Name: the optokinetic response as a quantitative measure of visual acuity in zebrafish
Uploaded: 2013-10-09T22:00:00
Duration: 4 min 56 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about The Optokinetic Response as a Quantitative Measure of Visual Acuity in Zebrafish at JoVE.com

Finansiering fra Western University of Health Sciences College of Optometri til DJC. Særlig tak til Irisa Tam til grafisk design.

Alle husdyrbrug og eksperimenter bør godkendes og gennemføres i overensstemmelse med retningslinjerne, som beskrevet af Institutional Animal Care og brug Udvalg for den pågældende institution eller andre juridiske krav. 1.. Zebrafisk Care <ol><li> Opretholde zebrafisk under standardbetingelser ved 28,5 ° C på en 10 timers mørke-14 timers lys cyklus 16. </li><li> Hold voksen zebrafisk med en tank densitet på ca 3 fisk / L. </li></ol> 2. Optokinetic respons (OKR) <ol><li> Byg brugerdefinerede OKR optagelse enhed ved hjælp af en 14,5 cm i diameter roterende tromle, et stereoanlæg mikroskop med justerbare lys intensitet indstillinger (300-8,000 lux) og en computer (figur 1a). <ol><li> Vedhæft et kamera til mikroskop, der vil give en levende foder på en tilstødende skærm og mulighed for billedoptagelse og optagelse. </li><li> Styre den roterende tromle ved hjælp af en mikrocontroller er knyttet til en computer, som vil accommodate forskellige hastighed og retning markeringer. </li></ol></li><li> Bedøver fiskene i 0,016% tricaine for 2-3 min og derefter placere fisken på en lille platform med øjne og gæller ophængt over kanten. </li><li> Placer en tynd svamp / håndklæde over kroppen af ​​fisken og pin 2-3 stykker af skum, formet til at rumme de fisk, over fisken for at holde det immobiliseret. Begrænsning af bevægelse af halen af ​​fisken viste sig at være et afgørende aspekt for immobilisering uden at forårsage skade på fisk, og blev bedst opnås ved hjælp af et fladt stykke skum. (Figur 1b) </li><li> Anbring fisk inden for en cylindrisk, vand-fyldt tank, der passer inde i den roterende tromle OKR optageenheden. Brug magneter på platformen for at placere fisken oprejst, med øjnene ca 7,3 cm fra kanten af ​​tromlen. Fiskene skal genoplive fra anæstesi inden for et par minutter - normal vejrtrækning vil genoptage og tilfældige øjenbevægelser skal overholdes. </li><li> Placer en base rist på 0,07 cykler per grad (CPD) i den roterende tromle og engagere de edb-kontroller for at begynde rotation og videooptagelse (en hastighed på 12 rpm blev brugt til dette papir, men hastigheder på 8-16 rpm bør give lignende resultater). </li><li> Når en indledende OKR er fremkaldt af basen rist, pause rotationen kortvarigt, og erstatte den rist med en mindre rist (højere rumlig frekvens). </li><li> Gentag denne proces, indtil en OKR ikke længere kan fremkaldes. Gentest med den mindste rist, der forårsagede en OKR efter en modificeret trappe tilgang og derefter gentage bruge risten, som undlod at fremkalde en reaktion for at kontrollere tabet af OKR. Denne proces kan gentages for at verificere en korrekt reaktion på den mindste påviselige rist, hvis den endelige rist ændret i forhold til den første udslettelse begivenhed. </li><li> Opnå monokulare skarphed målinger ved at placere en sort plast okkluderingsindretning over striber der støder op til det modsatte øje. Gentag proceduren ovenfor (trin 2,6-2,7). </li><li>Anskaf skarphed af det modsatte øje ved at flytte okkluderen og gentage trin 2,6-2,7 igen. </li><li> Bemærk afstanden hvert øje er fra striberne under proceduren ved hjælp af henvisningen måling strimmel under akvarium så præcise skarphed foranstaltninger kan beregnes på følgende trin testning. </li></ol> 3. Beregning Visual Acuity <ol><li> Anskaf synsstyrke ved at beregne byggevaredirektivet: <img alt="Ligning 1" fo:content-width="0.7in" src="/files/ftp_upload/50832/50832eq1.jpg" width="70px" /> hvor a er afstanden fra linsens centrum til gitteret, og h er længden af en cyklus af mindste gitteret hvor OKR blev observeret (figur 1c). </li><li> For kombinerede synsstyrke målinger det gennemsnit en værdi fra både venstre og højre øje er brugt. </li></ol>

<ol>
	<li>Brockerhoff, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+behavioral+screen+for+isolating+zebrafish+mutants+with+visual+system+defects.">A behavioral screen for isolating zebrafish mutants with visual system defects.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 92, 10545-10549 (1995).</li><li>Neuhauss, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+disorders+of+vision+revealed+by+a+behavioral+screen+of+400+essential+loci+in+zebrafish.">Genetic disorders of vision revealed by a behavioral screen of 400 essential loci in zebrafish.</a> J. Neurosci. 19, 8603-8615 (1999).</li><li>Schumann, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+objective+determination+of+visual+acuity+on+the+basis+of+the+optokinetic+nystagmus.">The objective determination of visual acuity on the basis of the optokinetic nystagmus.</a> Am. J. Optom. Arch. Am. Acad. Optom. 29, 575-583 (1952).</li><li>Gorman, J. J., Cogan, D. G., Gellis, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+apparatus+for+grading+the+visual+acuity+of+infants+on+the+basis+of+opticokinetic+nystagmus.">An apparatus for grading the visual acuity of infants on the basis of opticokinetic nystagmus.</a> Pediatrics. 19, 1088-1092 (1957).</li><li>Fulton, A. B., Manning, K. A., Dobson, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+behavioral+method+for+efficient+screening+of+visual+acuity+in+young+infants.+II.+Clinical+application.">A behavioral method for efficient screening of visual acuity in young infants. II. Clinical application.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 17, 1151-1157 (1978).</li><li>Huizinga, E., Van Der Meulen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vestibular+rotatory+and+optokinetic+reactions+in+the+pigeon.">Vestibular rotatory and optokinetic reactions in the pigeon.</a> Ann. Otol. Rhinol. Laryngol. 60, 927-947 (1951).</li><li>Tappeiner, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+Acuity+and+Contrast+Sensitivity+of+Adult+Zebrafish.">Visual Acuity and Contrast Sensitivity of Adult Zebrafish.</a> Front. Zool. 9, 10 (2012).</li><li>Mueller, K. P., Schnaedelbach, O. D., Russig, H. D., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=VisioTracker,+an+innovative+automated+approach+to+oculomotor+analysis.">VisioTracker, an innovative automated approach to oculomotor analysis.</a> J. Vis. Exp. (56), e3556 (2011).</li><li>Zou, S. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+the+optokinetic+response+to+study+visual+function+of+zebrafish.">Using the optokinetic response to study visual function of zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (36), e1742 (2010).</li><li>Mueller, K. P., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+measurements+of+the+optokinetic+response+in+adult+fish.">Quantitative measurements of the optokinetic response in adult fish.</a> J. Neurosci. Methods. 186, 29-34 (2010).</li><li>Li, L., Dowling, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dominant+form+of+inherited+retinal+degeneration+caused+by+a+non-photoreceptor+cell-specific+mutation.">A dominant form of inherited retinal degeneration caused by a non-photoreceptor cell-specific mutation.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 94, 11645-11650 (1997).</li><li>Ren, J. Q., McCarthy, W. R., Zhang, H., Adolph, A. R., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+visual+responses+of+wild-type+and+hypopigmented+zebrafish.">Behavioral visual responses of wild-type and hypopigmented zebrafish.</a> Vision Res. 42, 293-299 (2002).</li><li>Maaswinkel, H., Mason, B., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ENU-induced+late-onset+night+blindness+associated+with+rod+photoreceptor+cell+degeneration+in+zebrafish.">ENU-induced late-onset night blindness associated with rod photoreceptor cell degeneration in zebrafish.</a> Mech. Ageing Dev. 124, 1065-1071 (2003).</li><li>Stujenske, J. M., Dowling, J. E., Emran, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+bugeye+mutant+zebrafish+exhibits+visual+deficits+that+arise+with+the+onset+of+an+enlarged+eye+phenotype.">The bugeye mutant zebrafish exhibits visual deficits that arise with the onset of an enlarged eye phenotype.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 52, 4200-4207 (2011).</li><li>Veth, K. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mutations+in+zebrafish+lrp2+result+in+adult-onset+ocular+pathogenesis+that+models+myopia+and+other+risk+factors+for+glaucoma.">Mutations in zebrafish lrp2 result in adult-onset ocular pathogenesis that models myopia and other risk factors for glaucoma.</a> PLoS Genet. 7, e1001310 (2011).</li><li>Westerfield, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> THE ZEBRAFISH BOOK, A guide for the laboratory use of zebrafish (Danio rerio). , (2007).</li><li>Cagenello, R., Arditi, A., Halpern, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Binocular+enhancement+of+visual+acuity.">Binocular enhancement of visual acuity.</a> J. Opt. Soc. Am. A Opt. Image Sci. Vis. 10, 1841-1848 (1993).</li><li>Brockerhoff, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+the+optokinetic+response+of+zebrafish+larvae.">Measuring the optokinetic response of zebrafish larvae.</a> Nat. Protoc. 1, 2448-2451 (2006).</li><li>Hodel, C., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Computer-based+analysis+of+the+optokinetic+response+in+zebrafish+larvae.">Computer-based analysis of the optokinetic response in zebrafish larvae.</a> CSH Protoc. 2008, pdb prot4961 (2008).</li><li>Huber-Reggi, S. P., Mueller, K. P., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+optokinetic+response+in+zebrafish+by+computer-based+eye+tracking.">Analysis of optokinetic response in zebrafish by computer-based eye tracking.</a> Methods Mol. Biol. 935, 139-160 (2013).</li><li>Tappeiner, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+acuity+and+contrast+sensitivity+of+adult+zebrafish.">Visual acuity and contrast sensitivity of adult zebrafish.</a> Front. Zool. 9, 10 (2012).</li><li>Saszik, S., Bilotta, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+temperature+on+the+dark-adapted+spectral+sensitivity+function+of+the+adult+zebrafish.">The effects of temperature on the dark-adapted spectral sensitivity function of the adult zebrafish.</a> Vision Res. 39, 1051-1058 (1999).</li><li>Haug, M. F., Biehlmaier, O., Mueller, K. P., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+acuity+in+larval+zebrafish:+behavior+and+histology.">Visual acuity in larval zebrafish: behavior and histology.</a> Front. Zool. 7, 8 (2010).</li><li>Curcio, C. A., Sloan, K. R., Kalina, R. E., Hendrickson, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+photoreceptor+topography.">Human photoreceptor topography.</a> J. Comp. Neurol. 292, 497-523 (1990).</li><li>Kalloniatis, M., Luu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Visual Acuity. , (1995).</li></ol>

Forfatterne har ikke noget at afsløre.

Til tider fiskene kan slippe ud i vandbeholderen. Det er afgørende at immobilisere halen. Derudover brugen af ​​en tynd svamp / håndklæde over fisken krop blev også fundet at være uvurderlig for at holde fiskene suspenderet i længere tid. Vi var i stand til at holde fisk immobiliseret i mere end 30 min ved hjælp af denne procedure uden at skade fisken. Denne mængde tid er mere end nok til at gøre kikkerten og begge monokulare acuities. Præsentationen af risten kan enten gøres som beskrevet her og andre steder ved hjælp af en fysisk roterende tromle eller ved at præsentere et digitalt display 18-22. Begge typer har særlige fordele og ulemper. Vi valgte at bruge den fysiske rotation både omkostningsmæssige årsager og tekniske specifikationer. Eksklusive computeren og imaging udstyr, kan det OKR anordning beskrevet her blive bygget for omkring 150 dollar. Den OKR er en objektiv metode til bestemmelse visual skarphed i voksen zebrafisk. Mens flere andre visuomotor assays for syn er anvendt i tidligere eksperimenter og endda elektroretinogrammet er med held blevet udført i voksne zebrafisk øjne, selv om det ikke har været stærkt udnyttet den voksne zebrafisk OKR åbner døren til mange nye eksperimentelle betingelser 22. Denne undersøgelse har vist, at OKR anvendelighed måle synsstyrke ændringer over tid, identificere synsstyrke forskel i øjet sygdomsmodeller, og i fastsættelsen af ​​monokulært synsstyrke. Interessant, voksen zebrafisk vision i forhold til menneskets syn (20/20) er ca 20/1, 000 (når 0,60 cpd omdannes til -0.3 logMAR). Selv om dette kan synes dårlig, er zebrafisk øjne meget velegnet til miljøet. På trods af den visuelle opgave at kigge gennem 6,5 cm vand, et par millimeter af polycarbonat, og en anden centimeter af luft, fiskene udføre ganske godt! Vi fandt, at den voksne zebrafisk skarphed er ABOut 70% af, hvad der kunne forventes i betragtning af deres fotoreceptorer afstand. 23. Kontrast, at med optimal menneskelig ydeevne ~ 20/12, hvilket er omkring 80% af den forventede 20/10, og OKR teknik til at måle visuel kapacitet i voksen zebrafisk er imponerende 24 25. Teknikken med at måle uafhængige øjet visuelle acuities giver mulighed for studier, hvor det ene øje kunne være behandlet, og den anden bruges som en kontrol. Derudover kunne fiske med asymmetrisk udvikling øje såsom lrp2/bugeye eller fisk, der udvikler grå stær overvåges mere præcist. Det skal bemærkes, at pleje skal tages for at præcist at måle afstanden fra øjnene til striberne, og at okkludere den fulde synsfelt. Denne teknik skal åbne døren til mere præcise og specifikke foranstaltninger af zebrafisk visuel funktion.

Zebrafisk (Danio rerio), er en god model til at studere visuel fysiologi på grund af ligheden af deres nethinden til andre hvirveldyr, deres korte levetid, og tilgængeligheden af genetisk ændrede mutanter 1,2. Den optokinetic refleks / respons / nystagmus (OKR) er en kombination af glat forfølgelse og hurtige saccade øjenbevægelser. For mere end 60 år klinikere har vist, at OKR kan bruges til objektivt at måle synsstyrke hos patienter og er især nyttig til at bestemme spædbarn visuelle evner 3-5. Den første registrerede brug af OKR i dyr var ved hjælp af duer i 1950&#39;erne 6. For nylig har OKR blevet et værdifuldt redskab til at vurdere den visuelle funktion i larvernes zebrafisk og er ofte brugt til at screene for genetiske mutanter, der har en synshandicappet 1,2. Mens OKR har været meget anvendt til at bestemme visuel funktion i larve zebrafisk, er det først for nylig blevet påvist i voksne zebrafiske 7-10. En nylig papir ved Tappeiner bruger en kommercielt tilgængelig optomotor systemet traditionelt anvendes til mus et al., OptoMotry, at påvise, at synsstyrke den voksne zebrafisk stadig temmelig konstant, ~ 0,59 cykler per grad (CPD), også på tværs af forskellige vinkelhastigheder 7 . Selvom OKR har vist sig at være ganske nyttigt i larvernes zebrafisk undersøgelser har andre metoder til visuel adfærd blevet brugt i zebrafisk voksne med varierende grader af succes. Flugten respons assay viste, at albino og rubin zebrafisk begge pigmentering mutanter, har reduceret visuelle reaktioner i lyse lysforhold 11,12. Denne samme flugt respons assay har også med succes identificeret nat blindhed D mutanter, omend på 2 år 13. Imidlertid flugtrespons assayet er ikke uden mangler. Det er svært at tilskrive en nøjagtig visuel funktion og er kun en grov approximation af visuelle ændringer - betyder, at det tager en stor ændring, før ændringen er identificeret. En anden metode, der er udviklet til at identificere voksne zebrafisk med synshandicap er optomotor respons (OMR) 11. I dette assay er fisk anbragt i en cirkulær tank med en uigennemsigtig spalte i midten. Sorte og hvide striber roterer omkring tanken, og fisken har til opgave at svømme i retning af stribe bevægelse. Ligesom flugt reaktion, OMR fokuserer på visuomotor kapaciteter af den voksne zebrafisk. Det har dog været anvendt med succes til at identificere fisk med synshandicap, såsom lrp2/bugeye mutanter 14. De lrp2/bugeye zebrafisk udstille buphthalmos, forhøjet intraokulært tryk, formindsket OMR og progressiv retinal degeneration 14,15. Mange undersøgelser har brugt visuomotor kapaciteter i voksen zebrafisk, som ofte er subjektive og ikke kan Quantitatively analyseret. Ved at bruge OKR, kan man studere synsstyrke voksne fisk mere objektivt. Vi har bygget vores egen OKR-enhed, modelleret efter et oprindeligt brugt til larve undersøgelser 1.. I denne undersøgelse har vi vise, at OKR kan bruges til at beregne både monokulære og binokulære synsstyrke i zebrafisk.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="593">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:209px;">Super Low Light Black White Video Security Camera</td>
			<td style="width:143px;">Super Circuits</td>
			<td style="width:119px;">PC164CEX-2</td>
			<td style="width:124px;"> Any low light camera may be used</td>
		</tr>
		<tr height="106">
			<td height="106" style="height:106px;width:209px;">Arduino Duemilanove microcontroller</td>
			<td style="width:143px;">Adafruit Industries</td>
			<td style="width:119px;"> </td>
			<td style="width:124px;"> The Arduino Uno is also compatible with the speed control software.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tricaine Methanesulfonate</td>
			<td>VWR</td>
			<td>101107-950</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the optokinetic response as a quantitative measure of visual acuity in zebrafish

Zebrafisk er en gennemprøvet model for vision forskning, men mange af de tidligere metoder, der generelt fokuseret på fiskelarver eller demonstreret et simpelt svar. For nylig voksen visuel adfærd i zebrafisk er blevet af interesse, men metoder til at måle specifikke svar er nye på vej. For at løse dette hul, vi satte sig for at udvikle en metode til gentagne gange og præcist udnytte optokinetic respons (OKR) til at måle synsstyrke i voksen zebrafisk. Her viser vi, at der kan måles den voksne zebrafisk visuelle skarphed, herunder både kikkerter og monokulare acuities. Fordi fisken ikke skades under proceduren, kan måles synsstyrke og sammenlignes over kortere eller længere perioder. Synsstyrke målinger der er beskrevet her, kan også gøres hurtigt giver mulighed for høj kapacitet og yderligere visuelle procedurer, hvis det ønskes. Denne type analyse er befordrende for narkotika interventionsstudier eller undersøgelser af sygdomsprogression.

OKR Device Funktionalitet Den OKR anordning som beskrevet ovenfor og vist i figur 1 fungerer med minimal vedligeholdelse. Som bemærket i trin 2.3 immobilisere halen er afgørende for at holde fiskene fastholdes under optagelsen. Tilstrækkeligt immobiliseret, kan fiskene holdes i OKR enheden i længere perioder. Derfor bør der udvises forsigtighed i de første immobiliseringstrin, så der kan indsamles flere data for hver enkelt fisk. Synsstyrke målinger Kikkerten OKR let fremkaldt hos normale voksne fisk. Ved at følge ovenstående fremgangsmåde kan man finde visuelle acuities for zebrafisk af mange aldre (figur 2). Den bedste kikkert rumlige skarphed vi indspillede var 0.74 byggevaredirektivet. Som bemærket i figur 2, kikkerten skarphed generelt stiger med alderen (n = 46, p = 0,002 ANOVA hjælp SPSS V14), men flader udefter omkring 12 måneder. Når vi sammenlignede den målte synsstyrke i fem måneder gammel vildtype fisk til alder-matchede lrp2/bugeye fisk, fandt vi, at lrp2/bugeye fisk væsentligt havde reduceret synsstyrke (p &lt;0,001; vildtype: 0,49 ± 0,05 cpd n = 8, lrp2/bugeye: 0,35 ± 0,06, n = 10; Students t-test med Excel). Ved at okkludere det højre øje kan bestemmes synsstyrke for det venstre øje og omvendt. I forhold til den binokulære skarphed, er kikkerten summation observeret på samme måde som det menneskelige øje 17 (figur 3). Kikkerten skarphed var generelt 5-10% bedre end enten højre (OD) eller venstre (OS) acuities målt uafhængigt. For nogle enkelte fisk var forskellen en forbedring på 25%. <img alt="Figur 1" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50832/50832fig1.jpg" width="500px" /> Figur 1. Okr recording. A) OKR består af en 14,5 cm i diameter roterende tromle og mikroskop med justerbar lysintensitet indstillinger (300-8,000 lux). Et kamera giver en live-feed på en tilstødende skærm. Den roterende tromle har forskellige hastigheder i både med og mod uret retninger og udskiftelige rumfrekvens riste indsættes og fjernes efter behov. B) Fisk er sikret og placeret i midten af den roterende tromle. C) Cykler pr grad (CPD) er beregnet hjælp CPD = <img alt="" src="img2.png" /> <a href="http://www.jove.com/files/ftp_upload/50832/50832fig1highres.jpg" target="_blank">Klik her for at se større billede</a> . <img alt="Figur 2" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50832/50832fig2.jpg" width="500px" /> Figur 2. Synsstyrke ændrer sig med alderen. Grafen viser uafhængige visuelle acuities målt 5 -<html> 15 måneder i alder. Den synsstyrke stiger generelt i hele det første år af udvikling og derefter haler off en smule ved 15 måneder (p = 0,002 ANOVA hjælp SPSS v14). Hvert punkt kan enten repræsentere 1 eller flere fisk. Synsstyrke måles i cyklusser / grad (CPD). (N = 46 i alt, 8 ved 5 måneder, 4 ved 6 måneder 7 ved 8 måneder, 6 ved 9 måneder, 11 ved 10 måneder, 2 ved 11 måneder, 2 på 12 måneder og 6 til 15 måneder). <a href="http://www.jove.com/files/ftp_upload/50832/50832fig2highres.jpg" target="_blank">Klik her at se større billede</a> . <img alt="Figur 3" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50832/50832fig3.jpg" width="500px" /> Figur 3. Binokulære synsstyrke summation effekt. Kikkerten (OU) synsstyrke er generelt højere i forhold til højre (OD) eller venstre (OS) øjet acuities. I denne særlige gruppe var OS acuities betydeligt lavere. (* P = 0,006, N = 8)jove.com/files/ftp_upload/50832/50832fig3highres.jpg &quot;target =&quot; _blank &quot;&gt; Klik her for at se større billede.

Watch this Scientific Journal Video about The Optokinetic Response as a Quantitative Measure of Visual Acuity in Zebrafish at JoVE.com

The Optokinetic Response as a Quantitative Measure of Visual Acuity in Zebrafish

Zebrafisk har været et værdifuldt redskab for mange forskningsområder. Her vi demonstrere en metode til at fremkalde en visuel reaktion og beregne en funktionel synsstyrke i den voksne zebrafisk.

Den Optokinetic respons som en kvantitativ måling af Visual Acuity i zebrafisk

Zebrafish are a proven model for vision research, however many of the  earlier methods generally focused on larval fish or demonstrated a simple  ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Hyponeophagia: A Measure of Anxiety in the Mouse

Before the present day, when fast-acting and potent rodenticides such as alpha-chloralose were not yet in use, the work of pest controllers was often ...

A Dual Tracer PET-MRI Protocol for the Quantitative Measure of Regional Brain Energy Substrates Uptake in the Rat

En Dual Tracer PET-MR-protokollen for kvantitativ måling af Regional Brain Energy Substrater Optagelse i Rat

We present a method for comparing the uptake of the brain&#39;s two key energy substrates: glucose and ketones (acetoacetate [AcAc] in this case) in the ...

Electroretinogram Analysis of the Visual Response in Zebrafish Larvae

Elektroretinogrammet Analyse af Visual respons i zebrafisk Larver

The electroretinogram (ERG) is a noninvasive electrophysiological method for determining retinal function. Through the placement of an electrode on the ...

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Samtidige<em&gt; Ex vivo</em&gt; Functional Test af to nethinder af<em&gt; In vivo</em&gt; Elektroretinogrammet System

An In vivo electroretinogram (ERG) signal is composed of several overlapping components originating from different retinal cell types, as well as noise ...

Visual Evoked Potential Recording in a Rat Model of Experimental Optic Nerve Demyelination

Visuelt fremkaldt Potentiel optagelse i en rotte model for Eksperimentel Optic Nerve Demyelinisering

The visual evoked potential (VEP) recording is widely used in clinical practice to assess the severity of optic neuritis in its acute phase, and to ...

In Vivo Gene Transfer to Schwann Cells in the Rodent Sciatic Nerve by Electroporation

In Vivo Gene Transfer to Schwann Cells in the Rodent Sciatic Nerve by Electroporation

In vivo genoverførsel til Schwann-celler i Rodent iskiasnerven ved elektroporering

The formation of the myelin sheath by Schwann cells (SCs) is essential for rapid conduction of nerve impulses along axons in the peripheral nervous ...

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

En simpel måde at måle Ændringer i Reward-søger Behavior Brug<em&gt; Drosophila melanogaster</em

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We ...

Drosophila Courtship Conditioning As a Measure of Learning and Memory

Drosophila Courtship Conditioning As a Measure of Learning and Memory

Drosophila Courtship Conditioning som et mål for læring og hukommelse

Many insights into the molecular mechanisms underlying learning and memory have been elucidated through the use of simple behavioral assays in model ...

Using Optical Coherence Tomography and Optokinetic Response As Structural and Functional Visual System Readouts in Mice and Rats

Ved hjælp af optisk kohærens tomografi og Optokinetic svar som strukturelle og funktionelle visuelle System udlæsninger i mus og rotter

Optical coherence tomography (OCT) is a fast, non-invasive, interferometric technique allowing high-resolution retinal imaging. It is an ideal tool for ...

Double Direct Injection of Blood into the Cisterna Magna as a Model of Subarachnoid Hemorrhage

Dobbelt direkte injektion af blod i Cisterna Magna som en model af Subarachnoid Blødning

Among strokes, subarachnoid hemorrhage (SAH) consecutive to the rupture of a cerebral arterial aneurysm represents 5-9% but is responsible for about 30% ...