदिक से संक्रमित चूहों में पुराना हो गया है) एमटीबी चुनौती, जानवरों पी. के संपर्क में रहे 40 दिनों के बाद berghei मच्छरों संक्रमित. सफल बीजाणुज प्रसारण पुष्टि करने के लिए और प्लाज्मोडियम संक्रमण के पाठ्यक्रम का पालन करने के लिए, पेरासाइटिमिया मच्छर के काटने के बाद 3 दिन की शुरुआत के Giemsa से सना हुआ रक्त स्मीयरों में दैनिक नजर रखी है. / Files/ftp_upload/50829/50829fig2highres.jpg &quot;src =&quot; / files/ftp_upload/50829/50829fig2.jpg &quot;/&gt; चित्रा 2. एक मच्छर पिंजरे के स्केच. संक्रामक मच्छरों इस तरह के एक आधा पिंट आइसक्रीम दफ़्ती के रूप में एक गत्ते का डिब्बा अंदर समाहित कर रहे हैं. एक छोटी सी शुरुआत दफ़्ती के पक्ष में कटौती और मच्छरों के लिए एक सुरक्षित प्रवेश द्वार बनाने के लिए प्रत्येक टुकड़ा में कटौती एक भट्ठा के साथ लेटेक्स के एक डबल परत के साथ कवर किया जाता है. फिल्टर पेपर के एक टुकड़े भरी सोख करने के लिए गत्ते का डिब्बा के अंदर तल पर टेप है. आइसक्रीम कप टेप और लोचदार बैंड द्वारा दफ़्ती के लिए तय हो गई है, जो (नायलॉन जाल) फंसाना साथ बंद बंद हो जाती हैं. <img alt="चित्रा 3" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50829/50829fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50829/50829fig3.jpg" /> चित्रा 3. Parasitized एरिथ्रोसाइट्स (स्केल बार, 20 और # दिखा एक राइट `s दाग ​​रक्त धब्बा के रक्त पेरासाइटिमिया. एक) उदाहरण181;. माउस रक्त में एम) बी) पेरासाइटिमिया दैनिक Giemsa से सना हुआ रक्त स्मीयर का विश्लेषण करके नजर रखी थी. Coinfected चूहों प्लाज्मोडियम एकल संक्रमित चूहों (n = 10) की तुलना में एक कम पेरासाइटिमिया है, परिणाम एसडी ± का मतलब है के रूप में दिखाए जाते हैं; *** पी &lt;0,001. 1 एक PLoS, अनुमति के साथ 7 (10), e48110 से पुनर्प्रकाशित. <img alt="चित्रा 4" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50829/50829fig4highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50829/50829fig4.jpg" /> चित्रा 4. फेफड़ों में एमटीबी की जांच. C57BL 6 / चूहों एयरोसोल एमटीबी की 100 CFU के साथ चुनौती दी थी और पी. के साथ 40 दिन बाद, coinfected berghei मच्छर काटने से. ए) एक दिन एयरोसोल संक्रमण के बाद एमटीबी की वांछित संख्या के तेज CFU निर्धारण के लिए पूरे फेफड़ों homogenates चढ़ाना द्वारा सत्यापित किया गया था. बी) जीवाणुcoinfection के समय में एल भार CFU विश्लेषण (एमटीबी d40/d0) के माध्यम से 3 चूहों के फेफड़ों lysates में निर्धारित किया गया है. 12 दिनों coinfection के बाद, फेफड़ों lysates एमटीबी नियंत्रण पर प्लाज्मोडियम coinfection के प्रभाव को निर्धारित करने के लिए CFU विश्लेषण के लिए चढ़ाया गया. फेफड़ों में एमटीबी संख्या पी. के साथ coinfection दौरान वृद्धि हुई है, ध्यान दें berghei NK65. एक्स अक्ष लेबलिंग: coinfection के बाद एमटीबी -infection/time के बाद समय. 1 एक PLoS, अनुमति के साथ 7 (10), e48110 से अनुकूलित.

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An Experimental Model to Study Tuberculosis-Malaria Coinfection upon Natural Transmission of Mycobacterium tuberculosis and Plasmodium berghei

टीबी और मलेरिया मानव और उष्णकटिबंधीय में गरीब आबादी में रुग्णता और मृत्यु दर के प्रमुख कारणों में सबसे अधिक प्रचलित संक्रमण के दो हैं. हम संक्रमण के अपने प्राकृतिक मार्ग के माध्यम से दोनों रोगजनकों के साथ चुनौती के बाद चूहों में मलेरिया तपेदिक coinfection के परिणाम का अध्ययन करने के लिए एक प्रयोगात्मक मॉडल प्रणाली की स्थापना की.

प्राकृतिक ट्रांसमिशन पर क्षय रोग मलेरिया coinfection अध्ययन करने के लिए एक प्रयोगात्मक मॉडल माइकोबैक्टीरियम क्षयरोग और प्लाज्मोडियम berghei</i

Coinfections naturally occur due to the geographic overlap of distinct types of pathogenic organisms. Concurrent infections most likely modulate the ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

An Experimental Model to Study Tuberculosis-Malaria Coinfection upon Natural Transmission of Mycobacterium tuberculosis and Plasmodium berghei

Sample Preparation of Mycobacterium tuberculosis Extracts for Nuclear Magnetic Resonance Metabolomic Studies

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नमूने की तैयारी<em&gt; माइकोबैक्टीरियम क्षयरोग</em&gt; परमाणु चुंबकीय अनुनाद metabolomic अध्ययन के लिए अर्क

Mycobacterium tuberculosis is a major cause of mortality in human beings on a global scale. The emergence of both multi- (MDR) and extensively-(XDR) ...

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Mycobacterium tuberculosis, the etiologic agent of human tuberculosis, has an extraordinary ability to survive against environmental stresses including ...

An In vitro Co-infection Model to Study Plasmodium falciparum-HIV-1 Interactions in Human Primary Monocyte-derived Immune Cells

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एक<em&gt; इन विट्रो में</em&gt; सह - संक्रमण का अध्ययन करने के लिए मॉडल<em&gt; प्लाज्मोडियम फाल्सीपेरम</emमानव प्राथमिक monocyte व्युत्पन्न प्रतिरक्षा कोशिकाओं में&gt; एचआईवी -1 सहभागिता

Plasmodium falciparum, the causative agent  of the deadliest form of malaria, and human immunodeficiency virus type-1 (HIV-1) are among the most important ...

Isolation and Analysis of Brain-sequestered Leukocytes from Plasmodium berghei ANKA-infected Mice

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से मस्तिष्क तनहा Leukocytes का अलगाव विश्लेषण<em&gt; प्लाज्मोडियम berghei</em&gt; ANKA संक्रमित चूहे

We describe a method for isolation and  characterization of adherent inflammatory cells from brain blood vessels of P. berghei ANKA-infected mice. ...

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एक बहु दवा प्रतिरोधी दिखाते<em&gt; माइकोबैक्टीरियम क्षयरोग</em&gt; प्रवर्धन माइक्रोएरे

Simplifying microarray workflow is a necessary first step for creating MDR-TB microarray-based diagnostics that can be routinely used in lower-resource ...

A Novel Microdissection Approach to Recovering Mycobacterium tuberculosis Specific Transcripts from Formalin Fixed Paraffin Embedded Lung Granulomas

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ठीक करने के लिए एक उपन्यास Microdissection दृष्टिकोण<em&gt; माइकोबैक्टीरियम क्षयरोग</emफेफड़े granulomas एंबेडेड formalin तय आयल से&gt; विशिष्ट देखिए

Microdissection has been used for the examination of tissues at DNA, RNA, and protein levels for over a decade. Laser capture microscopy (LCM) is the most ...

A 3D Human Lung Tissue Model for Functional Studies on Mycobacterium tuberculosis Infection

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Tuberculosis (TB) still holds a major threat to the health of people worldwide, and there is a need for cost-efficient but reliable models to help us ...

System for Efficacy and Cytotoxicity Screening of Inhibitors Targeting Intracellular Mycobacterium tuberculosis

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इंट्रासेलुलर लक्ष्य निर्धारण इनहिबिटर्स की प्रभावकारिता और cytotoxicity स्क्रीनिंग के लिए सिस्टम<em&gt; माइकोबैक्टीरियम क्षयरोग</em

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A High-throughput Compatible Assay to Evaluate Drug Efficacy against Macrophage Passaged Mycobacterium tuberculosis

A High-throughput Compatible Assay to Evaluate Drug Efficacy against Macrophage Passaged Mycobacterium tuberculosis

एक उच्च throughput संगत परख Macrophage passaged के खिलाफ ड्रग प्रभावकारिता का मूल्यांकन करने के लिए<em&gt; माइकोबैक्टीरियम क्षयरोग</em

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Imaging Mycobacterium tuberculosis in Mice with Reporter Enzyme Fluorescence

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इमेजिंग रिपोर्टर एंजाइम प्रतिदीप्ति के साथ चूहों में माइकोबैक्टीरियम तपेदिक

Reporter enzyme fluorescence (REF) utilizes substrates that are specific for enzymes present in target organisms of interest for imaging or detection by ...